Summary

התקני שדה חשמליים ומגנטיים לגירוי רקמות ביולוגיות

Published: May 15, 2021
doi:

Summary

פרוטוקול זה מתאר את התהליך שלב אחר שלב לבניית גירויים חשמליים ומגנטיים המשמשים להמרצת רקמות ביולוגיות. הפרוטוקול כולל קו מנחה לדמות שדות חשמליים ומגנטיים חישוביים וייצור התקני גירוי.

Abstract

שדות חשמליים (EFs) ושדות מגנטיים (MFs) נמצאים בשימוש נרחב על ידי הנדסת רקמות כדי לשפר את הדינמיקה של התאים כגון התפשטות, הגירה, בידול, מורפולוגיה וסינתזה מולקולרית. עם זאת, משתנים כגון גירויים חוזק זמני גירוי צריך להיחשב בעת גירוי תאים, רקמות או פיגומים. בהתחשב בכך ש- EFs ו- MFs משתנים בהתאם לתגובה התאית, עדיין לא ברור כיצד לבנות מכשירים המייצרים גירויים ביופיזיים נאותים כדי לעורר דגימות ביולוגיות. למעשה, יש חוסר ראיות לגבי החישוב וההפצה כאשר גירויים ביופיזיים מוחלים. פרוטוקול זה מתמקד בתכנון וייצור של מכשירים ליצירת EFs ו- MFs ויישום מתודולוגיה חישובית לחיזוי התפלגות גירויים ביופיזיים בתוך ומחוץ לדגימות ביולוגיות. מכשיר ה- EF הורכב משתי אלקטרודות נירוסטה מקבילות הממוקמות בחלק העליון והתחתון של תרבויות ביולוגיות. אלקטרודות היו מחוברות מתנד כדי ליצור מתחים (50, 100, 150 ו 200 Vp-p) ב 60 kHz. התקן ה- MF היה מורכב מסליל, אשר היה אנרגטי עם שנאי כדי ליצור זרם (1 A) ומתח (6 V) ב 60 הרץ. תמיכה בפולימתיל מתאקרילטה נבנתה כדי לאתר את התרבויות הביולוגיות באמצע הגליל. הסימולציה החישובית הבהירה את ההתפלגות ההומוגנית של EFs ו- MFs בתוך ומחוץ לרקמות ביולוגיות. מודל חישובי זה הוא כלי מבטיח שיכול לשנות פרמטרים כגון מתחים, תדרים, מורפולוגיות רקמות, סוגי לוחות היטב, אלקטרודות וגודל סליל כדי להעריך את EFs ו- MFs כדי להשיג תגובה סלולרית.

Introduction

EFs ו MFs הוכחו לשנות את הדינמיקה התא, מגרה התפשטות והגברת הסינתזה של המולקולות העיקריות הקשורות מטריצה חוץ תאית שלרקמות 1. גירויים ביופיזיים אלה יכולים להיות מיושמים בדרכים שונות באמצעות הגדרות והתקנים ספציפיים. לגבי המכשירים כדי ליצור EFs, ממריצי צימוד ישיר להשתמש אלקטרודות כי הם במגע עם דגימות ביולוגיות במבחנה או מושתל ישירות לתוך רקמות של חולים ובעלי חיים vivo2; עם זאת, יש עדיין מגבלות וליקויים הכוללים תאימות ביולוגית לא מספקת על ידי האלקטרודות במגע, שינויים ב- pH ורמות חמצן מולקולרי1. להיפך, התקני צימוד עקיפים מייצרים EFs בין שתי אלקטרודות, אשר ממוקמים במקביל לדגימות ביולוגיות3, המאפשר טכניקה חלופית לא פולשנית כדי לעורר דגימות ביולוגיות ולהימנע ממגע ישיר בין רקמות ואלקטרודות. סוג זה של מכשיר יכול להיות extrapolated ליישומים קליניים עתידיים לבצע הליכים עם פלישה מינימלית למטופל. ביחס למכשירים המייצרים MFs, מממריצי צימוד השראות יוצרים זרם חשמלי משתנה בזמן, הזורם דרך סליל הממוקם סביב תרביות תאים4,5. לבסוף, ישנם התקנים משולבים, המשתמשים במסמכים אלקטרוניים וב- MFs סטטיים כדי ליצור שדות אלקטרומגנטיים ארעיים1. בהתחשב בכך שיש תצורות שונות כדי לעורר דגימות ביולוגיות, יש צורך לשקול משתנים כגון מתח ותדירות כאשר גירויים ביופיזיים מוחלים. מתח הוא משתנה חשוב, שכן הוא משפיע על ההתנהגות של רקמות ביולוגיות; לדוגמה, הוכח כי נדידת תאים, אוריינטציה וביטוי גנים תלויים משרעת של מתח מיושם3,6,7,8,9,10. תדירות ממלאת תפקיד חשוב בגירוי ביופיזי, כפי שהוכח כי אלה מתרחשים באופן טבעי vivo. הוכח כי תדרים גבוהים ונמוכים יש השפעות מועילות על התאים; במיוחד, בערוצי סידן מגודרים במתח קרום התא או reticulum אנדופלזמי, אשר מפעילים מסלולי איתות שונים ברמה תאית1,7,11.

