Summary
Dit manuscript beschrijft de chirurgische techniek en experimentele benadering om ernstige overbelasting van de rechterventrikeldruk te ontwikkelen om hun adaptieve en onaangepaste fenotypen te modelleren.
Abstract
Gedecompenseerd rechterventrikelfalen (RVF) bij pulmonale hypertensie (PH) is fataal, met beperkte medische behandelingsopties. Het ontwikkelen en testen van nieuwe therapieën voor PH vereist een klinisch relevant groot diermodel van verhoogde pulmonale vasculaire weerstand en RVF. Dit manuscript bespreekt de nieuwste ontwikkeling van het eerder gepubliceerde PH-RVF-model voor schapen dat gebruik maakt van linker pulmonale arterie (PA) ligatie en hoofd PA-occlusie. Dit model van PH-RVF is een veelzijdig platform om niet alleen de ernst van de ziekte te beheersen, maar ook de fenotypische respons van de RV.
Volwassen schapen (60-80 kg) ondergingen linker PA (LPA) ligatie, plaatsing van de belangrijkste PA-manchet en het inbrengen van rv-drukmonitor. PA manchet en RV drukmonitor waren aangesloten op onderhuidse poorten. Proefpersonen ondergingen tweemaal per week gedurende 9 weken progressieve PA-banding met sequentiële metingen van RV-druk, PA-manchetdrukken en gemengd veneus bloedgas (SvO2). Bij de start en het eindpunt van dit model werden de ventriculaire functie en afmetingen beoordeeld met behulp van echocardiografie. In een representatieve groep van 12 proefpersonen stegen de rv-gemiddelde en systolische druk van respectievelijk 28 ± 5 en 57 ± 7 mmHg in week 1 tot 44 ± 7 en 93 ± 18 mmHg (gemiddelde ± standaardafwijking) in week 9. Echocardiografie toonde karakteristieke bevindingen van PH-RVF, met name RV-verwijding, verhoogde wanddikte en septumbuiging. De longitudinale trend van SvO2 en PA manchetdruk toont aan dat de snelheid van PA-banding kan worden getitreerd om verschillende RV-fenotypen op te wekken. Een snellere PA-bandingstrategie leidde tot een snelle daling van de SvO2 -< 65%, wat wijst op RV-decompensatie, terwijl een langzamere, meer tempostrategie leidde tot het behoud van fysiologisch SvO2 op 70% -80%. Een dier dat de versnelde strategie ondervond, ontwikkelde in week 9 enkele liters pleurale effusie en ascites. Dit chronische PH-RVF-model biedt een waardevol hulpmiddel voor het bestuderen van moleculaire mechanismen, het ontwikkelen van diagnostische biomarkers en het mogelijk maken van therapeutische innovatie om RV-aanpassing en maladaptatie van PH te beheren.
Introduction
Gedecompenseerd rechterventrikel (RV) falen is de belangrijkste oorzaak van morbiditeit en mortaliteit voor patiënten met pulmonale hypertensie (PH). RV-falen is verantwoordelijk voor meer dan 50% van de ziekenhuisopnames bij patiënten met PH en is een veel voorkomende doodsoorzaak in deze patiëntenpopulatie1,2. Hoewel de huidige medische behandelingen voor PH temporiserende maatregelen kunnen bieden, keren ze de progressie van de ziekte niet om. Als zodanig is de enige langdurige behandeling longtransplantatie. Om nieuwe medische behandelingen en interventies voor PH en RVF te onderzoeken en te testen, is een klinisch relevant diermodel nodig om de complexe pathofysiologie van de ziekte samen te vatten. In het bijzonder is er een grote klinische behoefte om RV-gerichte therapieën voor PH-patiënten te ontwikkelen om de RV-functie te verbeteren. Tot op heden hebben de meeste gepubliceerde dierstudies van PH- en RV-disfunctie vertrouwd op kleine zoogdieren zoals muizen en ratten3. Aan de andere kant zijn er slechts een handvol grote diermodellen geweest om de ziekte en RV-pathofysiologie van abnormale afterload4,5,6,7 te bestuderen. Bovendien bevat geen van de eerder gepubliceerde grote diermodellen beschrijvingen van experimentele procedures voor gecontroleerde titratie van de ernst van de ziekte die differentieel leidt tot gecompenseerde versus gedecompenseerde RV-faalfenotypen. Een diermodel van PH dat kan worden getitreerd om acuut en chronisch RV-falen met verschillende mate van compensatie te induceren, is nodig om ziektemechanismen te bestuderen en om nieuwe diagnostiek en therapieën voor PH en RVF te ontwikkelen, testen en vertalen naar de klinische praktijk. Een dergelijk model bij een groot dier is vooral waardevol voor de ontwikkeling van mechanische circulatieondersteuningsapparaten8.
Hier wordt een chronisch PH-RVF-model van grote dieren gepresenteerd met behulp van linker pulmonale arterie (PA) ligatie en progressieve hoofd-PA-banding bij volwassen schapen9,10. De ligatie van de linker PA (LPA) verhoogt de pulmonale vasculaire weerstand en vermindert de PA-capaciteit11,12. De progressieve PA-bandingbenadering maakt een nauwkeurige titratie van de ernst van de ziekte en RV-aanpassing mogelijk. Dit platform kan ook gemakkelijk worden gebruikt voor longitudinaal onderzoek naar ziekteprogressie naar RV-decompensatie. De procedures en processen die nodig zijn om dit model uit te voeren, worden gepresenteerd als een hulpmiddel voor onderzoekers die geïnteresseerd zijn in een groot dierenplatform om nieuwe behandelingen voor PH en RVF te ontwikkelen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
De Institutional Animal Care and Use Committee van het Vanderbilt University Medical Center keurde het protocol goed. De beschreven procedures werden uitgevoerd in overeenstemming met de Guide for the Care and Use of Laboratory Animals van de Amerikaanse National Research Council, 8e editie. Het overzicht en de tijdlijn van de experimentele procedure zijn weergegeven in figuur 1. Aanvullende tabel 1 beschrijft het geslacht, het gewicht, het ras, de herkomst van het schaap en andere relevante informatie die nuttig kan zijn voor de reproduceerbaarheid.
1. Een dag voor de operatie, voorbereiding van het dier
- Houd voedsel 24-40 uur achter voorafgaand aan de chirurgische procedure om de pens van het dier te decomprimeren.
- Breng 12 uur voor de procedure een fentanylpleister van 50 μg/h aan op een geschoren gebied op de dorsum van het schaap. Reinig het gebied met chloorhexidine om lanolineolieresten te verwijderen voordat de pleister wordt aangebracht. Dek de pleister af en bescherm deze met een elastisch buisverband.
2. Dag van de operatie, pre-operatieve stappen in de voorbereidingsruimte
- Dien tiletamine/zolazepam intramusculair toe (2,2-5 mg/kg) en lever 1%-3% isofluraan gemengd met 80%-100% zuurstof via een gezichtsmasker om anesthesie te induceren.
- Leg het schaap in rug op de bereidingstafel en zet de poten vast.
- Intubeer met een endotracheale buis van 10 mm en start mechanische ventilatie onder volumeregelingsmodus (getijdenvolume, TV = 10 ml / kg, ademhalingsfrequentie, RR = 15 ademhalingen per minuut).
- Scheer het chirurgische veld van de nek van het schaap naar de bovenbuik, zoals hieronder beschreven.
- Scheer de voorste hals van het schaap om de huid boven de halsaderen bloot te leggen voor centraal veneuze katheterisatie (zie stap 3.7).
- Scheer de anterolaterale thorax bilateraal ter voorbereiding op thoracotomie (zie stap 4.1).
