Summary
Wir präsentieren Details zu Laborverfahren zur medikamentenfreien In-vitro-Aktivierung (IVA) von Eierstockfollikeln für Patientinnen mit schwerer Ovarialfunktionsstörung. Diese Methode könnte die Anzahl der abrufbaren Eizellen pro ovarieller Hyperstimulation erhöhen und die Erhaltung der Fruchtbarkeit für diese Patientinnen verbessern.
Abstract
Die Ovarialfunktion nimmt während des Alterns und bei einigen pathophysiologischen Zuständen, einschließlich Karyotypanomalien, Autoimmunerkrankungen, Chemo- und Strahlentherapien sowie Eierstockoperationen, allmählich ab. Bei unverheirateten Frauen mit schwerer Ovarialfunktionsstörung ist die Erhaltung der Fruchtbarkeit wichtig für zukünftige Schwangerschaften. Obwohl die Kryokonservierung von Eizellen eine etablierte Methode zur Erhaltung der Fruchtbarkeit ist, konnten diese Patientinnen auch nach einer Überstimulation der Eierstöcke nur eine begrenzte Anzahl von Eizellen konservieren, was zu wiederholten Stimulationen führte, um genügend Eizellen zu gewährleisten, um eine zukünftige Schwangerschaft zu gewährleisten. Um dieses Problem zu lösen, haben wir kürzlich ein medikamentenfreies In-vitro-Aktivierungsverfahren (IVA) entwickelt, mit dem wir frühe Stadien der Eierstockfollikel stimulieren können, um sich bis zum präantralen Follikelstadium zu entwickeln. Diese präantralen Follikel können auf das einzigartige Protokoll der Gonadotropinstimulation reagieren, was zu einer erhöhten Anzahl von entnommenen Eizellen pro ovarieller Stimulation für die Kryokonservierung führt. Die medikamentenfreie IVA bestand aus dem chirurgischen Ansatz und der Stimulation der Eierstöcke. Wir entfernten einen Teil des Kortex aus einem oder beiden Eierstöcken von Patientinnen unter laparoskopischer Operation. Das kortikale Gewebe der Eierstöcke wurde in kleine Würfel geschnitten, um den Hippo-Signalweg zu stören und die Entwicklung von Follikeln im Frühstadium zu stimulieren. Diese Würfel wurden orthotrop in die verbleibenden Eierstöcke sowie unter die Serosa beider Eileiter gepfropft. Wir haben bereits den chirurgischen Eingriff der medikamentenfreien IVA und das Protokoll der anschließenden Ovarialstimulation veröffentlicht, aber hier stellen wir die Details der Labormethoden vor, die für eine medikamentenfreie IVA erforderlich sind.
Introduction
Die Eierstockfunktion nimmt während des Alterns und einiger pathophysiologischer Zustände, einschließlich Karyotyp-Anomalien, Autoimmunerkrankungen, Chemo- und Strahlentherapien und Eierstockoperationen, allmählich ab. Die Erhaltung der Fruchtbarkeit ist eine der besten Optionen für unverheiratete Frauen mit schwerer Ovarialfunktionsstörung, um ihr Potenzial für eine zukünftige Schwangerschaft zu erhalten. Zur Erhaltung der Fruchtbarkeit stehen derzeit zwei Methoden zur Verfügung, hauptsächlich im Bereich der Onkofruchtbarkeit. Die Kryokonservierung von Eizellen ist ein etabliertes Verfahren zur Erhaltung der Fruchtbarkeit und viele erfolgreiche Fälle wurden berichtet1,2. Auf der anderen Seite wurde die Kryokonservierung von Eierstockgewebe auch zur Erhaltung der Fruchtbarkeit bei Krebspatienten etabliert, aber es ist immer noch eine experimentelle Strategie3,4. Bei beiden Methoden sind mehrere reife Eizellen erforderlich, damit eine Schwangerschaft stattfinden kann. Im Allgemeinen zeigten Patientinnen mit vorzeitiger Ovarialinsuffizienz (POI), die vor dem 40. Lebensjahr zu Amenorrhoe werden, und Frauen mittleren Alters mit niedriger Ovarialreserve eine schlechte ovarielle Reaktion (POR) auf die Stimulation der Eierstöcke zur Ermöglichen reifer Eizellen5,6,7. Darüber hinaus zeigten junge Patientinnen mit einer geringen Anzahl von Antralfollikeln auch POR zur Stimulation der Eierstöcke7. Diese Patientinnen haben selbst nach richtiger Überstimulation der Eierstöcke eine sehr begrenzte Anzahl von abrufbaren Eizellen, so dass mehrere teure Verfahren erforderlich sind, um eine ausreichende Anzahl von Eizellen für die Schwangerschaft zu gewährleisten.
