Summary
Den nuværende protokol, der simulerer centralledningssyndrom (CCS) i mus, har forbedret repeterbarheden og minimeret driftsskader på forsøgsdyrene, hvilket har undgået at forstyrre den anatomiske struktur for meget. Strategien i denne undersøgelse er fordelagtig, fordi den giver mulighed for forskning i skademekanismer ved at producere konsistente resultater.
Abstract
Dyremodeller for centralsnorssyndrom (CCS) kan være til væsentlig gavn for præklinisk forskning. Identificerbare anatomiske veje kan give minimalt invasive eksponeringsmetoder og reducere ekstra skade på forsøgsdyr under drift, hvilket muliggør opretholdelse af konsistent og stabil anatomisk morfologi under eksperimenter for at minimere adfærdsmæssige og histologiske forskelle mellem individer for at forbedre reproducerbarheden af eksperimenter. I denne undersøgelse blev rygmarven på C6-niveau eksponeret ved hjælp af en rygmarvsskade koaksial platform (SCICP) og kombination med en minimalt invasiv teknik. Ved hjælp af en vertebral stabilisator fikserede vi ryghvirvlerne og komprimerede rygmarven fra C57BL/6J-mus med 5 g/mm2 og 10 g/mm2 vægte med SCICP for at fremkalde forskellige grader af C6 rygmarvsskade. I tråd med den tidligere beskrivelse af CCS afslører resultaterne, at læsionen i denne model er koncentreret i den grå substans omkring centralledningen, hvilket muliggør yderligere forskning i CCS. Endelig gives histologiske resultater som reference for læserne.
Introduction
De seneste år har været vidne til en konstant stigende forekomst af rygmarvsskade (SCI), med flere skader hos ældre mennesker fra mindre voldelig tauma1. Disse skader involverer oftere cervikal rygsøjlen og fører oftere til en ufuldstændig neurologisk dysfunktion2.
I det enogtyvende århundrede er CCS den mest udbredte type ufuldstændig SCI, der tegner sig for mere end halvdelen af alle SCI. Sammenlignet med konventionel ufuldstændig SCI er CCS kendetegnet ved uforholdsmæssigt mere forringelse af de øvre end nedre ekstremiteter3. Det er kendetegnet ved overvejende øvre ekstremitetssvaghed med mindre signifikant sensorisk og blæredysfunktion. CCS menes at være forårsaget af posttraumatisk blødning og ødem i den centrale region eller, som for nylig foreslået, af wallersk degeneration fra kompression af rygmarven i rygmarvsstenose. Forvaltningen af CCS mangler dokumentation på højt niveau til vejledning, hvilket kræver en omfattende forståelse af dens patofysiologi4. Der er imidlertid ikke rapporteret modeller af CCS. Egnede dyremodeller er afgørende for forståelsen af patofysiologi, som kan danne forskningsgrundlag for kliniske og prækliniske studier 5,6,7,8,9,10.
I dette studie etableres en CCS-model i mus med en rygmarvsskadekoaksial platform (SCICP) og en minimalt invasiv operationsplan, som giver mulighed for yderligere forskning i og forståelse af CCS. Modellen er bevist gyldig i løbet af forskningsprocessen ved histologisk, magnetisk resonansbilleddannelse (MRI) og immunofluorescensanalyse.
Protocol
Eksperimenter blev godkendt af laboratoriedyrs etiske og velfærdsudvalg ved Shandong University Cheeloo College of Medicine (godkendelsesnummer: 22021). De blev udført i overensstemmelse med vejledningen om pleje og brug af forsøgsdyr udgivet af National Institutes of Health (NIH Publications No. 85-23, revideret 1996). Alle mus, der blev brugt i denne undersøgelse, var 9-10 uger gamle C57BL/6J-hunmus købt fra Jinan Pengyue Experimental Animal Company (Jinan, Kina). I alt 9 mus involveret i denne undersøgelse blev lige randomiseret til kontrol-, milde og svære grupper. 7, 28 og 70 dage efter skaden blev en mus fra hver gruppe ofret.
1. C6 laminektomi og rygmarv eksponering
BEMÆRK: Eksponeringen blev udført under et mikroskop. Blødning kan undgås ved at være opmærksom på to aspekter: (i) Alle blodkar bør undgås. (ii) Musklerne skal adskilles ved muskelens oprindelses- og afslutningspunkter.
