Summary
वर्तमान प्रोटोकॉल सचेत चूहों में गुर्दे के रक्त प्रवाह के दीर्घकालिक निरंतर माप का वर्णन करता है और साथ ही प्रत्यारोपित कैथेटर (द्रव से भरे या टेलीमेट्री द्वारा) के साथ रक्तचाप रिकॉर्ड करता है।
Abstract
गुर्दे शरीर के तरल पदार्थों के होमियोस्टैसिस को बनाए रखने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। गुर्दे के रक्त प्रवाह (आरबीएफ) का विनियमन गुर्दे के कार्य में निस्पंदन और चयापचय के महत्वपूर्ण कार्यों के लिए आवश्यक है। गुर्दे के छिड़काव के नियमन के लिए जिम्मेदार तंत्र निर्धारित करने के लिए विभिन्न परिस्थितियों में आरबीएफ को मापने के लिए एनेस्थेटाइज्ड जानवरों में कई तीव्र अध्ययन किए गए हैं। हालांकि, तकनीकी कारणों से, लंबे समय तक अनियंत्रित अनियंत्रित चूहों में आरबीएफ को लगातार (24 घंटे / दिन) मापना संभव नहीं है। ये विधियां कई हफ्तों तक आरबीएफ के निरंतर निर्धारण की अनुमति देती हैं, जबकि साथ ही साथ प्रत्यारोपित कैथेटर (द्रव से भरे या टेलीमेट्री द्वारा) के साथ रक्तचाप (बीपी) को रिकॉर्ड करती हैं। आरबीएफ निगरानी एक गोलाकार सर्वो-नियंत्रित चूहे पिंजरे में रखे गए चूहों के साथ की जाती है जो पूरे अध्ययन में चूहे के अनियंत्रित आंदोलन को सक्षम बनाता है। इसी समय, प्रवाह जांच और धमनी कैथेटर से केबलों की उलझन को रोका जाता है। चूहों को पहले बाईं गुर्दे की धमनी पर एक अल्ट्रासोनिक प्रवाह जांच प्लेसमेंट और दाईं ऊरु धमनी में प्रत्यारोपित धमनी कैथेटर के साथ यंत्रीकृत किया जाता है। इन्हें गर्दन की झपकी तक चमड़े के नीचे रूट किया जाता है, और आरबीएफ और बीपी को मापने के लिए क्रमशः फ्लोमीटर और प्रेशर ट्रांसड्यूसर से जोड़ा जाता है। सर्जिकल आरोपण के बाद, चूहों को तुरंत पिंजरे में रखा जाता है ताकि कम से कम एक सप्ताह तक ठीक हो सकें और अल्ट्रासोनिक जांच रिकॉर्डिंग को स्थिर किया जा सके। इस प्रणाली में मूत्र संग्रह भी संभव है। निरंतर निगरानी के लिए सर्जिकल और पोस्ट-सर्जिकल प्रक्रियाओं को इस प्रोटोकॉल में प्रदर्शित किया गया है।
Introduction
गुर्दे शरीर के वजन का केवल 0.5% हैं, लेकिन रक्त प्रवाह में समृद्ध हैं, कुल कार्डियक आउटपुट1 का 20% -25% प्राप्त करते हैं। गुर्दे के रक्त प्रवाह (आरबीएफ) का विनियमन गुर्दे के कार्य, शरीर के तरल पदार्थ और इलेक्ट्रोलाइट होमियोस्टैसिस के लिए केंद्रीय है। गुर्दे में रक्त प्रवाह विनियमन के महत्व को एकतरफा नेफरेक्टोमी 2,3,4 के बाद शेष गुर्दे में आरबीएफ की पर्याप्त वृद्धि और गुर्दे की विफलता 5,6,7 में होने वाली आरबीएफ की कमी से अच्छी तरह से चित्रित किया गया है। क्या आरबीएफ में इस तरह के परिवर्तन गुर्दे के कार्य में परिवर्तन के जवाब में होते हैं या आरबीएफ की कमी के कारण कार्य में कमी होती है, एनेस्थेटाइज्ड शल्य चिकित्सा से तैयार जानवरों या