Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Biology

Genotipizzazione rapida del tessuto mouse utilizzando Sigma Extract-N-Amp PCR Tissue Kit

doi: 10.3791/636 Published: January 22, 2008

Summary

La genotipizzazione completa di un campione coda di topo, tra cui la digestione dei tessuti e la lettura della PCR, è fatto in un'ora e mezza con Sigma SYBR Green Extract-N-Amp PCR Tissue kit.

Abstract

Il rilevamento del DNA genomico tramite PCR e rivelazione su un gel elettroforesi è un metodo standard che il genotipo di un campione di tessuto è determinata. La preparazione tradizionale dei tessuti per PCR-ready DNA spesso richiedere diverse ore o giorni, a seconda del campione di tessuto. Il genotipo del campione può quindi essere ritardata per diversi giorni, che non è un'opzione per i diversi tipi di esperimenti. Qui mostriamo la genotipizzazione completa di un campione coda di topo, tra cui la digestione dei tessuti e la lettura di PCR, in un'ora e mezza con Sigma SYBR Green Extract-N-Amp PCR Tissue kit. In primo luogo, dimostriamo i quindici minuti di estrazione del DNA dal campione di tessuto. Poi, dimostriamo il tempo reale lettura della amplificazione del campione, che consente l'individuazione di un campione positivo in quanto è di essere amplificati. Insieme, la lettura rapida estrazione e in tempo reale permettono una immediata identificazione del genotipo di numerosi tipi differenti di tessuti attraverso il metodo affidabile di PCR.

Protocol

Si prega di cliccare qui per visualizzare il protocollo.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit Reagent Kit Sigma-Aldrich XNATG Includes: Extraction Solution Neutralization Solution B Tissue Preparation Solution Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

DOWNLOAD MATERIALS LIST

Genotipizzazione rapida del tessuto mouse utilizzando Sigma Extract-N-Amp PCR Tissue Kit
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).More

Doan, L., Monuki, E. S. Rapid Genotyping of Mouse Tissue Using Sigma's Extract-N-Amp Tissue PCR Kit. J. Vis. Exp. (11), e636, doi:10.3791/636 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter