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Medicine

पोर्सिन वेन ग्राफ्ट रोग मॉडल की स्थापना और मूल्यांकन

Published: July 25, 2022 doi: 10.3791/63896
Automatic Translation
*1, *1, *2, *1, 2, 1, 3, 1, 1, 1, 1
1Department of Cardiovascular Surgery, the First Affiliated Hospital of Jinan University, 2Guangdong Provincial Key Laboratory of Laboratory Animals, Guangdong Laboratory Animals Monitoring Institute, 3The First Affiliated Hospital of Jinan University
* These authors contributed equally

Summary

इस प्रोटोकॉल में, कार्डियोपल्मोनरी बाईपास के बिना बाईं छाती की दीवार में एक छोटे से चीरे के माध्यम से नोवेल पिग वेन बाईपास ग्राफ्टिंग की गई थी। एक पोस्टऑपरेटिव पैथोलॉजी अध्ययन किया गया था, जिसमें अंतःशिरा मोटा होना दिखाया गया था।

Abstract

शिरापरक ग्राफ्ट रोग (वीजीडी) कोरोनरी धमनी बाईपास ग्राफ्ट (सीएबीजी) विफलता का प्रमुख कारण है। रोग तंत्र की जांच और चिकित्सीय रणनीतियों के विकास के लिए सीएबीजी-वीजीडी के बड़े पशु मॉडल की आवश्यकता होती है।

सर्जरी करने के लिए, हम तीसरे इंटरकोस्टल स्पेस के माध्यम से कार्डियक चैंबर में प्रवेश करते हैं और आंतरिक स्तन नस को सावधानीपूर्वक विच्छेदित करते हैं और इसे सामान्य खारा में डुबोते हैं। दाहिनी मुख्य कोरोनरी धमनी को तब इस्किमिया के लिए इलाज किया जाता है। लक्ष्य पोत को इंजेक्शन दिया जाता है, एक शंट प्लग रखा जाता है, और ग्राफ्ट नस के बाहर के छोर को एनास्टोमोस किया जाता है। आरोही महाधमनी आंशिक रूप से अवरुद्ध हो जाती है, और छिद्रण के बाद ग्राफ्ट नस का समीपस्थ छोर एनास्टोमोस हो जाता है। ग्राफ्ट नस को पैटेंसी के लिए जांचा जाता है, और समीपस्थ दाईं कोरोनरी धमनी को बंद कर दिया जाता है।

सीएबीजी सर्जरी एक संवहनी ग्राफ्ट के रूप में इसके उपयोग के लिए बाईं आंतरिक स्तन नस को काटने के लिए मिनीपिग्स में की जाती है। सीरम जैव रासायनिक परीक्षणों का उपयोग सर्जरी के बाद जानवरों की शारीरिक स्थिति का मूल्यांकन करने के लिए किया जाता है। अल्ट्रासाउंड परीक्षा से पता चलता है कि ग्राफ्ट पोत के समीपस्थ, मध्य और डिस्टल छोर अबाधित हैं। सर्जिकल मॉडल में, सीएबीजी सर्जरी के बाद हिस्टोलॉजिकल परीक्षा पर ग्राफ्ट में अशांत रक्त प्रवाह देखा जाता है, और ग्राफ्ट में इंटियल हाइपरप्लासिया से जुड़े शिरापरक ग्राफ्ट स्टेनोसिस देखा जाता है। यहां अध्ययन एक दोहराए जाने योग्य सीएबीजी-प्रेरित वीजीडी मॉडल की स्थापना के लिए विस्तृत शल्य चिकित्सा प्रक्रियाएं प्रदान करता है।

Introduction

यद्यपि हाल के वर्षों में कोरोनरी हृदय रोग की मृत्यु दर में काफी गिरावट आई है, संयुक्त राज्य अमेरिका में मध्यम आयु वर्ग के आधे वयस्क हर साल इस्केमिक हृदय से संबंधित लक्षण विकसित करते हैं, और एक तिहाई पुराने वयस्क कोरोनरीहृदय रोग से मर जाते हैं। कोरोनरी धमनी बाईपास ग्राफ्टिंग (सीएबीजी) मायोकार्डियल इस्किमिया में सुधार के लिए एक प्रभावी शल्य चिकित्सा पद्धति है, और इससे भी महत्वपूर्ण बात यह है कि यह मल्टीवेसल कोरोनरी धमनी रोग2 के उपचार के लिए एक अपूरणीय शल्य चिकित्सा पद्धति है। समय के साथ, हालांकि, संवहनी ग्राफ्ट सूजन, अंतःशिरा हाइपरप्लासिया और प्रगतिशील एथेरोस्क्लेरोसिस विकसित करते हैं, जो नस ग्राफ्ट विफलता या नस ग्राफ्ट रोग (वीजीडी) 3 का कारण बनता है। सीएबीजी के बाद के रोगियों में, यदि रेस्टेनोसिस होता है, तो कुछ मामलों में केवल रोगग्रस्त रक्त वाहिका को प्रतिस्थापित किया जा सकताहै। पुराने रोगियों और अतिरिक्त कोमोर्बिडिटी कोरोनरी धमनी बाईपास ग्राफ्टिंग को फिर से करना काफी चुनौतीपूर्ण बनाते हैं। ग्राफ्टेड रक्त वाहिकाओं से जुड़ी रोग संबंधी समस्याओं में देरी या नियंत्रण करना एक तत्काल समस्या है जिसे हल किया जाना है। रोग तंत्र की जांच और चिकित्सीय रणनीतियों के विकास के लिए सीएबीजी-वीजीडी के बड़े पशु मॉडल की आवश्यकता होती है। शोधकर्ताओं ने सफलतापूर्वक छोटे और बड़े जानवरों जैसे चूहों4, चूहों5, खरगोश6 और सूअर 7 में पशु वीजीडी मॉडल स्थापितकिए हैं। छोटे जानवरों की तुलना में, सूअरों जैसे बड़े जानवरों में मनुष्यों के समान शारीरिक संरचनाएं और शारीरिक विशेषताएं होती हैं औरउनका जीवनकाल लंबा होता है 8,9. इस प्रकार, बड़े जानवर शिरापरक ग्राफ्ट रोग में दीर्घकालिक रोग संबंधी परिवर्तनों की खोज और दवाओं या उपकरणों के प्रीक्लिनिकल परीक्षण के लिए अधिक उपयुक्त हैं। हमने और हमारी सहयोगी टीम ने पोर्सिन दिल की विफलता मॉडल स्थापित करने के लिए शल्य चिकित्सा तकनीकों को सफलतापूर्वक लागू किया है और इस मॉडल 10 में कार्डियक पैथोलॉजिकलपरिवर्तनों का वर्णन किया है।