- Forbered kirurgiske instrumenter og SCICP.
BEMÆRK: SCICP's struktur er blevet rapporteret i tidligere studie11. Forskellen i forhold til den tidligere undersøgelse er, at den nuværende protokol opnår rygmarvsskade ved kompression. To forskellige vægte (10,4 g og 20,8 g) på denne platform kan producere kompression på henholdsvis 5 g / mm2 og 10 g / mm2 (figur 1). Rygmarvseksponeringen og kompressionstrinnene er vist i figur 2. - Isofluran administreres til musen ved inhalation ved hjælp af en næsekegle (induktion: 3% -5%, vedligeholdelse: 1,5% -2%).
- Når anæstesien træder i kraft, skal du udforske en lille bule ved midterlinjen bag musens hals, som er den spinøse proces i den anden brysthvirvel (T2).
- Barber håret omkring denne bule. Desinficer huden med tre skiftende anvendelser af en iodoforopløsning efterfulgt af hudantiseptika 75% ethanol.
- Placer musen udsat på operationsbordet. Påfør øjensalve for at beskytte øjnene.
- Læg en 3-4 mm tyk pude under brystet for at tillade en buet cervikal rygsøjlekurve, hvilket letter eksponeringen af inter-lamina-rummet og en uhindret luftvej under drift. Injicer buprenorphin som præoperativ analgesi (0,05-0,1 mg/kg, SQ).
- Lav et 1-1,5 cm langsgående snit med en steril skalpel centreret på 2. brysthvirvelsøjlens spinøse proces for at udsætte fasciallaget (figur 2A).
- Fjern en del af fedtvævet over T2 med steril mikrosaks for at finde T2 spinøs proces.
- Adskil de bilaterale trapezius og rhomboid muskler fra C5-T2 langs midterlinjen med mikrosaks (figur 2B).
- Adskil musklerne på lamina af C5-T2 hvirvler med mikrosaks, og træk muskellaget tilbage til siderne med sterile mikroretraktorer (figur 2C).
- Skær multifidus og cervikale rygmuskler på overfladen af hvirvlerne.
- Find T2 i henhold til det højeste punkt i de spinøse processer. Undersøg de spinøse processer successivt mod den rostrale ende fra T2 for at lokalisere C6 (figur 3).
- Løft C6-laminaen med tang, skær laminaen af, og rygmarven er udsat (figur 2D).
2. Cervikal rygmarvskompressionsskade
- Klem C6-7 facetleddene med vertebralstabilisatoren, og lås den (figur 2E).
- Ret den sterile vægtspids mod den blottede rygmarv, og sørg for, at den flade bund af spidsen er placeret parallelt med rygmarvens dorsale overflade (figur 2F).
- Juster ærmet for at få vægten til at komprimere rygmarven. Stop justeringen, når vægten holder en konstant relativ position med rygmarven (figur 2G).
BEMÆRK: Gør ikke denne proces for voldsom eller hurtig, hvis vægten udøver kontusionskraft på rygmarven. - Fjern vægten og vertebral stabilisatoren efter en 5 minutters kompression.
- Overhold farveændringerne i rygmarven efter kompression under mikroskopet (figur 2H).
- Skyl med steril PBS og brug sug til at rengøre operationsstedet.
- Sutur musklerne og huden i lag ved hjælp af polypropylen ikke-absorberbar sutur (størrelse: 6-0).
- Desinficere det kirurgiske område, læg musen på en varm pude, indtil musen genopretter fuld bevidsthed, og returner derefter musen til museburet.
- Injicer buprenorphin til analgesi (0,05-0,1 mg/kg, SQ) hver 8-12 timer i 3 dage.
3. Histologisk analyse
- Bedøv musen ved intraperitoneal injektion af 1,25% tribromethanol (0,02 ml / g legemsvægt) på dag 7, 28 eller 70 efter skade. Transkardialt infunderer musen med 60 ml fosfatbufret saltvand (PBS) og 20 ml 4% paraformaldehyd11.
- Transekter rygmarven 0,5 cm fra læsionscentret fra begge sider med mikrosaks, og bevar den 1 cm lange sektion.
- Den konserverede rygmarvssektion nedsænkes i 30 % saccharose ved 4 °C i 48 timer.
