Summary
Det nuvarande protokollet som simulerar centralt navelsträngssyndrom (CCS) hos möss har förbättrat repeterbarheten och minimerat operationsskadorna på försöksdjuren, vilket gör att den anatomiska strukturen inte störs alltför mycket. Strategin i denna studie är fördelaktig eftersom den möjliggör forskning om skademekanismer genom att producera konsekventa resultat.
Abstract
Djurmodeller av centralt navelsträngssyndrom (CCS) kan vara till stor nytta för preklinisk forskning. Identifierbara anatomiska vägar kan ge minimalt invasiva exponeringsmetoder och minska extra skador på försöksdjur under drift, vilket gör det möjligt att upprätthålla konsekvent och stabil anatomisk morfologi under experiment för att minimera beteendemässiga och histologiska skillnader mellan individer för att förbättra försökens reproducerbarhet. I denna studie exponerades ryggmärgen på C6-nivå med hjälp av en koaxial plattform för ryggmärgsskador (SCICP) och kombination med en minimalt invasiv teknik. Med hjälp av en vertebral stabilisator fixerade vi kotorna och komprimerade ryggmärgen på C57BL/6J-möss med 5 g/mm2 och 10 g/mm2 vikter med SCICP för att inducera olika grader av C6-ryggmärgsskada. I linje med den tidigare beskrivningen av CCS visar resultaten att lesionen i denna modell är koncentrerad till den grå substansen runt den centrala strängen, vilket möjliggör ytterligare forskning om CCS. Slutligen ges histologiska resultat som referens för läsarna.
Introduction
Under de senaste åren har vi sett en ständigt ökande förekomst av ryggmärgsskada, med fler skador hos äldre personer på grund av mindre våldsam tauma1. Dessa skador involverar oftare halsryggraden och leder oftare till en ofullständig neurologisk dysfunktion2.
Under 2000-talet är CCS den vanligaste typen av ofullständig ryggmärgsskada och står för mer än hälften av all ryggmärgsskada. Jämfört med konventionell ofullständig ryggmärgsskada kännetecknas CCS av oproportionerligt större försämring av de övre än nedre extremiteterna3. Den kännetecknas av övervägande svaghet i de övre extremiteterna med mindre betydande sensorisk dysfunktion och blåsdysfunktion. CCS tros orsakas av posttraumatisk blödning och ödem i centrala regionen eller, som nyligen föreslagits, av wallersk degeneration från kompression av ryggmärgen vid spinal stenos. Hanteringen av CCS saknar evidens på hög nivå för att vägleda, vilket kräver en omfattande förståelse av dess patofysiologi4. Modeller för CCS har dock inte rapporterats. Lämpliga djurmodeller är avgörande för förståelsen av patofysiologin, vilket kan ge en forskningsbas för kliniska och prekliniska studier 5,6,7,8,9,10.
I denna studie etableras en CCS-modell i möss med en koaxial plattform för ryggmärgsskador (SCICP) och en minimalinvasiv operationsplan, vilket möjliggör ytterligare forskning om och förståelse av CCS. Modellen har visat sig vara giltig under forskningsprocessen genom histologisk, magnetisk resonanstomografi (MRT) och immunofluorescensanalys.
Protocol
Försöken godkändes av Laboratory Animal Ethical and Welfare Committee vid Shandong University Cheeloo College of Medicine (godkännandenummer: 22021). De utfördes i enlighet med Guide for the Care and Use of Laboratory Animals publicerad av National Institutes of Health (NIH Publications No. 85-23, reviderad 1996). Alla möss som användes i denna studie var 9-10 veckor gamla C57BL/6J-möss som köpts från Jinan Pengyue Experimental Animal Company (Jinan, Kina). Totalt 9 möss som deltog i denna studie randomiserades lika mycket till kontrollgruppen, den milda och den svåra gruppen. 7, 28 och 70 dagar efter skadan avlivades en mus från varje grupp.
1. C6-laminektomi och ryggmärgsexponering
OBS: Exponeringen utfördes under ett mikroskop. Blödning kan undvikas genom att vara uppmärksam på två aspekter: (i) Alla blodkärl bör undvikas. ii) Musklerna måste separeras vid muskelns ursprungs- och slutpunkter.