सीएबीजी सर्जरी को नैदानिक अभ्यास में मानकीकृत किया गया है, लेकिन जब इसे वीजीडी पशु मॉडल की स्थापना पर लागू किया जाता है, तो प्रजातियों के बीच अंतर, पशु उपकरण और सुविधाओं का अधिग्रहण, पशु शल्य चिकित्सा संचालन, और पशु आहार और नर्सिंग शोधकर्ताओं के लिए बड़ी चुनौतियां हैं। नैदानिक अभ्यास के रूप में, वीजीडी पशु मॉडल स्थापित करने के लिए उपयोग की जाने वाली सीएबीजी सर्जरी के दृष्टिकोण में मिडलाइन स्टर्नोटॉमी11 और बाएं पार्श्व थोराकोटॉमी12 शामिल हैं। मिडलाइन स्टर्नोटॉमी आमतौर पर13,14 का उपयोग किया जाता है। हालांकि, इस दृष्टिकोण में मनुष्यों और जानवरों दोनों के लिए उच्च जोखिम हैं। थंकाम एट अल द्वारा रिपोर्ट किए गए अध्ययन में, मॉडलिंग के लिए उपयोग किए जाने वाले छह सूअरों में से दो की सर्जरीके दौरान मृत्यु हो गई। उच्च मॉडल मृत्यु दर अध्ययन लागत को बढ़ाती है और परिणामों की सटीकता को प्रभावित करती है। एक अध्ययन से पहले पता चला थाकि सूअरों में सीएबीजी-प्रेरित वीजीडी स्थापित करने के लिए बाईं छाती की दीवार चीरा संभव था। यहां, इस अध्ययन का उद्देश्य मिनीपिग्स में सीएबीजी-प्रेरित वीजीडी मॉडल के लिए प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य सर्जरी स्थापित करने और इस मॉडल के फेनोटाइप का मूल्यांकन करने के लिए एक चरण-दर-चरण प्रोटोकॉल का वर्णन करना है। प्रायोगिक प्रोटोकॉल संयुक्त रूप से कार्डियक सर्जरी और एनेस्थीसिया टीमों द्वारा डिजाइन किया गया था। बाएं तीसरे इंटरकोस्टल स्पेस के लिए सर्जिकल दृष्टिकोण सर्जरी से पहले प्रयोगशाला में अन्य मिनीपिग्स के शवों के अनुसार निर्धारित किया गया था, और एनेस्थीसिया विधि केंद्र16 में उपयोग की जाने वाली विधि के अनुसार की गई थी। पशु मॉडल का मूल्यांकन करने के लिए रक्त जैव रासायनिक परीक्षण, अल्ट्रासोनिक परीक्षा और हिस्टोलॉजी परीक्षा आयोजित की गई थी।

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Protocol

प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए प्रक्रियाओं को गुआंग्डोंग प्रयोगशाला पशु निगरानी संस्थान की संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था। सभी प्रयोग प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए गाइड (8 वां संस्करण, 2011, राष्ट्रीय अनुसंधान परिषद, यूएसए) के अनुसार आयोजित किए गए थे। शल्य चिकित्सा प्रक्रिया चित्रा 1 में दिखाया गया है।

1. जानवरों की प्रीऑपरेटिव तैयारी

  1. यादृच्छिक रूप से 30-35 किलोग्राम वजन वाले 10 3 महीने के पुरुष मिनीपिग्स को शाम समूह (एन = 5) और वीजीडी समूह (एन = 5) में विभाजित करें।
  2. बॉडी मास इंडेक्स (बीएमआई) का उपयोग करके सूअरों की प्रीऑपरेटिव और पोस्टऑपरेटिव स्वास्थ्य स्थितियों का मूल्यांकन करें। बीएमआई की गणना निम्नानुसार करें:
    बीएमआई = शरीर का वजन (किलो)/(शरीर की लंबाई [सेमी] × शरीर की लंबाई [सेमी])
    नोट: शरीर की लंबाई सुअर की नाक से पूंछ के आधार तक मापी जाती है।
  3. एनेस्थीसिया के बाद आकांक्षा से बचने के लिए सर्जरी से पहले जानवरों को 12 घंटे तक उपवास करें। संज्ञाहरण उपकरण और सर्जिकल उपकरण तैयार करें, जिसमें एक संज्ञाहरण मशीन, गैस, एनेस्थेटिक दवाएं, एक संज्ञाहरण पाइपलाइन, एक विशेष लैरींगोस्कोप, और सर्जिकल उपकरण, एक रिब रिटेनर, सीवन, एक थायरॉयड रिट्रैक्टर, सर्जिकल फोर्स आदि शामिल हैं। सर्जरी में उपयोग किए जाने वाले सभी उपकरणों को निष्फल करें।

2. सर्जरी के लिए जानवरों को तैयार करना

  1. जानवरों का वजन करें और एनेस्थेटिक खुराक की गणना करें। इंट्रामस्क्युलर रूप से एनेस्थेटिक मिश्रण का प्रबंधन करें जिसमें 2 मिलीग्राम / किग्रा 1: 1 टिलेटामाइन और ज़ोलाज़ेपाम, 0.2 मिलीग्राम / किग्रा डायजेपाम और 0.02 मिलीग्राम / किग्रा एट्रोपिन17 शामिल हैं। इंट्राऑपरेटिवदर्द से राहत के लिए फेंटानिल (50 मिलीग्राम / किग्रा) का उपयोग करें।
  2. सुनिश्चित करें कि एक उचित एनेस्थेटिक विमान प्राप्त किया जाता है और कान तक पहुंच स्थापित करने के लिए सीमांत कान की नस में एक निवास शिरापरक कैथेटर (20 जी) डालें। सुअर को ऑपरेशन टेबल पर स्थानांतरित करें और इसे लापरवाह स्थिति में रखें। अंगों को पट्टियों के साथ स्थिर करें और बाँझ आवरण के साथ सिर को ऊपर उठाएं।
    नोट: संज्ञाहरण की स्थिति की निगरानी नेत्रगोलक के केंद्रीय निर्धारण, मियोसिस, प्यूपिलरी रिफ्लेक्स की हानि और दर्द रिफ्लेक्स के नुकसान द्वारा की गई थी।  हृदय गति और रक्तचाप को बेसलाइन की तुलना में निचले स्तर पर बनाए रखा गया था। सर्जन को पक्षाघात के तहत एचआर, बीपी और अन्य मापदंडों की निगरानी करनी चाहिए और बेसलाइन से 20% ऊपर एचआर बढ़ने पर एनेस्थेटिक खुराक > बढ़ाना चाहिए।
  3. पशु चिकित्सा लैरींगोस्कोप का उपयोग करके एपिग्लोटिस और ग्लोटिस को उजागर करें। 7.0-7.5एफआर ट्यूब के साथ श्वासनली इंटुबैशन करें और इसे संज्ञाहरण श्वास सर्किट से कनेक्ट करें।
    नोट: वेंटिलेटर का उपयोग ज्वारीय मात्रा 280 एमएल, इंस्पिरेटरी / समाप्ति अनुपात 1: 2, श्वसन दर 20 गुना / मिनट, और सकारात्मक अंत-समाप्ति दबाव (5 सेमी एच2ओ) के साथ निरंतर सकारात्मक दबाव वेंटिलेशन के लिए किया जाता है।
  4. शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं के दौरान मांसपेशियों को आराम देने के लिए अंतःशिरा रूप से वेक्यूरोनियम ब्रोमाइड (0.1 मिलीग्राम / किग्रा) इंजेक्ट करें और 16-20 बीपीएम की श्वसन दर और 10 एमएल / किग्रा की ज्वारीय मात्रा पर संज्ञाहरण बनाए रखने के लिए 2% आइसोफ्लुरेन का उपयोग करें।
    नोट: वेकुरोनियम लकवाग्रस्त जानवरों में संज्ञाहरण की पर्याप्त गहराई सुनिश्चित करने के लिए दिया जाता है, खासकर जब प्रेरण दवा और आइसोफ्लुरेन की खुराक अनुशंसित के निचले छोर पर होती है।
  5. संज्ञाहरण के तहत सूखापन को रोकने के लिए सुअर की आंखों पर पशु चिकित्सक मलहम का उपयोग करें। सुअर के शरीर के तापमान को 38 डिग्री सेल्सियस ± 5 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखने के लिए इलेक्ट्रिक कंबल का उपयोग करें।
  6. हृदय गति, रक्त ऑक्सीजन के स्तर और शरीर के तापमान की निगरानी के लिए इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम का उपयोग करें।