मानव विषयों में पता लगाना चुनौतीपूर्ण रहा है। अस्थायी अध्ययन की आवश्यकता होती है जिसमें घटनाओं को परिभाषित परिवर्तन से पहले और बाद में निर्धारित किया जा सकता है और घटनाओं की प्रगति के दौरान एक ही जानवर में देखा जा सकता है। पशु और मानव अध्ययनों में, आरबीएफ का अनुमान अप्रत्यक्ष रूप से पैरा-एमिनो हिप्पुरिक एसिड (पीएएच) 8,9,10 की निकासी द्वारा और हाल के समय में अल्ट्रासाउंड 9,11,12, एमआरआई 4,13 और पीईटी-सीटी 14,15 जैसी इमेजिंग तकनीकों द्वारा लगाया गया है। जो प्रत्येक गुर्दे की सहायक स्नैपशॉट छवियां देते हैं और जो रोग की प्रगति का पालन कर सकते हैं। संज्ञाहरण के बिना अल्ट्रासाउंड या एमआरआई स्कैन द्वारा छोटे जानवरों में आरबीएफ का मूल्यांकन करना चुनौतीपूर्ण है। लंबे समय तक एक ही चूहे में सचेत परिस्थितियों में आरबीएफ को लगातार मापना असंभव रहा है।
इसलिए, वर्तमान प्रोटोकॉल ने ऐसी तकनीकें विकसित कीं जो आरबीएफ के एक साथ निरंतर 24 घंटे / दिन माप को सक्षम करती हैं, जिसे स्वतंत्र रूप से चलने वाले चूहों के लिए निरंतर रक्तचाप माप विधियों के साथ जोड़ा गया है जैसा कि पहले वर्णित 16,17,18,19,20,21 . यह तकनीक भविष्य में विभिन्न गुर्दे विकारों में कारण-प्रभाव संबंधों का अध्ययन करने के लिए चूहों के विभिन्न मॉडलों में आरबीएफ के अस्थायी मूल्यांकन की अनुमति देती है।
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Protocol
प्रोटोकॉल विस्कॉन्सिन संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग के मेडिकल कॉलेज द्वारा अनुमोदित है। प्रयोगों के लिए डाहल नमक-संवेदनशील चूहों (नर और मादा), ~ 8 सप्ताह की उम्र, 200-350 ग्राम का उपयोग किया गया था।
1. जानवरों की तैयारी
- पशु कक्ष में चूहे के लिए एक आंदोलन प्रतिक्रिया पेजिंग सिस्टम, एक पेरिवास्कुलर प्रवाह मॉड्यूल, सिरिंज पंप, रिकॉर्डिंग डिवाइस और सॉफ्टवेयर ( सामग्री की तालिका देखें) स्थापित करें।
- सर्जरी से कम से कम सप्ताह पहले पर्यावरण, भोजन और पानी की प्रणाली से परिचित होने के लिए पिंजरे में चूहों को रखें। सर्जरी से एक दिन पहले चूहों को तेज करें क्योंकि उच्च पेट सामग्री बाईं गुर्दे की धमनी में प्रवाह जांच के प्लेसमेंट में हस्तक्षेप कर सकती है और श्वासनली आकांक्षा का कारण बन सकती है।
- एक ऊरु धमनी कैथेटर बनाने के लिए पीवीसी सीमेंट के साथ 90 सेमी पॉलीयुरेथेन ट्यूबिंग (आंतरिक व्यास 0.64 मिमी और बाहरी व्यास 0.64 मिमी) के अंत में 5 सेमी पॉलीयुरेथेन ट्यूबिंग (आंतरिक व्यास 0.30 मिमी और बाहरी व्यास 0.64 मिमी) को कनेक्ट करें ( सामग्री की तालिका देखें)।
- कैथेटर को एथिलीन ऑक्साइड स्टरलाइज़र, 2.5% ग्लूटारल्डिहाइड के साथ प्रवाह जांच और स्टीम ऑटोक्लेव में सर्जिकल उपकरणों के साथ निष्फल करें। 1% सोडियम हाइपोक्लोराइट के साथ सर्जिकल टेबल, माइक्रोस्कोपी और रोशनी पोंछें।
