Summary
Este protocolo describe un modelo animal compuesto con exposición a partículas (PM) que agrava la isquemia miocárdica con aterosclerosis.
Abstract
Los problemas de salud causados por la contaminación del aire (especialmente la contaminación por partículas) están recibiendo cada vez más atención, especialmente entre los pacientes con enfermedades cardiovasculares, lo que agrava los trastornos complicados y causa un mal pronóstico. El modelo de exposición a isquemia miocárdica simple (IM) o partículas (PM) no es adecuado para tales estudios de enfermedades con múltiples causas. Aquí, se ha descrito un método para construir un modelo compuesto que combina la exposición a PM, la aterosclerosis y la isquemia miocárdica. Los ratones ApoE-/− fueron alimentados con una dieta alta en grasas durante 16 semanas para desarrollar aterosclerosis, se realizó la instilación traqueal de la suspensión estándar de PM para simular la exposición pulmonar de PM, y la arteria coronaria descendente anterior izquierda se ligó una semana después de la última exposición. La instilación traqueal de PM puede simular la exposición pulmonar aguda al tiempo que reduce significativamente el costo del experimento; La clásica ligadura de la arteria descendente anterior izquierda con intubación traqueal no invasiva y un nuevo dispositivo de expansión auxiliar pueden garantizar la tasa de supervivencia del animal y reducir la dificultad de la operación. Este modelo animal puede simular razonablemente los cambios patológicos del paciente de infarto de miocardio agravados por la contaminación del aire y proporcionar una referencia para la construcción de modelos animales relacionados con estudios que involucran enfermedades con múltiples causas.
Introduction
La contaminación del aire se ha asociado con una alta mortalidad por todas las causas y contribuyó con una carga significativa de enfermedad más que la suma de la contaminación del agua, la contaminación del suelo y la exposición ocupacional1. Un informe de la OMS reveló que la contaminación del aire exterior causó 4,2 millones de muertes prematuras tanto en ciudades como en zonas rurales de todo el mundo en 20162. El 91% de las personas en todo el mundo viven en lugares donde la calidad del aire excede los límites de las directrices de la OMS2. Además, la materia particulada fina (PM) (≤2,5 μm de diámetro, PM2,5) es reconocida como la amenaza más importante de contaminación del aire para la salud pública mundial3, especialmente para las personas que viven en ciudades de países de ingresos bajos y medios.
Los efectos adversos de la contaminación del aire en las enfermedades cardiovasculares merecen más atención. Estudios previos han demostrado que la PM conduce a un mayor riesgo de enfermedad cardiovascular (ECV)4. La exposición a altas concentraciones de partículas ultrafinas durante varias horas puede conducir a un aumento de la mortalidad por infarto de miocardio. Para las personas con antecedentes de infarto de miocardio, la exposición a partículas ultrafinas puede aumentar significativamente el riesgo de recurrencia5. Además, generalmente se acepta que la exposición a PM acelera la progresión de la aterosclerosis6.
Para la investigación médica, es crucial seleccionar un modelo animal adecuado. Ya existen modelos animales de aterosclerosis simple7, modelos animales de isquemia miocárdica8 y modelos animales de exposición a PM9. El ratón ApoE−/− (apolipoproteína E noqueada) es un modelo de ratón tradicional utilizado en estudios de aterosclerosis. La capacidad de eliminar las lipoproteínas plasmáticas en ratones ApoE−/− se ve gravemente afectada. La alimentación con dieta alta en grasas causaría aterosclerosis severa, asemejándose a la dependencia dietética de la cardiopatía aterosclerótica observada en humanos7. La ligadura de la arteria coronaria descendente anterior izquierda (LAD) es un método clásico para inducir el evento isquémico 8,10. La infusión traqueal ha sido utilizada en muchas investigaciones y se destaca de los modelos de exposición11,12 debido a su mejor simulación y menor costo.