- Förbered kirurgiska instrument och SCICP.
OBS: SCICP:s struktur har rapporterats i tidigare studie11. Skillnaden jämfört med föregående studie är att det nuvarande protokollet åstadkommer ryggmärgsskada genom kompression. Två olika vikter (10,4 g och 20,8 g) av denna plattform kan ge en kompression på 5 g/mm2 respektive 10 g/mm2 (figur 1). Ryggmärgsexponeringen och kompressionsstegen visas i figur 2. - Administrera isofluran till musen genom inhalation med hjälp av en näskon (induktion: 3%-5%, underhåll: 1,5%-2%).
- Efter att bedövningen har verkat, utforska en liten utbuktning vid mittlinjen bakom nacken på möss, vilket är ryggradsprocessen i den andra bröstkotan (T2).
- Raka håret runt denna utbuktning. Desinficera huden med tre omväxlande appliceringar av en jodoforlösning följt av hudantiseptika 75 % etanol.
- Placera musen liggande på operationsbordet. Applicera ögonsalva för att skydda ögonen.
- Lägg en 3-4 mm tjock dyna under bröstet för att tillåta en böjd halsryggradskurva, vilket underlättar exponeringen av utrymmet mellan lamina och en fri luftväg under operation. Injicera buprenorfin som preoperativ analgesi (0,05-0,1 mg/kg, SQ).
- Gör ett 1-1,5 cm längsgående snitt med en steril skalpell centrerad på den 2:a bröstkotans ryggradsutskott för att exponera fasciaskiktet (Figur 2A).
- Ta bort en del av fettvävnaden ovanför T2 med en steril mikrosax för att hitta T2-ryggraden.
- Separera de bilaterala trapezius- och romboidmusklerna från C5-T2 längs mittlinjen med en mikrosax (Figur 2B).
- Separera musklerna på lamina på C5-T2-kotorna med en mikrosax och dra tillbaka muskellagret åt sidorna med sterila mikroretraktorer (Figur 2C).
- Skär av multifidus och cervikala ryggradsmuskler på ytan av kotorna.
- Lokalisera T2 enligt den högsta punkten i de spinösa processerna. Undersök de spinösa utskotten successivt mot rostraländen från T2 för att lokalisera C6 (Figur 3).
- Lyft C6-lamellen med pincett, skär av laminan och ryggmärgen exponeras (Figur 2D).
2. Cervikal ryggmärgskompressionsskada
- Kläm fast facettlederna C6-7 med ryggradsstabilisatorn och lås den (Figur 2E).
- Rikta den sterila viktspetsen mot den exponerade ryggmärgen och se till att den platta botten av spetsen är placerad parallellt med ryggmärgens dorsala yta (Figur 2F).
- Justera hylsan så att vikten komprimerar ryggmärgen. Sluta justera när vikten håller en konstant relativ position med ryggmärgen (Figur 2G).
OBS: Gör inte denna process för våldsam eller snabb om vikten utövar kontusionskraft på ryggmärgen. - Ta bort vikten och kotstabilisatorn efter en 5 minuters kompression.
- Observera färgförändringarna i ryggmärgen efter kompression under mikroskopet (Figur 2H).
- Skölj med steril PBS och använd sug för att rengöra operationsplatsen.
- Suturera muskler och hud i lager med hjälp av icke-absorberbar sutur av polypropen (storlek: 6-0).
- Desinficera operationsområdet, placera musen på en varm dyna tills musen återfår fullt medvetande och sätt sedan tillbaka musen i musburen.
- Injicera buprenorfin mot analgesi (0,05-0,1 mg/kg, SQ) var 8-12:e timme i 3 dagar.
3. Histologisk analys
- Bedöva musen genom intraperitoneal injektion av 1,25 % tribrometanol (0,02 ml/g kroppsvikt) dag 7, 28 eller 70 efter skadan. Transkardiellt infundera musen med 60 ml fosfatbuffrad koksaltlösning (PBS) och 20 ml 4 % paraformaldehyd11.
- Transektera ryggmärgen 0,5 cm från lesionens centrum från båda sidor med en mikrosax och bevara den 1 cm långa sektionen.
- Sänk ner den bevarade ryggmärgsdelen i 30 % sackaros vid 4 °C i 48 timmar.
