Summary
Nous présentons ici une méthode d’évaluation de la qualité basée sur une technique de diffusion multiple de la lumière pour évaluer la qualité de l’Indigo Naturalis.
Abstract
Le contrôle de la qualité de la phytothérapie chinoise est un élément crucial de la recherche et du développement de la phytothérapie chinoise. Face aux défis de la modernisation et de l’internationalisation de la phytothérapie chinoise, il est urgent d’établir des procédures approfondies et efficaces pour l’identification de la qualité de la phytothérapie chinoise, et il y a un besoin urgent de nouvelles techniques d’analyse et de test qui soient efficaces, précises et respectueuses de l’environnement.
La diffusion multiple de la lumière est une méthode analytique de pointe qui permet d’évaluer avec précision et rapidité la qualité de la phytothérapie chinoise sans modifier la nature ou l’état de l’échantillon ni utiliser de réactifs organiques. Indigo Naturalis est considéré comme un bon remède contre l’hyperthermie pédiatrique, le psoriasis, la leucémie et la colite ulcéreuse. Dans cette étude, le processus d’ajout de poudre d’Indigo Naturalis dans l’eau a été enregistré avec précision à l’aide d’un instrument de diffusion de la lumière multiple.
Les mesures qualitatives et quantitatives de l’instrument peuvent être utilisées pour capturer avec précision la trajectoire globale et le comportement de coulage de la poudre d’Indigo Naturalis dans l’eau et pour établir une méthode d’évaluation rapide de la qualité de l’Indigo Naturalis avec les spectrogrammes de transmission et de rétrodiffusion de l’échantillon comme indicateurs qualitatifs et l’indice de stabilité comme indicateur quantitatif. La technique analytique basée sur la diffusion multiple de la lumière fournit une méthode rapide, précise, écologique et respectueuse de l’environnement pour l’évaluation de la qualité de l’Indigo Naturalis et soutient le développement et la transformation de l’Indigo Naturalis de haute qualité.
Introduction
En médecine traditionnelle chinoise, au cours du traitement de la maladie, l’efficacité clinique des médicaments et la sécurité du traitement sont directement influencées par la qualité de la phytothérapie chinoise. En utilisant une technologie d’identification de pointe, on peut évaluer l’efficacité de la phytothérapie chinoise et garantir la sécurité de l’utilisateur. La méthode de test de l’eau de la phytothérapie chinoise consiste à immerger les herbes dans de l’eau ou un solvant, puis à déterminer rapidement et précisément l’authenticité du médicament en observant les changements de couleur, de taille et de forme1.
C’était à l’origine un bon choix pour l’identification de la médecine chinoise. Cependant, l’inconvénient de la méthode traditionnelle d’analyse de l’eau est que la précision et la sensibilité de la distinction de l’authenticité de la médecine chinoise sont faibles en raison de la subjectivité de l’observation à l’œil nu2. L’un des principaux matériaux médicinaux utilisés dans la méthode d’analyse de l’eau est l’Indigo Naturalis, considéré comme un remède efficace contre l’hyperthermie pédiatrique, le psoriasis, la leucémie et la colite ulcéreuse3. Le véritable Indigo Naturalis flotte à la surface de l’eau et l’eau ne devient pas bleu foncé après avoir été secouée. Cependant, le faux Indigo Naturalis a des particules qui coulent et l’eau deviendra bleu foncé après avoir été secouée4. Son principe est dû à l’indigo hydrophobe et facilement flottable, à l’indirubine et à d’autres composants organiques de l’Indigo Naturalis de haute qualité. Au contraire, en raison d’une faible teneur en matière organique, d’une grande quantité de chaux et d’une texture lourde, certaines particules dopées au faux Indigo Naturalis couleront rapidement5. Cependant, cette méthode n’est qu’une simple identification qualitative, et elle limite l’identification rapide de l’authenticité de la phytothérapie chinoise et ne révèle pas les changements de l’Indigo Naturalis dans l’eau.