Sin embargo, los modelos animales de una sola enfermedad tienen limitaciones significativas en la investigación científica. La isquemia miocárdica inducida simplemente por la ligadura de LAD no se simula en la situación real. En el estado natural, la isquemia miocárdica suele ser causada por la ruptura de la placa y el bloqueo de las arterias coronarias13. Los pacientes con miocardiopatía isquémica suelen presentar lesiones básicas ateroscleróticas13. También hay metabolismo anormal de los lípidos y reacciones inflamatorias en el cuerpo14. Por lo tanto, la isquemia causada por factores físicos o en condiciones naturales tiene diferentes manifestaciones patológicas. Estudios existentes han demostrado que el infarto y la inflamación en modelos de isquemia miocárdica con aterosclerosis son más graves15,16. La exposición a PM puede agravar aún más la aterosclerosis y la isquemia miocárdica al inducir inflamación y estrés oxidativo1. Tres factores generalmente coexisten en el estado natural, por lo que la situación real podría simularse mejor mediante el uso de un modelo compuesto.
Este protocolo describe el desarrollo de un modelo animal de isquemia miocárdica (IM) que combina aterosclerosis (EA) y exposición aguda a PM. Los ratones ApoE−/− fueron alimentados con una dieta alta en grasas para inducir aterosclerosis. La exposición pulmonar de PM fue imitada por goteo de suspensión de PM a través de la tráquea. La ligadura de la LAD en ratones se utilizó para inducir isquemia miocárdica. Estos métodos se combinaron y optimizaron para simular mejor el estado de la enfermedad y mejorar la tasa de supervivencia de los animales. No se necesita una gran unidad de exposición o una máquina de anestesia de gas, lo que hace que el experimento sea fácil de realizar. Este modelo se puede utilizar para estudiar el impacto de la exposición a PM en la contaminación del aire en la aterosclerosis y la miocardiopatía isquémica y realizar investigaciones sobre nuevos medicamentos desarrollados para tratar enfermedades con factores tan complejos.
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Protocol
Todas las actividades con animales descritas aquí fueron aprobadas por el Comité de Ética Animal del Instituto de Materia Médica China, Academia China de Ciencias Médicas Chinas. Para el estudio se utilizaron ratones machos ApoE−/− (fondo C57BL/6) de 6-8 semanas de edad.
1. Preparación experimental
- Prepare anestésicos de tribromoetanol (15 mg/ml): disuelva 0,75 g de tribromoetanol en 1 ml de alcohol terc-amílico (ver Tabla de materiales). Después de la disolución completa, dilúyalo a 50 ml con solución salina estéril. Conservar la solución a 4 °C en un recipiente estéril y evitar la exposición a la luz.
NOTA: En este protocolo, se utilizó tribromoetanol debido al tiempo óptimo de recuperación de la anestesia y la tasa de supervivencia de los animales. Siga las recomendaciones del comité local de ética animal al seleccionar el régimen de anestesia. - Preparar la suspensión PM: medir 5 mg de DPM (material particulado diesel, ver Tabla de materiales) en tubos de centrífuga de 10 ml. Agregue 5 ml de solución salina normal y voltee el tubo boca abajo para mezclar bien. Use una película de parafina para sellar el tubo y luego colóquelo en un limpiador ultrasónico durante 2-3 h (40KHz, 80w) para la rotura ultrasónica.
NOTA: La suspensión debe ser homogénea y libre de partículas aglomeradas. Agitar bien antes de usar.
2. Inducción de aterosclerosis en ratones
- Alimente a los ratones con una dieta alta en grasas (yema de huevo en polvo 10%, manteca de cerdo 10%, esterol 1%, alimento de mantenimiento 79%, consulte la Tabla de materiales) durante 12 semanas.
- Para estimar el progreso de la aterosclerosis, seleccione 2-3 ratones al azar y verifique si hay una placa en el arco aórtico mediante imágenes de ultrasonido u observación anatómica directa17.
NOTA: Para la observación anatómica, los animales fueron seleccionados mediante muestreo aleatorio y sacrificados después de la anestesia. Luego, se abrió su cavidad torácica y se visualizaron directamente los vasos sanguíneos. La observación anatómica suele ser más confiable porque las imágenes de ultrasonido pueden no detectar todas las placas. - Una vez que la aterosclerosis se ha juzgado formada, prepare a los ratones para el siguiente paso.
3. Intubación orotraqueal y exposición aguda a partículas
NOTA: PM estará expuesto una vez a la semana durante 4 semanas después de 12 semanas de alimentación alta en grasas y continuamente se le dará una dieta alta en grasas.