3. सर्जिकल प्रक्रियाएं

  1. बाईं छाती की दीवार को शेव करें और शल्य चिकित्सा क्षेत्र को बाएं मैंडिबुलर कोण तक, गर्भनाल तक, बाएं पीछे की एक्सिलरी लाइन तक और दाईं ओर एक्सिलरी फ्रंट तक तैयार करने के लिए 0.7% आयोडीन और 75% अल्कोहल के तीन वैकल्पिक राउंड लागू करें। सर्जिकल क्षेत्र के चारों ओर एक बाँझ सर्जिकल ड्रेप रखें।
  2. तीसरे बाएं इंटरकोस्टल स्पेस में एक इलेक्ट्रिक चाकू के साथ 7-10 सेमी अनुप्रस्थ चीरा बनाएं और चमड़े के नीचे के ऊतकों को परत दर परत अलग करें (चित्रा 2 ए)। हड्डी की कैंची के साथ तीसरी पसली के 5-6 सेमी खंड को हटा दें और तीसरे पसली-उरोस्थि जोड़ को उजागर करने के बाद आंतरिक स्तन नस को एक रिट्रैक्टर द्वारा उजागर करें (चित्रा 2 बी)।
  3. उरोस्थि के बाईं ओर बाईं आंतरिक स्तन धमनी के साथ आंतरिक स्तन नस का पता लगाएं। संवहनी बल के साथ आंतरिक स्तन नस का एक कुंद विच्छेदन करें।
  4. एक इलेक्ट्रिक चाकू के साथ बाएं आंतरिक स्तन नस की शाखाओं के इलेक्ट्रोकोग्यूलेशन द्वारा हेमोस्टेसिस करें। यदि हेमोस्टेसिस अधूरा है, तो हेमोस्टेसिस के लिए सूती धागे बंधाव का उपयोग करें। कटाई के दौरान नस के दो सिरों को लिगेट करें और चिह्नित करें (चित्रा 2 सी)।
  5. हेपरिन सोडियम समाधान के 2 एमएल और सामान्य खारा के 98 एमएल को जोड़कर हेपरिन सामान्य खारा तैयार करें। नस को हटाने के बाद, हेपरिन सामान्य खारा को पूर्व-उपचार के लिए नस में इंजेक्ट करें (चित्रा 2 डी)। फिर, नस को सामान्य खारा में डालें और इसे बैकअप के लिए रखें।
  6. ऊपर वर्णित के रूप में एक समान चीरा बनाएं और शाम समूह में आंतरिक स्तन नस को हटा दें। पेरिकार्डियम खोलें, फिर शाम समूह में छाती की दीवार को बंद करें। कोरोनरी धमनी बाईपास ग्राफ्टिंग के बिना पैथोलॉजिकल नियंत्रण के लिए शाम समूह की आंतरिक स्तन नस का उपयोग करें।
  7. दाहिने कोरोनरी धमनी ट्रंक को उजागर करने के लिए पेरिकार्डियम पर एक इलेक्ट्रिक चाकू के साथ ~ 7 सेमी चीरा लगाएं। पेरिकार्डियम को निलंबित करें और 1-0 सर्जिकल सीवन (चित्रा 2 ई) के साथ दूसरी तरफ त्वचा पर सिलाई करें। आसपास के ऊतकों से दाहिने कोरोनरी धमनी ट्रंक को अलग करें (चित्रा 2 ई)।
  8. एक तार हुक के साथ महाधमनी के पास पृथक दाईं कोरोनरी धमनी के समीपस्थ छोर के नीचे ब्लॉकिंग बैंड को बाईपास करें और ब्लॉकिंग बैंड को कसकर और आराम करके मायोकार्डियम को 2 मिनट इस्किमिया और 5 मिनट के तीन चक्रों के साथ इलाज करें (चित्रा 2 एफ)। इस्किमिया / रीपरफ्यूजन पूर्व शर्त (चित्रा 2 जी) के दौरान इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम मॉनिटर के साथ हृदय की विद्युत गतिविधि की निगरानी करें।
    नोट: जब दाईं कोरोनरी धमनी अवरुद्ध हो जाती है, तो इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम हृदय गति और एसटी-सेगमेंट ऊंचाई में वृद्धि दिखाता है।
  9. सही कोरोनरी रक्त प्रवाह को अवरुद्ध करने के लिए बैंड को कस लें। रक्त वाहिकाओं को कवर करने वाले एपिकार्डियम को काटें। कोरोनरी धमनी की दीवार को उजागर करें, और रक्त वाहिकाओं की पूर्ववर्ती दीवार के केंद्र के खिलाफ सर्जिकल ब्लेड की नोक के साथ अनुदैर्ध्य रूप से काटें।
  10. लुमेन को काटने के बाद, कैंची से चीरा बड़ा करें और कोरोनरी शंट रखें। आंसू के माध्यम से डिस्टल कोरोनरी धमनी में एक कुंडल के साथ शंट के एक छोर को डालें। एक स्पष्ट ऑपरेटिव क्षेत्र सुनिश्चित करने के लिए कोरोनरी धमनियों में रक्त को खोखले कोरोनरी शंट में शंट करें (चित्रा 2 एच)।
  11. 7-0 पॉलीप्रोपाइलीन सीवन (चित्रा 2 आई) के साथ आंतरिक स्तन नस और दाहिने कोरोनरी ट्रंक के बीच एक एंड-टू-साइड निरंतर सीवन करें। आरोही महाधमनी के बीच में, एक अर्ध-रोड़ा क्लैंप के साथ आरोही महाधमनी की बाईं ओर की दीवार को अवरुद्ध करें।
  12. महाधमनी की दीवार में एक छोटा सा चीरा लगाने के लिए एक सर्जिकल ब्लेड का उपयोग करें, जहां एडवेंटिटिया काटा गया है, इस चीरा के माध्यम से महाधमनी गुहा में पंच के सिर के छोर पर स्लाइडिंग शाफ्ट के सिर के छोर को डालें, स्लाइडिंग शाफ्ट को बाहर की ओर अनुबंधित करें, और इसके ऊपर गोलाकार चाकू धमनी दीवार के एक टुकड़े को काट देता है। पंच द्वारा काटा गया ऊतक ब्लॉक व्यास में लगभग 3 मिमी है (चित्रा 2 जे)।
  13. शंट को बाहर निकालें। 6-0 पॉलीप्रोपाइलीन सीवन (चित्रा 2 के) के साथ आंतरिक स्तन नस और महाधमनी दीवार के बीच एक एंड-टू-साइड निरंतर सीवन करें। अर्ध-रोड़ा क्लैंप खोलें।
  14. अल्ट्रासाउंड का उपयोग करके एनास्टोमोसिस साइट के समीप दाईं कोरोनरी धमनी ट्रंक के बाईपास प्रवाह को रिकॉर्ड करें। इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम (चित्रा 2 एल) का उपयोग करके हृदय की विद्युत गतिविधि की निगरानी करें।
  15. छाती गुहा में एक अस्थायी जल निकासी ट्यूब (फादर: 16) का उपयोग करें ताकि रक्त और तरल पदार्थ को निकालने की अनुमति मिल सके। 1-0 सूती धागे का उपयोग करके पेरिकार्डियम चीरा को सिलें और प्रत्येक परत पर पेनिसिलिन (लगभग 0.5 ग्राम) पाउडर रखते हुए छाती की परत (अंदर से बाहर: प्लूरा परत, मांसपेशी परत, चमड़े के नीचे ऊतक परत, त्वचा की परत) को बंद करें। 1-0 सूती धागे का उपयोग करके त्वचा के चीरे को सिलने के बाद जल निकासी ट्यूब को हटा दें।

4. सर्जरी के बाद की देखभाल

  1. जानवरों के सहज सांस लेने के बाद एंडोट्राचेल ट्यूब को हटा दें। एनेस्थेसियोलॉजिस्ट को जानवर के जीवन शक्ति (जैसे, श्वसन दर, हृदय गति, ऑक्सीजन संतृप्ति, आदि) का आकलन करना चाहिए और जानवरों के जागने और सहज गतिविधि पर लौटने के बाद ईसीजी को हटा देना चाहिए। जानवरों को वापस फीडिंग रूम में भेजें और प्रजनन कक्ष में एक अन्य पेन में शाम जानवरों को रखें। जानवरों को एक इलेक्ट्रिक कंबल के साथ गर्म रखें। सर्जरी के बाद हर घंटे जानवरों का निरीक्षण करें (कम से कम 4 बार)।
  2. सर्जरी के अगले दिन जानवर को खिलाएं। पोस्ट-ऑपरेटिव थ्रोम्बोसिस को रोकने और घाव के दर्द को कम करने के लिए पशु फ़ीड में 7 दिनों के लिए एस्पिरिन (200 मिलीग्राम) 2x प्रतिदिन जोड़ें।
    नोट: आकांक्षा को रोकने के लिए सर्जरी के दिन जानवरों को खिलाने से बचें।
  3. पोस्ट-ऑपरेटिव संक्रमण (14,000 यूनिट प्रति किलोग्राम) को रोकने के लिए लगातार 7 दिनों के लिए रोजाना पेनिसिलिन 1x के इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शन के साथ जानवर को प्रशासित करें।

5. अल्ट्रासोनिक परीक्षा

  1. सीएबीजी सर्जरी के बाद, उच्च आवृत्ति रैखिक सरणी जांच को लपेटने के लिए बाँझ अल्ट्रासोनिक जांच आस्तीन का उपयोग करें। जांच को शिरापरक ग्राफ्ट की सतह पर रखें।
  2. दो आयामी अल्ट्रासाउंड मोड में ग्राफ्ट की रूपरेखा प्रदर्शित करें, फिर ग्राफ्ट में रक्त प्रवाह का पता लगाने के लिए कलर डॉप्लर मोड में शिफ्ट करें।

6. शिरापरक ग्राफ्ट ऊतक संग्रह

  1. जैव रासायनिक परीक्षण के लिए कान की नस के शिरापरक सर्किट से 10 एमएल रक्त का नमूना एकत्र करें। (तालिका 1)। 5 मिनट के लिए 1,000 x g पर रक्त के नमूने को सेंट्रीफ्यूज करें और एक स्वचालित जैव रासायनिक विश्लेषक के साथ जैव रासायनिक परीक्षण करें।
  2. जानवर को एनेस्थेटाइज करें जैसा कि पहले वर्णित है। संज्ञाहरण गहराई की पुष्टि होने पर, कान की सीमांत नस या फोरलिम्ब नस से 10% पोटेशियम क्लोराइड 0.5 एमएल / किग्रा शरीर के वजन को इंजेक्ट करें। फिर, सर्जरी के 30 दिन बाद नस ग्राफ्ट काटने के लिए इलेक्ट्रिक चाकू के साथ 10 सेमी का औसत उरोस्थि चीरा लगाएं। चरण 2.2 के अनुसार शरीर की स्थिति को ठीक करें, और नसबंदी और ड्रेप के प्लेसमेंट के बाद, उरोस्थि को विभाजित करने के लिए एक औसत उरोस्थि चीरा लगाएं। अलगाव के दौरान, मुख्य रक्त वाहिकाओं और हृदय से बचें, और परत दर परत ग्राफ्टेड रक्त वाहिकाओं को अलग करें।
  3. जल्दी से दिल से जुड़ने वाली बड़ी रक्त वाहिकाओं को काट दें, बर्फ के चिप्स पर हृदय और आरोही महाधमनी रखें, और ग्राफ्ट संवहनी पुल, जुड़े महाधमनी और दाईं कोरोनरी धमनी को हटा दें। 4 डिग्री सेल्सियस पर सामान्य खारा के साथ सभी नमूनों को धो लें।
  4. आकार में लगभग 3-4 सेमी के पूरे ग्राफ्ट पोत को लें, इसे 4-5 बराबर भागों में विभाजित करें, और क्रायोप्रिजर्वेशन ट्यूबों में स्थानांतरित करें। ट्यूबों को फ्लैश फ्रीज करने के लिए जल्दी से तरल नाइट्रोजन में डालें और भंडारण के लिए -80 डिग्री सेल्सियस अल्ट्रा-कम तापमान फ्रीजर में ले जाएं।
  5. विश्लेषण के लिए, ग्राफ्ट को बर्फ-ठंडा 0.9% खारा के साथ धोएं और इसे 4% पैराफॉर्मलडिहाइड समाधान में ठीक करें। 1: 10 के फिक्सेटिव समाधान के लिए ऊतक ब्लॉक आकार का अनुपात बनाए रखें और ऊतक को 12 घंटे से अधिक समय तक ठीक करें।
  6. हेमेटॉक्सिलिन के जलीय घोल के 50 एमएल में 3 मिनट के लिए खंडों को दाग दें। 10 सेकंड के लिए 0.5% हाइड्रोक्लोरिक एसिड इथेनॉल के 50 एमएल और 0.2% अमोनिया पानी के 50 एमएल से धोकर अनुभागों को अलग करें।
  7. 1 घंटे के लिए बहते पानी से कुल्ला करें और फिर 3 मिनट के लिए भिगोकर आसुत जल में साफ करें। 10 मिनट के लिए 70% और 90% इथेनॉल में निर्जलित करें। 2-3 मिनट के लिए 0.5% अल्कोहल ईओसिन धुंधला घोल के 50 एमएल में रखें।
  8. दाग वाले खंडों को शुद्ध इथेनॉल के साथ 10 मिनट के लिए निर्जलित करें और फिर नमूने को पारदर्शी बनाने के लिए 10 मिनट के लिए शुद्ध जाइलीन में भिगोदें। तटस्थ गोंद के साथ पारदर्शी वर्गों को ड्रिप करें और कवरलिप के साथ कवर करें। 40x आवर्धन पर प्रकाश माइक्रोस्कोप के तहत पैथोलॉजिकल वर्गों का निरीक्षण करें।

