Summary
Het huidige protocol beschrijft een gestandaardiseerde chirurgische methode voor het elastase-geïnduceerde AAA-model door de directe toepassing van elastase op de adventitia van infrarode abdominale aorta bij muizen.
Abstract
Abdominaal aorta-aneurysma (AAA), hoewel voornamelijk asymptomatisch, is potentieel levensbedreigend omdat de breuk van AAA meestal een verwoestend resultaat heeft. Momenteel zijn er verschillende verschillende experimentele modellen van AAA, die elk een ander aspect in de pathogenese van AAA benadrukken. Het elastase-geïnduceerde AAA-model is het op één na meest gebruikte AAA-model voor knaagdieren. Dit model omvat directe infusie of toepassing van varkens pancreatische elastase (PPE) in het infrarode segment van de aorta. Vanwege technische uitdagingen wordt het meeste elastase-geïnduceerde AAA-model tegenwoordig uitgevoerd met de externe toepassing in plaats van een intraluminale infusie van PBM' s. De infiltratie van elastase zal degradatie van elastische lamellen in de mediale lagen veroorzaken, wat resulteert in het verlies van de integriteit van de aortawand en de daaropvolgende verwijding van de abdominale aorta. Een nadeel van het elastase-geïnduceerde AAA-model is echter de onvermijdelijke variatie in hoe de operatie wordt uitgevoerd. Met name de chirurgische techniek van het isoleren van het infrarode segment van de aorta, het materiaal dat wordt gebruikt voor aorta-verpakking en PBM-incubatie, de enzymatische activiteit van PBM en de tijdsduur van PBM-toepassing kunnen allemaal belangrijke determinanten zijn die de uiteindelijke AAA-formatiesnelheid en aneurysmadiameter beïnvloeden. Met name het verschil in deze factoren van verschillende studies over AAA kan leiden tot reproduceerbaarheidsproblemen. Dit artikel beschrijft een gedetailleerd chirurgisch proces van het elastase-geïnduceerde AAA-model door directe toepassing van PBM op de adventitia van de infrarode abdominale aorta in de muis. Na deze procedure is een stabiele AAA-formatiesnelheid van ongeveer 80% bij mannelijke en vrouwelijke muizen haalbaar. De consistentie en reproduceerbaarheid van AAA-studies met behulp van een elastase-geïnduceerd AAA-model kan aanzienlijk worden verbeterd door een standaard chirurgische procedure vast te stellen.
Introduction
Abdominaal aorta-aneurysma (AAA) wordt gedefinieerd als een segmentale dilatatie van de abdominale aorta met ten minste 50% toename van de diameter van het vat1. AAA is potentieel fataal, omdat de breuk kan leiden tot een extreem hoog sterftecijfer, zelfs met interventie 2,3,4. Er is gemeld dat AAA verantwoordelijk is voor ongeveer 13.000 sterfgevallen per jaar in de VS, waardoor het de10e belangrijkste doodsoorzaak is 1,5.
De pathogenese van AAA is nog niet helemaal begrepen 6,7,8. Om het moleculaire mechanisme van AAA te onderzoeken en potentiële therapeutische doelen te testen, zijn verschillende experimentele AAA-modellen opgesteld 9,10. Knaagdiermodellen van AAA omvatten elastase, calciumchloride, angiotensine II en xenograftmodellen, waaronder het elastase-geïnduceerde AAA-model het op één na meest gebruikte model 10,11,12,13,14,15,16,17. Dit model omvat directe infusie of toepassing van varkens pancreatische elastase (PPE) in het infrarode segment van de aorta. De penetratie van elastase in de mediale laag van de aorta zal de afbraak van elastische lamellen en infiltratie van ontstekingscellen veroorzaken, wat leidt tot het verlies van de integriteit van de aortawand en de daaropvolgende verwijding van abdominale aorta 7,18. Het elastase-geïnduceerde AAA-model werd voor het eerst gerapporteerd door Anidjar et al. in 1990 met behulp van ratten, waarbij een geïsoleerd segment van de aorta werd doordrenkt met elastase17. Later in 2012 werd een aangepast model met behulp van een periadventiële toepassing van PBM gerapporteerd door Bhamidipati et al.19. Tegenwoordig zijn de meeste operaties voor het elastase-geïnduceerde AAA-model geïnspireerd op de groep van Bhamidipati en worden ze uitgevoerd met de externe toepassing in plaats van intraluminale perfusie van PBM. Hoewel de externe toepassing minder behoefte heeft aan fijne chirurgische vaardigheden, is de incidentie van AAA relatief lager en de grootte iets kleiner dan die van intraluminale perfusie11,19.
Hoewel het veel wordt gebruikt in AAA-studies, heeft het door elastase geïnduceerde AAA-model bepaalde beperkingen. Een kanttekening bij dit model is de onvermijdelijke variaties van hoe de operatie wordt uitgevoerd, wat kan leiden tot het probleem van reproduceerbaarheid. Het verschil kan bijvoorbeeld bestaan in de chirurgische procedure met betrekking tot hoe het infrarode segment van de aorta wordt geïsoleerd en welk deel van het segment wordt geselecteerd voor PBM-toepassing tussen verschillende laboratoria. De enzymatische activiteit van PBM's en de tijdsduur van PBM-incubatie kunnen ook variëren. Dit zijn echter allemaal essentiële determinanten die de uiteindelijke AAA-formatiesnelheid en aneurysmadiameter beïnvloeden. De variatie van deze kritische determinanten maakt gegevensvergelijking van AAA-studies uit verschillende groepen met behulp van dit model erg moeilijk. Daarom is een gestandaardiseerde chirurgische ingreep nodig als hulpmiddel om vergelijkbare resultaten van verschillende instellingen te krijgen.
Dit artikel beschrijft een gestandaardiseerd chirurgisch protocol voor het elastase-geïnduceerde AAA-model door directe toepassing van PBM op de adventitia van infrarood abdominale aorta bij muizen. Details over chirurgisch materiaal en procedures die essentieel zijn voor een succesvolle en robuuste generatie van AAA bij muizen met behulp van dit model zullen ook worden besproken.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
De dierprotocollen zijn goedgekeurd door de University of Michigan Institutional Animal Care and Use Committee (PRO00010092). Mannelijke en vrouwelijke C57BL / 6J wild-type (WT) muizen, ~ 7 weken oud, werden gebruikt voor de experimenten.
1. Bereiding van dieren
- Voed de muizen met het standaard chow-dieet (zie Tabel met materialen) voor en na de operatie.
OPMERKING: Verschillende stammen en leeftijden van muizen kunnen worden gebruikt. Leeftijd variërend van 5,5-12 weken oud wordt echter aanbevolen om een maximale incidentie te bereiken. - Dien voor elke muis 5 mg/kg Carprofen subcutaan toe 30 minuten vóór de inductie van de anesthesie.
- Dien na 30 minuten 100 mg/kg Ketamine en 5 mg/kg Xylazine toe via intraperitoneale injectie om anesthesie te induceren.
2. Voorbereiding op de operatie
- Bereid het chirurgische materiaal voor.
- Snijd de nitril handschoenen in reepjes van 4 cm x 4 mm. Snijd de wattenschijfjes in stukjes van 3 cm x 2 mm. Autoclaaf deze met andere chirurgische instrumenten, waaronder chirurgische scharen, weefseltangen en Halsted-Mosquito hemostaten (zie Tabel met materialen).
- Plaats de muis in rugligging op een steriel absorberend verbandkussen. Immobiliseer de voor- en achterpoten met chirurgische tape.
- Gebruik applicators met wattenpunt (zie Tabel met materialen) om haarverwijderaarlotion over de middelste en onderste buikstreek te borstelen en veeg het gebied vervolgens uit met chirurgisch gaas om het haar te verwijderen.
- Desinfecteer het operatiegebied ten minste drie keer in een cirkelvormige beweging met afwisselende toepassingen van 70% alcohol en een scrub op basis van jodium of chloorhexidine. Laat drogen.
3. Chirurgische ingreep
- Voer de volgende stappen uit om toegang te krijgen tot de buikholte.
- Test de muis op het ontbreken van een teenknijpreactie vóór de huidincisie.