- Integrer vævene med OCT, skær vævene i 6 μm tykke sektioner med et kryotome, og saml sektionerne på et glasglas.
- Hæmatoxylin og eosin farvning
- Skyl de 6 μm sektioner med 1x PBS i 5 min 3 gange for at fjerne resterende OCT.
- Dyp sektionerne i hæmatoxylin i 90 s. Vask sektionerne under rindende vand i 3 min.
- Dyp sektionerne i eosin i 4 min. Sug i 95% alkohol i 30 s for at fjerne overskydende eosin.
- Til sidst dehydreres diasene med alkohol (95% alkohol og 100% alkohol to gange successivt) i 30 s og sættes diasene i et xylenbad til rydning i 2 minutter. Derefter forsegles sektionerne med et dækglas og harpiksgel.
- Preussisk blå farvning
- Nedsænk diasene i 20 minutter i en lige blanding af kaliumferrocyanid (10%) og saltsyre (10%).
- Skyl 3 gange med destilleret vand, og bejd på modpolden i 5 minutter med Nuclear Fast Red.
- Skyl tre gange med destilleret vand, efterfulgt af en skylning med 95% alkohol og to skylninger med 100% alkohol i 5 min.
- Ryd sektionerne i xylen to gange i 3 minutter hver, og forsegl derefter med harpiksgel12.
- Immunofluorescens farvning
- Der inkuberes objektglassene med følgende primære antistoffer i 1 time ved 37 °C: kaninantiioniseret calciumbindende adaptermolekyle 1 (Iba-1) (1:500), som blev opreguleret i mikroglia efter nerveskade; mus anti-glial fibrillær sur protein (GFAP) (1:300), som udtrykkes i astrocytter i centralnervesystemet; kanin anti-neurofilament-200 (NF-200) (1:2000), som udtrykkes i neurofilament.
- Inkuber med sekundære antistoffer i 1 time ved stuetemperatur (RT): Alexa Fluor488 ged anti-mus og Alexa Fluor594 ged anti-kanin (1:1.000).
- Snap fotografier og yderligere analysere med et fluorescens mikroskop13.
4. Magnetisk resonansbilleddannelse
- Bedøv musen 7 dage efter skaden med isofluranbedøvelse (1% -2% isofluran, 20% -30%O2) administreret gennem en minimaske.
- Scan den cervikale rygmarv i sagittal orientering. Brug følgende indstillinger til MR-billeddannelse: Spin-ekko (SE) sekvens i multislice og interleaved måde med TR / TE = 2500/12 ms, erhvervelsesmatrix = 256 x 128 matrix over synsfeltet (FOV) = 12 x 8 mm2, skivetykkelse = 1 mm og antallet af excitationer (NEX) = 2.
BEMÆRK: Hold musens respirationshastighed på 10-15/min under scanning for at eliminere respirationsrelaterede billedartefakter14.
Representative Results
Det sagittale HE-afsnit antyder, at selvom det beskadigede område i det grå stof var bredere i den alvorlige gruppe, var kontinuitet over den hvide substans til stede. Derudover understøtter forskellen i beskadiget gråstofområde mellem de alvorlige og milde grupper rimeligheden af gruppeindstillingen i protokollen (figur 4).
De koronale HE-sektioner viser, at læsionen hovedsageligt findes i det grå stof i begge grupper. I den alvorlige gruppe var strukturen af den hvide substans, der omgiver det grå stof, mere tilbøjelig til at blive påvirket, men omridset af det hvide stof blev stadig opretholdt (figur 5). NF-200 immunofluorescens antyder, at selvom den hvide substans omkring grå stof blev påvirket i den alvorlige gruppe, var den hvide substans stadig relativt intakt. Disse resultater er i overensstemmelse med de karakteristika, der blev beskrevet for CCS i den tidligere undersøgelse4 (figur 6).
Der blev ikke fundet røde blodlegemer i sagittale HE-sektioner 7 dage efter skade i hverken den milde eller den alvorlige gruppe. Den preussiske blå farvning afslørede ingen hæmosiderose i den milde gruppe, men i den alvorlige gruppe. Disse resultater indikerer, at tilskyndelse til blødning kan kræve en relativt alvorlig grad af skade (figur 7).