- Bädda in vävnaderna med OCT, skär vävnaderna i 6 μm tjocka sektioner med en kryotom, och samla sektionerna på en glasskiva.
- Färgning av hematoxylin och eosin
- Skölj 6 μm-sektionerna med 1x PBS i 5 min 3 gånger för att ta bort kvarvarande OCT.
- Sänk ner sektionerna i hematoxylin i 90 s. Tvätta sektionerna under rinnande vatten i 3 min.
- Sänk ner sektionerna i eosin i 4 min. Blötlägg i 95 % alkohol i 30 sekunder för att ta bort överflödigt eosin.
- Torka slutligen objektglasen med alkohol (95 % alkohol och 100 % alkohol två gånger i följd) i 30 sekunder och lägg objektglasen i ett xylenbad för rensning i 2 minuter. Försegla sedan sektionerna med ett täckglas och hartsgel.
- Preussisk blå färgning
- Sänk ner objektglasen i 20 minuter i en lika stor blandning av kaliumferrocyanid (10 %) och saltsyra (10 %).
- Skölj 3 gånger med destillerat vatten och motfärga i 5 minuter med Nuclear Fast Red.
- Skölj tre gånger med destillerat vatten, följt av en sköljning med 95 % alkohol och två sköljningar med 100 % alkohol i 5 min.
- Rensa sektionerna i xylen två gånger i 3 minuter vardera och försegla sedan med hartsgel12.
- Immunofluorescensfärgning
- Inkubera objektglasen med följande primära antikroppar i 1 timme vid 37 °C: kanin antijoniserad kalciumbindande adaptermolekyl 1 (Iba-1) (1:500), som uppreglerades i mikroglia efter nervskada; GFAP (1:300) som uttrycks i astrocyter i centrala nervsystemet hos möss. kanin anti-neurofilament-200 (NF-200) (1:2000), som uttrycks i neurofilament.
- Inkubera med sekundära antikroppar i 1 timme vid rumstemperatur (RT): Alexa Fluor488 getantimus och Alexa Fluor594 getantikanin (1:1 000).
- Ta fotografier och analysera vidare med ett fluorescensmikroskop13.
4. Magnetisk resonanstomografi
- Bedöva musen 7 dagar efter skadan med isofluranbedövning (1%-2% isofluran, 20%-30%O-2) administrerad genom en minimask.
- Skanna halsryggmärgen i sagittal orientering. Använd följande inställningar för MRT-avbildning: Spin-echo (SE) sekvens i flera skivor och interfolierad med TR/TE = 2500/12 ms, exponeringsmatris = 256 x 128 matris över synfältet (FOV) = 12 x 8 mm2, skivtjocklek = 1 mm och antal excitationer (NEX) = 2.
OBS: Håll musens andningsfrekvens på 10-15/min under skanning för att eliminera andningsrelaterade bildartefakter14.
Representative Results
Det sagittala HE-snittet tyder på att även om det skadade området i den grå substansen var bredare i den svåra gruppen, fanns det kontinuitet över den vita substansen. Dessutom stöder skillnaden i skadad grå substans mellan de svåra och milda grupperna rimligheten i gruppinställningen i protokollet (figur 4).
De koronala HE-snitten visar att lesionen huvudsakligen finns i den grå substansen i båda grupperna. I den svåra gruppen var det mer sannolikt att strukturen hos den vita substansen som omger den grå substansen påverkades, men konturerna av den vita substansen bibehölls fortfarande (Figur 5). NF-200 immunofluorescens tyder på att även om den vita substansen som omger grå substans påverkades i den svåra gruppen, var den vita substansen fortfarande relativt intakt. Dessa resultat överensstämmer med de egenskaper som beskrivits för CCS i den tidigare studien4 (figur 6).
Inga röda blodkroppar hittades i sagittala HE-snitt 7 dagar efter skadan i vare sig den milda eller den svåra gruppen. Den preussiska blåfärgningen visade ingen hemosideros i den milda gruppen utan i den svåra gruppen. Dessa resultat indikerar att blödningsframkallning kan kräva en relativt allvarlig grad av skada (Figur 7).
Immunofluorescens avslöjade områden med förhöjt GFAP- och Iba-1-uttryck vid både mild och svår skada, vilket tyder på ett inflammatoriskt svar och bildandet av ett gliaärr i lesionen. Den svåra gruppen uppvisade också ett större lesionsområde än den milda gruppen (Figur 8).
MRT är en relativt minimalinvasiv metod för att observera ryggmärgen. Resultaten tyder på att det i både den milda och den svåra gruppen finns en hypointensiv signalförändring i lesionen med en hög signalkontur. Den svåra gruppen uppvisade en signifikant större hypointensiv signalarea (Figur 9). Den hypointensiva signalen tyder på en fällning från retikulocytlysatet i detta område, och den omgivande hyperintensiva signalen tyder på ett inflammatoriskt svar. Vi genomförde flera beteendetester i vår tidigare studie. Till exempel visar greppstyrketestet i frambenen en signifikant skillnad15.
Figur 1: Hylsan och vikterna för SCICP. Spetsens yta utformades för att vara 1,3 mm x 1,6 mm baserat på det exponerade området av ryggmärgen mätt efter C6-laminektomin. Vikten är belagd med PTFE vilket effektivt minskar friktionen mellan hylsans innervägg och vikten. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 2: Exponering och kompression av ryggmärgen. A) Längsgående snitt i huden. (B) Separera musklerna rostralt från T2-ryggradsprocessen; C) Separera musklerna ovanför lamellerna. D) C6-laminektomi. (E) Fixering av ryggradskroppen; (F) Bestämning av kompressionsplatsen. G) Kompression av ryggmärgen. (H) Ingen signifikant skada på den vita substansen ovanför ryggmärgen efter ryggmärgskompression. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 3: Anatomi för cervikalt skelett hos möss. Platsen som indikeras av pilen är T2-ryggradsprocessen. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 4: De sagittala HE-färgade sektionerna. (A) Cervikal ryggmärg sagittal sektion. (B,C) Den svåra gruppen hade allvarligare skador än den milda gruppen, men båda fokuserade på den grå substansen runt den centrala strängen. Bilderna med 7, 28 och 70 dpi tyder inte på någon signifikant skillnad i skadeuttryck i samma skadegrupp vid olika perioder och att kontinuiteten i den vita substansen i den övre och undre ryggmärgen bibehålls. Skalstreck: 1 mm. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 5: Cervikal ryggmärgsskada koronal HE-färgade snitt. (A-C) Skadan påverkar främst den grå substansen som omger den centrala strängen, vilket kan ses i panelerna B och C. Gruppen med allvarliga skador har ett mer omfattande skadeområde än gruppen med lindriga skador, vilket är mer sannolikt att den vita substansen påverkas. Skalstapel: 400 μm. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 6: NF-200 koronal immunofluorescens efter skada. NF-200-svar utan signifikant skillnad vid konturen av vit substans. Skalstapel: 400 μm. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 7: Preussisk blåfärgning. (A-C) Hemosideros observerades i den svåra gruppen men inte i den lindriga gruppen. Skalstapel: 400 μm. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 8: Sagittal GFAP och Iba-1 immunofluorescens efter skada. (A-C) När graden av skada ökar, ökar arean av GFAP- och Iba-1-respons. Skalstreck: 1 mm. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 9: Sagittal MRT efter cervikal ryggmärgsskada (T2-viktade bilder). Skadeområdet observerades som en hypointensiv signal i grupperna med lindriga och svåra skador, med ett betydligt bredare område med hypointensiv signal i gruppen med allvarliga skador. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Discussion
Av de många typerna av ryggmärgsskador är CCS en av de mest potentiellt behandlingsbara typerna av skador 3,4. På grund av bristen på laboratorieforskningsmodeller fokuserade forskningen om CCS från 1950-talet på kliniska studier och kadaverdissektionsundersökningar 3,16,17. Den aktuella studien visar att man kan använda kompatibla verktyg och minimalinvasiva procedurer för att etablera mössens CCS-modell. Ur ett tekniskt perspektiv har denna plattform stark användbarhet och god reproducerbarhet. Givet att experimentresultaten visar validiteten är vår teknik för att etablera den modell som ligger närmast den standard som tidigare studier har definierat för CCS4.