La technologie de diffusion multiple de la lumière est une technologie qui permet de mesurer le balayage de signaux lumineux multi-angles sur la base d’un laser traversant l’échantillon. La lumière incidente sera diffusée lorsqu’elle pénètre dans l’échantillon ou rencontre des particules. Si la lumière diffusée pénètre à travers l’échantillon, un signal lumineux de transmission se forme ; Si la concentration de l’échantillon est élevée, la lumière sera réfléchie par les particules, formant un signal lumineux de rétrodiffusion. Les changements d’intensité lumineuse reflètent les changements de concentration et de taille des particules dans la préparation liquide6. Les multiples instruments de diffusion de la lumière peuvent analyser rapidement et avec précision des phénomènes tels que l’émulsification, la floculation, la précipitation et la rupture de la suspension, de l’émulsion et de la mousse liquide par la technologie de diffusion de la lumière multiple, ainsi qu’analyser quantitativement des caractéristiques telles que le taux d’occurrence des phénomènes ci-dessus.
La technologie de diffusion multiple de la lumière a démontré des avantages significatifs dans la surveillance de la stabilité des particules7, la clarification du vin rouge8 et le contrôle de la qualité de la fermentation du lait9. Grâce à cette technologie, la méthode traditionnelle d’analyse de l’eau d’Indigo Naturalis peut être intuitive, quantitative et scientifique. Par conséquent, sur la base du principe de la technologie de diffusion multiple de la lumière, cette étude a établi une méthode d’évaluation rapide de la qualité de l’Indigo Naturalis, en prenant l’indice de stabilité turbiscan (TSI) de l’échantillon comme indice de contrôle de la qualité (Figure 1).
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Protocol
1. Préparation de l’échantillon d’essai
- Mettez en place quatre lots différents de poudre à base de plantes Indigo Naturalis pour le test. Passez chaque échantillon à travers le septième tamis et le neuvième tamis à tour de rôle et prélevez l’échantillon entre le septième et le neuvième tamis5.
REMARQUE : La taille moyenne de l’ouverture du septième tamis est de 125 μm ± 5,8 μm. La taille moyenne de l’ouverture du neuvième tamis est de 75 μm ± 4,1 μm. - Peser avec précision 0,2 g de l’échantillon (poudre d’Indigo Naturalis) sur un papier de pesée et le mettre de côté.
2. Ajout d’échantillons
- Construisez un support en fer et placez un anneau en fer avec un entonnoir de 5 cm de diamètre dessus.
- À l’aide d’une pipette, ajouter 20 ml d’eau pure dans le flacon en verre de l’échantillon (diamètre du fond 2,6 cm, hauteur 6 cm). Placez le flacon en verre d’échantillon directement sous l’entonnoir de manière à ce que le bord inférieur de l’entonnoir affleure l’embouchure du flacon.
REMARQUE : Nettoyez l’extérieur du flacon en verre d’échantillon avec une serviette en papier propre et non abrasive et inspectez la surface du verre pour voir s’il y a des marques visibles. S’il y en a, changez la bouteille en verre. Veillez à ne pas renverser lorsque vous ajoutez du liquide. - Libérez l’échantillon à une hauteur de 80 cm du bord inférieur de l’entonnoir afin qu’il puisse glisser librement le long de l’entonnoir dans le flacon d’échantillon.
3. Fonctionnement de l’instrument
- Allumez l’instrument Turbiscan Lab et réchauffez-le pendant 30 minutes.
- Créez le fichier. Cliquez sur le bouton Créer un fichier dans le menu supérieur (ou sur la fonction Nouveau fichier dans le menu Fichier) pour créer un nouveau fichier de mesure vide. Définissez son nom et son emplacement de sauvegarde (par défaut, le dossier de données se trouve à l’emplacement suivant : « C :/users/admin/Formulaction/FAnalyser/Data »).
- Cliquez sur le bouton Afficher la température du laboratoire Turbiscan dans le menu supérieur pour régler la température cible de l’instrument sur 25 °C.
REMARQUE : La température de l’instrument est influencée par la température ambiante, veillez donc à ajuster la température ambiante. - Cliquez sur Analyse du programme dans le menu supérieur pour accéder au programme d’analyse de configuration. Ajoutez le programme à la liste et, dans la barre des tâches, ajoutez 30 s en tant que cycle et 21 balayages à la séquence d’analyse. Sélectionnez ce programme d’analyse pour toutes les mesures ultérieures.
- Déplacez le flacon d’échantillon préparé dans le système de mesure. Après avoir configuré le programme, cliquez sur Démarrer pour démarrer la mesure.
REMARQUE : Veillez à ne pas secouer la bouteille en verre lorsque vous la déplacez et ne la déplacez que légèrement. - Après l’acquisition des données, cliquez sur la liste des paramètres calculés pour calculer automatiquement la TSI.
