Summary
Her presenterer vi en kvalitetsevalueringsmetode basert på en multippel lysspredningsteknikk for å evaluere kvaliteten på Indigo Naturalis.
Abstract
Kvalitetskontroll av kinesisk urtemedisin er en avgjørende del av kinesisk urtemedisin forskning og utvikling. Stilt overfor utfordringene med modernisering og internasjonalisering av kinesisk urtemedisin, er det presserende å etablere grundige og effektive prosedyrer for kvalitetsidentifikasjon av kinesisk urtemedisin, og det er et presserende behov for nye analytiske og testteknikker som er effektive, nøyaktige og miljøvennlige.
Flere lysspredning er en banebrytende og analytisk metode som nøyaktig og raskt kan vurdere kvaliteten på kinesisk urtemedisin uten å endre prøvens natur eller tilstand eller bruke organiske reagenser. Indigo Naturalis regnes som et godt middel for pediatrisk hypertermi, psoriasis, leukemi og ulcerøs kolitt. I denne studien ble prosessen med tilsetning av Indigo Naturalis-pulver i vann registrert nøyaktig ved bruk av et multippel lysspredningsinstrument.
De kvalitative og kvantitative målingene av instrumentet kan brukes til å nøyaktig fange den generelle banen og synkeoppførselen til Indigo Naturalis-pulver i vann og å etablere en rask evalueringsmetode for kvaliteten på Indigo Naturalis med overførings- og tilbakespredningsspektrogrammer av prøven som kvalitative indikatorer og stabilitetsindeks som en kvantitativ indikator. Den analytiske teknikken basert på flere lysspredning gir en rask, nøyaktig, grønn og miljøvennlig metode for kvalitetsevaluering av Indigo Naturalis og støtter utvikling og transformasjon av høykvalitets Indigo Naturalis.
Introduction
I tradisjonell kinesisk medisin, i løpet av sykdomsbehandlingen, blir den kliniske effekten av medisiner og sikkerheten i behandlingsforløpet direkte påvirket av kvaliteten på kinesisk urtemedisin. Ved hjelp av banebrytende identifikasjonsteknologi kan man vurdere effekten av kinesisk urtemedisin og garantere brukersikkerhet. Den kinesiske urtemedisinens vanntestmetode refererer til å senke urter i vann eller løsningsmiddel, og deretter raskt og nøyaktig bestemme medisinens ekthet ved å observere endringene i farge, størrelse og form1.
Det var opprinnelig et godt valg for identifisering av kinesisk medisin. Ulempen med den tradisjonelle vanntestmetoden er imidlertid at nøyaktigheten og følsomheten for å skille ektheten til kinesisk medisin er lav på grunn av subjektiviteten til observasjon med det blotte øye2. Et av de viktigste medisinske materialene som brukes i vanntestmetoden er Indigo Naturalis, betraktet som et effektivt middel for pediatrisk hypertermi, psoriasis, leukemi og ulcerøs kolitt3. Den ekte Indigo Naturalis flyter på overflaten av vann, og vannet blir ikke mørkeblått etter risting. Den falske Indigo Naturalis har imidlertid partikler som synker, og vannet blir mørkeblått etter risting4. Prinsippet skyldes hydrofobe og lett flytende indigo, indirubin og andre organiske komponenter av høy kvalitet Indigo Naturalis. Tvert imot, på grunn av lavt organisk materiale, en stor mengde kalk og tung tekstur, vil noen partikler dopet med falsk Indigo Naturalis synke raskt5. Imidlertid er denne metoden bare en enkel kvalitativ identifikasjon, og den begrenser den raske identifiseringen av ektheten av kinesisk urtemedisin og unnlater å avsløre endringene av Indigo Naturalis i vann.