על פי האמור לעיל, מכשיר ליצירת EFs מורכב מחולל מתח מחובר שני קבלים מקבילים12. מכשיר זה יושם על ידי ארמסטרונג ואח ‘כדי לעורר הן את קצב התפשטות ואת הסינתזה המולקולרית של כונדרוציטים13. עיבוד של מכשיר זה בוצע על ידי ברייטון ואח ‘אשר שינו את תרבות התא היטב צלחות על ידי קידוח העפעפיים העליונים והתחתונים שלהם. חורים מולאו על ידי מגלשות כיסוי, שם המשקפיים התחתונים שימשו לתרבות רקמות ביולוגיות. אלקטרודות הונחו על כל שקופית כיסוי כדי ליצור EFs14. מכשיר זה שימש כדי לעורר חשמלית chondrocytes, osteoblasts ו סחוס explants, מראה עלייה בהתפשטות התא14,15,16 סינתזה מולקולרית3,17. המכשיר שתוכנן על ידי Hartig et al. כלל מחולל גלים ומגבר מתח, שהיו מחוברים לקבלים מקבילים. אלקטרודות היו עשויות נירוסטה באיכות גבוהה הממוקמת במקרה בידוד. המכשיר שימש כדי לעורר osteoblasts, מראה עלייה משמעותית התפשטות והפרשת חלבון18. המכשיר המשמש את קים ואח ‘כלל שבב ממריץ זרם biphasic, אשר נבנה באמצעות תהליך הייצור של מוליכים למחצה משלימים של תחמוצת מתכת במתח גבוה. צלחת היטב תרבות תוכננה לתרבת תאים על פני משטח מוליך עם גירוי חשמלי. אלקטרודות היו מצופות זהב מעל לוחות סיליקון19. מכשיר זה שימש כדי לעורר osteoblasts, מראה עלייה בהתפשטות ואת הסינתזה של גורם הגדילה אנדותל כלי הדם19, וממריץ את הייצור של פעילות פוספטאז אלקליין, תצהיר סידן וחלבונים morphogenicעצם 20. באופן דומה, מכשיר זה שימש כדי לעורר את קצב התפשטות וביטוי של גורם הגדילה אנדותל כלי הדם של תאי גזע mesenchymal מח העצם האנושי21. המכשיר שתוכנן על ידי Nakasuji ואח ‘היה מורכב מחולל מתח מחובר לוחות פלטינה. אלקטרודות נבנו כדי למדוד את הפוטנציאל החשמלי ב 24 נקודות שונות. מכשיר זה שימש כדי לעורר chondrocytes, מראה כי EFs לא לשנות מורפולוגיה של התא התפשטות מוגברת סינתזה מולקולרית22. המכשיר ששימש את Au et al. כלל תא זכוכית המצויד בשני מוטות פחמן המחוברים לממריץ לב עם חוטי פלטינה. גירוי זה שימש כדי לעורר קרדיומיוציטים ופיברובלסטים, שיפור התא יישור fibroblast23.