2. सर्जरी
- नीचे दिए गए चरणों का पालन करते हुए आरबीएफ जांच रखें।
- चूहों को 2.0% -2.5% आइसोफ्लुरेन के साथ इस हद तक एनेस्थेटाइज करें कि चूहे दर्द उत्तेजना का जवाब नहीं देते हैं। इसे 37 डिग्री सेल्सियस पर सेट सर्जिकल टेबल पर रखें और सर्जरी से पहले 0.09 मिलीग्राम / किलोग्राम ब्यूप्रेनोर्फिन एसआर और 15 मिलीग्राम / किलोग्राम सेफाज़ोलिन ( सामग्री की तालिका देखें) इंजेक्ट करें।
- पूरे पेट को एक इलेक्ट्रिक क्लिपर के साथ शेव करें और गर्दन की झपकी पर 7वें ग्रीवा कशेरुक के चारों ओर एक क्षेत्र जहां कैथेटर और प्रवाह साबित होता है कि तार बाहर निकल जाएंगे।
- शेविंग के बाद, 70% इथेनॉल, 10% पोविडोन-आयोडीन और फिर 70% इथेनॉल के साथ क्षेत्र को पोंछें।
- चूहे को प्रवण स्थिति में रखें। गर्दन और बाएं फ्लैंक की झपकी पर स्केलपेल का उपयोग करके 1 सेमी कट बनाएं। फिर, हेमोस्टैटिक बल के साथ एक कुंद विच्छेदन करें और फ्लैंक चीरा से गर्दन के पीछे तक एक चमड़े के नीचे की जगह को साफ करें।
- इस चमड़े के नीचे की सुरंग के माध्यम से प्रवाह जांच को गर्दन से फ्लैंक चीरा तक हेमोस्टैटिक बल के साथ पारित करें।
- चूहे को लापरवाह स्थिति में रखें। 4-5 सेमी मध्य रेखा पेट का चीरा लगाएं।
- प्रवाह जांच को रखने के लिए पर्याप्त स्थान को उजागर करने के लिए घुमावदार चिमटी के साथ गुर्दे की धमनी के आसपास के क्षेत्र को विच्छेदित करें ( सामग्री की तालिका देखें)। फिर बाएं क्वाड्रेटस लुम्बोरम मांसपेशी को हेमोस्टैटिक बल के साथ स्पष्ट रूप से छेदें और प्रवाह जांच के सिर को पेट की गुहा में खींचें।
- प्रवाह जांच की नोक को बाईं गुर्दे की धमनी से हुक करें और इसे प्रवाह मीटर से कनेक्ट करें ( सामग्री की तालिका देखें)। जांच टिप के चारों ओर कुछ जेल जोड़ें, और प्रवाह दर का मूल्य प्रवाह मीटर पर दिखाई देगा।
नोट: यद्यपि यह चूहे के आकार पर निर्भर करता है, 230 ग्राम चूहे में लगभग 3-5 एमएल / मिनट का प्रवाह देखा जाएगा। - पेट की दीवार पर चिपकने वाले ऊतक के साथ जांच से जुड़े पॉलिएस्टर फाइबर जाल को गोंद करें और सूखने और बंधे (~ 1-2 मिनट) तक पकड़ें। एक बार प्रवाह होने के बाद, प्रवाह मीटर से प्रवाह जांच को डिस्कनेक्ट करें और पेट को खारे-भिगोए हुए धुंध से कवर करें और कैथेटर डालने के चरण पर आगे बढ़ें।
- नीचे दिए गए चरणों का पालन करते हुए ऊरु कैथेटर डालें।
नोट: तरल पदार्थ से भरे कैथेटर डालने की विधि नियमित टेलीमेट्री इंस्टॉलेशन के समान है। यद्यपि टेलीमेट्री को प्राथमिकता दी जाती है, धमनी कैथेटर सचेत चूहे से दबाव की निगरानी और अवधि रक्त के नमूने को सक्षम बनाता है।- सबसे पहले, कैथेटर को खारा से भरें और ऊरु धमनी को विच्छेदित करने और उजागर करने के लिए बाईं जांघ पर स्केलपेल का उपयोग करके 1 सेमी त्वचा चीरा लगाने से पहले संवहनी बल के साथ दबाएं। एक धागे के साथ ऊरु धमनी के समीपस्थ पक्ष में प्रवाह को अवरुद्ध करते समय, कैथेटर डालें।