Immunofluorescens afslørede områder med forhøjet GFAP og Iba-1-ekspression i både mild og alvorlig skade, hvilket tyder på et inflammatorisk respons og dannelsen af et glialar i læsionen. Den alvorlige gruppe udviste også et større læsionsområde end den milde gruppe (figur 8).
MR er en relativt minimalt invasiv metode til at observere rygmarven. Resultaterne tyder på, at der i både de milde og svære grupper er en hypointens signalændring i læsionen med en høj signalkontur. Den alvorlige gruppe viste et signifikant større hypointenst signalområde (figur 9). Det hypointense signal antyder et bundfald fra reticulocytlysatet i dette område, og det omgivende hyperintense signal antyder et inflammatorisk respons. Vi gennemførte flere adfærdsmæssige tests i vores tidligere undersøgelse. For eksempel afslører grebstyrketesten i forbenene en signifikant forskel15.
Figur 1: SCICP's ærme og vægt. Spidsens overfladeareal blev designet til at være 1,3 mm x 1,6 mm baseret på det eksponerede område af rygmarven målt efter C6 laminektomi. Vægten er belagt med PTFE, hvilket effektivt reducerer friktionen mellem ærmets indervæg og vægten. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: Eksponering og kompression af rygmarven. A) langsgående snit i huden (B) Adskil musklerne rostralt fra T2 spinøs proces; C) Musklerne over laminerne adskilles. D) C6 laminektomi (E) Fastgørelse af rygsøjlen; (F) bestemmelse af placeringen af kompression; g) kompression af rygmarven (H) Ingen væsentlig skade på den hvide substans over rygmarven efter rygmarvskompression. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 3: Musens cervikale skeletanatomi. Stedet angivet med pilen er T2 spinous proces. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 4: De sagittale HE-farvede sektioner. (A) Cervikal rygmarv sagittal sektion. (B,C) Den alvorlige gruppe havde mere alvorlig skade end den milde gruppe, men begge fokuserede på den grå substans omkring den centrale ledning. 7, 28 og 70 dpi billederne tyder ikke på nogen signifikant forskel i udtrykket af skade i samme skadegruppe i forskellige perioder, og at kontinuiteten af den hvide substans i den overlegne og ringere rygmarv opretholdes. Vægtstang: 1 mm. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 5: Cervikal rygmarvsskade koronale HE-farvede sektioner. (A-C) Skaden påvirker primært den grå substans omkring midterledningen, som det ses i panelerne B og C. Den alvorlige skadegruppe lider af et mere omfattende udvalg af skader end den milde skadegruppe, som er mere tilbøjelig til at påvirke den hvide substans. Vægtstang: 400 μm. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 6: NF-200 koronal immunfluorescens efter skade. NF-200 respons uden signifikant forskel ved hvid substans disposition. Vægtstang: 400 μm. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 7: Preussisk blå farvning. (A-C) Hemosiderose blev observeret i den svære gruppe, men ikke i den milde gruppe. Vægtstang: 400 μm. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 8: Sagittal GFAP og Iba-1 immunofluorescens efter skade. (A-C) Når graden af skade øges, øges arealet af GFAP og Iba-1 respons. Vægtstang: 1 mm. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 9: Sagittal MR efter cervikal rygmarvsskade (T2-vægtede billeder). Skadesregionen blev observeret som et hypointenst signal i de milde og svære skadegrupper, med et signifikant bredere område af hypointenst signal i gruppen med alvorlig skade. Klik her for at se en større version af denne figur.
Discussion
Af de mange typer rygmarvsskader er CCS en af de mest potentielt behandlelige typer skader 3,4. På grund af manglen på laboratorieforskningsmodeller fokuserede forskning på CCS fra 1950'erne på kliniske undersøgelser og kadaverdissektionsundersøgelser 3,16,17. Denne undersøgelse viser, at der anvendes kompatible værktøjer og minimalt invasive procedurer til at etablere mus' CCS-model. Fra et teknisk perspektiv har denne platform stærk funktionsdygtighed og god reproducerbarhed. I betragtning af at eksperimentresultater viser validiteten, er vores teknik til at etablere den model, der er tættest på den standard, tidligere undersøgelser har defineret for CCS4.