התקני MF שונים יוצרו על בסיס סלילי הלמהולץ כדי לעורר מספר סוגים של דגימות ביולוגיות. לדוגמה, סלילי הלמהולץ שימשו כדי לעורר התפשטות סינתזה מולקולרית של כונדרוציטים24,25, לשפר את הסינתזה proteoglycan של סחוס מפרקי26, לשפר את הסרת הגנים הקשורים להיווצרות עצם של תאים דמויי osteoblast27, ולהגדיל את התפשטות וביטוי מולקולרי של תאי אנדותל28. סלילי הלמהולץ מייצרים MFs לאורך שני סלילים הממוקמים אחד מלפנים והשני. הסלילים חייבים להיות ממוקמים עם מרחק שווה לרדיוס של הסלילים כדי להבטיח MF הומוגני. החיסרון בשימוש בסלילים של הלמהולץ טמון בממדי הסליל, מכיוון שהם צריכים להיות גדולים מספיק כדי ליצור את עוצמת ה- MF הנדרשת. בנוסף, המרחק בין סלילים חייב להיות מספיק כדי להבטיח התפלגות הומוגנית של MFs סביב רקמות ביולוגיות. כדי למנוע בעיות שנגרמו על ידי סלילי הלמהולץ, מחקרים שונים התמקדו בייצור סלילי סולנואיד. סלילי סולנואיד מבוססים על צינור, אשר פצע עם חוט נחושת כדי ליצור MFs. כניסות חוט נחושת יכול להיות מחובר ישירות לשקע או אספקת חשמל כדי להמריץ את הסליל וליצור MFs במרכז סולנואיד. ככל שהסליל מסתובב יותר, כך MF שנוצר גדול יותר. עוצמת ה- MF תלויה גם במתח ובזרם המוחלים כדי להמריץ את הסליל29. סלילי סולנואיד שימשו כדי לעורר סוג אחר מגנטי של תאים כגון HeLa, HEK293 ו MCF730 או תאי גזע mesenchymal31.

התקנים המשמשים מחברים שונים לא נחשבו לגודל הולם של אלקטרודות או לאורך הנכון של הסליל כדי להפיץ הומוגנית הן EFs והן MFs. יתר על כן, התקנים מייצרים מתחים ותדרים קבועים, ומגבילים את השימוש בהם כדי לעורר רקמות ביולוגיות ספציפיות. מסיבה זו, בפרוטוקול זה מבוצעת הנחיית סימולציה חישובית המדמה הן מערכות קיבוליות והן סלילים כדי להבטיח התפלגות הומוגנית של EFs ו- MFs על דגימות ביולוגיות, תוך הימנעות מ אפקט הקצה. בנוסף, מוצג כי העיצוב של מעגלים אלקטרוניים לייצר מתחים ותדירות בין האלקטרודות לבין הסליל, יצירת EFs ו MFs כי יתגבר על מגבלות שנגרמו על ידי עכבה של תרבות התא היטב צלחות ואוויר. שינויים אלה יאפשרו יצירה של ביו-רקטורים לא פולשניים ומסתגלים כדי לעורר כל רקמה ביולוגית.

Protocol

1. הדמיה של EFs ו- MFs הערה: הדמיה של EFs ו- MFs בוצעה במולטיפיזיקה של COMSOL. בחר תצורה דו-ממדית צירית שתייצג הן את התחומים החשמליים והן את התחומים המגנטיים. בתצורה הפיזית, בחרו בממשק ‘זרם חשמלי’ לחישוב EFs באלקטרודות מקבילות או בממשק השדה המגנטי לחישוב MFs סבי…

Representative Results

הדמיה חישוביתהפצות של מסמכי EFs ו- MFs מוצגות באיור 3. מצד אחד, ניתן היה להתבונן בהתפלגות ההומוגנית של EFs במערכת ההקפתית(איור 3A). ה-EF תוכנן להתבונן בפירוט בעוצמת השדה בתוך המדגם הביולוגי (איור 3B). סימולציה זו הייתה שימושית כדי parametrize את …