- थोड़ी मात्रा में खारा के साथ फ्लश करें, उचित आकार के स्टेनलेस तार के साथ प्लग करें, और कैथेटर को ठीक करने के लिए धागे से बांधें।
- एक बार जब लिगेचर कैथेटर के चारों ओर बंध जाता है, तो कैथेटर को गर्दन के क्षेत्र में लाने के लिए जांघ से गर्दन के पीछे तक स्टेनलेस-स्टील ट्रोकार का उपयोग करके एक चमड़े के नीचे की सुरंग बनाएं। ट्रेपेज़ियस मांसपेशी में रखे गए 3-0 रेशम सीवन के साथ इसे सुरक्षित करें।
- जांच को आगे बढ़ाएं।
- चूहे को प्रवण स्थिति में घुमाएं और फ्लैंक पर प्रवाह जांच के गोलाकार लूप को चमड़े के नीचे सिलाई करें। फ्लैंक और गर्दन पर चीरा को 4-0 सर्जिकल सीवन के साथ सीवन करें ( सामग्री की तालिका देखें)।
- प्रवाह जांच में एक त्वचा बटन संलग्न करें और इसे गर्दन के पीछे 3-0 रेशम के साथ सीवन करें।
- प्रवाह जांच को फिर से प्रवाह मीटर से कनेक्ट करें, आरबीएफ की जांच करने के लिए चूहे को पृष्ठीय स्थिति में वापस मोड़ें, और गुर्दे की धमनी पर अपनी स्थिति को अनुकूलित करने के लिए प्रवाह जांच का अंतिम समायोजन करें।
- अंत में, मांसपेशियों को 3-0 रेशम के साथ और त्वचा को 4-0 सर्जिकल सीवन के साथ सीवन करें।
3. जानवर की वसूली
- सावधानीपूर्वक अवलोकन के बाद, जब तक चूहों को संज्ञाहरण से पूरी तरह से ठीक नहीं किया जाता है, तब तक चूहों को एक आंदोलन प्रतिक्रिया पेजिंग सिस्टम में वापस कर दें, प्रवाह जांच को रक्त प्रवाह मीटर से कनेक्ट करें, और जांच और प्रवाह माप को स्थिर करने के लिए लगभग एक सप्ताह की वसूली अवधि की अनुमति दें।
नोट: इस अवधि के दौरान रिकॉर्डिंग करने की आवश्यकता नहीं है। - थक्के को रोकने के लिए धमनी कैथेटर से 100 μL / घंटा की दर से पूरे अध्ययन में लगातार 3% हेपरिनाइज्ड खारा डालें।
- जब प्रवाह 5-6 दिनों के बाद स्थिर हो जाता है, तो रक्त प्रवाह को 0-20 एमएल / मिनट पर मापने के लिए फ्लोमीटर अंशांकन सेट करें और आरबीएफ की निरंतर रिकॉर्डिंग शुरू करें।
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Representative Results
एक प्रतिनिधि पुरुष डाहल नमक-संवेदनशील चूहे से औसत धमनी दबाव डेटा (चित्रा 1 ए) और रक्त प्रवाह डेटा (चित्रा 1 बी) दिखाया गया है। डाहल नमक-संवेदनशील चूहों को एक कॉलोनी में बनाए रखा जाता है और विस्कॉन्सिन के मेडिकल कॉलेज में पाला जाता है। सर्जरी 8 सप्ताह की उम्र में की गई थी, और सर्जरी के समय शरीर का वजन 249 ग्राम था। चूहों को 0.4% NaCl आहार के साथ खिलाया गया था, और आहार को 10 सप्ताह की उम्र में 4% NaCl आहार में बदल दिया गया था। माप को 4% NaCl आहार पर 3 सप्ताह के लिए जारी रखा गया था, और प्रयोग को 13 सप्ताह की उम्र में समाप्त कर दिया गया था। डेटा एक मिनट के औसत के साथ दिखाया गया है। औसत धमनी दबाव और रक्त प्रवाह में एक स्पष्ट दैनिक अंतर देखा गया था। जबकि उच्च नमक आहार के साथ रक्तचाप बढ़ता है, रक्त प्रवाह बढ़ने के बजाय कम हो जाता है, जिससे गुर्दे संवहनी प्रतिरोध में वृद्धि होती है।