- Maak een longitudinale incisie van 2,5 cm op de huid langs de middellijn van de midden- en onderbuik met behulp van een chirurgische schaar.
- Trek voorzichtig de onderliggende spier omhoog en maak een longitudinale incisie van 2,5 cm langs linea alba om toegang te krijgen tot de buikholte.
- Leg de abdominale aorta bloot.
- Gebruik bevochtigde applicators met katoenen punt om de darmen en maag naar de rechterkant van de muis te verplaatsen.
OPMERKING: Idealiter zal dit het infrarode segment van de aorta blootleggen. Als de aorta moeilijk te lokaliseren is, kunnen de rechternier en de rechter nierslagader de aorta identificeren (omdat de rechternier een iets lagere anatomische locatie heeft dan de linker nier). - Gebruik een tang om voorzichtig het bindweefsel te verwijderen dat de abdominale aorta en inferieure vena cava (IVC) bedekt.
OPMERKING: De abdominale aorta en IVC bevinden zich in dezelfde vaatschede. Het is niet nodig om al het bindweefsel te verwijderen, omdat volledige verwijdering het risico op beschadiging van deze twee bloedvaten zou vergroten. - Gebruik een tang om de achterkant van de abdominale aorta en IVC voorzichtig te ontleden van de onderliggende spieren.
OPMERKING: Uiteinden van de tang moeten dwars in de achterkant van de schede gaan en een gat in de fascia maken dat de schede verbindt met de onderliggende spieren. Zodra het gat is gemaakt, vergroot u de grootte ervan door de tang langzaam los te laten. - Plaats een stuk van de 4 cm x 4 mm handschoenstreep (zoals eerder vermeld, stap 2.1.1) door de achterkant van de abdominale aorta en IVC en recht de streep. Plaats de streep ~0,5 cm van de rechter nierslagader.
OPMERKING: Zorg ervoor dat het gat groot genoeg is, zodat de omliggende fascia de streep niet zal verdraaien. - Plaats boven de streep een stuk van 3 cm x 2 mm wattenschijfje door de achterkant van de abdominale aorta en IVC en maak vervolgens het wattenschijfje recht.
- Gebruik bevochtigde applicators met katoenen punt om de darmen en maag naar de rechterkant van de muis te verplaatsen.
- Incubeer de elastase.
- Gebruik een pipet om 30 μL varkens pancreatische elastase (totale enzymatische activiteit van 1,8 eenheid, zie Tabel met materialen) op het aortasegment boven het wattenschijfje te laten vallen en wikkel vervolgens het wattenschijfje en de streep rond de aorta en IVC. Spoel een stuk gaas van 10 cm x 10 cm af met steriele 0,9% zoutoplossing en plaats het op de buik.
OPMERKING: Het gaas hoeft slechts gedeeltelijk te worden gespoeld, omdat overdrijven het risico zou lopen de elastase eronder te verdunnen. - Verwijder na 30 minuten de streep en het wattenschijfje met een tang.
- Gebruik een pipet om 30 μL varkens pancreatische elastase (totale enzymatische activiteit van 1,8 eenheid, zie Tabel met materialen) op het aortasegment boven het wattenschijfje te laten vallen en wikkel vervolgens het wattenschijfje en de streep rond de aorta en IVC. Spoel een stuk gaas van 10 cm x 10 cm af met steriele 0,9% zoutoplossing en plaats het op de buik.
- Sluit de buikholte volgens de onderstaande stappen.
- Irrigeer de aorta en buikholte met 500 μL steriele 0,9% zoutoplossing. Gebruik een gaasje van 10 cm x 10 cm om de resterende zoutoplossing te absorberen.
- Hersluit de spierlagen met een lopende 6-0 niet-absorbeerbare monofilament hechting.
- Sluit de huid met 3-4 onderbroken 6-0 niet-absorbeerbare monofilament hechtingen.
4. Postoperatieve zorg
- Dien 5 mg/kg Carprofen subcutaan toe op de postoperatieve dag 1.
- Verwijder huidnaden op de postoperatieve dag 10.
5. Meting van de diameter van het abdominale aorta-aneurysma
- Euthanaseer de muizen door CO 2-overdosering op postoperatieve dag 14. Dit vertegenwoordigt het tijdspunt van maximale dilatatie.