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Representative Results
Les figures 2A à D correspondent respectivement à S1, S2, S3 et S4 d’Indigo Naturalis. A est de l’Indigo Naturalis de haute qualité, montrant la même transmission de la lumière à n’importe quelle hauteur dans un délai de 0 à 10 min, ce qui est très stable. B est l’Indigo Naturalis commun, et sa transmission de la lumière fluctue légèrement avec le changement de temps et est généralement stable. C et D sont des produits contrefaits et de qualité inférieure. Il peut y avoir deux conditions dans les spectrogrammes de transmission du faux Indigo Naturalis, à savoir que la lumière de transmission en C a diminué rapidement au premier moment de la mesure, et que la lumière de transmission au fond de la bouteille d’échantillon était significativement inférieure à celle en haut, ce qui indique que le dépôt s’est produit dans la bouteille d’échantillon pour la première fois, Et la déposition a été très rapide. Cependant, la lumière de transmission en D est stable à l’instant zéro puis diminue lentement avec l’allongement du temps. Par rapport au C, il indique qu’il y a une sédimentation lente dans le flacon d’échantillon.
Les figures 3A à D correspondent respectivement à S1, S2, S3 et S4 d’Indigo Naturalis. À partir des données spectrales de la rétrodiffusion, on peut en déduire grossièrement que les données de l’échantillon sont cohérentes avec la lumière de transmission. Aucune fluctuation ou de faibles fluctuations (figure 3A et figure 3B, respectivement) indiquent que l’échantillon est stable. La figure 3C, D peut être trouble en raison de la sédimentation de l’échantillon, et la fluctuation augmente, ce qui conduit à l’instabilité de l’échantillon.
En comparant le spectrogramme de transmission (Figure 2) et les spectrogrammes de rétrodiffusion (Figure 3) des quatre Indigo Naturalis avec les instantanés de début et de fin des vidéos (Figure 4) et de la vidéo supplémentaire S1, de la vidéo supplémentaire S2, de la vidéo supplémentaire S3 et de la vidéo supplémentaire S4 capturés par l’instrument de diffusion de la lumière multiple, l’authenticité de l’Indigo Naturalis peut être rapidement et grossièrement identifiée.
Avec l’allongement du temps de mesure, les spectrogrammes de transmission et les spectrogrammes de rétrodiffusion d’Indigo Naturalis de haute qualité devraient fluctuer peu ou pas du tout, et les spectrogrammes de transmission et de rétrodiffusion d’Indigo Naturalis pseudo ou inférieur peuvent diminuer progressivement ou fortement. La vidéo supplémentaire S1, la vidéo supplémentaire S2, la vidéo supplémentaire S3 et la vidéo supplémentaire S4 ont également clairement reflété ce résultat. Les valeurs de la STI reflètent l’accumulation des changements d’intensité de la lumière de transmission ou de la rétrodiffusion par rapport à la mesure précédente pendant la durée de la mesure, ainsi que la variation complète de la concentration volumique et de la taille des particules de l’échantillon pendant toute la période de balayage. La qualité des quatre types d’Indigo Naturalis peut être distinguée avec précision en comparant leur TSI à 10 min (figure 5 et tableau 1). Plus la valeur TSI est élevée, plus le système sera instable et plus la plage de variation de l’échantillon sera grande de10. Si la valeur TSI est de <10 pendant la période d’analyse, l’échantillon sera considéré comme stable. Par conséquent, le protocole actuel montre une méthode d’identification rapide de l’Indigo Naturalis de bonne qualité basée sur la STI dans un instrument de diffusion multiple de la lumière.