- Prepare una tabla de disección (consulte la Tabla de materiales) con una banda elástica que se asegure a 1,5 cm del borde superior. Fije la placa de disección en un ángulo de 60° desde el plano de la mesa.
- Anestesiar al ratón con anestésico de tribromoetanol por inyección intraperitoneal (0,1 mL por cada 10 g de peso corporal). Después de 2-3 minutos, voltee el mouse para verificar si hay un reflejo de enderezamiento. Realice un pellizco en el dedo del pie para confirmar la sedación. Deje caer lubricante estéril en los ojos.
- Desinfecte la tabla de disección con toallitas con alcohol.
- Coloque el ratón anestesiado en posición supina sobre la tabla y enganche los incisivos superiores a la banda elástica.
- Utilice un pequeño foco LED (consulte la Tabla de materiales) con un tubo flexible. Enfoca la luz en la tráquea, que se encuentra alrededor del punto medio de la línea axilar.
- Coloque un pequeño hisopo de algodón estéril en la boca del ratón, luego enrolle el hisopo para sacar la lengua.
- Sostenga la lengua y tire suavemente hacia arriba para formar la cavidad oral, la faringe y la tráquea en la misma dirección longitudinal. La glotis, que es la entrada de la tráquea, se mostrará como un punto brillante, que se abre y se cierra con cada respiración.
- Siga sosteniendo la lengua suavemente. Inserte la cánula (22 G) en la tráquea del ratón apuntando a la glotis, sacando el núcleo de la aguja después de insertar la cánula en la tráquea.
- Use una pistola de pipeta con una pequeña cantidad de solución salina normal para probar si el tubo está correctamente en la comadreja. Si el tubo está en la posición correcta, la columna de líquido en la pistola de pipeta rebotará con cada respiración.
- Coloque 50 μL de suspensión DPM (preparada en el paso 1.2) en el tubo con una pipeta. La suspensión se inhalará naturalmente en los pulmones del ratón mientras respira.
NOTA: Para garantizar una respiración suave, es mejor darle al ratón dos veces la suspensión DPM (25 μL por una vez), separada por 10 s. - Retire la aguja permanente de la mascota después de la exposición a PM. Espere a que el ratón permanezca en las almohadillas térmicas hasta que recupere la conciencia (10-20 min) y luego vuelva a colocarlo en la jaula de la casa.
4. Ligadura de arterias coronarias
NOTA: La operación de modelado de isquemia miocárdica (ligadura de la arteria coronaria) se realiza enla semana 16.
- Preparar instrumentos quirúrgicos. Después del autoclave, guarde todas las herramientas quirúrgicas en una caja de instrumentos sellada. Remojarlos en alcohol al 75% durante 20-30 minutos antes de la cirugía.
- Construir la plataforma de cirugía. Para lograr la pendiente adecuada de la plataforma, utilice una cubierta de placa de cultivo celular (150 mm x 25 mm). Doble la seda 0-0 (10-15 cm de longitud) por la mitad y fije los extremos del hilo a la parte superior de la plataforma inclinada con cinta adhesiva para crear un lazo de suspensión.
- Anestesiar a los ratones siguiendo el procedimiento descrito en el paso 3.2.
NOTA: Se debe asegurar un intervalo de 1 semana entre cada administración de tribromoetanol. - Desinfecte la plataforma con toallitas con alcohol.
- Colocar el ratón en posición supina sobre la plataforma de intubación y enganchar los incisivos superiores en el asa de suspensión descrita en el paso 4.2. Pegue con cinta adhesiva la cola, las extremidades y los bigotes.
- Retire el vello del pecho izquierdo y parte del pecho derecho adyacente con crema depilatoria antes de la cirugía.
- Realizar la intubación orotraqueal en ratones siguiendo el procedimiento descrito en los pasos 3.4-3.8.
- Vincule la aguja que habita en la mascota con un ventilador para animales (consulte la Tabla de materiales). Configuración del ventilador: frecuencia respiratoria- 120 veces / min; relación inhalación/respiración: 1:1.1; volumen corriente - 1.7 mL.
- Limpie la piel con yodóforo y alcohol para desinfectar.
- Exponer el corazón. Haga un corte de piel de 0,5-1 cm con tijeras oftálmicas y sujete los músculos (músculo pectoral superficial y músculo serrato anterior) para exponer las costillas. Sujete la costilla con una pinza oftálmica (con ganchos) y luego haga un pequeño corte en el tercer espacio intercostal (consulte la Tabla de materiales). Haga una ventana operativa con herramientas caseras de apertura de pecho.