Die Eizellspende gefolgt von einer In-vitro-Fertilisation (IVF) mit dem Sperma des Ehemannes und dem Embryotransfer (ET) ist die einzige Option für diese POI- und POR-Patienten, die Schwierigkeiten haben, ihre eigenen Eizellen zu erhalten8,9,10. Die Eizellspende wird jedoch durch ethische Fragen sowie Autoimmun- und Schwangerschaftskomplikationen erschwert11,12,13,14. Um diese Probleme zu lösen, ist die Etablierung einer Unfruchtbarkeitsbehandlung mit eigenen Eizellen der Patientin erwünscht. Für POI-Patientinnen haben wir den In-vitro-Aktivierungsansatz (IVA) entwickelt, um ein erfolgreiches Follikelwachstum und die Erzeugung reifer Eizellen zu ermöglichen, was zu einer Reihe von Schwangerschaften und Entbindungenführt 15. In IVA fragmentierten wir Eierstockkortexen nach Entfernung der Eierstöcke unter laparoskopischer Operation und kultivierten sie für zwei Tage, um Follikel durch Akt-stimulierende Medikamente zu aktivieren und dann heterotope Transplantationen zurück in künstliche Beutel durchzuführen, die unter der Serosa der Eileiter unter der zweiten laparoskopischen Operation hergestellt wurden15. Dieses Verfahren förderte das Wachstum von primordialen, primären und sekundären Follikeln nach der Fragmentierung des Eierstockkortex, um die Hippo-Signalstörung zu fördern16,gefolgt von einer zweitägigen Kultur mit Akt-Signalstimulatoren17.
Im Gegensatz zu schweren POI-Fällen haben POR-Patientinnen mit verminderter Ovarialreserve mehrere sekundäre Follikel. Da die Hippo-Signalstörung allein wirksam ist, um das sekundäre Follikelwachstum zu fördern16, haben wir kürzlich erfolgreiche Schwangerschaften und Entbindungen für POR-Patienten gezeigt, die das medikamentenfreie IVA-Verfahren mit kortikaler Fragmentierung und orthotopischer Transplantation ohne Behandlung der Akt-stimulierenden Medikamente verwenden. Die medikamentenfreie IVA stimuliert das Frühstadium der Eierstockfollikel, um sich nach nur einer Operation in das präantrale Follikelstadium zu entwickeln, und erhöht die Anzahl der entnommenen Eizellen für den IVF-Embryotransfer15,18. Der medikamentenfreie IVA-Ansatz hat mehrere Vorteile im Vergleich zu unserer ursprünglichen IVA, indem 1) potenzieller Follikelverlust während der Kultur vermieden wird, 2) die Invasivität und die Kosten der zweiten Operation minimiert werden, 3) nur kurzfristige Bettruhe nach der Operation und 4) das Potenzial einer spontanen Schwangerschaft aufgrund orthotopischer Transplantationen besteht. Wir haben kürzlich einen Videoartikel veröffentlicht, der die chirurgischen Verfahren der medikamentenfreien IVA19 und detaillierte Protokolle der Ovarialstimulation nach der Operationzeigt 20. Hier stellen wir Ihnen Details zu den Labormethoden vor, die für eine medikamentenfreie IVA erforderlich sind.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Von jeder POR-Patientin mit abnehmender ovarieller Reserve, die sich für die medikamentenfreie IVA-Behandlung einschrieb, wurde eine schriftliche Einwilligung nach Aufklärung eingeholt. Diese Studie wurde vom Ethikkomitee der International University of Health and Welfare (Nr. 17-S-21) genehmigt. Die klinische Studie wurde unter der Nummer UMIN000034464 registriert und in Übereinstimmung mit dem Ethikkodex des Weltärztebundes (Deklaration von Helsinki) durchgeführt.