Tidligere undersøgelser af kompressionsskader har hovedsageligt anvendt aneurismeklip, balloner og kalibreret tang 9,10,18. Desuden opstod de fleste skader på niveauet af thorax rygmarv18. Rygmarven på C6-niveau blev valgt som det skadede segment i denne undersøgelse for at undersøge egenskaberne ved CCS. Det er værd at være opmærksom på, at CCS-modellens overlevelsesrate også er en væsentlig faktor for at sikre eksperimentel konsistens. Denne undersøgelse rapporterer at forårsage bilateral kompressionsskade på musens cervikale rygmarv, mens rygmarvstraumatisk skade på højt niveau, især bilateral skade, kan være dødelig for forsøgsdyr, hvis den er for alvorlig. Ifølge El-Bohy er C4/5 rygmarven mere tilbøjelig til at påvirke de nedadgående bulbospinalkanaler og åndedrætsrelaterede motoneuroner, hvilket fører forsøgsdyr til respirationsdepression og død 18,19,20,21,22,23., I denne undersøgelse har mus med forskellige grader af kompression på C6 cervikal rygmarv signifikant differentierede skadeegenskaber foreslået af histologiske tests. Selvom der var signifikante adfærdsmæssige og histologiske forskelle i musens cervikale rygmarvsklemmemodel rapporteret af Forgione, var forstyrrelse af pediklerne, ledprocesser, laminae og endda nerverødder påkrævet for at klemme rygmarven med de modificerede klemmer, hvilket havde en signifikant indflydelse på stabiliteten af de cervikale strukturer24. En anden undersøgelse af livmoderhalsskader rapporterede ved hjælp af den tværgående proces som fikseringssted5. Selvom ledprocesserne blev forhindret i at blive beskadiget, kunne nedbrydning af overmuskulært væv ligeledes føre til en indvirkning på rygmarvens stabilitet. I denne undersøgelse blev kun den 6. cervikale lamina resekteret for at opretholde stabiliteten af cervikal rygmarv, med de tilstødende ledled bevaret og overdreven muskelskade undgået. Samtidig forhindrer kompression ovenfra rygmarven skade på nerverødderne.
HE-resultaterne tyder på, at skadeområdet på musens cervikale rygmarv i hver gruppe hovedsageligt var i det grå stof nær den centrale ledning, som karakteriserede CCS, med signifikante forskelle i omfanget af skade mellem de forskellige grupper. Især kan de patologiske sektioner, vi viste, have lindret skademanifestation, fordi prøverne blev indsamlet et par dage efter skaden. Immunofluorescens (NF-200) viste mindre skade på nervekanalerne i rygmarvens hvide stofområde, hvilket også bekræftede, at skaden i CCS hovedsageligt var koncentreret omkring centralledningen. Immunofluorescensresultatet blev forstærket af tidligere histologiske resultater af patologi. Tidligere undersøgelser har vist, at CCS fører til ødem nær centralledningen, hvilket fører til hæmatom og i sidste ende dysfunktion i den mediale del af den laterale kortikospinalkanal3. Blødning er rapporteret som en typisk komponent i CCS, men ses sjældent i efterfølgende billeddannelses- og obduktionsundersøgelser17. I denne undersøgelse foreslog HE-resultater 7 dage efter skade tegn på vævsødem i alle grupper; Der blev dog ikke fundet nogen resterende røde blodlegemer i skadeområdet. Derfor blev preussisk blå brugt til at undersøge skadeområdet for blødning, og resultaterne svarede til hæmosiderose observeret i skadeområdet i den alvorlige skadegruppe 7 dage efter skaden, mens den milde gruppe ikke gjorde det. MR T2-billeder viste, at både milde og alvorlige skader havde områder med lavt signal i det beskadigede område af skaden 7 dage efter skaden, angiver aflejring af reticulocytlysat her. Disse resultater giver indicier, at uoverensstemmelsen mellem de tidligere rapporterede fund sandsynligvis skyldes, at MR-testen potentielt er mere følsom end den histologiske test14, ud over skadens sværhedsgrad, hvilket også kan påvirke mængden af blødning i skadeområdet. GFAP kom også i vid udstrækning til udtryk i det beskadigede område. Samtidig blev Iba-1-ekspression også set i intakte områder, hvilket tyder på persistensen af et inflammatorisk respons, i overensstemmelse med MR-resultaterne, hvor en ring af hyperintenst signal omkring det hypointense signalområde i læsionen antyder tilstedeværelsen af et inflammatorisk respons. I sidste ende, baseret på resultaterne af denne undersøgelse, var skadeområdet i modellen fokuseret på det grå stof omkring den centrale ledning, hvilket generelt er i overensstemmelse med de beskrivelser, der tidligere er rapporteret13. Desværre udførte vi ikke MR gentagne gange i hvert forsøgsdyr for at vise, hvordan skadestedet ændrer sig dynamisk med tiden. Fremtidige forskere kan inddrage dette i deres arbejde for bedre undersøgelse af CCS. Også immunmærkning med neuronale markører som NeuN, som definerer det grå stof, kan indgå i undersøgelsen.