Tidigare studier av kompressionsskador har främst använt aneurismklämmor, ballonger och kalibrerad pincett 9,10,18. Dessutom inträffade de flesta skadorna i ryggmärgsnivå18. Ryggmärgen på C6-nivå valdes som skadesegment i denna studie för att undersöka egenskaperna hos CCS. Det är värt att uppmärksamma att överlevnadsgraden för CCS-modellen också är en viktig faktor för att säkerställa experimentell konsekvens. Den aktuella studien rapporterar att den orsakar bilateral kompressionsskada på musens halsryggmärg, medan traumatisk skada på hög nivå av ryggmärgen, särskilt bilateral skada, kan vara dödlig för försöksdjur om den är för allvarlig. Enligt El-Bohy är det mer sannolikt att C4/5-ryggmärgen påverkar de nedåtgående bulbospinalkanalerna och andningsrelaterade motorneuroner, vilket leder försöksdjur till andningsdepression och död 18,19,20,21,22,23., I denna studie har möss med olika grader av kompression på C6-halsryggmärgen signifikant differentierade skadeegenskaper som antyds av histologiska tester. Även om det fanns signifikanta beteendemässiga och histologiska skillnader i den modell för avnavling av ryggmärgen hos möss som rapporterats av Forgione, krävdes störningar i pediklarna, ledutskotten, lamellerna och till och med nervrötterna för att klämma fast ryggmärgen med de modifierade klämmorna, vilket hade en signifikant inverkan på stabiliteten hos de cervikala strukturerna24. En annan studie av cervikala skador rapporterade att man använde den tvärgående processen som fixeringsställe5. Även om ledutskotten förhindrades från skador, kunde nedbrytning av övermuskulös vävnad också leda till en påverkan på ryggmärgens stabilitet. I den aktuella studien avlägsnades endast den 6:e cervikala lamina för att bibehålla stabiliteten i halsryggmärgen, med de angränsande lederna bevarade och överdriven muskelskada undviks. Samtidigt förhindrar kompression uppifrån ryggmärgen skador på nervrötterna.
HE-resultaten tyder på att skadeområdet på halsryggmärgen hos mössen i varje grupp huvudsakligen fanns i den grå substansen nära den centrala ryggmärgen, vilket kännetecknade CCS, med signifikanta skillnader i skadeomfång mellan de olika grupperna. Noterbart är att de patologiska sektionerna vi visade kan ha lindrat skademanifestationen eftersom proverna samlades in några dagar efter skadan. Immunofluorescens (NF-200) visade mindre skador på nervbanorna i ryggmärgens vita substans, vilket också bekräftade att skadorna i CCS huvudsakligen var koncentrerade runt den centrala strängen. Immunofluorescensresultatet förvärrades av tidigare histologiska resultat av patologi. Tidigare studier har visat att CCS leder till ödem nära den centrala strängen, vilket leder till hematom och i slutändan dysfunktion i den mediala delen av den laterala kortikospinalkanalen3. Blödning har rapporterats som en typisk komponent i CCS men ses sällan i efterföljande bild- och obduktionsstudier17. I denna studie tyder HE-resultat 7 dagar efter skada på tecken på vävnadsödem i alla grupper; Däremot hittades inga kvarvarande röda blodkroppar i skadeområdet. Därför användes preussiskt blått för att undersöka skadeområdet för blödning, och resultaten överensstämde med hemosideros som observerats i skadeområdet i gruppen med allvarliga skador 7 dagar efter skadan, medan den milda gruppen inte gjorde det. MRI T2-bilder visade att både lindriga och svåra skador hade låga signalområden i det skadade området av skadan 7 dagar efter skadan, vilket indikerar deposition av retikulocytlysat här. Dessa resultat ger indicier på att diskrepansen mellan de tidigare rapporterade fynden troligen beror på att MRT-testet är potentiellt känsligare än det histologiska testet14, förutom skadans svårighetsgrad, vilket också kan påverka mängden blödning i skadeområdet. GFAP uttrycktes också i stor utsträckning i det skadade området. Samtidigt sågs Iba-1-uttryck också i intakta områden, vilket tyder på att ett inflammatoriskt svar kvarstår, vilket överensstämmer med MRT-resultaten, där en ring av hyperintensiv signal runt det hypointensiva signalområdet i lesionen tyder på närvaron av ett inflammatoriskt svar. I slutändan, baserat på resultaten från den aktuella studien, var skadeområdet i modellen fokuserat på den grå substansen runt den centrala strängen, vilket i allmänhet överensstämmer med de beskrivningar som tidigare rapporterats13. Tyvärr utförde vi inte MR upprepade gånger på varje försöksdjur för att visa hur skadestället dynamiskt förändras med tiden. Framtida forskare kan inkludera detta i sitt arbete för bättre undersökningar av CCS. Även immunmärkning med neuronala markörer som NeuN, som definierar den grå substansen, kan inkluderas i studien.