Figure 1 : Principe d’évaluation de la qualité de l’Indigo Naturalis par diffusion multiple de la lumière. L’indigo et l’indirubine sont les principales raisons de la forte hydrophobicité de l’Indigo Naturalis. La teneur en indigo et en indirubine détermine la vitesse de sédimentation des particules. Grâce à cette caractéristique, un instrument à diffusion multiple de la lumière peut distinguer différentes qualités d’Indigo Naturalis. L’instrument de diffusion de la lumière multiple est doté d’une technologie de diffusion de la lumière multiple, et sa sonde de mesure se compose d’une source de lumière proche infrarouge pulsée (λ = 880 nm) et de deux détecteurs synchrones. L’un d’eux est un détecteur de lumière à transmission, qui est utilisé pour recevoir la lumière passant à travers le flacon d’échantillon (0° avec la lumière incidente) et pour déterminer l’échantillon clair. L’autre est un détecteur de lumière à rétrodiffusion, qui est utilisé pour recevoir la lumière de rétrodiffusion de l’échantillon (à 45° de la lumière incidente) et pour déterminer l’échantillon à forte concentration. La sonde de mesure balaie l’ensemble de la cellule d’échantillon de bas en haut, une fois tous les 40 μm, et collecte les données de la lumière de transmission (T) et de la lumière de rétrodiffusion (BS). En réglant les temps de mesure et de balayage, l’échantillon sera scanné à plusieurs reprises, et le signal et l’acquisition de données seront traités par le convertisseur courant-tension pour obtenir un atlas représentant les caractéristiques de stabilité de l’échantillon. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 2 : Spectrogrammes de transmission de quatre Indigo Naturalis dans l’instrument de diffusion de la lumière multiple. A-D correspondent respectivement à S1, S2, S3 et S4 d’Indigo Naturalis. (A) Indigo Naturalis stable et de haute qualité, présentant la même transmission de la lumière à n’importe quelle hauteur dans un rayon de 0 à 10 min. (B) L’Indigo Naturalis commun et sa transmission de la lumière fluctuent légèrement avec le changement de temps et sont généralement stables. (C, D) Produits contrefaits et de qualité inférieure. (C) Le voyant de transmission au fond de la bouteille d’échantillon était significativement plus bas que celui en haut, ce qui indique que le dépôt s’est produit dans la bouteille d’échantillon à un stade précoce et que le dépôt a été très rapide. (D) Cependant, la lumière de transmission est stable à l’heure zéro, puis diminue lentement avec le temps. Par rapport au C, il indique qu’il y a une sédimentation lente dans le flacon d’échantillon. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 3 : Spectrogrammes de rétrodiffusion de quatre Indigo Naturalis dans l’instrument de diffusion de lumière multiple. A-D correspondent respectivement à S1, S2, S3 et S4 d’Indigo Naturalis. À partir des données spectrales de la rétrodiffusion, on peut en déduire grossièrement que les données de l’échantillon sont cohérentes avec la lumière de transmission. (A) Pas de fluctuation, ce qui indique que l’échantillon est très stable. (B) La fluctuation est faible, ce qui indique que l’échantillon est relativement stable. (C, D) La turbidité est due à la sédimentation de l’échantillon, et la fluctuation augmente, ce qui conduit à l’instabilité de l’échantillon. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 4 : Instantanés de début et de fin des vidéos du processus de décantation de quatre Indigo Naturalis dans l’instrument de diffusion de la lumière multiple. A-D correspondent respectivement à S1, S2, S3 et S4 d’Indigo Naturalis. Dans les résultats, en comparant les images de numérisation de 0 min et 10 min, on peut voir que A (vidéo supplémentaire S1) et B (vidéo supplémentaire S2) sont très clairs dans l’ensemble du processus. C (Supplemental Video S3) est d’abord partiellement trouble, puis complètement trouble à la fin. D (Vidéo supplémentaire S4) passe graduellement de la clarification à la turbidité. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
Figure 5 : STI de quatre Indigo Naturalis de 0 min à 10 min. Le graphique montre la courbe de TSI avec le temps de numérisation. En fonction de la variation de la courbe TSI, S4 a la pente la plus élevée et la valeur STI change de manière particulièrement significative. Ensuite, la pente de S3 est également relativement importante, et la valeur TSI a connu une lente augmentation. Cependant, les pentes de S1 et S2 sont proches de zéro et les valeurs TSI changent moins. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.