NOTA: El corte de piel se encuentra en aproximadamente un tercio del proceso xifoide y la línea de la axila. - Rasgar las membranas pericárdicas. Entonces es posible ligar LAD siguiendo los pasos 4.11-4.14.
NOTA: Si los lóbulos pulmonares están bloqueando la vista, empújelo detrás del corazón con un pequeño hisopo de algodón estéril. - Al principio, localice el LAD.
- Sostenga la sutura de seda estéril 6-0 con una aguja usando pinzas hemostáticas microvasculares (consulte la Tabla de materiales). Pasar la seda a través de un ancho de miocardio de 2 mm en el área donde se encuentra la arteria coronaria.
NOTA: No intente ligar el LAD solamente, que puede causar una hemorragia intraoperatoria importante. - Coloque un trozo corto de seda 5-0 estéril entre la ligadura y los tejidos del miocardio para evitar la rotura del tejido.
- Ate el LAD y el pequeño haz del miocardio alrededor de él con fuerza. La ligadura se considera exitosa cuando la pared anterior del ventrículo izquierdo (VI) se vuelve pálida; La elevación del segmento ST se puede observar simultáneamente si se conecta una máquina de electrocardiograma.
- Exprima suavemente el aire del pecho. Suturar los músculos intercostales y la piel secuencialmente con seda estéril 5-0.
NOTA: Para exprimir el aire del tórax, cierre el tórax en el momento de la expansión pulmonar y use los dedos índice y medio para apretar suavemente la caja torácica en el medio y permitir que el aire escape más allá de la última puntada. Las jeringas también se pueden usar para extraer gas torácico.
NOTA: Se recomienda una sutura interrumpida simple, ya que los ratones pueden roer la seda cuando están despiertos.
5. Recuperación
- Limpie toda la mancha de sangre después de la cirugía, o el ratón sería atacado por otros.
- Coloque el ratón sobre una almohadilla térmica en posición reclinada lateral. Controle continuamente los signos del ratón durante 5-20 minutos hasta que se recuperen de la anestesia. El tiempo de monitoreo depende del estado del cuerpo.
NOTA: Los ratones respiran mejor en la posición lateral reclinada. - Una vez recuperado el reflejo de enderezamiento, transfiera los ratones a jaulas de recuperación limpias en una almohadilla térmica con comida y botella de agua. Continúe monitoreando durante 15-30 minutos para garantizar la supervivencia del ratón. Mantenga el ratón alejado de los demás antes de que pueda moverse de forma totalmente autónoma.
- Para prevenir la infección de la herida, inyecte penicilina sódica por vía intramuscular de acuerdo con la dosis deseada (1,00,000-1,50,000 U/kg). Para obtener más detalles, consulte la etiqueta del medicamento para la conversión de la dosis.
- Vuelva a colocar el ratón en la jaula de la casa. Mantenga el monitoreo durante las próximas 24 h antes de la recolección de muestras. Administrar analgésicos para experimentos a largo plazo.
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Representative Results
Los ratones fueron sacrificados 24 h después de la ligadura de la arteria coronaria, y la sangre se recogió después de la anestesia. Los ratones fueron anestesiados por tribromoetanol (según el paso 3.2), y la muestra de sangre se recogió del seno retroorbitario. Se extrajo el corazón y se examinó el grado de isquemia mediante tinción de cloruro de 2,3,5-trifeniltetrazolio (TTC) (Figura 1). Los tejidos normales se vuelven rojos cuando el TTC reacciona con la succinato deshidrogenasa, mientras que los tejidos isquémicos permanecen pálidos debido a la disminución de la actividad de la deshidrogenasa18. El corazón del grupo MI+PM tiene un área de infarto más grande que el del grupo MI.
La Figura 2 muestra placas en la aorta por tinción de O rojo aceite17,19. El aceite rojo O puede colorear con precisión las grasas neutras como los triglicéridos en los tejidos17. Las manchas rojas en la imagen indican placas. La aorta del grupo AS+PM tenía más placas que la del grupo AS. La Figura 3 muestra las herramientas caseras de apertura de pecho mencionadas y su uso.