Afslutningsvis har karakteristika for resultaterne på patologi og MR-scanninger tætte ligheder med dem, der er beskrevet for CCS i tidligere undersøgelser4. Den nuværende protokol, der gør det muligt at modellere CCS, muliggør yderligere forskning i og forståelse af CCS.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Denne undersøgelse blev støttet af National Key Research and Development Project of Stem Cell and Transformation Research (2019YFA0112100) og State Key Program of National Natural Science of China (81930070).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 4% fixative solution | Solarbio | P1110 | 4% |
| Anti-Neurofilament heavy polypeptide antibody | Abcam | ab8135 | Dilution ratio (1:2000) |
| Eosin Staining Solution (water soluble) | Biosharp | BL727B | |
| Ethanol | Fuyu Reagent | ||
| Fluorescent microscope | KEYENCE | BZ-X800 | |
| Frozen Slicer | Leica | ||
| GFAP (GA5) Mouse mAb | Cell Signaling TECHNOLOGY | #3670 | Dilution ratio (1:600) |
| Goat anti-Mouse IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor Plus 488 | ThermoFisher SCIENTIFIC | A32723TR | Dilution ratio (1:1000) |
| Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor Plus 594 | ThermoFisher SCIENTIFIC | A32740 | Dilution ratio (1:1000) |
| Hematoxylin Staining Solution | Biosharp | BL702A | |
| Mice | Jinan Pengyue Experimental AnimalCompany | C57BL/6J | |
| Microsurgery apparatus | Shandong ULT Biotechnology Co., Ltd | All the surgey instruments are custom-made | Ophthalmic scissors, micro mosquito forceps, microsurgery forceps, micro scissors |
| Normal sheep serum for blocking (working solution) | Zhong Shan Jin Qiao | ZLI-9022 | working solution |
| O.C.T. Compound | SAKURA | 4583 | |
| Phosphate buffered solution (PBS) | Solarbio | P1020 | pH 7.2–7.4 |
| Prussian Blue Iron Stain Kit (With Eosin) | Solarbio | G1424 | |
| RWD Laboratory inhalation anesthetic station | RWD Life Science Co., Ltd | R550 | |
| Small animal in vivo microCT imaging system | PerkinElmer | Quantum GX2 | |
| Spinal cord injury coaxial platform | Shandong ULT Biotechnology Co., Ltd | Custom-made(Feng's standard) | https://shop43957633.m.youzan.com/wscgoods/detail/367x5ovgn69q18g?banner_id=f.81386274~goods.7~ 1~b0yRFKOq&alg_id= 0&slg=tagGoodList-default%2COpBottom%2Cuuid% 2CabTraceId&components_ style_layout =1&reft=1659409105184&spm= g.930111970_f.81386274&alias= 367x5ovgn69q18g&from_uuid= 1362cc46-ffe0-6886-2c65-01903 dbacbba&sf=qq_sm&is_share= 1&shopAutoEnter=1&share_cmpt =native_wechat&is_silence_auth=1 |
| Surgery microscope | Zumax Medical Co., Ltd. | zumax, OMS2355 | |
| Tris Buffered Saline+Tween (TBST) | Solarbio | T1082 | Dilution ratio (1:19) |
| Xylene | Fuyu Reagent |
References
- Liu, C., et al. Survival in 222 Patients With Severe CSCI: An 8-Year Epidemiologic Survey in Western China. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 100 (10), 1872-1880 (2019).
- Qi, C., Xia, H., Miao, D., Wang, X., Li, Z. The influence of timing of surgery in the outcome of spinal cord injury without radiographic abnormality (SCIWORA). Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 15 (1), 223 (2020).