| Non. | Contenu indigo | Teneur en indirubine | TSI de 10 min |
| S1 (Épisode 1) | 9,00 % ± 0,38 % | 0,60 % ± 0,00 % | 0,61 ± 0,06 |
| S2 (en anglais seulement) | 2,07 % ± 0,01 % | 0,20 % ± 0,00 % | 2,74 ± 0,14 |
| S3 (en anglais seulement) | 1,40 % ± 0,02 % | 0,00 % ± 0,00 % | 28,46 ± 3,51 |
| S4 (en anglais seulement) | 0,00 % ± 0,00 % | 0,00 % ± 0,00 % | 68,75 ± 1,28 |
Tableau 1 : IST de quatre Indigo Naturalis à 10 min (n = 3). D’après la forte hydrophobicité de l’Indigo Naturalis, on peut en déduire que la teneur en indigo et en indirubine de l’Indigo Naturalis détermine sa qualité. Lorsque la teneur en indigo et en indirubine est élevée, l’échantillon flotte presque entièrement à la surface de l’eau, ce qui donne de faibles valeurs STI. À 10 min, la séquence TSI de chaque lot est S4 > S3 > S2 > S1. Pour S1 et S2, la valeur TSI est assez faible, ce qui reflète le fait que les échantillons sont relativement stables et de bonne qualité. Pour S3 et S4, la valeur TSI est extrêmement élevée, ce qui reflète également l’instabilité de l’échantillon et la qualité est inférieure.
Vidéo supplémentaire S1 : Vidéo d’animation du processus de décantation d’un Indigo Naturalis de bonne qualité dans l’instrument de diffusion de la lumière multiple. Dans l’ensemble de la vidéo d’animation, on peut voir que S1 est presque inchangé, ce qui indique qu’il est relativement stable. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Vidéo supplémentaire S2 : Vidéo d’animation du processus de décantation de l’Indigo Naturalis commun dans l’instrument de diffusion de la lumière multiple. Dans l’ensemble de la vidéo d’animation, on peut voir que S2 est presque inchangé, ce qui indique qu’il est relativement stable. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Vidéo supplémentaire S3 : Vidéo d’animation du processus de décantation du faux Indigo Naturalis dans l’instrument de diffusion de la lumière multiple. Dans l’ensemble de la vidéo d’animation, on peut voir que S3 est trouble à la troisième minute de balayage, ce qui indique une instabilité. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Vidéo supplémentaire S4 : Vidéo d’animation du processus de décantation du faux Indigo Naturalis dans l’instrument de diffusion de la lumière multiple. Dans toute la vidéo d’animation, on peut voir que S4 est trouble à la troisième minute de balayage, ce qui indique une instabilité. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
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Discussion
Selon la médecine traditionnelle chinoise, l’Indigo Naturalis a le pouvoir d’éliminer la chaleur et de la désintoxication, de refroidir le sang, d’éliminer les taches, de purger le feu et d’arrêter les convulsions. D’après des essais cliniques contrôlés randomisés en double aveugle11,12,13, Indigo Naturalis est efficace dans le traitement du psoriasis, de la colite ulcéreuse et de la leucémie aiguë promyélocytaire en plus de son traitement traditionnel de la toux et des mucosités, des symptômes hémorragiques, des plaies et des gonflements, de la chaleur du foie et de l’épilepsie. En raison de la variété d’Indigo Naturalis, la différence de qualité est importante et le processus de détection du contenu est compliqué. D’une part, les sources d’Indigo Naturalis comprennent Strobilanthes cusia (Nees) Kuntze, Persicaria tinctoria (Aiton) Spach et Isatis tinctoria L., l’environnement géographique et les différentes périodes de récolte entraînent des différences de qualité inhérentes14. D’autre part, le processus de préparation de l’Indigo Naturalis nécessite des étapes telles que la fermentation par trempage, le battage de l’indigo à la chaux, le raffinage des mouches d’eau, etc. Cependant, ce processus est susceptible de produire différentes qualités d’Indigo Naturalis, et la teneur en Indigo Naturalis varie d’un lot à l’autre. À l’heure actuelle, plusieurs études ont montré que le taux de qualification de la teneur en composantes de l’indice d’Indigo Naturalis est faible. Les produits contrefaits et de qualité inférieure causent des problèmes de qualité majeurs, ce qui rend extrêmement difficile l’utilisation clinique d’Indigo Naturalis15,16,17. Par conséquent, il est urgent et indispensable pour Indigo Naturalis de développer une méthode standardisée de contrôle de la qualité.
Une étape clé du processus décrit est que la bouteille en verre contenant l’échantillon doit être déplacée à l’intérieur de la cuve d’échantillon le plus rapidement possible tout en évitant de secouer la bouteille. Dans le cas contraire, une manipulation incohérente peut produire des résultats trompeurs. Deuxièmement, la température ambiante aura un impact sur la température de consigne de l’instrument. Lorsque la température ambiante dépasse 30 °C et que la température de l’instrument est inférieure à la température ambiante, la température de l’instrument augmente. Il convient de noter que la température ambiante doit être contrôlée en dessous de la température de l’instrument.