चित्रा 1: प्रतिनिधि धमनी दबाव और रक्त प्रवाह डेटा। औसत धमनी दबाव (मिमी एचजी) (ए) और गुर्दे के रक्त प्रवाह (एमएल / मिनट) (बी) को एक मिनट के औसत के साथ दिखाया गया है। एलएस: कम नमक (0.4% NaCl) आहार, एचएस: उच्च नमक (4% NaCl) आहार। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
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Discussion
वर्तमान प्रोटोकॉल एक ऐसी तकनीक का वर्णन करता है जो कई हफ्तों में लगातार आरबीएफ और धमनी दबाव को रिकॉर्ड करने के लिए व्यावसायिक रूप से उपलब्ध इंस्ट्रूमेंटेशन का उपयोग करता है। इसके अलावा, चरण 1.1 में वर्णित डिवाइस का उपयोग करके मूत्र एकत्र किया जा सकता है। इसका उपयोग मूत्र में मेटाबोलाइट्स का मूल्यांकन करने के लिए भी किया जा सकता है और, जब धमनी कैथेटर प्रत्यारोपित किया जाता है, तो विश्लेषण के लिए रक्त का नमूना।
परंपरागत रूप से, आरबीएफ माप शल्य चिकित्सा से तैयार एनेस्थेटाइज्ड जानवरों में तीव्र रूप से प्राप्त किए गए हैं या पीएएच निकासी द्वारा अनुमानित किए गए हैं। हालांकि, यह दिखाया गया है कि विभिन्न एनेस्थेटिक्स और सर्जरी22,23 गुर्दे के रक्त प्रवाह और धमनी दबाव को बदलते हैं। मनुष्यों में किए गए अध्ययनों से पता चला है कि आइसोफ्लुरेन ने पीएएच निकासी को क्रमशः 476.8-243.3 एमएल / मिनट और इनुलिन निकासी को 88.0 से 55.7 एमएल / मिनट तक कमकर दिया है। थियोबार्बिटल एक एनेस्थेटिक है जिसका व्यापक रूप से चूहों के महत्वपूर्ण अध्ययन के लिए उपयोग किया जाता है। फिर भी, यह बताया गया है किगुर्देके कॉर्टेक्स के माइटोकॉन्ड्रिया में एच2 ओ 2 उत्पादन थायोबार्बिटल24 के साथ संज्ञाहरण के बाद 90 मिनट बढ़ जाता है, जो रक्त प्रवाह को प्रभावित कर सकता है। कई प्रयोगात्मक अध्ययनों के लिए अनएस्थेटाइज्ड और अनस्ट्रेस्ड जानवरों में माप कहीं बेहतर होगा। प्रवाह जांच प्रत्यारोपित करके आरबीएफ को मापने की विधि कुत्तों25 और चूहों26 में प्रदर्शित की गई है। इस काम ने प्रयोगशाला में चूहों में आरबीएफ को मापने का एक तरीका भी स्थापित किया है।
इस प्रस्तुति में वर्णित तकनीकों को लागू करने से किसी दिए गए उत्तेजना के बाद अनुक्रमिक घटनाओं से संबंधित कई प्रश्नों को संबोधित किया जा सकता है। अननेस्थेटाइज्ड इंस्ट्रूमेंटेड चूहा मॉडल दवा के लिए तत्काल और पुरानी प्रतिक्रियाओं और उच्च रक्तचाप के विकास के दौरान होने वाली विभिन्न उत्तेजनाओं के दीर्घकालिक परिणामों के निर्धारण को सक्षम बनाता है।