- Toegang tot de buikholte zoals beschreven in stap 3.1.
- Voer vasculaire perfusie uit door 10 ml van 0,9% zoutoplossing in de bloedsomloop te injecteren via de linker ventrikel.
- Stel het infrarode segment van de abdominale aorta bloot zoals beschreven in stap 3.1-3.2. Verwijder voorzichtig het omliggende bindweefsel en scheid de abdominale aorta van IVC.
- Meet de diameter van de abdominale aorta met een remklauw.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Een totaal van drieëntwintig 7 weken oude wild-type (WT) muizen, waaronder 12 vrouwtjes en 11 mannetjes, werden geopereerd volgens het gepresenteerde protocol. De overlevingskans was 100% (chirurgische mortaliteit uitgesloten). De maximale abdominale aortadiameter werd gemeten met een remklauw.
AAA werd gedefinieerd als het verwijden van de abdominale aorta met een toename van 50% van de vaatdiameter. Daarom werd een toename van 50% in de maximale abdominale aortadiameter geselecteerd als het afkappunt voor succesvolle AAA-inductie. Op basis van dit criterium was de incidentie van AAA op postoperatieve dag 14 91,7% voor vrouwelijke dieren, waarbij 11 van de 12 die een operatie ondergingen AAA ontwikkelden; terwijl de incidentie voor mannelijke dieren 72,7% was, ontwikkelden 8 van de 11 die een operatie ondergingen AAA (figuur 1A). Onder de 19 dieren waarbij AAA voorkomt, is er een 1,7-voudige en 1,6-voudige toename van de maximale abdominale aortadiameter bij vrouwen en mannen in vergelijking met niet-chirurgische controles , respectievelijk (figuur 1B). Representatieve beelden van de aorta's van niet-chirurgische en operatiegroepen op postoperatieve dag 14 zijn weergegeven in figuur 1C.
Figuur 1: Karakterisering van AAA bij muizen die een operatie hebben ondergaan. Alle metingen gebeuren op postoperatieve dag 14. (A) De incidentie van AAA bij muizen die een operatie hebben ondergaan. (B) Maximale diameter van de infrarode aorta bij muizen van zowel niet-chirurgische (n = 4 voor zowel vrouwelijke als mannelijke) als chirurgische groepen (n = 12 voor vrouwen; n = 11 voor mannen). Gegevens zijn gemiddeld ± SEM. *p < 0,05. (C) Representatieve beelden van aorta's bij muizen uit zowel niet-chirurgische als chirurgische groepen. Schaalbalk = 2 mm. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Het elastase-geïnduceerde AAA-model werd voor het eerst gemeld door Anidjar et al. met behulp van ratten in 199017. In de afgelopen dertig jaar zijn verschillende aangepaste versies geïntroduceerd, samen met een aanzienlijke verbetering van de chirurgische technieken 19,20,21,22. Honderden instituten gebruiken elastase-geïnduceerde AAA-modellen als het op één na meest gebruikte experimentele knaagdiermodel voor AAA-studies12. Het is niet meer dan normaal dat verschillende groepen de operatie voor dit model iets anders zullen uitvoeren. Als gevolg hiervan is een voorbehoud van dit model de onvermijdelijke variaties van hoe de operatie wordt uitgevoerd, wat de vergelijking van gegevens van verschillende groepen met behulp van dit model erg moeilijk maakt. De variaties omvatten, maar zijn niet beperkt tot, hoe infraroodsegment van de aorta wordt blootgesteld, hoe uitgebreid de fasciale laag die de aorta bedekt, wordt gereinigd, hoe lang de incubatietijd is, evenals het materiaal dat wordt gebruikt voor aorta-verpakking en elastase-incubatie en het volume elastase dat aan het wikkelmateriaal wordt toegevoegd. Dit zijn echter allemaal essentiële determinanten die de uiteindelijke incidentiesnelheid en diameter van AAA beïnvloeden. Een gestandaardiseerde chirurgische procedure is nodig om het probleem van reproduceerbaarheid veroorzaakt door deze variaties op te lossen. Een gestandaardiseerd chirurgisch protocol wordt hier gepresenteerd voor het elastase-geïnduceerde AAA-model door directe toepassing van PBM op de adventitia van de infrarode abdominale aorta in de muis.