Bien que la diffusion multiple de la lumière présente des avantages uniques par rapport aux méthodes traditionnelles, elle a également ses limites. Tout d’abord, la diffusion multiplex de la lumière ne peut pas donner de manière définitive le contenu exact d’un échantillon, mais ne peut qu’identifier l’authenticité et une plage approximativement donnée. Deuxièmement, en l’absence d’une autre identification de la phytothérapie chinoise, elle n’est actuellement pertinente que pour l’évaluation rapide de la qualité de l’Indigo Naturalis. Troisièmement, les critères de la recherche contemporaine sur l’évaluation de la qualité sont loin d’être remplis en dépendant de multiples méthodologies de diffusion de la lumière et de multiples instruments de diffusion de la lumière.
Par rapport à la méthode existante d’analyse de l’eau, l’importance de la méthode de diffusion multiple de la lumière réside dans les points suivants. Tout d’abord, il a une sensibilité et une fiabilité élevées. La sensibilité et la résolution sont beaucoup plus élevées que celles de l’observation à l’œil nu. Le dispositif de diffusion de la lumière multiple peut capturer l’évolution de la solution au fil du temps et créer une vidéo animée de l’ensemble du processus. Deuxièmement, il peut être analysé qualitativement et quantitativement. Grâce à la mesure sans contact, l’instrument peut déterminer automatiquement la stabilité de l’échantillon à l’aide de ses caractéristiques optiques (lumière de transmission, lumière de rétrodiffusion, TSI et taille des particules).
À l’avenir, nous pensons que cette méthode sera éventuellement utile dans le domaine du contrôle de la qualité de la médecine traditionnelle chinoise, en particulier dans l’évaluation de l’authenticité. Cette étude a confirmé la validité et la précision de l’approche de diffusion multiple de la lumière dans l’évaluation rapide de la qualité de la médecine chinoise en utilisant Indigo Naturalis comme exemple. Par conséquent, au fur et à mesure que l’équipement et la technologie d’application progressent continuellement, de multiples technologies de diffusion de la lumière seront combinées à d’autres techniques de détection pour se compléter, ce qui aura un impact plus important sur le contrôle de la qualité des médicaments à base de plantes chinois à l’avenir.
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Disclosures
Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à divulguer.
Acknowledgments
Le travail tient à remercier le soutien de la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (n° 82173976), du Programme national de recherche et de développement (n° 2018YFC1707205) et du Laboratoire d’État des médicaments innovants et des équipements pharmaceutiques à haute économie d’énergie de l’Université de médecine traditionnelle chinoise du Jiangxi (n° 2018YFC1707205) et du Laboratoire d’État des médicaments innovants et des équipements pharmaceutiques à haute économie d’énergie de l’Université de médecine traditionnelle chinoise du Jiangxi (n° 2018). GZSYS202003).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Analytical balance (1/10,000) | Sartorious, Germany | BSA224S | www.sartorius.com.cn |
| Funnel | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | Diameter 5 cm | www.cdkelongchem.com |
| Indigo Naturalis S1 | Xianyou, Fujian | 20210501 | |
| Indigo Naturalis S2 | Yaan, Sichuan | 20201102 | |
| Indigo Naturalis S3 | Xianyou, Fujian | 20161012 | |
| Indigo Naturalis S4 | Xianyou, Fujian | 20180305 | |
| Iron ring | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | / | www.cdkelongchem.com |
| Iron stand | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | / | www.cdkelongchem.com |
| Mili-Q ultra-pure water meter | Milipore, USA | Mili-Q | www.merckmillipore.com |
| Ninth sieve | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | Average aperture size 75 µm | www.cdkelongchem.com |
| Sample bottle | French Formulaction Company | Bottom diameter 2.6 cm, height 6 cm | www.formulaction.com |
| Seventh sieve | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | Average aperture size 125 µm | www.cdkelongchem.com |
| Turbisoft Lab multiple light scattering instrument | French Formulaction Company | Turbisoft Lab 2.3.1.125 Fanalyser 1.3.5 | www.formulaction.com |
| Weighing paper | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | / | www.cdkelongchem.com |
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