- Scheer de linkerkant van de romp van de borst naar de rug (d.w.z. zo dorsaal als de tafel toestaat met het onderwerp in rugligging) en van borst naar achterflank caudaal, ter voorbereiding op implantatie van subcutane poorten (zie stappen 4.12-4.15).
- Plaats een angiocatheter van 20 G in de auriculaire slagader voor arteriële drukcontrole en bloedgasbemonstering.
- Plaats een siliconen buis met een binnendiameter van 3/8"-1/2" voor pensdecompressie. De orgastrische buis blijft gedurende de hele procedure in de pens.
- Vervoer het dier van de preoperatieve voorbereidingsruimte naar de chirurgische suite.
3. Dag van de operatie, pre-operatieve stappen in de operatiekamer
- Sluit de schapen opnieuw aan op de ventilator in de operatiekamer en blijf beademen in dezelfde stand in stap 2.3 (isofluraan 1%-3%, TV = 10 ml/kg, RR = 15 ademhalingen per minuut)
- Sluit de sensoren voor pulsoximetrie (SpO2), arteriële bloeddruk, temperatuur, eindgetijdencapnograaf en elektrocardiogram (ECG) aan op de anesthesiemonitor.
- Verbind de sensoren voor vitale functies met het dier.
- Plaats de pulsoximeter op de tong van het dier.
- Plaats de temperatuursonde in het rectum.
- Sluit elektrocardiogramsondes met 3 lood aan: plaats de rode kabel op het linkerachterbeen, de witte lood op het rechtervoorbeen en het zwarte lood op het linker voorste been.
- Sluit het mannelijke lueruiteinde van de driewegstopkraan aan op de angiokatheter van de auriculaire slagader en sluit het tegenoverliggende vrouwelijke lueruiteinde aan op de drukomvormer voor arteriële lijnbewaking met behulp van een drukbuis van de juiste grootte.
- Lijn de transducer uit op het niveau van de operatietafel.
- Open de driewegstopkraan op de transducer.
- Schuif over de hoofdknop van de vitals-monitor om het arteriële bloeddrukkanaal te markeren en druk vervolgens op de knop om het kanaal te selecteren.
- Selecteer ZERO IBP om de transducer op nul te zetten.
- Sluit de mannelijke lueraansluiting van de capnografiemonitorlijn aan op de vrouwelijke lueraansluiting op de ventilatorbuis om eindgetijden-CO2 te bewaken.
- Stel de IV-pompen in voor continue vloeistoftoediening en inotrope of vasopressorondersteuning.
- Perforeer het septum op de zoutzak met de iv-toedieningsset. Zorg ervoor dat de infuusbuis is geklemd voordat u de zak perforeert om morsen te voorkomen.
- Lijn de iv-toedieningsset uit en monteer deze in de infuusrolpomp en controleer of de op de pomp opgegeven richting overeenkomt met de richting van de vloeistoftoediening.
OPMERKING: Zorg ervoor dat de IV-toedieningsset compatibel is met de IV-pomp. - Schakel de pomp in en geef PRIME op om alle lucht in de lijn te verwijderen.
- Plaats de schapen voor de operatieve procedure.
- Draai het schaap vanuit rugligging naar een gedeeltelijke rechter laterale decubituspositie.
- Zet de rechter voorvoet naar beneden vast en zet de linkervoorvoet vast terwijl je deze cefalade en lateraal intrekt met touw of atraumatische riemen.
- Voer transthoracale echocardiografie uit voor baselinebeoordeling van de ventriculaire anatomie en functie. Echografie is ook nuttig om de optimale intercostale ruimte te bepalen die chirurgische toegang tot zowel de hoofdlongslagader als de linker longslagader vergemakkelijkt.
- Reinig het operatieveld vrij van vuil en andere verontreinigingen met zeep of schrobborstel. Bereid de nek en de borst voor met chloorhexidine of betadine-oplossing en drapeer het chirurgische veld op een steriele manier.
- Met behulp van ultrasone begeleiding of anatomische oriëntatiepunten, toegang tot de linker of rechter interne halsader met behulp van een finder naald of angiocath. Gebruik seldinger techniek, breng een 7-Franse triple-lumen centrale veneuze katheter in de interne halsader voor intraveneuze toegang en centrale veneuze drukbewaking.
- Gebruik de proximale poort voor drukbewaking en distale poort voor vloeistof- en medicijntoediening.
- Dien 20 mg/kg cefazoline en 5 mg/kg enrofloxacine intraveneus toe. Herhaal de dosering van cefazoline elke 2-4 uur tijdens de procedure.
- Dien een bolus van 500 ml normale zoutoplossing toe om de voorspanning vóór de operatie te vergroten. Begin met een onderhoudssnelheid van intraveneuze vloeistof van 15 ml / kg / h.
4. Werkwijze
- Voer een spiersparende mini-thoracotomie uit (lengte < 8 cm) in de linker vierde intercostale ruimte om mediastinale blootstelling te verkrijgen. Kies mini-thoracotomie om postoperatief herstel te versnellen.
- Na het verdelen van de huid, splitst u de onderliggende spier (pectoralis major) in de lengterichting langs de vezels, die enigszins schuin naar de intercostale ruimte lopen. Plaats een zelfklevend retractor om de spierlaag te spreiden en de borstwand bloot te leggen.
- Verdeel de serratus anterieure en de onderliggende intercostale spier in de geselecteerde intercostale ruimte en zorg ervoor dat de cefalade onmiddellijk in de rib blijft.
- Betreed de pleurale ruimte en ga dan verder met het volledig loslaten van de intercostale spieren achteraan naar de wervelkolom en anteromedieel naar het borstbeen om onbedoelde ribfracturen of dislocatie aan het borstbeen te voorkomen. Vermijd letsel aan de borstvaten mediaal.
- Plaats de zelfklevende retractors om de ribruimte en het bovenliggende zachte weefsel te openen. Gebruik een klein of middelgroot Finochietto-oprolmechanisme om de ribben te scheiden en een Tuffier-oprolmechanisme (5 cm oprolblad) om loodrecht op de Finochietto in de intercostale ruimte te zitten, waardoor het zachte weefsel in de intercostale ruimte wordt ingetrokken om de blootstelling te verbeteren.
- Snijd het pericardium anterieur aan de phrenische zenuw zonder het te verwonden en creëer een pericardiale put met 2-0 zijdenaden om de belangrijkste PA en RV bloot te leggen. Identificeer het linker atriale aanhangsel binnen de blootstelling als een oriëntatiepunt voor het niveau van de PA-bifurcatie.
- Beoordeel de blootstelling en zorg ervoor dat de juiste intercostale ruimte is betreden. Idealiter zijn de proximale PA en het linker atriale aanhangsel direct onder de incisie goed zichtbaar, wat suggereert dat de optimale intercostale ruimte is geselecteerd om blootstelling aan zowel de hoofd-PA als de LPA te bieden.
- Als blootstelling onvoldoende wordt geacht om zowel de hoofd-PA als de LPA veilig te bereiken, aarzel dan niet om een extra intercostale ruimte te openen om alle noodzakelijke stappen van de operatie uit te voeren; dit zal echter niet nodig zijn met de juiste incisieselectie.
- Ontleed rond de hoofd-PA en isoleer deze met een navelstrengband. Zorg voor een adequate posterieure dissectie voor de uiteindelijke occluderplaatsing en PA-stroomsonde zo distaal mogelijk op de hoofd-PA.
- Plaats een steriele flowsonde in een kom met water of zoutoplossing op het steriele veld om de software voor gegevensverzameling te kalibreren. Geef de elektrische stekker aan de andere kant af aan een niet-steriele aangewezen persoon om de sonde op de meter aan te sluiten.
- Raadpleeg de aanvullende documenten voor details over het aansluiten en kalibreren van PA-flowsonde en -meter.
- Breng een royale hoeveelheid steriele ultrasone gel aan in de groef van de PA-stroomsonde.