Afgezien van de consistente inductiesnelheid van AAA, bezit dit protocol de voordelen van lage kosten en korte bedrijfstijd. Het chirurgische materiaal dat in dit protocol wordt gebruikt, kan allemaal gemakkelijk worden verkregen tegen lage kosten. De gemiddelde werkingstijd van dit protocol is 50 min, inclusief 30 min PBM-incubatie. Deze voordelen zullen de uitvoering van veel dierstudies gemakkelijker maken, wat bijdraagt aan een grotere statistische kracht en reproduceerbaarheid.
Blootstelling van de abdominale aorta is de meest kritieke stap in dit protocol. Het is essentieel om het bindweefsel in de vaatschede rond de abdominale aorta en IVC te verwijderen, zodat elastase een betere kans heeft om de mediale laag van de aorta te penetreren. Het volledig verwijderen van deze bindweefsels is echter tijdrovend en riskeert de onderliggende aorta en IVC te beschadigen. Dit is de stap van waaruit de meeste chirurgische sterfte wordt veroorzaakt. Als IVC of aorta beschadigd is, zullen de meeste dieren de volgende 48 uur niet overleven, zelfs als ze de operatie overleven, mogelijk als gevolg van de voortdurende bloeding na de operatie die leidt tot exsanguinatie. Om deze reden moet er over een delicaat evenwicht worden nagedacht tussen het maximaal blootstellen van de aorta en het niet beschadigen van de grote vaten. Het achterlaten van een kleine hoeveelheid bindweefsel op de vaatschede zal de perioperatieve mortaliteit aanzienlijk verminderen, terwijl het optreden van AAA niet wordt beïnvloed. Daarom wordt het niet aanbevolen om het bindweefsel dat de aorta en IVC bedekt volledig te verwijderen voor blootstelling aan de abdominale aorta. Toch moet uiterste voorzichtigheid worden betracht tijdens de abdominale aorta en IVC-dissectie van aangrenzend bindweefsel.
Anatomisch zijn de abdominale aorta en IVC nauw verbonden via een dunne fascialaag en samen in dezelfde vaatschede. Sommige experimentele modellen zoals veneuze trombose kunnen het scheiden van de aorta van aangrenzende IVC vereisen. Het is echter niet nodig om dit te doen in het elastase-geïnduceerde AAA-model23. Sommigen geven er de voorkeur aan om de vaatmantel met de klok mee te draaien, zodat de aorta zich recht boven IVC bevindt en elastase vervolgens rechtstreeks op de aorta kan worden aangebracht. Dit is niet nodig omdat het wattenschijfje eronder verzadigd is met elastase en de aorta continu zal worden blootgesteld aan elastase, ongeacht de anatomische relatie met IVC. Het wordt aanbevolen om de achterkant van de aorta en IVC via een tang voldoende te scheiden van de onderliggende spieren. In het geval dat de dissectie niet uitgebreid genoeg is in deze stap, zal spanningskracht worden gecreëerd door de omliggende fascia en spieren op de streep en wattenschijfje, wat resulteert in hun draaiing en daaropvolgende inefficiënte absorptie van elastase.
Een beperking van dit protocol is de uiteindelijke vorm van de geïnduceerde AAA. Het is onvermijdelijk dat wanneer elastase op de aorta wordt gedropt, naar andere segmenten van de aorta stroomt die niet door het wattenschijfje zijn omwikkeld. Bovendien kan nabijgelegen bloeding veroorzaakt door dissectie, zelfs van kleine hoeveelheden, elastase wegspoelen van het wattenschijfje naar andere aortasegmenten tijdens de incubatietijd van 30 minuten. Deze zullen leiden tot elastase die andere segmenten van de aorta binnendringt, waardoor de mediale laag en verwijding van de abdominale aorta niet beperkt blijven tot het segment dat door het wattenschijfje wordt omwikkeld. Als gevolg hiervan vertonen sommige dieren, in plaats van fusiforme aneurysma's veroorzaakt door focale verwijding, algemene verwijding van een lang segment van de abdominale aorta. De maximale aortadiameter bij deze dieren met continue verwijding van de aorta vertoont echter nog steeds een toename van meer dan 50% in vergelijking met controles. Ondertussen wordt geen verschil in maximale aortadiameter waargenomen tussen dieren die continue verwijding en focale verwijding van de abdominale aorta vertonen, wat suggereert dat de vorm van het aneurysma een indicator is van noch succesvolle AAA-inductie noch werkelijke AAA-grootte in dit geval protocol.