Discussion

טיפולים המשמשים לריפוי פתולוגיות שונות המשפיעות על רקמות אנושיות הם טיפולים תרופתיים32 אוהתערבויות כירורגיות 33, המבקשים להקל על הכאב באופן מקומי או להחליף רקמות מושפעות עם explants או השתלות. לאחרונה, טיפול בתאים אוטולוגיים הוצע כטיפול אלטרנטיבי לטיפול ברקמות פצוע?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

המחברים מודים לתמיכה הכספית שמספק “פונדו נאסיונאל דה פינסיאמיינטו פארה לה סינסיה, la Tecnología, y la Innovación -פונדו פרנסיסקו חוסה דה קלדס- Minciencias” ואוניברסיטת נאסיונאל דה קולומביה באמצעות המענק מס ‘80740-290-2020 ואת התמיכה שהתקבלה על ידי Valteam טק – מחקר וחדשנות לאספקת הציוד ותמיכה טכנית במהדורת הווידאו.

Materials

Electrical stimulator
Operational amplifier Motorola LF-353N —-
Quantity: 1
Resistors —- —- 22 kΩ
Quantity: 1
Resistors —- —- 10 kΩ
Quantity: 3
Resistors —- —- 2.6 kΩ
Quantity: 2
Resistors —- —- 2.2 kΩ
Quantity: 1
Resistors —- —- 1 kΩ
Quantity: 1
Resistors —- —- 220 Ω
Quantity: 2
Resistors —- —- 22 Ω
Quantity: 5
Resistors —- —- 10 Ω
Quantity: 1
Resistors —- —- 6.8 Ω
Quantity: 1
Resistors —- —- 3.3 Ω
Quantity: 2
Polyester capacitors —- —- 1 nF
Quantity: 2
Polyester capacitors —- —- 100 nF
Quantity: 1
VHF Band Amplifier Transistor JFET Toshiba 2SK161 —-
Quantity: 1
Power transistor BJT NPN Mospec TIP 31C —-
Quantity: 1
Zener diode Microsemi 1N4148 —-
Quantity: 1
Switch Toogle Switch SPDT – T13 —-
Quantity: 3
Toroidal ferrite core Caracol —- T*22*14*8
Quantity: 1
Cooper wire Greenshine —- AWG – 24
Quantity: 1
Relimate header with female housing ADAFRUIT —- 8 pin connectors
Quantity: 1
Relimate header with female housing ADAFRUIT —- 2 pin connectors
Quantity: 1
Female plug terminal connector JIALUN —- 4mm Lantern Plugs (Plug + Socket) 15 A
Quantity: 1
Aluminum Heat Sink AWIND —- For TIP 31C transistor
Quantity: 1
Led CHANZON —- 5 mm red
Quantity: 1
Integrated circuit socket connector Te Electronics Co., Ltd. —- Double row 8-pin DIP
Quantity: 1
3 pin connectors set STAR —- JST PH 2.0
Quantity: 3
2 pin screw connectors STAR —- For PCB
Quantity: 1
3 pin screw connectors STAR —- For PCB
Quantity: 1
Banana connector test lead JIALUN —- P1041 – 4 mm – 15 A
Quantity: 7
Bullet connectors to banana plug charge lead JIALUN —- 4 mm male-male/female-female adapters – 15 A
Quantity: 1
Case —- —- ABS
Quantity: 1
Electrodes —- —- Stainless – steel
Quantity: 2
Electrode support —- —- Teflon
Quantity: 2
Printed circuit board Quantity: 1
Magnetic stimulator
Cooper wire Greenshine —- AWG – 18
Quantity: 1
AC power plugs —- —- 120 V AC – 60 Hz
Quantity: 1
Banana female connector test lead JIALUN —- 1Set Dual Injection – 4 mm – 15 A
Quantity: 2
Banana male connector test lead JIALUN —- 1Set Dual Injection – 4 mm 15 A
Quantity: 1
Cell culture well plate support —- —- PMMA
Quantity: 1
Fuse Bussmann 2A —-
Quantity: 1
Transformer —- —- 1A – 6 V AC
Quantity: 1
Tube —- —- PVC
Quantity: 1
Variable rheostat MCP BXS150 10 Ω
Quantity: 1
General equipment
Digital dual source  PeakTech DG 1022Z 2 x 0 – 30 V / 0 – 5 A CC / 5 V / 3 A fijo
Quantity: 1
Digital Oscilloscope Rigol DS1104Z Plus 100 MHz, bandwidth, 4 channels
Quantity: 1
Digital multimeter Fluke F179 Voltage CC – CA (1000 V). Current CC – CA 10 A. Frequency 100 kHz
Quantity: 1