1. Extraktion des Ovarialkortex
- Entfernen Sie einen Teil des Eierstockkortex (10 x 10 mm, 2-3 mm Dicke) aus einem oder beiden Eierstöcken unter Vollnarkose durch laparoskopische Chirurgie wie zuvor beschrieben19,20.
- Legen Sie die gesammelten Ovarialkortex in einen sterilen Behälter mit 10 ml modifiziertem HTF (mHTF) bei 37 °C.
2. Fragmentierung des Ovarialkortex
HINWEIS: Vor der Dissektion des Ovarialkortex mHTF auf 37 °C aufwärmen. Halten Sie während des gesamten Verfahrens sterile Bedingungen aufrecht. Alle Werkzeuge für dieses Verfahren sind in der Materialtabelleaufgeführt.
- Legen Sie die gesammelten Ovarialkortex in eine Kunststoffschale mit 5-10 ml mHTF bei 37 °C und legen Sie sie auf die Wärmeplatte, um das Gewebe bei 37 °C zu halten (Abbildung 2A).
- Machen Sie ein Bild von jedem Kortex mit einer Digitalkamera mit dem Namen des Patienten, bevor Sie mit dem nächsten Verfahren beginnen, um die Hintergrunddaten des Patienten zu verknüpfen.
- Legen Sie einen individuellen Kortex auf eine sterile Gaze, die mit mHTF befeuchtet ist (Abbildung 2B).
HINWEIS: Tragen Sie zusätzliche mHTF mit einer Einwegpipette auf die Gaze auf, um zu verhindern, dass die Oberfläche des Kortex während dieses Verfahrens ausgetrocknet wird. - Entfernen Sie restes Medulla-Gewebe, das rosa aussieht, mit einer Mikroschere, so dass die Dicke des Gewebes 1-2 mm erreicht(Abbildung 2C und D).
HINWEIS: Um den Verlust von Follikeln im Frühstadium zu vermeiden, bereiten Sie die kortikalen Streifen mit einer Dicke von weniger als 1 mm nicht vor, da sich die Follikel im Frühstadium innerhalb von 1-2 mm von der Oberfläche des Eierstockkortex21befinden. - Sezieren Sie ein 1 mm x 1 mm x 5 mm Gewebestück aus jedem kortikalen Eierstockstreifen mit einem feinen Skalpell und lästen Sie es einer histologischen Analyse, um das Vorhandensein von Restfollikeln wie zuvor beschrieben zu bestimmen18 (Abbildung 2E).
HINWEIS: Die sezierten Gewebe für die Histologie werden in mHTF eingetaucht und bis zur Fixierung bei 4 °C gelagert(Abbildung 2F,siehe Schritt 4). - Schneiden Sie den Kortex mit einem feinen Skalpell in 1 mm x 1 mm x 10 mm große Streifen (Abbildung 2G).
HINWEIS: Es ist einfacher, durch Drücken auf das Skalpell zu schneiden als durch Ziehen daran. - Schneiden Sie diese Gewebestreifen in 1 mm x 1 mm x 1 mm kleine Würfel (Abbildung 2H).
HINWEIS: Um Veränderungen des osmotischen Drucks im Medium zu vermeiden, fügen Sie mHTF in Maßen vor der Gewebeautotransplantation hinzu.