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Representative Results

बीएमआई और सीरम जैव रासायनिक सूचकांक
शाम और वीजीडी समूहों के बीच बीएमआई काफी अलग नहीं था (शाम बनाम वीजीडी, 22.05 किलोग्राम / सेमी2 ± 0.46 किलोग्राम / सेमी2 बनाम 21.14 किलोग्राम / सेमी2 ± 0.39 किलोग्राम / सेमी2, पी = 0.46)। सीरम जैव रासायनिक परिणाम तालिका 1 में सूचीबद्ध हैं। समूहों के बीच सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण परिवर्तन चार जैव रासायनिक सूचकांकों में पाए गए, जिनमें एस्पार्टेट एमिनोट्रांसफेरेज़ (एएसटी, शाम बनाम वीजीडी, 25.25 आईयू / एल ± 1.88 आईयू / एल ± 31.5 आईयू / एल ± 2.58 आईयू / एल), सीरम बिलीरुबिन (शाम बनाम वीजीडी, 2.5 μmol / ± L ± 0.5 μmol / L ± 0.05 μmol / L ± 0.05 μmol / L ± 0.05 μmol / L ± 0.05 μmol / L ± 0.05 μmol / L) शामिल हैं। और क्रिएटिनिन (शाम बनाम वीजीडी, 92.75 μmol / L ± 4.15 μmol / L बनाम 141.75 μmol / L ± 12.65 μmol / L)।

अल्ट्रासोनिक परीक्षा
शाम (एन = 5) और वीजीडी समूहों (एन = 5) में सभी जानवर बच गए। सीएबीजी की शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं को चित्र 1 में दिखाया गया है। औसत ऑपरेशन समय 105 मिनट ± 25 मिनट (सीमा: 90-160 मिनट) था, और औसत इंट्राऑपरेटिव रक्तस्राव की मात्रा 85 एमएल ± 35 एमएल (सीमा: 50-200 एमएल) थी। ऑपरेशन समय का प्रभाव मुख्य रूप से मानव से सुअर तक ऑपरेटर की प्रवीणता का संक्रमण है और इसका कोई विशेष महत्व नहीं है। चीरा एनास्टोमोसिस के बाद से श्वासनली को बाहर निकालने तक की औसत अवधि 17 मिनट ± 5 मिनट (सीमा: 15-30 मिनट) थी। अल्ट्रासाउंड परीक्षा से पता चला कि ग्राफ्टेड वाहिका की रक्त आपूर्ति में सामान्य कोरोनरी धमनी की तुलना में आंशिक पुनरावृत्ति थी, और समग्र रक्त प्रवाह की दिशा आम तौर पर सामान्य थी (चित्रा 3)। न्यूमोथोरैक्स, टैम्पोनैड, संक्रमण, या अन्य गंभीर जटिलताओं को पोस्टऑपरेटिव रूप से नहीं देखा गया था। शाम और वीजीडी समूहों के बीच वजन या बीएमआई में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं पाया गया, 1 महीने बाद।

अल्ट्रासोनिक परीक्षा ग्राफ्ट पोत के समीपस्थ छोर (चित्रा 3 ए, बी), संवहनी गुहा (चित्रा 3 सी, डी), और डिस्टल एंड (चित्रा 3 ई, एफ) पर की गई थी। प्रतिगामी प्रवाह ग्राफ्ट पोत के समीपस्थ और डिस्टल सिरों पर देखा गया था; हालांकि, कोई रक्त बहिर्वाह नहीं देखा गया था।

नसों में पैथोलॉजिकल परिवर्तन
प्रत्येक शिरापरक ग्राफ्ट को लंबाई द्वारा तीन खंडों में समान रूप से विभाजित किया गया था, और मूल्यांकन के लिए प्रत्येक खंड से एक खंड का चयन किया गया था और कोरोनरी धमनी स्टेनोसिस18 के लिए संशोधित प्राउडिलिट वर्गीकरण के अनुसार वर्गीकृत किया गया था। तीन खंडों से औसत मूल्यों को रोड़ा की डिग्री के परिणामों के रूप में अपनाया गया था। विशिष्ट वर्गीकरण निम्नानुसार था: ग्रेड I = 0-बिंदु, रेस्टेनोसिस के बिना सामान्य; ग्रेड II = 1-बिंदु, हल्के स्टेनोसिस <30%; ग्रेड III = 2-अंक, स्टेनोसिस 30% और 50% के बीच; ग्रेड IV = 3-अंक, 50% और 90% के बीच गंभीर स्टेनोसिस; ग्रेड वी = 4-अंक, सबटोटल रोड़ा >90%; और ग्रेड VI = 5-अंक, कुल रोड़ा, जिसमें शिरापरक ग्राफ्ट में कोई रक्त प्रवाह नहीं होता है। कोरोनरी धमनी स्टेनोसिस के लिए संशोधित प्राउडिलिट वर्गीकरण को मात्रात्मक परिणामों का आकलन करने के लिए अपनाया गया था। शाम समूह के लिए परिणाम 0.00 ± 0.00 था, जो कोई संवहनी रोड़ा नहीं दर्शाता था, जबकि सीएबीजी समूह के लिए परिणाम 3.12 ± 1.22 था। इसलिए, अंतर दो समूहों के बीच महत्वपूर्ण था (पी < 0.05, तालिका 2)।