Sammanfattningsvis har egenskaperna hos fynden om patologi och MR-skanning stora likheter med de som beskrivits för CCS i tidigare studier4. Det nuvarande protokollet möjliggör modellering av CCS och möjliggör ytterligare forskning om och förståelse av CCS.
Disclosures
Författarna har inget att avslöja.
Acknowledgments
Denna studie stöddes av National Key Research and Development Project of Stem Cell and Transformation Research (2019YFA0112100) och State Key Program of National Natural Science of China (81930070).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 4% fixative solution | Solarbio | P1110 | 4% |
| Anti-Neurofilament heavy polypeptide antibody | Abcam | ab8135 | Dilution ratio (1:2000) |
| Eosin Staining Solution (water soluble) | Biosharp | BL727B | |
| Ethanol | Fuyu Reagent | ||
| Fluorescent microscope | KEYENCE | BZ-X800 | |
| Frozen Slicer | Leica | ||
| GFAP (GA5) Mouse mAb | Cell Signaling TECHNOLOGY | #3670 | Dilution ratio (1:600) |
| Goat anti-Mouse IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor Plus 488 | ThermoFisher SCIENTIFIC | A32723TR | Dilution ratio (1:1000) |
| Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor Plus 594 | ThermoFisher SCIENTIFIC | A32740 | Dilution ratio (1:1000) |
| Hematoxylin Staining Solution | Biosharp | BL702A | |
| Mice | Jinan Pengyue Experimental AnimalCompany | C57BL/6J | |
| Microsurgery apparatus | Shandong ULT Biotechnology Co., Ltd | All the surgey instruments are custom-made | Ophthalmic scissors, micro mosquito forceps, microsurgery forceps, micro scissors |
| Normal sheep serum for blocking (working solution) | Zhong Shan Jin Qiao | ZLI-9022 | working solution |
| O.C.T. Compound | SAKURA | 4583 | |
| Phosphate buffered solution (PBS) | Solarbio | P1020 | pH 7.2–7.4 |
| Prussian Blue Iron Stain Kit (With Eosin) | Solarbio | G1424 | |
| RWD Laboratory inhalation anesthetic station | RWD Life Science Co., Ltd | R550 | |
| Small animal in vivo microCT imaging system | PerkinElmer | Quantum GX2 | |
| Spinal cord injury coaxial platform | Shandong ULT Biotechnology Co., Ltd | Custom-made(Feng's standard) | https://shop43957633.m.youzan.com/wscgoods/detail/367x5ovgn69q18g?banner_id=f.81386274~goods.7~ 1~b0yRFKOq&alg_id= 0&slg=tagGoodList-default%2COpBottom%2Cuuid% 2CabTraceId&components_ style_layout =1&reft=1659409105184&spm= g.930111970_f.81386274&alias= 367x5ovgn69q18g&from_uuid= 1362cc46-ffe0-6886-2c65-01903 dbacbba&sf=qq_sm&is_share= 1&shopAutoEnter=1&share_cmpt =native_wechat&is_silence_auth=1 |
| Surgery microscope | Zumax Medical Co., Ltd. | zumax, OMS2355 | |
| Tris Buffered Saline+Tween (TBST) | Solarbio | T1082 | Dilution ratio (1:19) |
| Xylene | Fuyu Reagent |
References
- Liu, C., et al. Survival in 222 Patients With Severe CSCI: An 8-Year Epidemiologic Survey in Western China. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 100 (10), 1872-1880 (2019).
- Qi, C., Xia, H., Miao, D., Wang, X., Li, Z. The influence of timing of surgery in the outcome of spinal cord injury without radiographic abnormality (SCIWORA). Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 15 (1), 223 (2020).