3. Automatische Transplantation von kortikalen Ovarialfragmenten
- Öffnen Sie die Packung der IVA-Kanüle und legen Sie sie auf einen sterilen Vorhang.
- Spülen Sie das Innere der IVA-Kanüle mit mHTF aus, indem Sie mHTF mehrmals absaugen und entladen.
- Saugen Sie 100-200 μL mHTF an, um die Spitze der IVA-Kanüle zu füllen, um zu verhindern, dass die kortikalen Würfel während des Ladens austrocknen (Abbildung 3A).
- Laden Sie die kortikalen Würfel mit einer feinen Pinzette in die Spitze der IVA-Kanüle (Abbildung 3B-E).
HINWEIS: Die Anzahl der kortikalen Würfel zum Laden hängt von der Transplantationsstelle ab. Im Allgemeinen können 20-30 Würfel in einen orthotropen verbleibenden Eierstock transplantiert werden, während 10-15 Würfel in einen Beutel unter der Serosa des Eileiters transplantiert werden können. - Nachdem Sie die kortikalen Würfel geladen haben, halten Sie die Spitze der Kanüle, die die kortikalen Würfel enthält, an den Fingern, bis Die IVA-Kanüle an einen Chirurgen übertragen wird. Dadurch wird vermieden, dass die Würfeltemperatur sinkt.
HINWEIS: Die Details des Autografting-Verfahrens unter laparoskopischer Chirurgie wurden zuvorberichtet 19. Für die Transplantation von kortikalen Eierstockwürfeln wurde von unserem Mitarbeiter, der Kitazato Corporation, ein kanülenförmiges Gerät (IVA-Kanüle) entwickelt.
4. Histologische Analyse des Ovarialkortex
HINWEIS: Um die Anzahl der Restfollikel zu zählen, führen Sie eine histologische Analyse wie zuvor beschriebendurch 15.
- Markieren Sie die kortikale Streifenoberfläche vor der Probenfixierung mit einem Gewebemarkierungsfarbstoff. Dies zeigt die Seite des Kortex im Streifen für die Histologie an.
- Fixieren Sie die Gewebestreifen über Nacht bei 4 °C mit Bouins Lösung.
HINWEIS: Um Atretenfollikel nachzuweisen, empfehlen wir nicht, Paraformaldehyd zur Fixierung zu verwenden, um eine Schrumpfung des Zytoplasmas der Eizellen zu vermeiden. - Dehydrieren und die Gewebestreifen in Paraffin einbetten.
- Teilen Sie den Paraffinblock, der die Gewebeprobe enthält, seriell auf.
- Färben Sie jeden Abschnitt mit Hämatoxylin und Eosin, um die Follikel zu visualisieren.
- Zählen Sie die Follikel wie zuvor beschrieben17.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
In der ersten Veröffentlichung des IVA-Ansatzes15haben wir die kortikalen Eierstockwürfel nacheinander in die Transplantatstellen der laparoskopischen Chirurgie transplantiert (Abbildung 1A). Da 100-150 Eierstockwürfel verwendet wurden, dauerte es 3-4 Stunden für die Gewebetransplantation unter laparoskopischer Operation. Auch einige Eierstockwürfel gingen vor dem Pfropfen verloren. Da die IVA-Kanüle 20-30 Würfel gleichzeitig an eine Transplantatstelle übertragen konnte(Abbildung 1B),konnten wir die Operationszeit auf 1-2 Stunden verkürzen. Darüber hinaus könnte die IVA-Kanüle den Verlust von kortikalen Eierstockwürfeln während der Operation beseitigen.