- Plaats de siliconen voering in de groef van de PA flow probe en breng een extra laag ultrasone gel aan op de liner.
- Plaats de PA-stroomsonde op de PA en verkrijg PA-stroommetingen op de flowmeter en de interface voor gegevensverzameling.
- Plaatsing van de PA-stroomsonde kan gedeeltelijke occlusie van de PA veroorzaken die de linkerventrikelvoorspanning en de gemiddelde arteriële druk kan verminderen. Besteed zorgvuldig aandacht aan de hemodynamiek tijdens pa-stroomverwerving.
- Controleer het scherm van de flowmeter om er zeker van te zijn dat de PA-stroomsignaalsterkte 5 bar is. Als de meter minder dan 5 bar aangeeft, zorg dan voor voldoende contact tussen de stroomsonde en de hoofd-PA. Breng indien nodig extra ultrasone gel aan.
- Plaats een steriele flowsonde in een kom met water of zoutoplossing op het steriele veld om de software voor gegevensverzameling te kalibreren. Geef de elektrische stekker aan de andere kant af aan een niet-steriele aangewezen persoon om de sonde op de meter aan te sluiten.
- Voltooi intra-pericardiale dissectie van LPA en omring het met een navelstrengband.
- Gebruik een kleine sponsstok of een dun kneedbaar oprolmechanisme voor caudale terugtrekking van het linker atriumaanhangsel.
OPMERKING: Blootstelling aan de LPA wordt vergemakkelijkt door caudale terugtrekking van het linker atriale aanhangsel, cefalad terugtrekking van de belangrijkste PA en laterale terugtrekking van het pericardium net voor waar de LPA het pericard verlaat.
- Gebruik een kleine sponsstok of een dun kneedbaar oprolmechanisme voor caudale terugtrekking van het linker atriumaanhangsel.
- Plaats een heavy-duty siliconen vasculaire occluder rond de hoofd PA (figuur 2A, B, cirkel). Occluder grootte kan worden aangepast op basis van PA diameter; zorg ervoor dat de pasvorm goed zit. Gebruik een 0 zijden hechtdraad op een Keith naald om de uiteinden van de vasculaire occluder samen met een U-steek vast te zetten. Eenmaal bevestigd rond de hoofd-PA, schuift u de occluder distaal langs de hoofd-PA.
- Omcirkel de proximale hoofd-PA met een 1/2 " Penrose-drain om dissectie te vergemakkelijken en reserveer ruimte om een stroomsonde te plaatsen bij een volgende re-operatieve operatie. Knip de Penrose-afvoer om losjes rond de PA te passen en bevestig de Penrose aan zichzelf met een lopende 4-0 Prolene-hechting (figuur 2B).
- Stel een RV-drukleiding in voor de bewaking van rv-drukken (figuur 2B, witte pijl).
- Selecteer een locatie voor de RV-drukleiding in de rv-uitstroomkanaalvrije wand. Plaats een 5-0 monofilament, niet-absorbeerbare polypropyleen purse-string hechting met pledgets rond de geselecteerde locatie en plaats een vasculaire snare. Maak de pledgets van een steriele chirurgische handschoen.
- Bereid de RV-drukleiding voor: snijd het mannelijke uiteinde van de steriele 36'' drukbuis in een hoek van 30° af om het inbrengen door het myocard te vergemakkelijken. Gebruik een zijden stropdas van 2-0 om de druklijn op een optimale diepte te markeren voor plaatsing in de camper.
- Maak met behulp van een scalpel met 11 messen een kleine cardiotomie in de RVOT-vrije wand in de eerder geplaatste ringbandnaaddraad. Controleer het bloeden met handmatige druk of door de snare op de ringbandnaad aan te spannen.
OPMERKING: Verkrijg bij deze stap een basisbiopsie van de RV-vrije wand door RV-weefsel in de hechtdraad van de portemonnee te bemonsteren. Deze biopsieplaats kan dan dienen als toegangspunt voor de RV-drukleiding. - Plaats het gesneden uiteinde van de drukbuis in het RV-uitstroomkanaal (RVOT) en bevestig het. Bind de portemonnee-string vast en bevestig vervolgens de purse-string aan de drukbuis om de drukleiding vast te zetten.
- Breid de RVOT-slang uit door een extra drukbuis aan te sluiten op de RVOT-drukleiding.
- Draag de extra drukbuizen over aan een niet-steriele aangewezen persoon om de slang aan te sluiten op een drukomvormer en monitor voor de meting van de basis rv-druk. Stel de drukomvormer als volgt in.
- Sluit het mannelijke lueruiteinde van de IV-toedieningsset aan op het vrouwelijke lueruiteinde van de transducer.
- Sluit het vrouwelijke lueruiteinde van de drukbuis aan op het mannelijke lueruiteinde van de transducer.
- Spike de IV-toediening in een gehepariniseerde zoutoplossing zak (2 IE / ml).
- Plaats de zoutzak in een drukzak en pomp de drukzak tot 250-300 mmHg zoals aangegeven op de meter.
- Bereid de lijn volledig voor door de klep op de transducer los te laten, waardoor een goede ontluchting wordt gegarandeerd.
- Volg aanvullende methoden voor kalibratie van de transducer.
- Na zorgvuldig te hebben ontleed rond de LPA, omring je deze met een navelstrengband. Ligate de LPA door de navelstrengband vast te binden. Let op de hemodynamische reactie van het dier op ligatie indien relevant voor het onderzoek. Verhoog de minuutventilatie om de verhoogde ventilatie in dode ruimte te compenseren die wordt gecreëerd bij LPA-ligatie. Deze beademingsaanpassingen verminderen respiratoire acidose.
- Injecteer langzaam tot 3 ml zoutoplossing in de hoofd-PA-occluder om ervoor te zorgen dat er geen lekkage is tijdens het bewaken van de RVOT-druk van de RVOT-drukleiding. Zodra de RV-reactie is bevestigd, trekt u de ingeprent zoutoplossing in.
- Breng de RVOT-drukleiding en PA-occluderbuis uit de borst één intercostale ruimte onder de thoracotomie-incisie.
- Vorm twee subdermale pockets langs de fasciale laag op het linker dorsum van het schaap zo ver naar achteren naar de wervelkolom als haalbaar binnen het steriele veld. Deze dienen als de locaties voor inwoonhavens (figuur 2C).
- Tunnel met behulp van een borstbuistrekker de RVOT-drukleiding en occluderbuis van de borstincisie naar de linker dorsumpoortplaatsen.
- Bevestig zowel de occluderbuis als de RV-drukleiding aan de weerhaakaansluitingen van de poort. Veranker de occluder en drukbuizen rond de poortconnectoren met extra banden. Gebruik de meegeleverde prikkeldraadaansluiting om de verbinding te beschermen (figuur 1C). Plaats de poorten in de voorgevormde subdermale zakken.
- Veranker de poorten op drie locaties rond de rand aan de onderliggende fascia met 3-0 polypropyleen hechtingen om poortmigratie te voorkomen. Hersluit het onderhuidse weefsel, de dermis en de huid in lagen met polyglactine 910-hechtingen. Herbevestig de drukmetingen via percutane toegang tot de poorten. Spoel de RVOT-poort met 5 ml (1000 IE / ml, 5000 eenheden) heparinenatrium.
- Plaats een 16-Franse borstbuis in de linker pleuraholte via een aparte incisie, bevestig deze op de huid en sluit deze vervolgens aan op een gesloten borstbuisafvoereenheid met een druk van -20 cm·H2O. Plaats een ongebonden U-steek rond de buis om sluiting na verwijdering van de borstbuis te vergemakkelijken.
- Dien een intercostale zenuwblokkade (0,5-1 mg/kg bupivacaïne) toe voor postoperatieve analgesie.