Figura 1: Ensayo de tinción TTC en tejido cardíaco de ratón. El área del infarto muestra blanco. La exposición a PM agravó la isquemia miocárdica. Simulado: No sufrió cirugía de IM o exposición a PM; MI: Sufrió cirugía de IM pero no exposición a PM; MI + PM: Sufrió cirugía de IM y exposición a PM. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 2: Ejemplos representativos de tinción O de rojo aceite de aortas de ratones ApoE−/− . La placa en la aorta estaba teñida de rojo. La alimentación alta en grasas condujo a la aterosclerosis en ratones ApoE-/-, y la exposición a PM agravó la aterosclerosis. Sham: ratones de tipo salvaje con dieta normal; AS: ApoE-/- ratones con dieta alta en grasas; AS+PM: Ratones ApoE-/- con una dieta alta en grasas, sufrieron exposición a PM. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 3: Herramientas caseras de apertura de pecho. Coloque las herramientas de apertura del pecho para abrir una ventana de operación cuando esté en uso. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
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Discussion
El establecimiento de un modelo animal compuesto es ligeramente diferente del modelo IM único. Mantener una alta tasa de supervivencia es un desafío en el desarrollo del modelo compuesto. La gravedad de la aterosclerosis en ratones ApoE−/− se volverá más severa con la extensión del tiempo de alimentación alto en grasas7, y la debilidad de los ratones conduce a una mayor mortalidad. Por lo tanto, es necesario monitorear la condición de los ratones durante el experimento continuamente y ajustar el tiempo para inducir aterosclerosis de acuerdo con las necesidades del experimento.
La exposición a PM puede ejercer poco efecto sobre la tasa de supervivencia de los ratones. Pero la repetición de la intubación traqueal causará sangrado intraoral y edema en ratones20, lo que aumentará la dificultad de los experimentos posteriores. Por lo tanto, es necesario practicar el proceso de intubación diligentemente. Trate de encontrar la posición correcta en el menor número de intentos posible. Dado que se necesita un largo período en este experimento, es necesario acortar los largos incisivos del ratón. La poda de los incisivos largos del ratón debe evitarse durante las operaciones, incluida la intubación endotraqueal; De lo contrario, los incisivos afilados pueden rascar la lengua del ratón y causar sangrado.
La cirugía de ligadura de LAD afecta la tasa de supervivencia de los ratones. La ligadura intratorácica clásica y conservadora de la arteria coronaria LAD se ha elegido con prudencia en lugar del "Modelo Eficiente"10 (un método que exprime el corazón del tórax) para obtener una mejor supervivencia a largo plazo después de la cirugía con menos costos de entrenamiento.
Los elementos esenciales más críticos en la operación son anestesiar, mantener la respiración del ratón y prevenir el sangrado. En comparación con el pentobarbital, el tribromoetanol puede mejorar significativamente la tasa de supervivencia de los ratones. El ratón estará inconsciente 2-5 minutos después de la anestesia, y esta situación generalmente dura hasta el final de la operación. Si el ratón se despierta, se administra una inyección adicional de 0,05 ml de anestésico.
Después de abrir la cavidad torácica, el ventilador debe estar conectado por completo. Si la intubación traqueal se cae en el medio, la cavidad torácica debe sellarse inmediatamente con pinzas hemostáticas, y el experimento puede continuarse después de volver a conectar el ventilador. Se debe evitar el sangrado durante la cirugía. El proceso de sangrado tiende a ocurrir en el tórax abierto, el pericardio extirpado y la LAD ligada. Si se produce sangrado, retire la sangre con hisopos de algodón. El escape debe apretarse completamente al cerrar la cavidad torácica, o usar el tubo torácico8 cuando el tórax está cerrado.