Een andere beperking van dit protocol is het toepassen van deze methode op grotere dieren. Het topische elastase-geïnduceerde AAA-model moet gemakkelijk worden toegepast op andere kleine dieren zoals ratten. Elastase alleen is echter mogelijk niet voldoende voor grotere dieren zoals varkens of primaten om een consistent AAA-fenotype te induceren. Marinov et al. rapporteerden bijvoorbeeld dat elastaseperfusie alleen bij varkens enkele histologische veranderingen kon veroorzaken, waaronder elastineverstoring, maar geen consistent aneurysma24 kon induceren. Shannon A et al. rapporteerden een varkensmodel van infrarood AAA geïnduceerd door elastase. Het vereist echter een combinatie van ballonangioplastiek, perfusie, topische elastase en een dieet met BAPN (een lysyloxidaseremmer die collageenverlinking voorkomt) gezien de aanzienlijke duurzaamheid van aorta25. Daarom lijkt het erop dat de toepassing van een gestandaardiseerd elastase-geïnduceerd AAA-protocol bij grotere dieren nog steeds een behoorlijke uitdaging is vanwege het verschil in grootte en duurzaamheid van de aorta tussen muizen en grotere dieren, de technische uitdagingen en de potentieel hoge kosten.
Kortom, ondanks enkele beperkingen kan AAA consistent worden geïnduceerd bij zowel mannelijke als vrouwelijke muizen in dit gestandaardiseerde protocol. De consistentie en reproduceerbaarheid van AAA-studies met behulp van het elastase-geïnduceerde AAA-model zullen naar verwachting aanzienlijk worden verbeterd door deze standaard chirurgische procedure vast te stellen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De auteurs hebben niets te onthullen.
Acknowledgments
We bedanken de Unit for Laboratory Animal Medicine van de Universiteit van Michigan voor hun hulp bij het voeren en fokken van dieren. Deze studie wordt ondersteund door NIH RO1 HL138139, NIH RO1 HL153710 aan J. Zhang, NIH RO1 HL109946, RO1 HL134569 aan Y.E. Chen en de American Heart Association grant 20POST35110064 aan G. Zhao.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 6-0 non-absorbable monofilament suture | Pro Advantage | P420697 | |
| Carprofen | Zoetis Inc. | NDC: 54771-8507 | |
| Chow Diet | LabDiet | 3005659-220 | PicoLab 5L0D |
| Cotton Applicator | Dynarex | 4303 | |
| Cotton Pad | Rael | UPC: 810027130969 | |
| GraphPad Prism 8 | GraphPad Software Inc. | Version 8.4.3 | |
| Grarfe Forceps | Fine Science Tools | 11051-10 | |
| Halsted Mosquito Hemostats | Fine Science Tools | 13009-12 | |
| Ketamine | Par Pharmaceutical | NDC: 42023-0115-10 | |
| Nitrile gloves | Fisherbrand | 19-130-1597 | |
| Penicillin-Streptomycin | Thermo Fisher | 15140122 | |
| Porcine pancreatic elastase | Sigma-Aldrich | E1250-100MG | |
| Scissors | Fine Science Tools | 14068-12 | |
| Sterile 0.9% saline solution | Baxter | 2B1324X | |
| Xylazine | Akorn | NDC: 59399-110-20 |
References
- Kent, K. C. Clinical practice: Abdominal aortic aneurysms. The New England Journal of Medicine. 371 (22), 2101-2108 (2014).
- Karthikesalingam, A., et al. Mortality from ruptured abdominal aortic aneurysms: Clinical lessons from a comparison of outcomes in England and the USA. Lancet. 383 (9921), 963-969 (2014).