- Sluit de thoracotomie met figuur-van-acht, #2 polyglactine 910 hechtingen. Sluit de borstspierlaag met running #0 polyglactine 910. Sluit het onderhuidse weefsel in lagen lopende #2-0 polyglactine 910 hechtingen en niet de huid.
- Verplaats het dier naar dorsale lighouding, verwijder de orogastrische buis en stop vervolgens met isofluraan.
- Ga door met mechanische beademing en ondersteunende zorg totdat de pH van het arteriële bloed > 7,35 en pCO2 < 55 mmHg.
- Extubeer zodra het dier spontaan ademt, zijn kop optilt en op de endotracheale buis kauwt. Verwijder de borstbuis voorafgaand aan volledig verdovingsherstel. Bind de U-steek om de incisie van de borstbuis te sluiten.
- Breng het dier over naar zijn kooi terwijl u het herstel van de anesthesie bewaakt. Zorg ervoor dat er te allen tijde extra zuurstof (3-5 L/min per mondkapje) beschikbaar is terwijl het schaap onbeweeglijk blijft. Controleer vitale functies elk uur gedurende de eerste 4 uur, elke 8 uur gedurende de volgende 24 uur en eenmaal daags daarna.
5. Postoperatief herstel
- Controleer de thoracotomie- en poortimplantatieplaatsen dagelijks op tekenen van infectie. Dien langwerkend antibioticum (ceftiofur, 5 mg/kg intramusculair) toe binnen 24 uur na de ingreep en daarna om de 3-4 dagen gedurende 1 week.
- Zet de fentanylpleister postoperatief voort gedurende een totaal van 72 uur. Geef daarna extra analgesie (bijv. Meloxicam, 1 mg / kg eenmaal daags intramusculair) als het dier tekenen van pijn blijft vertonen (d.w.z. tandenknarsen, verhoogde hartslag).
- Verwijder de uitwendige hechtingen en huidnieten 10-14 dagen na de operatie of zoals aanbevolen door veterinair personeel.
- Zorg voor bescherming van de havenlocatie tegen het feit dat het dier de havenplaatsen tegen omliggende structuren wrijft of schraapt met behulp van een buisvormig verband (figuur 2D).
6. Chronische PA banding (9 - 10 weken)
- Breng de schapen over naar een klein verblijf. Knip de overtollige wol rond de geïmplanteerde poorten af.
- Reinig de geschoren gebieden met 70% isopropylalcohol. Breng actuele lidocaïnespray aan voor lokale verdoving.
- Bereid twee drukomvormers voor voor het bewaken van rv- en occludermanchetdrukken (figuur 3A).
- Voor beide transducers: Sluit het vrouwelijke lueruiteinde van de drukbuis (36 inch of langer) aan op het mannelijke lueruiteinde van de transducer. Sluit het mannelijke lueruiteinde van de drukbuis aan op een van de vrouwelijke luerverbindingen op een driewegstopkraan. Sluit ten slotte een Huber-naald van 22 G aan op het mannelijke lueruiteinde van die driewegstopkraan.
- Voor RV-drukomvormer: Hang een heparinized zoutzak (2 IE / ml), prik de zak door met de IV-toedieningsset en sluit de mannelijke luerverbinding van de IV-toedieningsset aan op de vrouwelijke lueraansluiting van de RV-drukomvormer. Zet vervolgens de zoutzak (bijv. drukzak) onder druk.
- Voor de occluder transducer: Primeer de transducer en de drukbuis volledig. Plaats een mannelijke luerdop op het vrouwelijke lueruiteinde van de drukomvormer om te voorkomen dat de manchetvloeistof teruglekt naar de transducer.
- Sluit beide transducers aan op de hardware voor gegevensverzameling met behulp van een geschikte kabel of adapter.
- Kalibreer de transducers zoals gespecificeerd in aanvullend bestand 1.
- Klik op Start in de rechterbovenhoek van het softwarevenster om te beginnen met het opnemen van de software voor gegevensverzameling om RV- en PA-manchetdrukgolfvormen bij 400 Hz vast te leggen.
- Laat een assistent het dier enigszins in bedwang houden voordat u de haven betreedt. Plaats de Huber-naald van de RV-drukomvormer naar de RV-poort. Bevestig een spuit van 10 ml aan de driewegstopkraan en probeer bloed terug te trekken in de spuit vanuit de RV-poort (figuur 3B).
- Als het moeilijk is om de spuit terug te trekken, injecteer dan eerst 5-10 ml zoutoplossing in de RV-poort om de bron van occlusie los te maken.
- Als de verstopping aanhoudt, breng dan 2 mg weefselplasminogeenactivator (tPA) in de haven in als fibrinolytisch middel en laat het een nacht staan. Controleer de volgende dag om de tPA op te zuigen.
- Zodra de RV-drukleiding is ingesteld, sluit u de Huber-naald aan op de PA-manchetomvormer.
- Leg de beginwaarden van rv- en PA-manchetdrukken vast (figuur 3C). Let op eventuele drastische veranderingen ten opzichte van eerdere metingen.
- Als de PA-manchet en /of RV-druk aanzienlijk is gedaald ten opzichte van de vorige meting, kan dit een teken zijn dat de PA-manchet lekt.
- Observeer een ander duidelijk teken van PA-manchetlekkage door de PA-manchetgolfvorm te bestuderen. Als de gemiddelde PA-manchetdruk met een waarneembare snelheid daalt, is de kans groot dat de manchet lekt.
OPMERKING: Controleer opnieuw of alle lueraansluitingen op de drukomvormer, de slang en de stopkraan zijn aangedraaid. De vloeistofinhoud onder hoge druk van de PA-manchet kan terugstromen en lekken uit losse luerverbindingen.- Als de PA-manchet lekt, bepaal dan de mate van lekkage. Als de lekkagesnelheid traag is, kan een frequentere bandingstrategie de lekkage overwinnen om het ziektemodel nog steeds effectief te maken.
- Injecteer langzaam 3% hypertone zoutoplossing in de occluderpoort terwijl u let op rv- en manchetdrukken.
- Pas de hoeveelheid injectie aan op basis van de gewenste ernst van de PH-ziekte en het RV-fenotype. Een wekelijkse verhoging van de manchetdruk met 100-150 mmHg is een redelijk doel om een adaptief compenserend RV-fenotype te ontwikkelen.
- Snellere verhogingen van de manchetdruk (>250 mmHg per week) zullen waarschijnlijk een decompenserend RV-fenotype produceren.
- Zodra de PA-manchet tot de gewenste hoeveelheid is opgeblazen, verwijdert u de Huber-naald uit de manchetpoort.
- Verkrijg een bloedmonster van de RV-poort.
- Zuig 10 ml bloed op een steriele manier uit de RV-poort en zet apart.
- Plaats een nieuwe spuit in plaats van de aspiratiespuit en zuig zoveel bloed op als nodig is zonder de wekelijkse bloedafnamelimiet van 7,5% van het totale bloedvolume te overschrijden.
- Sluit de originele spuit opnieuw aan met aangezogen bloed en retourneer deze via de RV-poort.
- Trek aan de klephendel van de drukomvormer om heparinized zoutoplossing uit de zoutzak in de RV-poort te spoelen. Ga door met spoelen totdat de hele lijn helder en kleurloos wordt.
- Spoel de RV-poort door met 10 ml zoutoplossing. Spoel vervolgens de poort verder met 5 ml 1000 E / ml heparinenatrium.