Flere lysspredningsteknologi er en teknologi som kan måle flervinklet lyssignalskanning basert på en laser som passerer gjennom prøven. Innfallslyset vil bli spredt når det trenger inn i prøven eller møter partikler. Hvis det spredte lyset trenger gjennom prøven, dannes et overføringslyssignal; Hvis prøvekonsentrasjonen er høy, vil lyset reflekteres av partiklene og danne et tilbakespredningslyssignal. Endringene i lysintensitet reflekterer endringene i partikkelkonsentrasjon og partikkelstørrelse i væskepreparat6. De mange lysspredningsinstrumentene kan raskt og nøyaktig analysere fenomener som emulgering, flokkulering, utfelling og brudd på suspensjon, emulsjon og skumvæske ved hjelp av flere lysspredningsteknologier, samt kvantitativt analysere egenskaper som forekomsten av de ovennevnte fenomenene.
Flere lysspredningsteknologi har vist betydelige fordeler i overvåking av partikkelstabilitet7, rødvinsavklaring8 og kvalitetskontroll av melkegjæring9. Ved hjelp av denne teknologien kan den tradisjonelle vanntestmetoden til Indigo Naturalis være intuitiv, kvantitativ og vitenskapelig. Derfor, basert på prinsippet om multippel lysspredningsteknologi, etablerte denne studien en rask evalueringsmetode for kvaliteten på Indigo Naturalis, og tok Turbiscan stabilitetsindeks (TSI) av prøven som indeks for kvalitetskontroll (figur 1).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Utarbeidelse av testprøve
- Sett opp fire forskjellige batcher av Indigo Naturalis urtepulver for testen. Før hver prøve gjennom den syvende sikten og den niende sikten etter tur og samle prøven mellom den syvende og niende sikten5.
MERK: Den gjennomsnittlige blenderåpningsstørrelsen på den syvende sikten er 125 μm ± 5,8 μm. Den gjennomsnittlige blenderåpningsstørrelsen på den niende sikten er 75 μm ± 4,1 μm. - Vei nøyaktig 0,2 g av prøven (Indigo Naturalis pulver) på et veiepapir og sett det til side.
2. Eksempel tillegg
- Bygg et jernstøttestativ og legg en jernring med en trakt på 5 cm diameter på den.
- Bruk en pipette til å tilsette 20 ml rent vann til glassflasken (bunndiameter 2,6 cm, høyde 6 cm). Plasser glassflasken rett under trakten slik at den nedre kanten av trakten er i flukt med flaskens munn.
MERK: Rengjør utsiden av hetteglassprøven med et rent, ikke-slipende papirhåndkle og kontroller glassoverflaten for synlige merker. Hvis det er, bytt glassflaske. Vær forsiktig så du ikke søler når du tilsetter væske. - Slipp prøven i en høyde på 80 cm fra traktens nedre kant slik at den kan gli fritt langs trakten inn i prøveflasken.
3. Instrument drift
- Slå på Turbiscan Lab-instrumentet og varm det opp i 30 minutter.
- Opprett filen. Klikk på Opprett fil-knappen i toppmenyen (eller Ny fil-funksjonen på Fil-menyen) for å opprette en ny, tom målefil. Definer navnet og lagre plasseringen (som standard er datamappen plassert på: "C: / users / admin / Formulaction / FAnalyser / Data".
- Klikk på knappen Vis turbiscan labtemperatur i toppmenyen for å stille instrumentets måltemperatur til 25 °C.
MERK: Instrumenttemperaturen påvirkes av romtemperaturen, så vær nøye med å justere omgivelsestemperaturen. - Klikk på Program Scan i toppmenyen for å gå inn i installasjonsanalyseprogrammet. Legg programmet til listen, og legg til 30 s som en syklus og 21 skanninger i analysesekvensen på oppgavelinjen. Velg dette analyseprogrammet for alle påfølgende målinger.
- Flytt hetteglasset med klargjort prøvetaking inn i målesystemet. Når du har konfigurert programmet, klikker du Start for å starte målingen.