El método de exposición a PM en ratones incluye principalmente la torre de exposición21, la inyección de venas de la cola 22 y el goteo traqueal23. Las torres de exposición tienen enormes costos (debido al costoso equipo y al enorme consumo de PM), mientras que la inyección de la vena de la cola es bastante diferente del patrón natural de exposición a PM. El goteo traqueal es una forma de compromiso. En comparación con la respiración bajo exposición a PM, el goteo traqueal es un proceso de exposición pasiva. La distribución de PM en la tráquea y los pulmones puede ser diferente del estado natural. Pero como método clásico, el goteo traqueal es cuantitativamente preciso y fácil de implementar9. Aunque la instilación nasal es menos dañina, tras la instilación nasal, parte de la suspensión puede ingresar a los pulmones, parte puede ingresar al sistema digestivo y parte permanecerá en la cavidad nasal. Dado que la suspensión de PM no entrará en los pulmones, una instilación nasal no puede simular la exposición a la contaminación del aire. Por el contrario, inyectar la materia particulada en la tráquea asegura que todas las partículas entren directamente en los pulmones. Además, la cavidad nasal es más pequeña y requiere una mayor concentración de la suspensión para alcanzar la dosis deseada, lo que dificulta el control de la dosis media administrada.
El protocolo actual adolece de ciertas limitaciones. Las materias primas de la suspensión PM utilizadas en la instilación traqueal son una materia particulada estándar de los motores diesel. Contiene principalmente hidrocarburos aromáticos policíclicos, que es uno de los principales componentes de PM. Los componentes químicos de PM de la atmósfera incluyen nitratos, sulfatos, carbono elemental, orgánico, compuestos orgánicos (por ejemplo, hidrocarburos aromáticos policíclicos), compuestos biológicos (por ejemplo, endotoxina, fragmentos celulares) y metales (por ejemplo, hierro, cobre, níquel, zinc y vanadio)24. El estándar de materia particulada puede diferir de la materia particulada en el aire, lo que tampoco es una opción perfecta. La composición de las partículas varía según la región, el clima y la estación. Por lo tanto, el PM recogido del aire es incierto, lo que hace que los experimentos sean difíciles de repetir con los mismos resultados. El uso de estándares PM podría dar a la investigación una mejor repetibilidad.
En conjunto, se ha descrito un modelo de isquemia miocárdica basado en la aterosclerosis después de la exposición a partículas. Este modelo se puede utilizar para estudiar el efecto de la contaminación del aire en las enfermedades cardiovasculares y proporcionar una referencia para establecer un modelo animal de enfermedades complejas.
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Disclosures
Los autores no tienen intereses financieros contrapuestos que declarar.
Acknowledgments
Este modelo fue desarrollado con el apoyo de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (Nos. 81673640, 81841001 y 81803814) y el Programa Nacional Principal de Ciencia y Tecnología de China para Medicamentos Innovadores (2017ZX09301012002 y 2017ZX09101002001-001-3).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2,2,2-Tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402 | |
| 75% alcohol disinfectant | |||
| Animal ventilator | Shanghai Alcott Biotech | ALC-V8S | |
| Cotton swabs | Sterile | ||
| Cotton swabs for babies | Sterile , Approximately 3 mm in diameter | ||
| Culture Dish | Corning | 430597 | 150 mm x 25 mm |
| Diesel Particulate Matter | National Institute of Standards Technology | 1650b | |
| Dissection board | About 25 x 17 cm. The dissecting board can be replaced with a wooden board of the same size | ||
| High-fat diet for mice | Prescription: egg yolk powder 10%, lard 10%, sterol 1%, maintenance feed 79% | ||
| Iodophor disinfectant | |||
| LED spotlight | 5 V, 3 W,with hoses and clamps | ||
| Medical silk yarn ball | Shanghai Medical Suture Needle Factory Co., Ltd. | - | 0-0 |
| Medical tape | 3M | 1527C-0 | |
| Micro Vascular Hemostatic Forceps | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | W40350 | |
| Needle Holders | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | JC32010 | |
| Normal saline | |||
| Ophthalmic Scissors | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | Y00040 | |
| Ophthalmic tweezer, 10cm, curved, with hooks | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | JD1080 | |
| Ophthalmic tweezer, 10cm, curved, with teeth | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | JD1060 | |
| Pipet Tips | Axygen | T-200-Y-R-S | 0-200 μL |
| Pipette | eppendorf | 3121000074 | 100 uL |
| Safety pin | Approximately 4.5 cm in length , for making chest opening tools | ||
| Small Animal I.V. Cannulas | Baayen healthcare suzhou | BAAN-322025 | I.V CATHETER 22FG x 25 MM |
| Suture needle with thread | Shanghai Medical Suture Needle Factory Co., Ltd. | - | 6-0,Nylon line |
| Suture needle with thread | JinHuan Medical | F503 | 5-0 |
| Syringe | 1 mL | ||
| Tert-amyl alcohol | |||
| Zoom-stereo microscope | Mshot | MZ62 |
References
- Al-Kindi, S. G., Brook, R. D., Biswal, S., Rajagopalan, S. Environmental determinants of cardiovascular disease: lessons learned from air pollution. Nature Reviews: Cardiology. 17 (10), 656-672 (2020).