सर्जरी में कुछ प्रशिक्षण के साथ लगभग 100% जीवित रहने की दर के साथ न्यूनतम रक्त हानि शामिल है। 4 सप्ताह के प्रयोग के बाद प्रोटीज युक्त आयनिक डिटर्जेंट और नसबंदी के साथ धोने के बाद प्रवाह जांच का पुन: उपयोग किया जा सकता है। हालांकि, प्लास्टिक कोटिंग धीरे-धीरे खराब हो जाएगी और, कई उपयोगों के बाद, मरम्मत की आवश्यकता होगी। अगले में त्वचा बटन जहां कैथेटर बाहर निकलते हैं, सबसे महत्वपूर्ण संभावित समस्या का प्रतिनिधित्व करता है क्योंकि यह संक्रमण, जलन और खरोंच के लिए कमजोर है यदि सावधानीपूर्वक साफ और कीटाणुरहित नहीं किया जाता है। हालांकि, अगर यह ढीला हो जाता है, तो इसे एनेस्थीसिया के तहत जल्दी से मरम्मत की जा सकती है।
प्रक्रिया का महत्वपूर्ण चरण सर्जरी है, और तकनीक में महारत हासिल करने में कुछ समय लग सकता है। हालांकि, एक बार हासिल करने के बाद, अननेस्थेटाइज्ड क्रोनिक अध्ययन को न्यूनतम समस्याओं के साथ उत्पादक रूप से किया जा सकता है। तनाव या लिंग की परवाह किए बिना 200-350 ग्राम के चूहों पर काम करना संभव है। निर्माताओं द्वारा पहले से तैयार किए गए विभिन्न आकारों के प्रवाह जांच का उपयोग करके विभिन्न आकारों और जानवरों के चूहों पर प्रयोग भी संभव हैं।
हालांकि, सीमाएं और विशिष्ट मुद्दे हैं जिन पर ध्यान देना चाहिए। सबसे पहले, शल्य चिकित्सा के बाद के संक्रमण को कम करने के लिए नसबंदी उपकरणों, कैथेटर और प्रवाह जांच का उपयोग करके सर्जरी की जानी चाहिए। दूसरा, चूंकि सर्जरी व्यापक है और एक घंटे से अधिक की आवश्यकता होती है, अध्ययन के लिए "नियंत्रण" माप प्राप्त करने से पहले पर्याप्त रूप से लंबी वसूली अवधि प्रदान की जानी चाहिए। हमारी प्रयोगशाला में यह अवधि आम तौर पर 7-10 दिनों तक फैली हुई है। तीसरा, इलियस (आंत का एक रोड़ा या पक्षाघात) कुछ मामलों में पोस्टऑपरेटिव जटिलता का प्रतिनिधित्व करने वाली समस्या रही है। प्रक्रिया के दौरान आंत के संपर्क से बचने (उदाहरण के लिए, नम धुंध में लपेटकर रखें) और बंधन के अच्छी तरह से सूखने तक पेट के चीरे को बंद करने से बचें। सर्जरी के दौरान आंत को गुर्दे की धमनी में उजागर करने से बचना और यह सुनिश्चित करना आवश्यक है कि ट्यूरिंग करते समय आंत मुड़ न जाए। चौथा, यह माना जाना चाहिए कि आरबीएफ गुर्दे के वजन में वृद्धि के साथ आनुपातिक रूप से बढ़ेगा। यह उन अध्ययनों में माना जाना चाहिए जिनमें गुर्दे की अतिवृद्धि विपरीत गुर्दे को हटाने के बाद होती है। पांचवां, हमारे पास केवल एक महीने तक आरबीएफ को मापने का अनुभव है और इस अवधि से परे माप का विस्तार करने की कोशिश नहीं की है। चूंकि लगभग सभी मामलों में इस अवधि के दौरान चीजें अच्छी तरह से काम कर रही थीं, इसलिए अध्ययन को कई हफ्तों तक बढ़ाया जा सकता है। अंत में, समानांतर धमनी दबाव माप के बारे में एक संक्षिप्त शब्द: 24 घंटे / दिन की पैटेंसी और प्रत्यारोपित टेलीमेट्री उपकरणों को बनाए रखने के लिए पतला हेपरिन