References

  1. Balint, R., Cassidy, N. J., Cartmell, S. H. Electrical Stimulation: A Novel Tool for Tissue Engineering. Tissue Engineering Part B: Reviews. 19 (1), 48-57 (2013).
  2. Ercan, B., Webster, T. J. The effect of biphasic electrical stimulation on osteoblast function at anodized nanotubular titanium surfaces. Biomaterials. 31 (13), 3684-3693 (2010).
  3. Brighton, C., Wang, W., Clark, C. The effect of electrical fields on gene and protein expression in human osteoarthritic cartilage explants. The Journal of Bone and Joint Surgery-American. 90 (4), 833-848 (2008).
  4. Baerov, R. M., Morega, A. M., Morega, M. Analysis of magnetotherapy effects for post-traumatic recovery of limb fractures. Revue Roumaine des Sciences Techniques- Série électrotechnique et énergétique. 65 (1-2), 145-150 (2020).
  5. Escobar, J. F., et al. In Vitro Evaluation of the Effect of Stimulation with Magnetic Fields on Chondrocytes. Bioelectromagnetics. 41 (1), 41-51 (2019).
  6. Brighton, C., Wang, W., Clark, C. Up-regulation of matrix in bovine articular cartilage explants by electric fields. Biochemical and Biophysical Research Communications. 342 (2), 556-561 (2006).
  7. Xu, J., Wang, W., Clark, C., Brighton, C. Signal transduction in electrically stimulated articular chondrocytes involves translocation of extracellular calcium through voltage-gated channels. Osteoarthritis and Cartilage. 17 (3), 397-405 (2009).
  8. Xia, Y., et al. Magnetic field and nano-scaffolds with stem cells to enhance bone regeneration. Biomaterials. 183, 151-170 (2018).
  9. Richter, A., Bartoš, M., Ferková, &. #. 3. 8. 1. ;. Physical Analysis of Pulse Low-Dynamic Magnetic Field Applied in Physiotherapy BT. World Congress on Medical Physics and Biomedical Engineering 2018. , 239-245 (2019).
  10. Miyakoshi, J. Effects of static magnetic fields at the cellular level. Progress in Biophysics and Molecular Biology. 87, 213-223 (2005).
  11. Zhang, K., Guo, J., Ge, Z., Zhang, J. Nanosecond Pulsed Electric Fields (nsPEFs) Regulate Phenotypes of Chondrocytes through Wnt/β-catenin Signaling Pathway. Scientific Reports. 4 (5836), 1-8 (2014).
  12. Brighton, C. T., Unger, A. S., Stambough, J. L. In vitro growth of bovine articular cartilage chondrocytes in various capacitively coupled electrical fields. Journal of Orthopaedic Research. 2 (1), 15-22 (1984).
  13. Armstrong, P. F., Brighton, C., Star, A. M. Capacitively coupled electrical stimulation of bovine growth plate chondrocytes grown in pellet form. Journal of Orthopaedic Research. 6 (2), 265-271 (1988).
  14. Brighton, C., Townsend, P. Increased cAMP production after short-term capacitively coupled stimulation in bovine growth plate chondrocytes. Journal of Orthopaedic Research. 6 (4), 552-558 (1988).
  15. Brighton, C. T., Jensen, L., Pollack, S. R., Tolin, B. S., Clark, C. Proliferative and synthetic response of bovine growth plate chondrocytes to various capacitively coupled electrical fields. Journal of Orthopaedic Research. 7 (5), 759-765 (1989).
  16. Brighton, C. T., Okereke, E., Pollack, S. R., Clark, C. In vitro bone-cell response to a capacitively coupled electrical field. The role of field strength, pulse pattern, and duty cycle. Clinical Orthopaedics and Related Research. 285, 255-262 (1992).