- WHO. Ambient (outdoor) Air Pollution. WHO. , Available from: https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/ambient-(outdoor)-air-quality-and-health (2021).
- Kim, K. H., Kabir, E., Kabir, S. A review on the human health impact of airborne particulate matter. Environment International. 74, 136-143 (2015).
- Rajagopalan, S., Al-Kindi, S. G., Brook, R. D. Air pollution and cardiovascular disease: JACC State-of-the-Art Review. Journal of the American College of Cardiology. 72 (17), 2054-2070 (2018).
- Wolf, K., et al. Associations between short-term exposure to particulate matter and ultrafine particles and myocardial infarction in Augsburg, Germany. International Journal of Hygiene and Environmental Health. 218 (6), 535-542 (2015).
- Sun, Q., Hong, X., Wold, L. E. Cardiovascular effects of ambient particulate air pollution exposure. Circulation. 121 (25), 2755-2765 (2010).
- Emini Veseli, B., et al.
- Reichert, K., et al. Murine Left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: An improved and simplified model for myocardial infarction. Journal of Visualized Experiments. (122), e55353 (2017).
- Lei, J., et al. The acute effect of diesel exhaust particles and different fractions exposure on blood coagulation function in mice. International Journal of Environmental Research and Public Health. 18 (8), 4136 (2021).
- Gao, E., et al. A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse. Circulation Research. 107 (12), 1445-1453 (2010).
- Pei, Y. H., et al. LncRNA PEAMIR inhibits apoptosis and inflammatory response in PM2.5 exposure aggravated myocardial ischemia/reperfusion injury as a competing endogenous RNA of miR-29b-3p. Nanotoxicology. 14 (5), 638-653 (2020).
- Jia, H., et al. PM2.5-induced pulmonary inflammation via activating of the NLRP3/caspase-1 signaling pathway. Environmental Toxicology. 36 (3), 298-307 (2021).
- Vogel, B., et al.
- Libby, P.
- Zhou, Z., et al. Excessive neutrophil extracellular trap formation aggravates acute myocardial infarction injury in Apolipoprotein E deficiency mice via the ROS-dependent pathway. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2019, 1209307 (2019).
- Pluijmert, N. J., Bart, C. I., Bax, W. H., Quax, P. H. A., Atsma, D. E. Effects on cardiac function, remodeling and inflammation following myocardial ischemia-reperfusion injury or unreperfused myocardial infarction in hypercholesterolemic APOE*3-Leiden mice. Scientific Reports. 10 (1), 16601 (2020).
- Centa, M., Ketelhuth, D. F. J., Malin, S., Gistera, A.
- Benedek, A., et al. Use of TTC staining for the evaluation of tissue injury in the early phases of reperfusion after focal cerebral ischemia in rats. Brain Research. 1116 (1), 159-165 (2006).
- Mehlem, A., Hagberg, C. E., Muhl, L., Eriksson, U., Falkevall, A. Imaging of neutral lipids by oil red O for analyzing the metabolic status in health and disease. Nature Protocols. 8 (6), 1149-1154 (2013).
- Nelson, A. M., Nolan, K. E., Davis, I. C.
- Zheng, Z., et al. Exposure to fine airborne particulate matters induces hepatic fibrosis in murine models. Journal of Hepatology. 63 (6), 1397-1404 (2015).
- Bai, N., van Eeden, S. F. Systemic and vascular effects of circulating diesel exhaust particulate matter. Inhalation Toxicology. 25 (13), 725-734 (2013).
- Furuyama, A., Kanno, S., Kobayashi, T., Hirano, S. Extrapulmonary translocation of intratracheally instilled fine and ultrafine particles via direct and alveolar macrophage-associated routes. Archives of Toxicology. 83 (5), 429-437 (2009).
- Brunekreef, B., Holgate, S. T.