MERK: Vær forsiktig så du ikke rister glassflasken når du beveger deg, og flytt den bare litt. - Etter datainnsamling, klikk på listen over beregnede parametere for automatisk å beregne TSI.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Figur 2A-D tilsvarer henholdsvis S1, S2, S3 og S4 av Indigo Naturalis. A er av høy kvalitet Indigo Naturalis, og viser samme lystransmisjon i alle høyder innen 0-10 minutter, noe som er veldig stabilt. B er den vanlige Indigo Naturalis, og dens lystransmisjon svinger litt med tidsendringen og er generelt stabil. C og D er falske og dårligere produkter. Det kan være to forhold i overføringsspektrogrammene til falske Indigo Naturalis, nemlig overføringslyset i C avtok raskt ved første måletidspunkt, og overføringslyset i bunnen av prøveflasken var betydelig lavere enn det øverst, noe som indikerer at avsetningen skjedde i prøveflasken første gang, Og avsetningen var veldig rask. Imidlertid er overføringslyset i D stabilt ved nulltid og reduseres deretter sakte med forlengelsen av tiden. Sammenlignet med C indikerer det at det er langsom sedimentering i prøveflasken.
Figur 3A-D tilsvarer henholdsvis S1, S2, S3 og S4 av Indigo Naturalis. Fra spektrale data for tilbakespredningslys kan det grovt utledes at prøvedataene er konsistente med overføringslyset. Ingen eller små svingninger (henholdsvis figur 3A og figur 3B) indikerer at utvalget er stabilt. Figur 3C, D kan være uklar på grunn av sedimentering av prøven, og svingningen øker, noe som fører til ustabilitet i prøven.
Ved å sammenligne overføringsspektrogrammet (figur 2) og tilbakespredningsspektrogrammene (figur 3) til de fire Indigo Naturalis med start- og sluttbildene av videoene (figur 4) og tilleggsvideo S1, tilleggsvideo S2, tilleggsvideo S3 og tilleggsvideo S4 fanget av instrumentet for flere lysspredning, kan autentisiteten til Indigo Naturalis raskt og grovt identifiseres.
Med forlengelsen av måletiden bør overføringsspektrogrammene og tilbakespredningsspektrogrammene av høykvalitets Indigo Naturalis svinge lite eller ikke i det hele tatt, og overføringsspektrogrammene og tilbakespredningsspektrogrammene til pseudo eller dårligere Indigo Naturalis kan gradvis eller kraftig reduseres. Supplerende video S1, tilleggsvideo S2, supplerende video S3 og tilleggsvideo S4 gjenspeilte også dette resultatet tydelig. TSI-verdiene reflekterer akkumuleringen av intensitetsendringene til overføringslys eller tilbakespredningslys sammenlignet med forrige måling i måletiden, og det er også den omfattende endringen av volumkonsentrasjonen og partikkelstørrelsen til prøven i løpet av hele skanneperioden. Kvaliteten på de fire typene Indigo Naturalis kan skilles nøyaktig ved å kontrastere deres TSI etter 10 minutter (figur 5 og tabell 1). Jo høyere TSI-verdien er, desto mer ustabilt blir systemet, og jo større blir endringsområdet for prøven10. Hvis TSI-verdien er <10 i løpet av skanneperioden, vil prøven bli ansett som stabil. Derfor viser den nåværende protokollen en metode for rask identifisering av god kvalitet Indigo Naturalis basert på TSI i et multippel lysspredningsinstrument.