के साथ प्रत्यारोपित द्रव से भरे कैथेटर का उपयोग किया जाता है। प्रयोगात्मक डिजाइन और जरूरतों के आधार पर प्रत्येक के फायदे और नुकसान हैं। उदाहरण के लिए, धमनी कैथेटर से रक्त का नमूना संभव है यदि कैथेटर विधि चुनी जाती है, और टेलीमेट्री विधि के लिए हेपरिनाइजेशन की आवश्यकता नहीं होती है। हालांकि, दोनों ने आरबीएफ और बीपी के दीर्घकालिक माप के दौरान हमें अच्छी तरह से सेवा दी है।
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Disclosures
लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।
Acknowledgments
इस अध्ययन को वैज्ञानिक अनुसंधान के लिए अनुदान (पी 01 एचएल 116264, आरओ 1 एचएल 137748) द्वारा समर्थित किया गया था। लेखक अपनी सलाह के लिए थेरेसा कुर्थ को धन्यवाद देना चाहते हैं और प्रयोगशाला प्रबंधक के रूप में प्रयोगात्मक वातावरण को बनाए रखने में मदद करते हैं।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1RB probe | Transonic | 1RB | ultrasonic flow probe |
| Betadine | Avrio Health | povidone-iodine | |
| Buprenorphine SR-LAB | ZooPharm | Buprenorphine | |
| Cefazolin | APOTEX | NDC 60505 | Cefazolin |
| Crile Hemostats | Fine Surgical Instruments | 13004-14 | Hemostats for blunt dissection |
| Isoflurane | Piramal | NDC 66794 | Isoflurane |
| Medium Clear PVC cement | Oatey | PVC cement | |
| Mersilene polyester fiber mesh | Ethicon | polyester fiber mesh | |
| MetriCide28 | Metrex | SKU 10-2805 | 2.5% glutaraldehyde |
| Micro-Renathane 0.025 x 0.012 | Braintree Scientific | MRE 025 | use for catheter |
| MINI HYPE-WIPE | Current Technologies | #9803 | 1% sodium hypochlorite |
| Oatey Medium Clear PVC Cement | Oatey | #31018 | PVC cement |
| PHD2000 syringe pump | Harvard apparatus | 71-2000 | syringe pump |
| Ponemah software | DSI | recording software | |
| Precision 3630 Tower | Dell | Computer for recording | |
| Raturn Stand-Alone System | BASi | MD-1407 | a movement response caging system |
| RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025 | Braintree Scientific | RPT 040 | use for catheter |
| Silicone cuff | Transonic | AAPC102 | skin button |
| Surgical lubricant sterile bacteriostatic | Fougera | 0168-0205-36 | gell for flow probe |
| Tergazyme | Alconox | protease contained anionic detergent | |
| TS420 Perivascular Flow Module | Transonic | TS420 | perivascular flow module |
| Vetbond | 3M | 1469SB | tissue adhesive |
| WinDaq software | DATAQ | recording software |
References
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