- Herhaal de stappen 6.1-6.12 elke 1-4 dagen gedurende 9-10 weken.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Een representatieve groep van 12 schapen wordt gebruikt om de effectiviteit van dit model aan te tonen voor het ontwikkelen van verschillende gradaties van PH-RVF. Bij deze schapen steeg de gemiddelde PA-manchetdruk van 32 ± 20 mmHg in week 1 tot 1002 ± 429 mmHg in week 9. Dit resulteerde in een verhoging van de RV gemiddelde en systolische drukken van respectievelijk 28 ± 5 en 57 ± 7 mmHg in week 1 tot 44 ± 7 en 93 ± 18 mmHg in week 9. Bovendien werd het PA-manchetdrukprofiel gesuperponeerd op gemengde veneuze zuurstofverzadiging (SvO2) om de werkzaamheid van het model bij het fine-tunenaal van het ziektefenotype aan te tonen (figuur 4). Met name snellere PA-banding leidde tot een snellere afname van SvO2. Ter vergelijking: degenen die een meer geleidelijke PA-bandingstrategie ervoeren, behielden een fysiologisch bereik van SvO2 tussen 70% en 80%. Een representatief transthoracaal echocardiogram verkregen na 9 weken progressieve PA-banding toont RV-verwijding en septumbuiging als gevolg van drukoverbelasting (aanvullende video 1). In een eerder gepubliceerd casusrapport10 kan het model ook worden gebruikt om eindstadium RV-falen te induceren, wat leidt tot pleurale effusies en abdominale ascites.
Figuur 1: Overzicht en tijdlijn voor het totale experiment. (A) Experimentele tijdlijn voor het chronische pulmonale hypertensie (PH) rechterventrikelfalen (RVF) model en de voorgestelde data-acquisitiestrategie. (B) Het schematische diagram voor de eerste overlevingsoperatie om de basis te leggen voor het chronische pulmonale hypertensie (PH) rechterventrikelfalen (RVF) model. De belangrijkste longslagader (PA) occluder wordt geïmplanteerd, de linker longslagader (LPA) wordt geligeerd en een drukslang wordt geplaatst in het rechter ventriculaire uitstroomkanaal (RVOT). Ten slotte zijn zowel RVOT- als PA-manchetdrukleidingen aangesloten op hun respectieve poorten, die beide subcutaan worden geïmplanteerd voor terugkerende toegang en monitoring. (C) Foto van de PA-manchet, de onderhuidse poort en de kunststof fitting om hun prikkeldraadverbinding te beschermen. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 2: Foto's van de belangrijkste chirurgische stappen om het ovine pulmonale hypertensie (PH) model vast te stellen. (A) Isolatie van de belangrijkste longslagader (PA) en implantatie van de PA-manchet (cirkel). (B) Geïmplanteerde PA-manchet (cirkel), Penrose-buis (ster) en rechterventrikeluitstroomkanaal (RVOT) drukbuizen (witte driehoek). (C) Subcutane implantatie van poorten voor RVOT- en PA-manchetten. D) Buisvormige verbanden en schuimvullingen die rond het lichaam van het schaap zijn aangebracht om de geïmplanteerde poorten te beschermen. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 3: Experimentele benadering voor chronische longslagader (PA) banding. (A) Schema voor het instellen van drukomvormers voor het meten en aanpassen van de drukwaarden van de rechterventrikel (RV) en PA-manchet. (B) Foto van toegang tot RV-uitstroomkanaal (RVOT) en PA-manchetpoorten. (C) Representatieve druktracering van RV- en PA-manchetdrukken. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 4: Manchetdruk van de longslagader (PA) en bijbehorende gemengde veneuze zuurstofverzadiging (SvO2). Longitudinale trends tussen pulmonale arterie (PA) manchetdruk en overeenkomstige gemengde veneuze zuurstofverzadiging (SvO2) tonen differentiatie in rechterventrikelfenotype op basis van de PA-bandingstrategie. Het kleurprofiel varieert aanzienlijk tussen proefpersonen die een snellere PA-bandingstrategie hebben ervaren in vergelijking met proefpersonen die een meer geleidelijke bandingstrategie hebben ondergaan. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Aanvullende video 1: Representatieve transthoracale echocardiogrammen tussen gezonde uitgangstoestand en na het pulmonale hypertensie rechterventrikelfalen (PH-RVF) ziektemodel. Het PH-RVF-model vat de belangrijkste kenmerken van de ziekte samen, waaronder RV-verwijding en hypertrofie, en septumbuiging. Klik hier om deze video te downloaden.
Aanvullend bestand 1: Gegevensverzamelings- en kalibratiestappen. Klik hier om dit bestand te downloaden.
| Bron | Edele Levenswetenschappen, Woodbine, MD |
| Geslacht | Gecastreerd mannetje of vrouwtje |
| Zeven | Dorset kruis |
| Gewicht | 55-70kg bij ontvangst |
| Dieet | 3 lb pellets per dag. Timothy hooi gegeven in de meegeleverde voerzak, gevuld tot twee keer per dag |
| Lichtcyclus | Lichtcyclus 12/12 uur licht/donker periodes; Lichten aan om 6:00 uur, uit om 18:00 uur tenzij anders aangegeven |
| Staat van de behuizing | Schapen worden individueel of in paren gehuisvest. Behuizingen meten 6,3'w X 5,7'd (35,4 m²), tenzij anders aangegeven door de facility manager. Meerdere behuizingen kunnen worden aangesloten voor extra vloeroppervlak indien nodig. Rubberen matten worden aan alle schapen verstrekt na ontvangst door de dierenverzorger. Mat(en) wordt/worden wekelijks ontsmet. |
Aanvullende tabel 1: Relevante informatie over dieren voor dit platform.
| Cases/Evenementen | N (%) |
| Totaal | 28 (100) |
| Geen complicaties | 22 (78) |
| Infectie, vroegtijdige beëindiging | 1 (4) |
| Compromis van geïmplanteerde poort | 2 (7) |
| Compromis van geïmplanteerde longslagadermanchet | 2 (7) |
| Rv-decompensatie aan het einde van het model | 1 (4) |
Aanvullende tabel 2: Complicaties tijdens het pulmonale hypertensiemodel bij schapen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Het gepresenteerde PH-RVF-model kan op betrouwbare wijze verschillende niveaus van ernst van de ziekte induceren om overeen te komen met de doelen van het onderzoek. Twee verschillende benaderingen worden in combinatie gebruikt om dit ziektemodel te induceren. Ten eerste dient de LPA-ligatie om de pulmonale vasculaire weerstand te verhogen en de PA-capaciteit te verlagen11,12, waardoor het startpunt van het chronische model wordt vastgesteld bij een reeds verhoogde RV-nabelastingstoestand. Vervolgens dient de implantatie van de PA-manchet en de progressieve inflatie ervan om een gericht fenotype van PH-RVF te ontwikkelen. Het regelen van pa-manchetdruk en de snelheid van verandering kan differentieel compenserende of decompenserende campers creëren, aangetoond door onderhoud of afname van SvO2 (figuur 4). Door de manchetdruk met 250-300 mmHg per week te verhogen, zullen de schapen rond 5-6 weken vroege tekenen van decompensatie beginnen te vertonen. Het verhogen van de manchetdruk met 100-150 mmHg per week zorgt daarentegen voor een meer adaptief profiel gedurende de gehele duur van 9 weken.
Er bestaan weinig grote diermodellen van chronische PH en RVF in de literatuur. Longslagaderembolisatie bij schapen is het meest uitgebreid gemeld en besproken4,5. Deze aanpak heeft echter een hoog sterftecijfer, meer dan 86%4, afhankelijk van de doseringsfrequentie en de grootte van de kralen, maar het levert slechts een marginale verandering op in rv-hemodynamiek en functie. Aan de andere kant kan het gepresenteerde model een veel groter bereik van RV-drukoverbelasting veroorzaken met minimale procedureel gerelateerde sterfgevallen. Een dier dat stierf als gevolg van dit PH-RVF-model ontwikkelde enkele liters pleurale effusie en ascites10, correlerend met de klinische en onderzoeksresultaten van rechterhartfalen bij mensen13,14,15 en grote dieren16. Deze symptomen werden waargenomen zonder enig bewijs van linkerhartfalen. Dit model kan daarom dienen als een klinisch vertaalbaar platform voor grote dieren met de mogelijkheid om titreerbare pathofysiologie te produceren.