Figur 1: Prinsipp for evaluering av kvaliteten på Indigo Naturalis ved flere lysspredning. Indigo og indirubin er hovedårsakene til den sterke hydrofobisiteten til Indigo Naturalis. Innholdet av indigo og indirubin bestemmer sedimenteringshastigheten til partikler. Med denne egenskapen kan et multippel lysspredningsinstrument skille forskjellige kvaliteter av Indigo Naturalis. Multippel lysspredningsinstrumentet har flere lysspredningsteknologier, og målesonden består av en pulserende nær-infrarød lyskilde (λ = 880 nm) og to synkrone detektorer. En av dem er en transmisjonslysdetektor, som brukes til å motta lyset som passerer gjennom prøveflasken (0 ° med innfallslyset) og for å bestemme den klare prøven. Den andre er en tilbakespredningslysdetektor, som brukes til å motta tilbakespredningslyset til prøven (45 ° fra det innfallende lyset) og for å bestemme høykonsentrasjonsprøven. Målesonden skanner hele prøvecellen fra bunn til topp, en gang hver 40 μm, og samler inn data fra overføringslyset (T) og tilbakespredningslyset (BS). Ved å stille inn måletider og skannetid, vil prøven bli skannet gjentatte ganger, og signal- og datainnsamlingen vil bli behandlet av strømspenningsomformeren for å oppnå et atlas som representerer stabilitetsegenskapene til prøven. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 2: Transmisjonsspektrogrammer av fire Indigo Naturalis i instrumentet for multippel lysspredning. A-D tilsvarer henholdsvis S1, S2, S3 og S4 av Indigo Naturalis. (A) Stabil Indigo Naturalis av høy kvalitet, som viser samme lystransmisjon i alle høyder innen 0-10 minutter. (B) Den vanlige Indigo Naturalis og dens lystransmisjon svinger litt med tidsendringen og er generelt stabil. (C, D) Falske og dårligere produkter. (C) Overføringslyset i bunnen av prøveflasken var betydelig lavere enn det øverst, noe som indikerer at avsetningen skjedde i prøveflasken på et tidlig stadium, og avsetningen var veldig rask. (D) Overføringslyset er imidlertid stabilt ved nulltid og avtar deretter sakte med tiden. Sammenlignet med C indikerer det at det er langsom sedimentering i prøveflasken. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 3: Tilbakespredningsspektrogrammer av fire Indigo Naturalis i instrumentet for multippel lysspredning. A-D tilsvarer henholdsvis S1, S2, S3 og S4 av Indigo Naturalis. Fra spektrale data for tilbakespredningslys kan det grovt utledes at prøvedataene er konsistente med overføringslyset. (A) Ingen svingninger, noe som indikerer at utvalget er svært stabilt. (B) Svingningene er små, noe som indikerer at utvalget er relativt stabilt. (C, D) Turbiditet skyldes sedimentering av prøven, og svingningen øker, noe som fører til prøvens ustabilitet. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 4: Start og slutt øyeblikksbilder av videoene av sedimenteringsprosessen av fire Indigo Naturalis i multippel lysspredningsinstrumentet. A-D tilsvarer henholdsvis S1, S2, S3 og S4 av Indigo Naturalis. I resultatene, ved å sammenligne skanningsbildene på 0 min og 10 min, kan man se at A (Supplemental Video S1) og B (Supplemental Video S2) er veldig tydelige i hele prosessen. C (Supplemental Video S3) er delvis uklar i begynnelsen, og deretter helt uklar til slutt. D (Supplemental Video S4) endres gradvis fra avklaring til turbiditet. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 5: TSI på fire Indigo Naturalis fra 0 min til 10 min. Grafen viser kurven til TSI med skannetid. I henhold til variasjonen i TSI-kurven har S4 den høyeste hellingen og TSI-verdien endres spesielt betydelig. Deretter er skråningen til S3 også relativt stor, og TSI-verdien har vært i en langsom økning. Hellingene til S1 og S2 er imidlertid nær null, og TSI-verdiene endres mindre. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
| Nei. | Indigo-innhold | Indirubin innhold | TSI på 10 min |
| S1 | 9,00 % ± 0,38 % | 0,60 % ± 0,00 % | 0,61 ± 0,06 |
| S2 | 2,07 % ± 0,01 % | 0,20 % ± 0,00 % | 2,74 ± 0,14 |
| S3 | 1,40 % ± 0,02 % | 0,00 % ± 0,00 % | 28.46 ± 3,51 |
| S4 | 0,00 % ± 0,00 % | 0,00 % ± 0,00 % | 68,75 ± 1,28 |
Tabell 1: TSI for fire Indigo Naturalis etter 10 minutter (n = 3). Ifølge den sterke hydrofobisiteten til Indigo Naturalis, kan det utledes at indigo- og indirubininnholdet i Indigo Naturalis bestemmer kvaliteten. Når innholdet av indigo og indirubin er høyt, flyter prøven nesten helt på vannoverflaten, noe som resulterer i små TSI-verdier. Ved 10 minutter er TSI-sekvensen for hver batch S4 > S3 > S2 > S1. For S1 og S2 er TSI-verdien ganske liten, noe som gjenspeiler at prøvene er relativt stabile og av god kvalitet. For S3 og S4 er TSI-verdien ekstremt stor, noe som også gjenspeiler prøvens ustabilitet og kvaliteten er dårligere.