माइक्रोस्कोप के नीचे, शाम समूह में, ट्यूनिका इंटिमा, ट्यूनिका मीडिया और शिरापरक ग्राफ्ट की शिरापरक दीवार सामान्य दिखाई दी। वीजीडी समूह में, सीएबीजी सर्जरी के 30 दिन बाद शिरापरक ग्राफ्ट के ट्यूनिका इंटिमा और ट्यूनिका माध्यम को काफी मोटा कर दिया गया था। ट्यूनिका इंटिमा को ट्यूनिका मीडिया से अस्पष्ट रूप से सीमांकित किया गया था। ट्यूनिका मीडिया की लोचदार परत गायब हो गई (चित्रा 4)। शिरापरक ग्राफ्ट का लुमेन हाइपरप्लास्टिक ऊतकों से भरा था (चित्रा 4)। पोत के व्यास में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन नहीं देखा गया था।

Figure 1
(ए-सी) प्री-ऑपरेशन: मिनीपिग्स का वजन करें, डिफिब्रिलेटर और वेंटिलेटर के प्रदर्शन की जांच करें, और वेंटिलेशन ट्यूब को कनेक्ट करें। (डी-एफ) संज्ञाहरण: मिनीपिग्स को संज्ञाहरण का एक इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शन दें, ऑपरेटिंग टेबल पर मिनीपिग को ठीक करें, श्वासनली इंटुबैशन के लिए वायुमार्ग को पूरी तरह से उजागर करें, वेंटिलेटर को कनेक्ट करें, और संज्ञाहरण को बनाए रखने के लिए इनहेलेशन एनेस्थीसिया का उपयोग करें। (G-I) ऑपरेशन के दौरान: मिनीपिग्स में कार्डियक फ़ंक्शन का प्रीऑपरेटिव अल्ट्रासाउंड मूल्यांकन करें और बाईं छाती की दीवार चीरा के माध्यम से कोरोनरी धमनी बाईपास ग्राफ्टिंग को पूरा करें। (J-L) ऑपरेशन के बाद: घावों को एनास्टोमोज़ करें और पोस्ट-ऑपरेटिव देखभाल और मिनीपिग्स के भोजन पर ध्यान दें। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 2
चित्र 2: शल्य चिकित्सा प्रक्रिया। (A) छाती की दीवार को काटें, (B) आंतरिक स्तन नस को अलग करें, (C) आंतरिक स्तन शिरा को हटा दें, (D) हेपरिन पूर्व शर्त करें, (E) पेरिकार्डियम को निलंबित करें, (F) मायोकार्डियल इस्केमिया रीपरफ्यूजन करें, (G) ईसीजी परिवर्तनों की निगरानी करें, (H) कोरोनरी रक्त प्रवाह को अवरुद्ध करें, (I) ग्राफ्ट पोत के समीपस्थ छोर को एनास्टोमोज़ करें, (J) डिस्टल कोरोनरी एनास्टोमोसिस साइट, (के) कोरोनरी धमनियों के लिए एनास्टोमोसिस डिस्टल, (एल) पूर्ण कोरोनरी धमनी बाईपास ग्राफ्टिंग। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 3
चित्र 3: अल्ट्रासोनिक परीक्षा। कोरोनरी धमनी बाईपास ग्राफ्टिंग के पूरा होने के बाद, अल्ट्रासाउंड द्वारा ग्राफ्टेड पोत के रक्त प्रवाह की स्थिरता का आकलन किया जाता है। (ए, सी, ई) सामान्य कोरोनरी रक्त प्रवाह छवियां। ग्राफ्टेड वाहिकाओं के (बी) समीपस्थ, (डी) मध्य और (एफ) डिस्टल सिरों पर निरंतर रक्त प्रवाह संकेत देखे जाते हैं। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 4
चित्र 4: हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण। (ए) सामान्य आंतरिक स्तन शिरा पैथोलॉजिकल सेक्शन ने स्पष्ट संवहनी पदानुक्रम दिखाया और कोई लुमेन स्टेनोसिस नहीं दिखाया। (बी, सी) कोरोनरी धमनी प्रत्यारोपण के 30 दिनों के बाद आंतरिक स्तन नस की विकृति से पता चला कि पोत की आंत अलग-अलग डिग्री तक मोटी हो गई थी, और लुमेन स्पष्ट रूप से संकुचित था। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

संकेतक शाम समूह (n = 5) ग्राफ्ट समूह (n = 5)
ALT (IU/L) 46 ±5.11 47.75±7.88
एएसटी (आईयू / एल) 25.25 ±1.88 31.5±2.58*
कुल प्रोटीन (IU / L) 63.12 ±.138 60.17±1.91
एल्ब्यूमिन (IU / L) 32.25 ±0.77 23.77±5.61
ग्लोब्युलिन (जी / एल) 30.87 ±.136 36.4±6.03
सीरम बिलीरुबिन (μmol / L) 2.5 ±0.47 4.5±0.14*
Total Bilirubin (μmol/ L) 0.025 ±0.14 0.92±0.33*
क्षारीय फॉस्फेट (IU / L) 103 ±19.3 104±16.04
ग्लूकोसामाइन (mmol / L) 4.44 ±0.36 5.96±0.42
यूरिया नाइट्रोजन (mmol/L) 2.46 ±0.17 2.89±0.65
सीरम क्रिएटिनिन μmol / 92.75 ±4.15 141.75±12.65*
कुल कोलेस्ट्रॉल (mmol / L) 2.37 ±0.12 2.16±0.06
ट्राइग्लिसराइड (mmol / L) 0.48 ±0.10 0.25±0.05
उच्च घनत्व लिपोप्रोटीन mmol / L 1.05 ±0.07 1.03±0.07
बहुत कम घनत्व वाले लिपोप्रोटीन (mmol / L) 1.43 ±0.06 1.29±0.04
लैक्टेट डिहाइड्रोजनेज (mmol / L) 384.75 ±26.8 478.25±49.58*

तालिका 1. सीरम जैव रासायनिक संकेतक। विश्लेषण के लिए सांख्यिकीय विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग किया गया था। डेटा को मानक त्रुटि (एन = 5) ± माध्य के रूप में व्यक्त किया गया था। माप डेटा की तुलना छात्र के टी-टेस्ट द्वारा विश्लेषण की गई थी। 0.05 से कम पी-वैल्यू ने सांख्यिकीय महत्व का संकेत दिया। *पी < 0.05, सीएबीजी बनाम शाम।

प्राउडिलिट वर्गीकरण
नमूने की संख्या सीएबीजी सर्जरी के तुरंत बाद स्कोर करें सीएबीजी सर्जरी के 30 दिन बाद स्कोर
1 0, 0, 0 2, 2, 2
2 0, 0, 0 1, 2, 2
3 0, 0, 0 2, 3, 2
4 0, 0, 0 3, 2, 2
5 0, 0, 0 2, 1, 2