Er zijn verschillende opmerkelijke uitdagingen bij het uitvoeren van dit model. Ten eerste, terwijl het gebruik van een linker mini-thoracotomie een snel postoperatief herstel vergemakkelijkt, is gelijktijdige chirurgische blootstelling van zowel de hoofd-PA als de LPA technisch uitdagend via deze minimaal invasieve incisie. Het selecteren van de optimale intercostale ruimte is essentieel en echografie kan een nuttige gids zijn. De PA-bifurcatie is meer distale en posterieure in vergelijking met de menselijke anatomie, waardoor ligatie van de LPA de meest uitdagende stap van deze procedure is. Hoewel de ligatie dient als een kritieke stap om de pulmonale vasculaire weerstand te verhogen en de PA-capaciteit te verminderen, is het mogelijk dat de belangrijkste PA-banding alleen voldoende hoge RV-druk kan bereiken.
Infectie van inwonende havens en dehiscentie van havenwonden kan moeilijk aan te pakken zijn en leiden tot verwoestende complicaties. In dit pulmonale hypertensiemodel kunnen infecties de acute metabole belediging zijn die cardiopulmonale compromissen, ineenstorting en vroege mortaliteit veroorzaakt. Hoge normen voor steriele techniek, zorgvuldige huidsluiting en bescherming van de havenlocatie beperken de incidentie en impact van deze gebeurtenissen aanzienlijk.
Manchetbreuk is een specifiek probleem met het model dat kan leiden tot een verminderde RV-druk. Hoewel dit probleem ongebruikelijk is, is het eerder waargenomen. Er zijn een paar preventieve en corrigerende stappen voor dit probleem. Ten eerste moet ervoor worden gezorgd dat de manchet niet wordt doorboord terwijl deze met hechtdraad rond de PA wordt vastgezet. Het testen van de manchet voordat de borstkas wordt gesloten, zorgt ervoor dat deze aan het einde van de eerste operatie wordt uitgevoerd. Vervolgens moet de PA-manchetmaat worden gekozen op basis van de hoofd-PA-diametergrootte. Als de manchet lekt, is het belangrijk om de omvang van de lekkage te beoordelen. Als frequentere inflatie van de PA-band de lekkagesnelheid kan overwinnen, kan het model nog steeds matige PH-RVF bereiken, hoewel het mogelijk niet langer de gewenste ernst van PH-RVF induceert.
In onze ervaring heeft dit model een algemeen slagingspercentage van 78% (aanvullende tabel 2), maar de meeste complicaties waren in de eerdere helft van deze onderzoeken. Het meer recente cohort van 13 proefpersonen heeft een slagingspercentage van 100%, wat suggereert dat dit model reproduceerbaar en vrij van complicaties kan zijn met voldoende ervaring.
Ten slotte is een belangrijke wetenschappelijke beperking van het gepresenteerde diermodel dat het geen belangrijk kenmerk van pulmonale arteriële hypertensie overbrengt, namelijk pulmonale vasculaire remodellering. Daarom is dit model niet het ideale platform om therapieën te ontwikkelen en te testen die uitsluitend gericht zijn op de pulmonale vasculatuur. In plaats daarvan is het een effectief platform om RV-disfunctie en falen van abnormale RV-afterload te bestuderen. Patiëntresultaten in PH worden grotendeels bepaald door rv-functie en gunstige uitkomsten worden geassocieerd met het behoud van deze RV-functie17. Hoewel dit model niet alle aspecten van PH vastlegt, is het een waardevol model voor het begrijpen van de moleculaire routes die leiden tot RVF en het ontwikkelen van RV-gerichte therapieën om RVF te verbeteren.
Het LPA-ligatie- en belangrijkste incrementele PA-bandingmodel kan met succes de complexe pathofysiologie van RVF secundair aan PH samenvatten. Dit model biedt onderzoekers een experimenteel platform om nieuwe diagnostische biomarkers te ontwikkelen die onderscheid maken tussen adaptieve en onaangepaste reacties op PH op de RV, kritische responsroutes in RVF ophelderen en therapeutische innovaties mogelijk maken om RVF te behandelen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De auteurs hebben geen belangenconflicten te onthullen.
Acknowledgments
Dit werk werd gefinancierd door de National Institutes of Health R01HL140231. Wij danken de afdeling Dierverzorging voor hun veehouderij en veterinaire zorg. We bedanken het SR Light Laboratory en zijn medewerkers, Jamie Adcock, Susan Fultz, Codi VanRooyen en José Diaz, voor hun toegewijde technische ondersteuning bij grote dierenoperaties.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation Pour Bottle by Baxter Healthcare, 1000 mL | Medline | BHL2F7124 | Surgical Disposable |
| 0.25% Bupivacaine | Hospira Inc | 0409-1160-18 | Medication, Intra-Operative |
| 0.9% Normal Saline, 1000 mL | Baxter Healthcare Corp | 0338-0049-04 | Medication, Intra-Operative |
| 0.9% Normal Saline, 500 mL | Baxter Healthcare Corp., | 0338-0049-03 | Medication, Chronic PH |
| 16 mm Heavy Duty Occluder with actuating tubing | Access Technologies | OC-16HD | Surgical Disposable |
| 3-mL Skin Prep Applicator | Medline | MDF260400 | Surgical Disposable |
| 70% isopropyl alcohol prep pads | Medline | MDS090670 | Disposable, Chronic PH |
| Adhesive bandage tape | Patterson Veterinary | 07-835-7776 | Disposable, Chronic PH |
| Adson forceps | V. Mueller | NL1400 | Surgical Instrument |
| Allis tissue forceps | V. Mueller | CH1560 | Surgical Instrument |
| Aortic clamp, straight (bainbridge forceps) | V. Mueller | SU6001 | Surgical Instrument |
| Backhaus towel forceps | V. Mueller | SU2900 | Surgical Instrument |
| Bags, Infusion: Nonsterile Novaplus Infusion Bag, 500 mL | Medline | TCV4005H | Disposable, Chronic PH |
| Berry sternal needle holder | V. Mueller | CH2540 | Surgical Instrument |
| Blades, Electrode: Electrode Blade, 6.5", with 0.24 cm Shaft | Medline | VALE15516 | Surgical Disposable |
| Blades: Stainless-Steel Sterile Surgical Blade, Size #10 | Medline | B-D371210 | Surgical Disposable |
| Blades: Stainless-Steel Sterile Surgical Blade, Size #11 | Medline | B-D371211 | Surgical Disposable |
| Blades: Stainless-Steel Sterile Surgical Blade, Size #15 | Medline | B-D371215 | Surgical Disposable |
| BNC Male to BNC Male Cable | Digi-Key | 415-0198-036 | Equipment |
| Castroviejo needle holder | V. Mueller | CH8589 | Surgical Instrument |
| Cefazolin | Apotex Corp | 60505-6142-0 | Medication, Intra-Operative |
| Ceftiofur Crystalline Free Acid | Zoetis Inc | 54771-5223-1 | Medication, Post-Operative |
| Chest Drain, with Dry Suction, Adult-Pediatric | Medline | DEKA6000LFH | Surgical Disposable |
| Chest tube passer | V. Mueller | CH04189 | Surgical Instrument |