Tilleggsvideo S1: Animasjonsvideo av sedimenteringsprosessen til en Indigo Naturalis av god kvalitet i instrumentet for flere lysspredning. I hele animasjonsvideoen kan man se at S1 er nesten uendret, noe som indikerer at den er relativt stabil. Klikk her for å laste ned denne filen.
Tilleggsvideo S2: Animasjonsvideo av sedimenteringsprosessen til vanlig Indigo Naturalis i instrumentet for multippel lysspredning. I hele animasjonsvideoen kan det sees at S2 er nesten uendret, noe som indikerer at den er relativt stabil. Klikk her for å laste ned denne filen.
Supplerende Video S3: Animasjonsvideo av sedimenteringsprosessen med falsk Indigo Naturalis i instrumentet for flere lysspredning. I hele animasjonsvideoen kan det sees at S3 er uklar i tredje minutt av skanning, noe som indikerer ustabilitet. Klikk her for å laste ned denne filen.
Supplerende video S4: Animasjonsvideo av sedimenteringsprosessen med falsk Indigo Naturalis i instrumentet for flere lysspredning. I hele animasjonsvideoen kan det sees at S4 er uklar i tredje minutt av skanning, noe som indikerer ustabilitet. Klikk her for å laste ned denne filen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Ifølge tradisjonell kinesisk medisin har Indigo Naturalis makt til å fjerne varme og avgiftning, avkjøle blod, eliminere flekker, rense ild og arrestere kramper. Basert på randomiserte dobbeltblinde kontrollerte kliniske studier11,12,13, er Indigo Naturalis effektiv i behandlingen av psoriasis, ulcerøs kolitt og akutt promyelocytisk leukemi i tillegg til sin tradisjonelle behandling av hoste og slim, hemorragiske symptomer, sår og hevelser, levervarme og epilepsi. På grunn av mangfoldet av Indigo Naturalis er kvalitetsforskjellen stor, og innholdsdeteksjonsprosessen er komplisert. På den ene siden inkluderer kildene til Indigo Naturalis Strobilanthes cusia (Nees) Kuntze, Persicaria tinctoria (Aiton) Spach og Isatis tinctoria L., det geografiske miljøet og ulike høstingstider fører til de iboende kvalitetsforskjellene14. På den annen side krever forberedelsesprosessen av Indigo Naturalis trinn som bløtleggingsgjæring, kalkslående indigo, vannflueraffinering, etc. Imidlertid vil denne prosessen sannsynligvis produsere forskjellige kvaliteter av Indigo Naturalis, og innholdet av Indigo Naturalis varierer fra batch til batch. For tiden har flere studier vist at kvalifiseringsgraden av indekskomponentinnholdet i Indigo Naturalis er lav. Falske og dårligere produkter forårsaker store kvalitetsproblemer, noe som gjør det ekstremt vanskelig å bruke Indigo Naturalis klinisk15,16,17. Derfor er det presserende og uunnværlig for Indigo Naturalis å utvikle en standardisert kvalitetskontrollmetode.