तालिका 2. सर्जरी के तुरंत बाद और 30 दिनों के बाद ग्राफ्ट रोड़ा डिग्री के सांख्यिकीय परिणाम। संशोधित प्राउडिलिट वर्गीकरण पैमाने का उपयोग संवहनी रोड़ा डिग्री के लिए किया गया था: ग्रेड I = 0-बिंदु, रेस्टेनोसिस के बिना सामान्य; ग्रेड II = 1-बिंदु, हल्के स्टेनोसिस <30%; ग्रेड III = 2-अंक, स्टेनोसिस 30% और 50% के बीच; ग्रेड IV = 3-अंक, 50% और 90% के बीच गंभीर स्टेनोसिस; ग्रेड वी = 4-अंक, सबटोटल रोड़ा >90%; और ग्रेड VI = 5-अंक, कुल रोड़ा, जिसमें शिरापरक ग्राफ्ट में कोई रक्त प्रवाह नहीं होता है। डेटा में पांच शिरापरक ग्राफ्ट के परिणाम शामिल हैं, जिन्हें लंबाई द्वारा तीन वर्गों में समान रूप से विभाजित किया गया है।

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Discussion

इस अध्ययन में, हमने सीएबीजी-प्रेरित वीजीडी मॉडल विकसित करते समय पशु चयन, उपकरण तैयारी, शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं और पोस्ट-ऑपरेटिव मूल्यांकन के लिए प्रोटोकॉल का विस्तार से वर्णन किया। हमने सीएबीजी सर्जरी से पहले और बाद में शिरापरक ग्राफ्ट की अल्ट्रासोनिक परीक्षा और सर्जरी के 30 दिन बाद ग्राफ्ट की हिस्टोलॉजिकल परीक्षा की। सीएबीजी सर्जरी से पहले आंतरिक स्तन नस में रक्त प्रवाह सामान्य था, जबकि आंतरिक स्तन नस के ग्राफ्ट में प्रतिगामी प्रवाह देखा गया था। शाम ऑपरेशन समूह की तुलना में, ऑपरेशन समूह में जानवरों के यकृत और गुर्दे के कार्य को कुछ हद तक क्षतिग्रस्त कर दिया गया था। कोरोनरी ग्राफ्ट रोग की घटना को ध्यान में रखते हुए, मायोकार्डियल सिकुड़न के कमजोर होने के परिणामस्वरूप परिधीय ऊतकों का अपर्याप्त छिड़काव हुआ। शिरापरक ग्राफ्ट ने सीएबीजी सर्जरी के 30 दिन बाद अंतःशिरा हाइपरप्लासिया और संवहनी रीमॉडेलिंग दिखाया (चित्रा 4)। रक्त वाहिकाओं के आसपास फाइब्रोटिक परिवर्तन घाव भरने से जुड़े होते हैं, फाइब्रोब्लास्ट प्रसार दिन 1 से दिन 319 पर घाव भरने में जल्दी होता है, सक्रिय टाइप 1 कोलेजन और फाइब्रोनेक्टिन का उत्पादन दिन 4 से दिन 6 पर होता है, और साइटोप्लाज्मिक α-एसएम एक्टिन फाइब्रिल एकत्रीकरण दिन 7 से दिन 1419 पर होता है। तनाव फाइबर मायोफाइब्रोब्लास्ट के गठन का संकेत देते हैं, जो घाव संकुचन20 के साथ मेल खाता है। यह स्पष्ट नहीं है कि पेरिवास्कुलर फाइब्रोसिस सर्जिकल परिणामों को प्रभावित करता है या नहीं।

यहां, हमने नस ग्राफ्ट रोग मॉडल स्थापित करने के लिए मिनीपिग्स का चयन किया। जबकि चूहों जैसे छोटे जानवरों का उपयोग वीजीडी21 के पैथोलॉजिकल तंत्र का अध्ययन करने के लिए किया गया है, सूअर आकार, शरीर रचना विज्ञान और शरीर विज्ञान में मनुष्यों के समान हैं और इसलिए, मानव हृदय रोग के रोगजनन का अध्ययन करने के लिए याडिवाइस विकास के लिए एक उपकरण के रूप में अधिक उपयुक्त हैं। आंतरिक स्तन नसों को अक्सर चिकित्सकीय रूप से ग्राफ्ट के रूप में भी चुना जाता है। दो स्वतंत्र समूहों के नैदानिक अध्ययनों में पाया गया कि आंतरिक स्तन शिरा ग्राफ्ट में नस ग्राफ्ट घावों की उच्च घटनाओं की विशेषता है, और हमारे अध्ययन में समान रोग संबंधी परिवर्तन देखे गए (चित्रा 4)23,24। नैदानिक अभ्यास के रूप में, पशु सर्जरी में एक उपयुक्त शल्य चिकित्सा दृष्टिकोण का चयन सर्जरी की सफलता के लिए महत्वपूर्ण है; यहां, हमने होकम के बाएं थोराकोटॉमी11 का उल्लेख किया। हमने पाया कि बाएं थोराकोटॉमी स्पष्ट रूप से ऑपरेटिव क्षेत्र को उजागर कर सकता है, चीरा के आसपास की शारीरिक रचना को पहचानना आसान था, और रक्तस्राव की मात्रा कम थी। इसके अलावा, औसत थोराकोटॉमी की तुलना में, पार्श्व थोराकोटॉमी को उरोस्थि की आरी की आवश्यकता नहीं होती है, इसलिए सर्जिकल तनाव को कम किया जा सकता है।

एनेस्थीसिया एक सर्जिकल मॉडल की सफलता के लिए महत्वपूर्ण है। इस अध्ययन में, प्रोटोकॉल को कोटानी एट अल से संशोधित किया गया था, जिसमें केटामाइन और डायजेपाम के संयोजन को एनेस्थीसिया प्रेरण के रूप में उपयोग किया गया था और रखरखाव संज्ञाहरण25 के रूप में आइसोफ्लुरेन इनहेलेशन। इसके अतिरिक्त, एक शोध समूह ने दिखाया कि अंतःशिरा दवाएं रखरखाव संज्ञाहरण26 के लिए भी उपयुक्त थीं। सूअरों में एंडोट्रेकियल इंटुबैशन एक पशु शल्य चिकित्सा टीम के लिए मुश्किल हो सकता है। मानव वायुमार्ग की तुलना में, सूअरों की श्वासनली शरीर रचना ग्लोटिस के संपर्क को मुश्किल बनातीहै। यहां, ग्लोटिस को बेहतर ढंग से उजागर करने के लिए हमने सुअर के ऊपरी जबड़े को दबाया ताकि सुअर के ग्लोटिस को उजागर करने में मदद मिल सके (चित्रा 1 डी)। दूसरी ओर, एक प्रत्यक्ष लैरींगोस्कोपी या फाइबर-ऑप्टिक ब्रोंकोस्कोपी का उपयोग एंडोट्राचेल इंटुबैशन 28 में ग्लोटिस की कल्पना करने में मददकरेगा।