Abbildung 1: Die Wirksamkeit der IVA-Kanüle. (A) Vorherige Methode bei der Transplantation von kortikalen Eierstockwürfeln nacheinander mit einer Zwirkkraft. (B) Die aktuelle Methode mit der Transplantation von 20-30 Würfeln gleichzeitig mit der IVA-Kanüle. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
Abbildung 2: Ovarialgewebedissektion für medikamentenfreie IVA. (A) Ein Stück Eierstockrinde wird in eine Kunststoffschale gelegt, die mHTF bei 37 °C enthält. (B) Um restiges Medullagewebe zu entfernen, wird der Eierstockkortex auf eine angefeuchtete Gaze gelegt. (C) Medulla-Gewebe wird mit einer feinen Mikroschere entfernt. (D) Die Dicke des zu präparierenden Kortex beträgt zwischen 1 und 2 mm. (E) Nach Entfernung von Medullagewebe wird ein 1 mm x 1 mm x 5 mm großes Gewebestück aus jedem kortikalen Eierstockstreifen zur histologischen Analyse seziert. (F) Das sezierte Gewebe wird in einem 1,5-ml-Röhrchen mit mHTF bei 4 °C gelagert, bis es für die Histologie fixiert wird. (G und H) Der Eierstockkortex wird in 1 mm x 1 mm x 10 mm Streifen geschnitten und dann mit einem feinen Skalpell weiter in 1 mm x 1 mm x 1 mm kleine Würfel geschnitten. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
Abbildung 3: Automatische Transplantation von kortikalen Ovarialfragmenten. (A) Vor dem Laden von Würfeln werden 100-200 μL mHTF aspiriert, um die Spitze der IVA-Kanüle zu füllen, um zu verhindern, dass die kortikalen Würfel während des Ladens austrocknen (B-E) Laden von kortikalen Eierstockwürfeln in die Spitze der IVA-Kanüle. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
In diesem Manuskript haben wir ein detailliertes Laborprotokoll für drogenfreie IVA gezeigt. Die medikamentenfreie IVA ist ein neuer Ansatz der Unfruchtbarkeitsbehandlung für POR-Patientinnen mit abnehmender Ovarialreserve, um das Wachstum der sekundären Follikel zu fördern, was zu reiferen Eizellen nach der Stimulation der Eierstöcke führt und bei erfolgreicher Schwangerschaftzunimmt 20. Bei 15 POR-Patientinnen mit abnehmender Ovarialreserve erreichte dieser Ansatz eine spontane Schwangerschaft, In-vitro-Fertilisation-Embryotransfer ermöglichte vier Lebendgeburten, zusammen mit einer laufenden Schwangerschaft19.
Zur Vorbereitung der Transplantation des Ovarialkortex wurde Medullagewebe mit einer Mikroschere mit 1-2 mm Dicke entfernt. Zuvor haben wir gezeigt, dass sich primordiale, primäre und mehrheitliche sekundäre Follikel innerhalb von 1 mm Dicke von der Oberfläche des Eierstockkortex bei Patienten mit normaler ovarieller Reservebefanden 21. Bei POI-Patienten fanden wir heraus, dass sekundäre Follikel tiefer als 1 mm, aber innerhalb von 2 mm von der Oberfläche des Eierstockkortex21entfernt waren. Es ist bekannt, dass sich Antralfollikel in Medulla-Geweben21befinden, aber kein Follikel wurde in Medulla-Geweben bei POI-Patientengefunden 21. Obwohl POR-Patientinnen mit abnehmender Ovarialreserve Antralfollikel im Medullagewebe haben könnten, sind Antralfollikel nach der Transplantation aufgrund mangelnder Blutgefäßkommunikation schwer zu überleben22. Daher haben wir die Dicke des Ovarialkortex auf 1-2 mm festgelegt und der kritische Schritt innerhalb des Protokolls besteht darin, die kortikalen Streifen nicht < 1-2 mm zu machen, um den Verlust wertvoller Restfollikel zu vermeiden. Bei der Herstellung von kortikalen Streifen und Würfeln haben wir mHTF verwendet, aber man kann ein ähnliches Medium verwenden, das 4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinethansulfonsäure (HEPES) -Puffer enthält.
Bei diesem Verfahren transplantierten wir den Ovarialkortex, nachdem wir ihn in 1 mm3 Würfel 15,20geschnitten hatten. Aufgrund der Schwierigkeit, mit so kleinen Fragmenten für die Transplantation umzugehen, dauerten frühere Transplantations-Eierstockwürfel nacheinander unter der laparoskopischen Operation 3-4 Stunden, wobei einige Würfel gelegentlich während der Operation verloren gingen. Nach der Entwicklung der IVA-Kanüle konnten wir die Operationszeit auf 1-2 Stunden verkürzen, was dazu führte, dass die Invasivität der Operation minimiert wurde, damit die medikamentenfreie IVA zu einer tageschirurgischen Operation wird. Darüber hinaus konnten wir den Verlust von kortikalen Eierstockwürfeln während der Operation beseitigen. Aufgrund der begrenzten Anzahl von Follikeln im Ovarialkortex bei POR-Patientinnen mit abnehmender Ovarialreserve ist es wichtig, den Verlust von kortikalen Eierstockwürfeln zu vermeiden. Wenn die IVA-Kanüle nicht verfügbar ist, können Sie versuchen, eine ähnliche Kanüle zu finden, die Sie unter laparoskopischer Operation verwenden können.
Der Rückgang der Eierstockfunktion wird zunehmend durch Alterung und einige pathophysiologische Zustände verursacht 23,24,25. Daher ist bei unverheirateten Frauen mit schwerer Ovarialfunktionsstörung die Erhaltung der Fruchtbarkeit wichtig, um eine zukünftige Schwangerschaft zu ermöglichen. Für diese Patientinnen wurden die Methoden der Kryokonservierung von Eizellen oder Eierstockgewebe berichtet26,27,28,29. Obwohl die Kryokonservierung von Eizellen eine etablierte Methode zur Erhaltung der Fruchtbarkeit ist1,2, könnten diese Patientinnen auch nach einer ovariellen Hyperstimulation aufgrund einer geringen ovariellen Reserve eine sehr begrenzte Anzahl von abrufbaren Eizellen haben. Darüber hinaus wurde bei alternden Patientinnen mit Ovarialfunktionsstörung eine hohe Inzidenz von Chromosomenanomalien in ovulierten Eizellenberichtet 26,30. Dies führt dazu, dass mehrere teure Verfahren erforderlich sind, um eine ausreichende Anzahl von Eizellen sicherzustellen, um eine Schwangerschaft zu garantieren. Um diese Probleme zu lösen, haben wir den medikamentenfreien IVA-Ansatz entwickelt, um die Anzahl der reifen Eizellen für die Eizellentnahme zu erhöhen. Da die Kryokonservierung von Eizellen keine experimentelle Methode mehr ist31,32, wird erwartet, dass die medikamentenfreie IVA gefolgt von der Kryokonservierung von Eizellen eine vielversprechende Methode zur Erhaltung der Fruchtbarkeit bei unverheirateten Frauen mit schwerer Ovarialfunktionsstörung sein wird. Zukünftige klinische Studien mit den gefrierauftauenden Eizellen, die aus der medikamentenfreien IVA gewonnen werden, werden jedoch erforderlich sein, um die Wirksamkeit dieses Ansatzes zur Erhaltung der Fruchtbarkeit bei unverheirateten Frauen mit schwerer Ovarialfunktionsstörung zu bestimmen.
Abschließend haben wir die medikamentenfreie IVA als neuen Ansatz der Unfruchtbarkeitsbehandlung für POR-Patientinnen mit abnehmender Ovarialreserve entwickelt und das detaillierte Laborprotokoll gezeigt, um unsere Verfahren wiederholen zu können. Die methodischen Einschränkungen der medikamentenfreien IVA sind Schwierigkeiten bei der Vorhersage der Restfollikelzahl vor der Operation und auch die Unfähigkeit, das Überleben des Transplantats zu bewerten. Die Labortechnik der medikamentenfreien IVA könnte die Grundlage für die zukünftige Anwendung der Eierstockgewebekultur werden, um reife Eizellen ohne Transplantation zu erhalten.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Die Autoren bestätigen, dass sie keinen Interessenkonflikt haben.