- Noel, A. A., et al. Ruptured abdominal aortic aneurysms: The excessive mortality rate of conventional repair. Journal of Vascular Surgery. 34 (1), 41-46 (2001).
- Lederle, F. A., et al. Rupture rate of large abdominal aortic aneurysms in patients refusing or unfit for elective repair. JAMA. 287 (22), 2968-2972 (2002).
- Kochanek, K. D., Xu, J., Murphy, S. L., Minino, A. M., Kung, H. C. Deaths: Final data for 2009. National Vital Statistics Reports. 60 (3), 1 (2011).
- Daugherty, A., Cassis, L. A. Mechanisms of abdominal aortic aneurysm formation. Current Atherosclerosis Reports. 4 (3), 222-227 (2002).
- Quintana, R. A., Taylor, W. R. Cellular mechanisms of aortic aneurysm formation. Circulation Research. 124 (4), 607-618 (2019).
- Kuivaniemi, H., Ryer, E. J., Elmore, J. R., Tromp, G. Understanding the pathogenesis of abdominal aortic aneurysms. Expert Review of Cardiovascular Therapy. 13 (9), 975-987 (2015).
- Trollope, A., Moxon, J. V., Moran, C. S., Golledge, J. Animal models of abdominal aortic aneurysm and their role in furthering management of human disease. Cardiovascular Pathology. 20 (2), 114-123 (2011).
- Patelis, N., et al. Animal models in the research of abdominal aortic aneurysms development. Physiological Research. 66 (6), 899-915 (2017).
- Senemaud, J., et al. Translational relevance and recent advances of animal models of abdominal aortic aneurysm. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (3), 401-410 (2017).
- Lysgaard Poulsen, J., Stubbe, J., Lindholt, J. S. Animal models used to explore abdominal aortic aneurysms: A systematic review. European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 52 (4), 487-499 (2016).
- Tsui, J. C. Experimental models of abdominal aortic aneurysms. Open Cardiovascular Medicine Journal. 4, 221-230 (2010).
- Manning, M. W., Cassi, L. A., Huang, J., Szilvassy, S. J., Daugherty, A. Abdominal aortic aneurysms: Fresh insights from a novel animal model of the disease. Vascular Medicine. 7 (1), 45-54 (2002).
- Chiou, A. C., Chiu, B., Pearce, W. H. Murine aortic aneurysm produced by periarterial application of calcium chloride. Journal of Surgical Research. 99 (2), 371-376 (2001).
- Allaire, E., Guettier, C., Bruneval, P., Plissonnier, D., Michel, J. B. Cell-free arterial grafts: Morphologic characteristics of aortic isografts, allografts, and xenografts in rats. Journal of Vascular Surgery. 19 (3), 446-456 (1994).
- Anidjar, S., et al.
- Sun, J., et al. Mast cells modulate the pathogenesis of elastase-induced abdominal aortic aneurysms in mice. Journal of Clinical Investigation. 117 (11), 3359-3368 (2007).
- Bhamidipati, C. M., et al. Development of a novel murine model of aortic aneurysms using peri-adventitial elastase. Surgery. 152 (2), 238-246 (2012).
- Pyo, R., et al. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. Journal of Clinical Investigation. 105 (11), 1641-1649 (2000).
- Tanaka, A., Hasegawa, T., Chen, Z., Okita, Y., Okada, K. A novel rat model of abdominal aortic aneurysm using a combination of intraluminal elastase infusion and extraluminal calcium chloride exposure. Journal of Vascular Surgery. 50 (6), 1423-1432 (2009).
- Busch, A., et al. Four surgical modifications to the classic elastase perfusion aneurysm model enable haemodynamic alterations and extended elastase perfusion. European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 56 (1), 102-109 (2018).
- Liang, W., et al. KLF11 protects against venous thrombosis via suppressing tissue factor expression. Thrombosis and Haemostasis. , (2021).
- Marinov, G. R., et al. Can the infusion of elastase in the abdominal aorta of the Yucatan miniature swine consistently produce experimental aneurysms. Journal of Investigative Surgery. 10 (3), 129-150 (1997).
- Shannon, A. H., et al. Porcine model of infrarenal abdominal aortic aneurysm. Journal of Visualized Experiments. (153), e60169 (2019).