Et viktig trinn i prosessen som beskrives er at glassflasken som inneholder prøven skal flyttes inn i prøvetanken så raskt som mulig, samtidig som man unngår å riste flasken. Ellers kan inkonsekvent håndtering gi misvisende resultater. For det andre vil omgivelsestemperaturen ha innvirkning på instrumentets innstilte temperatur. Når romtemperaturen overstiger 30 °C, og instrumenttemperaturen er lavere enn romtemperaturen, vil instrumenttemperaturen stige. Det er verdt å merke seg at romtemperaturen skal kontrolleres under instrumenttemperaturen.
Selv om flere lysspredning har unike fordeler i forhold til tradisjonelle metoder, har den også sine begrensninger. For det første kan multiplex lysspredning ikke definitivt gi det nøyaktige innholdet i en prøve, men kan bare identifisere ektheten og et grovt gitt område. For det andre, uten ytterligere identifisering av kinesisk urtemedisin, er det foreløpig bare relevant for kvalitetsvurderingen av Indigo Naturalis. For det tredje er kriteriene for moderne kvalitetsevalueringsforskning langt fra å bli oppfylt ved å avhenge av flere lysspredningsmetoder og flere lysspredningsinstrumenter.
Sammenlignet med den eksisterende vanntestmetoden ligger betydningen av multippel lysspredningsmetoden i følgende punkter. For det første har den høy følsomhet og pålitelighet. Følsomheten og oppløsningen er mye høyere enn for observasjon med det blotte øye. Den flere lysspredningsenheten kan fange hvordan løsningen endres over tid og lage en animert video av hele prosessen. For det andre kan det analyseres kvalitativt og kvantitativt. Gjennom berøringsfri måling kan instrumentet automatisk bestemme prøvens stabilitet ved hjelp av sine optiske egenskaper (overføringslys, tilbakespredningslys, TSI og partikkelstørrelse).
I fremtiden tror vi at denne metoden til slutt vil være nyttig innen tradisjonell kinesisk medisin kvalitetskontroll, spesielt i vurderingen av ektheten. Denne studien støttet gyldigheten og nøyaktigheten av tilnærmingen til flere lysspredning i den raske vurderingen av kinesisk medisinkvalitet ved hjelp av Indigo Naturalis som et eksempel. Følgelig, etter hvert som utstyr og applikasjonsteknologi utvikler seg kontinuerlig, vil flere lysspredningsteknologier kombineres med andre deteksjonsteknikker for å utfylle hverandre, noe som har større innvirkning på kvalitetskontrollen av kinesiske urtemedisiner i fremtiden.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingen interessekonflikter å opplyse.
Acknowledgments
Arbeidet ønsker å anerkjenne støtte fra National Natural Science Foundation of China (nr. 82173976), National Key Research and Development Program (nr. 2018YFC1707205), og State Key Laboratory of Innovative Drugs and High Energy Saving Pharmaceutical Equipment, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine (nr. GZSYS202003).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Analytical balance (1/10,000) | Sartorious, Germany | BSA224S | www.sartorius.com.cn |
| Funnel | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | Diameter 5 cm | www.cdkelongchem.com |
| Indigo Naturalis S1 | Xianyou, Fujian | 20210501 | |
| Indigo Naturalis S2 | Yaan, Sichuan | 20201102 | |
| Indigo Naturalis S3 | Xianyou, Fujian | 20161012 | |
| Indigo Naturalis S4 | Xianyou, Fujian | 20180305 | |
| Iron ring | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | / | www.cdkelongchem.com |
| Iron stand | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | / | www.cdkelongchem.com |
| Mili-Q ultra-pure water meter | Milipore, USA | Mili-Q | www.merckmillipore.com |
| Ninth sieve | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | Average aperture size 75 µm | www.cdkelongchem.com |
| Sample bottle | French Formulaction Company | Bottom diameter 2.6 cm, height 6 cm | www.formulaction.com |
| Seventh sieve | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | Average aperture size 125 µm | www.cdkelongchem.com |
| Turbisoft Lab multiple light scattering instrument | French Formulaction Company | Turbisoft Lab 2.3.1.125 Fanalyser 1.3.5 | www.formulaction.com |
| Weighing paper | Chengdu Kelong Chemical Co. LTD | / | www.cdkelongchem.com |
References
- Li, G. M. The application of water test in the identification of traditional Chinese medicine. Chinese Medicine Modern Distance Education of China. 19 (23), 153-155 (2021).