Acknowledgments
Wir danken Tatsuji Ihana, Sachiyo Kurimoto, Kazuko Takahasih, Yuki Yoshizawa, Maho Arashi, Kentaro Fujita, Erina Kudo, Yuka Kurimoto und Mayuko Wakatsuki für die Unterstützung des drogenfreien IVA-Verfahrens und Prof. Aaron J.W. Hsueh (Stanford University School of Medicine, Stanford, CA) für die kritische Lektüre und Bearbeitung des Manuskripts. Wir danken auch Rebecca Truman und Gregory Truman für die Einfügung der englischen Erzählung. Diese Studie wurde von der Japan Society for the Promotion of Science (JSPS), Scientific Research B (19H03801) und Challenging Exploratory Research (18K19624) unterstützt.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 4.5 onz specimen container | FALCON | 354013 | Other products may also be suitable |
| 60mm dish | FALCON | 351007 | Other products may also be suitable |
| 50 x 50 cm sterile drape | HOGY Medical | SR-823 | Any type of sterile produsts may also be suitable |
| Disposable pippete | FALCON | 357575 | Other products may also be suitable |
| Fine scissors, Curved | WPI | #14224-G | Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products |
| Hot plate | TOKAI HIT | TPiE-SP | Use at operation room to maintain the temperature of dishes containing ovarian tissue before transplantation |
| Human Serum Albumin Solution | Irvine Scientific | 9988 | Medium for handling ovarian tissue |
| IVA cannule | KITAZATO | 446030 IVA-6030E | Specific cannula for tissue autografting |
| KAI medical Disposable scalpel | WPI | #5 10-A | Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products |
| Micro scissors, Curved | WPI | #503364 | Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products |
| Modified HTF Medium-HEPES | Irvine Scientific | 90126 | Medium for handling ovarian tissue |
| Sterile gauze | Osaki Medical | 15004 | Any type of sterile produsts may also be suitable |
| Swiss Tweezers, Curved Tips | KAI | #504505 | Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products |
References
- Liang, T., Motan, T. Mature Oocyte Cryopreservation for Fertility Preservation. Advances in Experimental Medicine and Biology. 951, 155-161 (2016).
- Yoon, T. K., et al. Live births after vitrification of oocytes in a stimulated in vitro fertilization-embryo transfer program. Fertility and Sterility. 79 (6), 1323-1326 (2003).
- Donnez, J., et al. Livebirth after orthotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue. Lancet. 364 (9443), 1405-1410 (2004).
- Meirow, D., et al. Pregnancy after transplantation of cryopreserved ovarian tissue in a patient with ovarian failure after chemotherapy. New England Journal of Medicine. 353 (3), 318-321 (2005).
- De Vos, M., Devroey, P., Fauser, B. C.
- Scott, R. T., et al. Follicle-stimulating hormone levels on cycle day 3 are predictive of in vitro fertilization outcome. Fertility and Sterility. 51 (4), 651-654 (1989).
- Ferraretti, A. P., et al. ESHRE consensus on the definition of 'poor response' to ovarian stimulation for in vitro fertilization: the Bologna criteria. Human Reproduction. 26 (7), 1616-1624 (2011).
- Huhtaniemi, I., et al. Advances in the Molecular Pathophysiology, Genetics, and Treatment of Primary Ovarian Insufficiency. Trends in Endocrinology and Metabolism. 29 (6), 400-419 (2018).
- Męczekalski, B., Maciejewska-Jeske, M., Podfigurna, A. Reproduction in premature ovarian insufficiency patients - from latest studies to therapeutic approach. Prz Menopauzalny. 17 (3), 117-119 (2018).
- Baker, V. Life plans and family-building options for women with primary ovarian insufficiency. Seminars in Reproductive Medicine. 29 (4), 362-372 (2011).
- Englert, Y., Govaerts, I. Oocyte donation: particular technical and ethical aspects. Human Reproduction. 13, Suppl 2 90-97 (1998).