  17. Wang, W., Wang, Z., Zhang, G., Clark, C., Brighton, C. T. Up-regulation of chondrocyte matrix genes and products by electric fields. Clinical Orthopaedics and Related Research. 427, 163-173 (2004).
  18. Hartig, M., Joos, U., Wiesmann, H. P. Capacitively coupled electric fields accelerate proliferation of osteoblast-like primary cells and increase bone extracellular matrix formation in vitro. European Biophysics Journal. 29 (7), 499-506 (2000).
  19. Kim, I. S., et al. Biphasic electric current stimulates proliferation and induces VEGF production in osteoblasts. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) – Molecular Cell Research. 1763 (9), 907-916 (2006).
  20. Kim, I., et al. Novel Effect of Biphasic Electric Current on In Vitro Osteogenesis and Cytokine Production in Human Mesenchymal Stromal Cells. Tissue Engineering Part A. 15, 2411-2422 (2009).
  21. Kim, I., et al. Novel action of biphasic electric current in vitro osteogenesis of human bone marrow mesenchymal stromal cells coupled with VEGF production. Bone. 43, 43-44 (2008).
  22. Nakasuji, S., Morita, Y., Tanaka, K., Tanaka, T., Nakamachi, E. Effect of pulse electric field stimulation on chondrocytes. Asian Pacific Conference for Materials and Mechanics. 1, 13-16 (2009).
  23. Au, H. T. H., Cheng, I., Chowdhury, M. F., Radisic, M. Interactive effects of surface topography and pulsatile electrical field stimulation on orientation and elongation of fibroblasts and cardiomyocytes. Biomaterials. 28 (29), 4277-4293 (2007).
  24. Vanessa, N., et al. In vitro exposure of human chondrocytes to pulsed electromagnetic fields. European Journal of Histochemistry. 51 (3), 203-211 (2007).
  25. Pezzetti, F., et al. Effects of pulsed electromagnetic fields on human chondrocytes: An in vitro study. Calcified Tissue International. 65 (5), 396-401 (1999).
  26. De Mattei, M., et al. Effects of electromagnetic fields on proteoglycan metabolism of bovine articular cartilage explants. Connective Tissue Research. 44 (3-4), 154-159 (2003).
  27. Sollazzo, V., Massari, L., Caruso, A., Mattei, M., Pezzetti, F. Effects of Low-Frequency Pulsed Electromagnetic Fields on Human Osteoblast-Like Cells In Wtro. Electromagnetobiology. 15, 75-83 (2009).
  28. Martino, C. F., Perea, H., Hopfner, U., Ferguson, V. L., Wintermantel, E. Effects of weak static magnetic fields on endothelial cells. Bioelectromagnetics. 31 (4), 296-301 (2010).
  29. Wada, K., et al. Design and implementation of multi-frequency magnetic field generator producing sinusoidal current waveform for biological researches. 2016 18th European Conference on Power Electronics and Applications (EPE’16 ECCE Europe). 2016, 1-8 (2016).
  30. Cho, H., Kim, S., Kim, K. K., Kim, K., Kim, K. Pulsed Electromagnetic Fields Stimulate Cellular Proliferation in Different Types of Cells. IEEE Transactions on Magnetics. 52 (7), 1-4 (2016).
  31. Yan, J., Dong, L., Zhang, B., Qi, N. Effects of extremely low-frequency magnetic field on growth and differentiation of human mesenchymal stem cells. Electromagnetic Biology and Medicine. 29 (4), 165-176 (2010).
  32. Enoch, S., Grey, J. E., Harding, K. G. ABC of wound healing. Non-surgical and drug treatments. BMJ. 332 (7546), 900-903 (2006).
  33. Bhosale, A. M., Richardson, J. B. Articular cartilage: Structure, injuries and review of management. British Medical Bulletin. 87 (1), 77-95 (2008).