- Ye, B. Analysis of application effect of water test method in identification of traditional Chinese medicine. Heilongjiang Medicine Journal. 33 (02), 283-285 (2020).
- Yang, Q. Y., et al. From natural dye to herbal medicine: a systematic review of chemical constituents, pharmacological effects and clinical applications of indigo naturalis. Chinese Medicine. 15 (1), 127 (2020).
- Chen, C. The application value of water test method in the identification of Chinese medicine. Journal of Traditional Chinese Medicine Management. 30 (10), 133-134 (2022).
- Liu, X. M., et al. Establishment and application of a rapid quality inspection method for Indigo Naturalis based on quantitative portrayal of water testing process. Acta Pharmacologica Sinica. 57 (11), 3411-3418 (2022).
- Mengual, O., Meunier, G., Cayre, I., Puech, K., Snabre, P. Characterisation of instability of concentrated dispersions by a new optical analyser: the TURBISCAN MA 1000. Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects. 152 (1), 111-123 (1999).
- Olatunji, O. N., Du, J., Hintz, W., Tomas, J. Application of particle sedimentation analysis in sterically-stabilized TiO2 particles stability assessment. Advanced Powder Technology. 27 (4), 1325-1336 (2016).
- Ferrentino, G., et al. Fining of red wine monitored by multiple light scattering. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 65 (27), 5523-5530 (2017).
- Ramezani, M., Ferrentino, G., Morozova, K., Scampicchio, M. Multiple light scattering measurements for online monitoring of milk fermentation. Foods. 10 (7), 1582 (2021).
- Yang, H. B., et al. A new approach to evaluate the particle growth and sedimentation of dispersed polymer microsphere profile control system based on multiple light scattering. Powder Technology. 315, 477-485 (2017).
- Zhang, X. X., et al. Treatment of non-high-risk acute promyelocytic leukemia with realgar-indigo naturalis formula (RIF) and all-trans retinoid acid (ATRA): study protocol for a randomized controlled trial. Trials. 21 (1), 7 (2020).
- Sugimoto, S., et al. Clinical efficacy and safety of oral Qing-Dai in patients with ulcerative colitis: a single-center open-label prospective study. Digestion. 93 (3), 193-201 (2016).
- Lin, Y. K., et al. Clinical assessment of patients with recalcitrant psoriasis in a randomized, observer-blind, vehicle-controlled trial using indigo naturalis. Archives of Dermatology. 144 (11), 1457-1464 (2008).
- Sun, Q., Leng, J., Tang, L., Wang, L., Fu, C. A Comprehensive review of the chemistry, pharmacokinetics, pharmacology, clinical applications, adverse events, and quality control of indigo naturalis. Frontiers in Pharmacology. 12, 664022 (2021).
- Yang, Y. J., et al. Investigation and analysis of the commodity quality of Indigo Naturalis herbs in Beijing area. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research. 23 (07), 1787-1788 (2012).
- Yao, Z. A., et al. Comparative study of thirty-eight batches of indigo naturalis. Journal of Chengdu University of TCM. 34 (02), 86-88 (2011).
- Bai, Z., et al. Determination of indigo and indirubin in indigo naturalis by HPLC. Modern Chinese Medicine. 12 (08), 27-29 (2010).