- Brooks, N. P.
- Avila, M. J., Hurlbert, R. J.
- Forgione, N., Chamankhah, M., Fehlings, M. G. A mouse model of bilateral cervical contusion-compression spinal cord injury. Journal of Neurotrauma. 34 (6), 1227-1239 (2017).
- López-Dolado, E., Lucas-Osma, A. M., Collazos-Castro, J. E. Dynamic motor compensations with permanent, focal loss of forelimb force after cervical spinal cord injury. Journal of Neurotrauma. 30 (3), 191-210 (2013).
- Allen, L. L., et al. Phrenic motor neuron survival below cervical spinal cord hemisection. Experimental Neurology. 346, 113832 (2021).
- Reinhardt, D. R., Stehlik, K. E., Satkunendrarajah, K., Kroner, A. Bilateral cervical contusion spinal cord injury: A mouse model to evaluate sensorimotor function. Experimental Neurology. 331, 113381 (2020).
- Ropper, A. E., Ropper, A. H.
- Sun, G. D., et al. A progressive compression model of thoracic spinal cord injury in mice: function assessment and pathological changes in spinal cord. Neural Regeneration Research. 12 (8), 1365-1374 (2017).
- Elzat, E. Y., et al. Establishing a mouse contusion spinal cord injury model based on a minimally invasive technique. Journal of Visualized Experiments. (187), 64538 (2022).
- Lu, J., Xu, F., Lu, H. LncRNA PVT1 regulates ferroptosis through miR-214-mediated TFR1 and p53. Life Sciences. 260, 118305 (2020).
- Zeng, H., et al. Lentivirus-mediated downregulation of α-synuclein reduces neuroinflammation and promotes functional recovery in rats with spinal cord injury. Journal of Neuroinflammation. 16 (1), 283 (2019).
- Bilgen, M., Al-Hafez, B., Berman, N. E., Festoff, B. W. Magnetic resonance imaging of mouse spinal cord. Magnetic Resonance in Medicine. 54 (5), 1226-1231 (2005).
- Yilihamu, E. E., et al. A novel mouse model of central cord syndrome. Neural Regeneration Research. 18 (12), 2751-2756 (2023).
- Chikuda, H., et al. Effect of early vs delayed surgical treatment on motor recovery in incomplete cervical spinal cord injury with preexisting cervical stenosis: A randomized clinical trial. JAMA Network Open. 4 (11), e2133604 (2021).
- Jimenez, O., Marcillo, A., Levi, A. D. A histopathological analysis of the human cervical spinal cord in patients with acute traumatic central cord syndrome. Spinal Cord. 38 (9), 532-537 (2000).
- Menezes, K., et al. Human mesenchymal stromal/stem cells recruit resident pericytes and induce blood vessels maturation to repair experimental spinal cord injury in rats. Scientific Reports. 10 (1), 19604 (2020).
- Hutson, T. H., Di Giovanni, S. The translational landscape in spinal cord injury: focus on neuroplasticity and regeneration. Nature Reviews. Neurology. 15 (12), 732-745 (2019).
- El-Bohy, A. A., Schrimsher, G. W., Reier, P. J., Goshgarian, H. G. Quantitative assessment of respiratory function following contusion injury of the cervical spinal cord. Experimental Neurology. 150 (1), 143-152 (1998).
- El-Bohy, A. A., Goshgarian, H. G. The use of single phrenic axon recordings to assess diaphragm recovery after cervical spinal cord injury. Experimental Neurology. 156 (1), 172-179 (1999).
- Gonzalez-Rothi, E. J., Lee, K. Z. Intermittent hypoxia and respiratory recovery in preclinical rodent models of incomplete cervical spinal cord injury. Experimental Neurology. 342, 113751 (2021).
- Locke, K. C., Randelman, M. L., Hoh, D. J., Zholudeva, L. V., Lane, M. A. Respiratory plasticity following spinal cord injury: perspectives from mouse to man. Neural Regeneration Research. 17 (10), 2141-2148 (2022).
- Forgione, N., et al. Bilateral contusion-compression model of incomplete traumatic cervical spinal cord injury. Journal of Neurotrauma. 31 (21), 1776-1788 (2014).