शिरापरक ग्राफ्ट रोग की पैथोलॉजिकल स्थिति को मुख्य रूप से तीन चरणों में विभाजित किया गया है: 1) तीव्र चरण (1 महीने के भीतर) घनास्त्रता; 2) सबस्यूट स्टेज (1-12 महीने) इंटियल हाइपरप्लासिया; 3) एथेरोस्क्लेरोसिस का देर से चरण (12 महीने से अधिक) गठन, जो ग्राफ्ट स्टेनोसिस और रोड़ा29 का कारण है। वीजीडी के तीव्र चरण में अधिकांश परिवर्तन परिचालन कारकों से संबंधित हैं, और अंतिम चरण में गठित एथेरोस्क्लेरोसिस अपरिवर्तनीय है। वीजीडी के रोगजनन, उपचार और रोकथाम के लिए सबस्यूट एंडोमेट्रियल मोटाई का अध्ययन बहुत महत्वपूर्ण है। यह भी महत्वपूर्ण है कि चुने गए ग्राफ्ट जहाज महान सफेनोस नस के ऊर्ध्वाधर जहाजों से अलग हैं। आंतरिक स्तन नस आमतौर पर कम हाइड्रोस्टेटिक दबाव सहन करती है, और महान सैफेनोस नस की तुलना में प्रत्यारोपण के बाद पैथोलॉजिकल परिवर्तन तेजी से होते हैं। हमारे मॉडल में, ग्राफ्टेड पोत के लुमेन को अवरुद्ध करने वाले विशिष्ट अंतःशिरा हाइपरप्लासिया को सर्जरी के 30 दिनों बाद हिस्टोलॉजिकल परीक्षा में देखा गया था, और अन्य नैदानिक अध्ययनों23,24 में समान रोग संबंधी परिवर्तन देखे गए हैं। मिनीपिग्स में आंतरिक स्तन नस का चयन करने के मॉडलिंग परिणाम फेनोटाइप में स्थिर हैं, मॉडलिंग का समय कम है, और वीजीडी के पैथोलॉजिकल परिवर्तनों में कमी की डिग्री अधिक है, जो अनुवर्ती अनुसंधान के विकास के लिए अनुकूल है।

मॉडल की कुछ सीमाएं भी हैं। बड़ी पशु मॉडलिंग प्रक्रिया में कुछ ठीक ऑपरेशन, पशु महत्वपूर्ण संकेतों की इंट्राऑपरेटिव निगरानी, और पोस्टऑपरेटिव पुनर्जीवन सभी को कुछ व्यावहारिक अनुभव की आवश्यकता होती है, जिसके लिए पेशेवर सर्जनों और एनेस्थेसियोलॉजिस्ट को प्रशिक्षण का मार्गदर्शन करने और जानवरों की आकस्मिक मृत्यु दर को बहुत कम करने की आवश्यकता होती है। बड़ी पशु सर्जरी के लिए विशिष्ट प्रयोगात्मक साइटों, पेशेवर स्टाफिंग और पर्याप्त वित्तीय सहायता की आवश्यकता होती है, जो छोटे संस्थानों के लिए भारी बोझ हो सकता है।

अंत में, पेशेवरों के मार्गदर्शन में, अच्छी तरह से सुसज्जित प्रयोगशालाएं इस मिनीपिग वीजीडी मॉडल की स्थापना करके वीजीडी के पैथोलॉजिकल परिवर्तनों का अध्ययन कर सकती हैं, जो वीजीडी के उपचार के लिए बहुत महत्वपूर्ण है।

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Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए हितों का कोई टकराव नहीं है।

Acknowledgments

लेखक तकनीकी सहायता, पशु देखभाल और नमूना संग्रह के लिए गुआंग्डोंग प्रयोगशाला पशु निगरानी संस्थान को धन्यवाद देते हैं। वे अल्ट्रासोनिक परीक्षा में तकनीकी सहायता के लिए शेन्ज़ेन मिंड्रे बायो-मेडिकल इलेक्ट्रॉनिक्स कं, लिमिटेड को भी धन्यवाद देते हैं। यह काम गुआंग्डोंग विज्ञान और प्रौद्योगिकी कार्यक्रम, चीन और जिनान विश्वविद्यालय केंद्रीय विश्वविद्यालयों के बुनियादी वैज्ञानिक अनुसंधान व्यवसाय व्यय परियोजना (2017 ए 020215076, 2008 ए 08003, और 21621409) द्वारा समर्थित था।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Aortic Punch Medtronic Inc. , America 3.0mm, 3.5mm, 4.0mm Used for proximal coronary bridge anastomosis
Automatic biochemical analyzer IDEXX Laboratories, Inc. America Catalyst One
Cardiac coronary artery bypass grafting instrument kit LANDANGER, France
Cardiogram monitor Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co, Ltd MEC-1000
Coronary Shunt AXIUS  OF-1500, OF-2500, OF-3000 The product temporarily blocks the coronary artery during arteriotomy to reduce the amount of bleeding in the surgical field and provide blood flow to the distal end during anastomosis.  The Axius shunt plug is not an implant and should be removed prior to completion of the anastomosis.  
Defibrillator MEDIANA Mediana D500
Diazepam Nanguo pharmaceutical Co. LTD, Guangdong, China H37023039  Narcotic inducer
Disposable manual electric knife Covidien, America E2516H
Electric negative pressure suction machine Shanghai Baojia Medical Instrument Co, Ltd YX932D
Esmolol Guangzhou Wanzheng Pharmaceutical Co. LTD H20055990 Emergency drugs
Ice machine  Local suppliers, Guangzhou, China
Lidocaine  Chengdu First Pharmaceutical Co. LTD H51021662 Emergency drugs
Luxtec headlight system Luxtec, America AX-1375-BIF Used for lighting fine parts during operation
Medical operation magnifier (glasses) Germany Lista co, LTD SuperVu Galilean 3.5× Used for fine site operation during operation
Multi-function high-frequency electrotome Shanghai Hutong Electronics Co, Ltd GD350-B
Nitrogen canister Local suppliers, Guangzhou, China
Nonabsorbable surgical suture (polypropylene suture) Johnson & Johnson, America 6-0, 7-0 Used to suture blood vessels.
Nonabsorbable suture (cotton thread) Covidien, America 1-0 Used for skin and muscle tissue tugging
Open heart surgery instrument kit Shanghai Medical Instrument (Group) Co., LTD
Propofol injection Xi 'an Libang Pharmaceutical Co. LTD H19990282 Anesthetic sedative
Refrigerator Local suppliers, Guangzhou, China
Respiratory anesthesia machine for animal Shenzhen Reward Life Technology Co, Ltd, China R620-S1
Semi-occlusion clamp Xinhua Surgical Instrument Co., Ltd. ZL1701RB Temporarily cut off the aortic flow
vecuronium bromide Richter, Hungary  JX20090127 Muscle relaxant
Veterinary ultrasound system  Royal Philips, Netherlands CX50
Zoletil Virbac, France Zoletil 50  Animal narcotic

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References

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