| COnfidence Flowprobes for Research (PAU-Series) | Transonic | 24PAU | Equipment, Perivascular Flow Probe |
| Cooley tangential occlusion clamp | V. Mueller | CH6572 | Surgical Instrument |
| Data Acquisition Hardware | ADInstruments | PowerLab 16/30 | Equipment |
| DeBakey Aorta clamp | V. Mueller | CH7247 | Surgical Instrument |
| DeBakey multi-purpose clamp | V. Mueller | CH7276 | Surgical Instrument |
| Debakey tissue forceps, 12’’ | V. Mueller | CH5906 | Surgical Instrument |
| Debakey vascular tissue forceps 7 3/4’’ | V. Mueller | CH5902 | Surgical Instrument |
| Debakey vascular tissue forceps, 9’’ | V. Mueller | CH5904 | Surgical Instrument |
| Electrosurgical Generator | Covidien | Force FX-C | Equipment |
| Endotracheal Tube, 10mm | Patterson Veterinary | 07-882-9008 | Surgical Disposable |
| Enrofloxacin | Norbrook Laboratories Limited | 55529-152-05 | Medication, Intra-Operative |
| Fentanyl Transdermal Patch | Apotex Corp | 60505-7007-2 | Medication, Pre-Operative |
| Ferris smith tissue forceps | V. Mueller | SU2510 | Surgical Instrument |
| Finochietto rib spreaders, large | V. Mueller | CH1220-1 | Surgical Instrument |
| Finochietto rib spreaders, medium | V. Mueller | CH1215-1 | Surgical Instrument |
| Flexsteel ribbon retractor, 1” x 13” | V. Mueller | SU3340 | Surgical Instrument |
| Flexsteel ribbon retractor, 2” x 13” | V. Mueller | SU3346 | Surgical Instrument |
| Foerster sponge forceps, curved | V. Mueller | GL660 | Surgical Instrument |
| Gauze Sponges: Sterile X-ray Compatible Gauze Sponges, 16-Ply, 4" x 4" | Medline | PRM21430LFH | Surgical Disposable |
| Gerald-DeBakey forceps | V. Mueller | CH04242 | Surgical Instrument |
| Glassman Allis | V. Mueller | SU6152 | Surgical Instrument |
| Halsted mosquito forceps | V. Mueller | SU2702 | Surgical Instrument |
| Harken clamp | V. Mueller | CH6462 | Surgical Instrument |
| Heat Therapy Pump | Gaymar/Stryker | TP-400 | Equipment |
| Heparin | Fresenius Kabi, | 63323-540-31 | Medication, Chronic PH |
| Hospira Primary IV Sets, 80" | Patterson Veterinary | 07-835-0123 | Surgical Disposable |
| Hypertonic saline 3% | Baxter Healthcare Corp., | 0338-0054-03 | Medication, Chronic PH |
| Hypodermic Needle with Bevel and Regular Wall, 20 G x 1" | Medline | B-D305175Z | Disposable, Chronic PH |
| Interface Cable, Edwards LifeScience Transducer to ADInstruments Bridge Amplifier | Fogg System | 0395-2434 | Equipment |
| Intravenous Infusion Pump | Heska | Vet/IV 2.2 Infusion Pump | Equipment |
| Isoflurane | Patterson Veterinary | 14043-704-06 | Medication, Pre-Operative |
| Kantrowitz thoracic clamp, 9-1/2” | V. Mueller | CH1722 | Surgical Instrument |
| Kelly hemostats | V. Mueller | 88-0314 | Surgical Instrument |
| Lidocaine HCl, 2.46% | PRN Pharmacal, | 49427-434-04 | Medication, Chronic PH |
| Ligaclip Multiple-Clip Appliers by Ethicon | Medline | ETHMCS20 | Surgical Disposable |
| Loop, Vessel, Mini, Red, 2/pk, Sterile | Medline | DYNJVL12 | Surgical Disposable |
| Lorna non-perforating towel forceps | V. Mueller | SU2937 | Surgical Instrument |
| Mayo dissecting scissors, curved | V. Mueller | SU1826 | Surgical Instrument |
| Mayo dissecting scissors, straight | V. Mueller | SU1821 | Surgical Instrument |
| Medipore Dress-It Pre-Cut Dressing Covers by 3M | Medline | MMM2955Z | Surgical Disposable |
| Meloxicam | Patterson Veterinary | 14043-909-10 | Medication, Post-Operative |
| Mixter thoracic forceps, 9” | V. Mueller | CH1730-003 | Surgical Instrument |
| Mosquito hemostats | V. Mueller | 88-0301 | Surgical Instrument |
| Multi-Channel Research Consoles | Transonic | T402/T403 | Equipment, Perivascular Flow Meter |
| Multi-Lumen Central Venous Catheterization Kits | Medline | ARW45703XP1AH | Surgical Disposable |
| Multi-Parameter Vital Signs Monitor | Smiths Medical | SurgiVet Advisor 3 | Equipment |
| Needles: Hypodermic Needle with Regular Bevel, Sterile, 18 G x 1.5" | Medline | B-D305185Z | Surgical Disposable |
| No. 3 knife handle | V. Mueller | SU1403-001 | Surgical Instrument |
| No. 7 knife handle | V. Mueller | SU1407 | Surgical Instrument |
| Non-Vented Male Luer Cap | Qosina | 13614 | Disposable, Chronic PH |
| Octal Bridge Amplifier | ADInstruments | FE228 | Equipment |
| Ophthalmic Ointment | Akorn Animal Health | 59399-162-35 | Medication, Pre-Operative |
| Penrose Tubing, 6 mm x 46 cm, 11 mm Flat | Medline | SWD514604H | Surgical Disposable |
| Perma-Hand Black Braided Silk: 2-0 SH Taperpoint Needle, Control Release, 30" | Medline | ETHD8552 | Surgical Disposable |
| Perma-Hand Suture, Black Braided, Size 0, 6 x 30” | Medline | ETHA306H | Surgical Disposable |
| Perma-Hand Suture, Black Braided, Size 4-0, 12 x 30" | Medline | ETHA303H | Surgical Disposable |
| Phenylephrine | West-Ward | 0641-6142-25 | Medication, Intra-Operative |
| Polyhesive Cordless Patient Return Electrodes, Adult | Medline | SWDE7509 | Surgical Disposable |
| Port-A-Cath Huber Needle, Straight, 22 G x 1-1/2" | Medline | AAKM21200724 | Disposable, Chronic PH |
| PROLENE Monofilament Suture, Blue, Size 4-0, 36", Double Arm, RB-1 Needle | Medline | ETHD7143 | Surgical Disposable |
| PROLENE Polypropylene Monofilament Suture, Blue, Double-Armed, RB-1 Needle, Size 5-0, 24" | Medline | ETH8555H | Surgical Disposable |
| Regional Block Needles, 22-gauge | Medline | B-D408348Z | Surgical Disposable |
| Schnidt tonsil artery forceps | V. Mueller | M01700 | Surgical Instrument |
| Skin staple extractor | Medline | CND3031 | Disposable, Chronic PH |
| Skin stapler 35 wide, with counter | Medline | STAPLER35W | Surgical Disposable |
| Sphygmomanometer | Patterson Veterinary | 07-815-0464 | Equipment |
| Sponge bowl | V. Mueller | GE-75 | Surgical Instrument |
| Sponge, Lap: X-Ray Detectable Sterile Lap Sponge, 18" x 18", 5/Pack | Medline | MDS241518HH | Surgical Disposable |
| Sponge, Peanut: X-Ray Detectable Sterile Peanut Sponge, Small, 3/8" | Medline | MDS72038 | Surgical Disposable |
| Sterile Disposable Deluxe OR Towel, Blue, 17'' x 27'', 2/Pack | Medline | MDT2168202 | Surgical Disposable |
| Sterile Luer-Lock Syringe, 3 mL | Medline | SYR103010Z | Disposable, Chronic PH |
| Sterile Luer-Lock Syringe, 5 mL | Medline | SYR105010Z | Disposable, Chronic PH |
| Sterile Surgical Equipment Probe Covers | Medline | DYNJE5930 | Surgical Disposable |
| Stopcock: 3-Way Stopcock with Handle in OFF Position, Rotating Adaptor Male Collar Fitting, 45 PSI | Medline | DYNJSC301 | Surgical Disposable |
| Stopcock: 3-Way Stopcock with Handle in OFF Position, Rotating Adaptor Male Collar Fitting, 45 PSI | Medline | DYNJSC301 | Disposable, Chronic PH |
| Subcutaneous Port with 5-French Connector and Blue Boot | Access Technologies | CP2AC-5NC | Surgical Disposable |
| Super cut metzenbaum dissecting scissors | V. Mueller | CH2032-S | Surgical Instrument |
| Super cut nelson-metzenbaum dissecting scissors | V. Mueller | CH2025-S | Surgical Instrument |
| Syringes: Sterile Luer-Lock Syringe, 10 mL | Medline | SYR110010Z | Surgical Disposable |
| Thoracic Catheter, Straight, 28 Fr x 20" | Medline | SWD570549H | Surgical Disposable |
| Three-quarter surgical drape | Medline | DYNJP2414H | Surgical Disposable |
| Tiletamine + Zolazepam | Zoetis Inc | 54771-9050-1 | Medication, Pre-Operative |
| TourniKwik Tourniquet Set with Four 7.5" Bronze-Colored Tubes and 1 Snare, 12 French | Medline | CVR79013 | Surgical Disposable |
| Transducer clip | Edwards LifeScience | TCLIP05 | Equipment |
| Trigger Aneroid Gauge (Sphygmomanometer) | Patterson Veterinary | 07-815-0464 | Equipment |
| TruWave Disposable Pressure Transducer Kits by Edwards Lifesciences | Medline | VSYPX260 | Surgical Disposable and Chronic PH |
| TS420 Perivascular Flow Module | Transonic | TS420 | Equipment, Perivascular Flow Meter |
| Tubing, Suction: Sterile Universal Suction Tubing with Straight Ribbed Connectors, 1/4" x 12' | Medline | OR612 | Surgical Disposable |
| Tubing: Pressure Monitoring Tubing with Fixed Male Luer Lock and Female Fitting, Low Pressure, 72" L | Medline | DYNJPMTBG72MF | Surgical Disposable |
| Tubing: Pressure Monitoring Tubing with Fixed Male Luer Lock and Female Fitting, Low Pressure, 72" L | Medline | DYNJPMTBG72MF | Disposable, Chronic PH |
| Tubular Elastic Dressing Retainer | Medline | DERGL711 | Disposable, Chronic PH |
| Tuffier rib retractor | V. Mueller | CD1101 | Surgical Instrument |
| Tygon E-3603 Flexible Tubings | Fisher Scientific | 14-171-227 | Surgical Disposable |
| U.S.A retractor | V. Mueller | SU3660 | Surgical Instrument |
| Umbilical Tape, Cotton, 3-Strand, 1/8 x 36" | Medline | ETHU12TH | Surgical Disposable |
| Valleylab Button Switch Pencil | Medline | VALE2516H | Surgical Disposable |
| Vanderbilt deep vessel forceps | V. Mueller | CH1687 | Surgical Instrument |
| Veterinary Anesthesia Machine | Midmark | Matrx VMC | Equipment |
| Veterinary Anesthesia Ventilator | Hallowell EMC | Model 2000 | Equipment |
| Vicryl: Undyed Coated Vicryl 0 CT-1 36" Suture | Medline | ETHVCP946H | Surgical Disposable |
| Vicryl: Undyed Coated Vicryl 2 TP-1 Taper 54" Suture | Medline | ETHVCP880T | Surgical Disposable |
| Vicryl: Undyed Coated Vicryl 2-0 CT-1 18" Suture | Medline | ETHVCP739D | Surgical Disposable |
| Vital crile-wood needle holder, 10-3/8” | V. Mueller | CH2427 | Surgical Instrument |
| Vital mayo-hegar needle holder, 7-1/4” | V. Mueller | CH2417 | Surgical Instrument |
| Vital metzenbaum dissecting scissors, 14’’ | V. Mueller | CH2009 | Surgical Instrument |
| Vital metzenbaum dissecting scissors, 9” | V. Mueller | CH2006 | Surgical Instrument |
| Vital ryder needle holder, 9” | V. Mueller | CH2510 | Surgical Instrument |
| Yankauer, Bulb Tip: Sterile Rigid Yankauer with Bulb Tip, No Vent | Medline | DYND50130 | Surgical Disposable |
References
- Campo, A., et al. Outcomes of hospitalization for right heart failure in pulmonary arterial hypertension. European Respiratory Journal. 38 (2), 359-367 (2011).
- Tonelli, A. R., et al. Causes and circumstances of death in pulmonary arterial hypertension. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 188 (3), 365-369 (2013).
- Urashima, T., et al. Molecular and physiological characterization of RV remodeling in a murine model of pulmonary stenosis. American Journal of Physiology- Heart and Circulatory Physiology. 295 (3), (2008).
- Sato, H., et al. Large animal model of chronic pulmonary hypertension. ASAIO Journal. 54 (4), 396-400 (2008).
- Pohlmann, J. R., et al. A low mortality model of chronic pulmonary hypertension in sheep. Journal of Surgical Research. 175 (1), 44-48 (2012).
- Noly, P. -E., Guihaire, J., Coblence, M., Dorfmuller, P., Fadel, E., Mercier, O. Chronic thromboembolic pulmonary hypertension and assessment of right ventricular function in the piglet. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (105), e53133 (2015).
- Pereda, D., et al. Swine model of chronic postcapillary pulmonary hypertension with right ventricular remodeling: Long-term characterization by cardiac catheterization, magnetic resonance, and pathology. Journal of Cardiovascular Translational Research. 7 (5), 494-506 (2014).
- Silva, K. A. S., Emter, C. A. Large animal models of heart failure: A translational bridge to clinical success. JACC: Basic to Translational Science. 5 (8), 840-856 (2020).
- Ukita, R., et al. Left pulmonary artery ligation and chronic pulmonary artery banding model for inducing right ventricular - pulmonary hypertension in sheep. ASAIO Journal (American Society for Artificial Internal Organs: 1992. 67 (1), 44-48 (2020).
- Ukita, R., et al. Progression toward decompensated right ventricular failure in the ovine pulmonary hypertension model. ASAIO Journal (American Society for Artificial Internal Organs: 1992. , (2021).
- Mercier, O., et al. Piglet model of chronic pulmonary hypertension. Pulmonary Circulation. 3 (4), 908-915 (2013).
- Guihaire, J., et al. Right ventricular plasticity in a porcine model of chronic pressure overload. Journal of Heart and Lung Transplantation. 33 (2), 194-202 (2014).
- Tang, K. J., Robbins, I. M., Light, R. W. Incidence of pleural effusions in idiopathic and familial pulmonary arterial hypertension patients. Chest. 136 (3), 688-693 (2009).
- Luo, Y. F., et al. Frequency of pleural effusions in patients with pulmonary arterial hypertension associated with connective tissue diseases. Chest. 140 (1), 42-47 (2011).
- Brixey, A. G., Light, R. W. Pleural effusions occurring with right heart failure. Current Opinion in Pulmonary Medicine. 17 (4), 226-231 (2011).
- Holt, T. N. Bovine High-mountain Disease. Merck and the Merck Veterinary Manual. , Available from: https://www.merckvetmanual.com/circulatory-system/bovine-high-mountain-disease/bovine-high-mountain-disease (2019).
- Van De Veerdonk, M. C., et al. Progressive right ventricular dysfunction in patients with pulmonary arterial hypertension responding to therapy. Journal of the American College of Cardiology. 58 (24), 2511-2519 (2011).