  34. Al Hamed, R., Bazarbachi, A. H., Malard, F., Harousseau, J. -. L., Mohty, M. Current status of autologous stem cell transplantation for multiple myeloma. Blood Cancer Journal. 9 (4), 44 (2019).
  35. Massari, L., et al. Biophysical stimulation of bone and cartilage: state of the art and future perspectives. International Orthopaedics. 43 (3), 539-551 (2019).
  36. Naskar, S., Kumaran, V., Basu, B. Reprogramming the Stem Cell Behavior by Shear Stress and Electric Field Stimulation: Lab-on-a-Chip Based Biomicrofluidics in Regenerative Medicine. Regenerative Engineering and Translational Medicine. 5 (2), 99-127 (2019).
  37. Hunckler, J., de Mel, A. A current affair: electrotherapy in wound healing. Journal of Multidisciplinary Healthcare. 10, 179-194 (2017).
  38. Henry, S. L., Concannon, M. J., Yee, G. J. The effect of magnetic fields on wound healing: experimental study and review of the literature. Eplasty. 8, 393-399 (2008).
  39. Hiemer, B., et al. Effect of electric stimulation on human chondrocytes and mesenchymal stem cells under normoxia and hypoxia. Molecular Medicine Reports. 18 (2), 2133-2141 (2018).
  40. Chao, P. H., et al. Chondrocyte translocation response to direct current electric fields. Journal of Biomechanical Engineering. 122 (3), 261-267 (2000).
  41. Zhao, M., Bai, H., Wang, E., Forrester, J., McCaig, C. Electrical stimulation directly induces pre-angiogenic responses in vascular endothelial cells by signaling through VEGF receptors. Journal of Cell Science. 117 (3), 397-405 (2004).
  42. Li, X., Kolega, J. Effects of direct current electric fields on cell migration and actin filament distribution in bovine vascular endothelial cells. Journal of Vascular Research. 39 (5), 391-404 (2002).
  43. Singh, B., Dixit, A. Multistage amplifier and tuned amplifier. Analog Electronics. , 87-131 (2007).
  44. Esfandiari, E., et al. The effect of high frequency electric field on enhancement of chondrogenesis in human adipose-derived stem cells. Iranian Journal Basic Medical Sciences. 4 (3), 571-576 (2014).
  45. Mardani, M., et al. Induction of chondrogenic differentiation of human adipose-derived stem cells by low frequency electric field. Advanced Biomedical Research. 5 (97), 1-7 (2016).
  46. Karaman, O., Gümüşay, M., Demirci, E. A., Kaya, A. Comparative assessment of pulsed electromagnetic fields (PEMF) and pulsed radio frequency energy (PRFE) on an in vitro wound healing model. International Journal of Applied Electromagnetics and Mechanics. 57, 427-437 (2018).
  47. Glinka, M., et al. Test chambers for cell culture in static magnetic field. Journal of Magnetism and Magnetic Materials. 331, 208-215 (2013).
  48. Vacek, T. P., et al. Electrical stimulation of cardiomyocytes activates mitochondrial matrix metalloproteinase causing electrical remodeling. Biochemical and Biophysical Research Communications. 404 (3), 762-766 (2011).
  49. Okutsu, S., et al. Electric Pulse Stimulation Induces NMDA Glutamate Receptor mRNA in NIH3T3 Mouse Fibroblasts. The Tohoku Journal of Experimental Medicine. 215 (2), 181-187 (2008).

Play Video

Cite This Article
Saiz Culma, J. J., Escobar Huertas, J. F., Garzón-Alvarado, D. A., Vaca-Gonzalez, J. J. Electric and Magnetic Field Devices for Stimulation of Biological Tissues. J. Vis. Exp. (171), e62111, doi:10.3791/62111 (2021).

View Video