- Englert, Y., Rodesch, C., Laruelle, C., Govoerts, I. Oocyte donation: ethical aspects related to the donor. Contraception, Fertilite, Sexualite. 25 (3), 251-257 (1997).
- Storgaard, M., et al. Obstetric and neonatal complications in pregnancies conceived after oocyte donation: a systematic review and meta-analysis. BJOG: An International Journal of Obstetrics and Gynaecology. 124 (4), 561-572 (2017).
- Storgaard, M., Malchau, S., Loft, A., Larsen, E., Pinborg, A. Oocyte donation is associated with an increased risk of complications in the pregnant woman and the fetus. Ugeskrift for Laeger. 179 (11), (2017).
- Kawamura, K., et al. Hippo signaling disruption and Akt stimulation of ovarian follicles for infertility treatment. Proceedings of the National Academy of Sciences. 110 (43), 17474-17479 (2013).
- Hsueh, A. J., Kawamura, K., Cheng, Y., Fauser, B. C.
- Li, J., et al. Activation of dormant ovarian follicles to generate mature eggs. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (22), 10280-10284 (2010).
- Suzuki, N., et al. Successful fertility preservation following ovarian tissue vitrification in patients with primary ovarian insufficiency. Human Reproduction. 30 (3), 608-615 (2015).
- Tanaka, Y., Hsueh, A. J., Kawamura, K. Surgical approaches of drug-free in activation and laparoscopic ovarian incision to treat patients with ovarian infertility. Fertility and Sterility. , (2020).
- Kawamura, K., Ishizuka, B., Hsueh, A. J. W. Drug-free in-vitro activation of follicles for infertility treatment in poor ovarian response patients with decreased ovarian reserve. Reproductive Biomedicine Online. 40 (2), 245-253 (2020).
- Haino, T., et al. Determination of Follicular Localization in Human Ovarian Cortex for Vitrification. Journal of Adolescent and Young Adult Oncology. 7 (1), 46-53 (2018).
- Baird, D. T., Webb, R., Campbell, B. K., Harkness, L. M., Gosden, R. G. Long-term ovarian function in sheep after ovariectomy and transplantation of autografts stored at -196 C. Endocrinology. 140 (1), 462-471 (1999).
- Qin, Y., Jiao, X., Simpson, J. L., Chen, Z. J. Genetics of primary ovarian insufficiency: new developments and opportunities. Human Reproduction Update. 21 (6), 787-808 (2015).
- Domniz, N., Meirow, D. Premature ovarian insufficiency and autoimmune diseases. Best Practice & Research: Clinical Obstetrics & Gynaecology. 60, 42-55 (2019).
- Laven, J. S.
- Grynberg, M., et al.
- Tomao, F., Spinelli, G. P., Panici, P. B., Frati, L., Tomao, S. Ovarian function, reproduction and strategies for fertility preservation after breast cancer. Critical Reviews in Oncology/Hematology. 76 (1), 1-12 (2010).
- Kim, S., Lee, Y., Lee, S., Kim, T. Ovarian tissue cryopreservation and transplantation in patients with cancer. Obstetrics & Gynecology Science. 61 (4), 431-442 (2018).
- Donnez, J., Dolmans, M. M. Ovarian tissue freezing: current status. Current Opinion in Obstetrics and Gynecology. 27 (3), 222-230 (2015).
- Wu, R. C., Kuo, P. L., Lin, S. J., Liu, C. H., Tzeng, C. C. X chromosome mosaicism in patients with recurrent abortion or premature ovarian failure. Journal of the Formosan Medical Association. 92 (11), 953-956 (1993).
- De Munck, N., Vajta, G. Safety and efficiency of oocyte vitrification. Cryobiology. 78, 119-127 (2017).
- Argyle, C. E., Harper, J. C., Davies, M. C. Oocyte cryopreservation: where are we now. Human Reproduction Update. 22 (4), 440-449 (2016).