- Brooks, N. P.
- Avila, M. J., Hurlbert, R. J.
- Forgione, N., Chamankhah, M., Fehlings, M. G. A mouse model of bilateral cervical contusion-compression spinal cord injury. Journal of Neurotrauma. 34 (6), 1227-1239 (2017).
- López-Dolado, E., Lucas-Osma, A. M., Collazos-Castro, J. E. Dynamic motor compensations with permanent, focal loss of forelimb force after cervical spinal cord injury. Journal of Neurotrauma. 30 (3), 191-210 (2013).
- Allen, L. L., et al. Phrenic motor neuron survival below cervical spinal cord hemisection. Experimental Neurology. 346, 113832 (2021).
- Reinhardt, D. R., Stehlik, K. E., Satkunendrarajah, K., Kroner, A. Bilateral cervical contusion spinal cord injury: A mouse model to evaluate sensorimotor function. Experimental Neurology. 331, 113381 (2020).
- Ropper, A. E., Ropper, A. H.
- Sun, G. D., et al. A progressive compression model of thoracic spinal cord injury in mice: function assessment and pathological changes in spinal cord. Neural Regeneration Research. 12 (8), 1365-1374 (2017).
- Elzat, E. Y., et al. Establishing a mouse contusion spinal cord injury model based on a minimally invasive technique. Journal of Visualized Experiments. (187), 64538 (2022).
- Lu, J., Xu, F., Lu, H. LncRNA PVT1 regulates ferroptosis through miR-214-mediated TFR1 and p53. Life Sciences. 260, 118305 (2020).
- Zeng, H., et al. Lentivirus-mediated downregulation of α-synuclein reduces neuroinflammation and promotes functional recovery in rats with spinal cord injury. Journal of Neuroinflammation. 16 (1), 283 (2019).
- Bilgen, M., Al-Hafez, B., Berman, N. E., Festoff, B. W. Magnetic resonance imaging of mouse spinal cord. Magnetic Resonance in Medicine. 54 (5), 1226-1231 (2005).
- Yilihamu, E. E., et al. A novel mouse model of central cord syndrome. Neural Regeneration Research. 18 (12), 2751-2756 (2023).
- Chikuda, H., et al. Effect of early vs delayed surgical treatment on motor recovery in incomplete cervical spinal cord injury with preexisting cervical stenosis: A randomized clinical trial. JAMA Network Open. 4 (11), e2133604 (2021).
- Jimenez, O., Marcillo, A., Levi, A. D. A histopathological analysis of the human cervical spinal cord in patients with acute traumatic central cord syndrome. Spinal Cord. 38 (9), 532-537 (2000).
- Menezes, K., et al. Human mesenchymal stromal/stem cells recruit resident pericytes and induce blood vessels maturation to repair experimental spinal cord injury in rats. Scientific Reports. 10 (1), 19604 (2020).
- Hutson, T. H., Di Giovanni, S. The translational landscape in spinal cord injury: focus on neuroplasticity and regeneration. Nature Reviews. Neurology. 15 (12), 732-745 (2019).
- El-Bohy, A. A., Schrimsher, G. W., Reier, P. J., Goshgarian, H. G. Quantitative assessment of respiratory function following contusion injury of the cervical spinal cord. Experimental Neurology. 150 (1), 143-152 (1998).
- El-Bohy, A. A., Goshgarian, H. G. The use of single phrenic axon recordings to assess diaphragm recovery after cervical spinal cord injury. Experimental Neurology. 156 (1), 172-179 (1999).
- Gonzalez-Rothi, E. J., Lee, K. Z. Intermittent hypoxia and respiratory recovery in preclinical rodent models of incomplete cervical spinal cord injury. Experimental Neurology. 342, 113751 (2021).
- Locke, K. C., Randelman, M. L., Hoh, D. J., Zholudeva, L. V., Lane, M. A. Respiratory plasticity following spinal cord injury: perspectives from mouse to man. Neural Regeneration Research. 17 (10), 2141-2148 (2022).
- Forgione, N., et al. Bilateral contusion-compression model of incomplete traumatic cervical spinal cord injury. Journal of Neurotrauma. 31 (21), 1776-1788 (2014).
