Summary

تدخل Tuina في نموذج أرنب لالتهاب المفاصل في الركبة

Published: August 25, 2023
doi:

Summary

يصف البروتوكول طريقة لتدخل Tuina في نموذج أرنب من هشاشة العظام في الركبة.

Abstract

يتميز الفصال العظمي في الركبة (KOA) بشكل أساسي بالتغيرات التنكسية في غضروف مفصل الركبة والأنسجة الرخوة المحيطة. تم تأكيد فعالية Tuina في علاج KOA ، ولكن يجب التحقيق في الآلية الأساسية. تهدف هذه الدراسة إلى إنشاء نموذج أرنب KOA مجدي علميا تم معالجته باستخدام Tuina للكشف عن الآليات الأساسية. لهذا ، تم تقسيم ذكور الأرانب النيوزيلندية البالغة من العمر 18 و 6 أشهر بشكل عشوائي إلى مجموعات زائفة ونموذج وتوينا ، مع 6 أرانب في كل مجموعة. تم إنشاء نموذج KOA عن طريق حقن محلول غراء 4٪ في تجويف مفصل الركبة. تدخلت مجموعة Tuina مع Tuina جنبا إلى جنب مع طريقة تصحيح مفصل الركبة الدوار لمدة 4 أسابيع. تم إجراء الإمساك والتثبيت القياسي فقط في مجموعات صورية ونموذجية. في نهاية التدخل لمدة 1 أسبوع ، لوحظ نطاق حركة مفصل الركبة (ROM) ، وتم تلطيخ الغضروف الهيماتوكسيلين-يوزين (HE). تظهر الدراسة أن Tuina يمكن أن تمنع موت الخلايا الغضروفية المبرمج ، وإصلاح أنسجة الغضاريف ، واستعادة ROM مفصل الركبة. في الختام ، توضح هذه الدراسة الجدوى العلمية لعلاج Tuina للأرانب النموذجية KOA ، مع تسليط الضوء على تطبيقه المحتمل في دراسة KOA والحالات المماثلة المتعلقة بمفصل الركبة.

Introduction

هشاشة العظام في الركبة (KOA) هو مرض تنكسي يصيب مفصل الركبة ، ويتجلى بشكل رئيسي في آلام الركبة والتورم والتشوه وتقييد الحركة ، مع ارتفاع معدل الإعاقة وارتفاع معدل الانتشار لدى النساء ، مع 527.81 مليون مريض يعانون من هشاشة العظام في جميع أنحاء العالم في عام 2019 وانتشاره العالمي يمثل 60.6٪ من إجمالي الانتشار العالمي ل OA1. سريريا ، ينقسم علاج KOA عادة إلى علاجات غير جراحية وجراحية. تشمل العلاجات غير الجراحية العلاج الطبيعي والعلاج الدوائي والعلاج بحقن البلازما الغنيةبالصفائح الدموية 2,3. Tuina هي طريقة علاج شائعة وآمنة وموثوقة وفعالة في الطب الصيني. تستخدم هذه الدراسة Tuina جنبا إلى جنب مع طريقة تصحيح مفصل الركبة الدوار لعلاج KOA. يمكن لتقنيات Tuina مثل طريقة العجن والضغط الدوراني موازنة الأنسجة العضلية وتقليل الألم وضبط مستويات العوامل الالتهابية وتحسين التمثيل الغذائي للأنسجة وتثبيط تنكس الغضروف المفصلي 4,5. يمكن لطريقة التصحيح الدوراني لمفصل الركبة ضبط محاذاة عظام ومفاصل الأطراف السفلية ، وتحسين فجوة مفصل الركبة ، واستعادة خط القوة الطبيعي ، وتحقيق التوازن بين الميكانيكا الحيوية للأطراف السفلية6،7،8،9. تمارين المقاومة يمكن أن تعزز كتلة العضلات وقوتها وتعزز تجديد أنسجة الغضاريف10,11. وجدت دراسة أولية أن بروتوكول Tuina هذا أكثر فعالية بكثير من كبسولات كبريتات الجلوكوزامين عن طريق الفم في علاج KOA، مع بداية أسرع للعمل وتثبيط كبير لتنكس الخلايا الغضروفية وإصلاح أنسجة الغضاريفالتالفة 12. في علاج KOA، بالمقارنة مع العلاج Tuina، العقاقير غير الستيرويدية المضادة للالتهابات لها آثار ضارة وفعالية غير مرضية على المدى الطويل، ومخاطر وتكاليف جراحية عالية نسبيا، وتتطلب مؤشرات معينة للعلاج الجراحي، مع مشاكل ما بعد الجراحة ومضاعفات حول الأطراف الاصطناعية13،14،15. عند مقارنته بالعلاج الدوائي والجراحة ، يوفر علاج Tuina ل KOA العديد من المزايا ، بما في ذلك تقليل الآثار الجانبية ، وانخفاض المخاطر ، وتعزيز السلامة ، والفعالية من حيث التكلفة ، والفعالية طويلة الأمد. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن يخفف بشكل فعال من آلام مفصل الركبة والتورم والفرقعة وتقييد الحركة6،13،16،17.

ومع ذلك ، فإن آلية Tuina لعلاج KOA تحتاج إلى توضيح ، مما يحد من تحسين وكمال بروتوكول العلاج ل KOA. لذلك ، فإن دراسة آلية تدخل Tuina في KOA من خلال التجارب على هي طريقة فعالة. الأرانب ، مقارنة بالفئران ، لديها مزاج سهل الانقياد ومفاصل الركبة أكبر. تتشابه البنية التشريحية والمؤشرات الكيميائية الحيوية للغضروف مع تلك الخاصة بالبشر ، لذلك فهي موضوع مناسب لدراسة آلية مرض مفصل الركبة بواسطة Tuina18. يتميز نموذج KOA الذي تم إنشاؤه عن طريق حقن غراء في تجويف مفصل الركبة للأرانب بمزايا وقت النمذجة القصير ، وتقليل الصدمات ، ومعدل النجاح المرتفع ، ومعدل البقاء على قيد الحياة المرتفع ، وآلية مرضية مماثلة ل KOA19. تهدف هذه الدراسة إلى إنشاء بروتوكول تجارب حيوانية مجدية علميا لتدخل Tuina في KOA والتحقيق في آلية Tuina.

Protocol

تمت الموافقة على الدراسة من قبل لجنة الأخلاقيات في المستشفى التابع لجامعة شاندونغ للطب الصيني التقليدي (رقم الموافقة: 2020-29). 1. التجارب تربية 18 ، 6 أشهر من ذكور الأرانب النيوزيلندية من الدرجة العادية (2.75 ± 0.25 كجم) في أقفاص مفردة قياسية (دورة الضوء / الظلام 12 ساعة ،…

Representative Results

تعكس درجة تقييد حركة الركبة وتلف أنسجة الغضاريف شدة KOA. يعكس ROM لمفصل الركبة درجة تقييد حركة مفصل الركبة. أصغر ROM مفصل الركبة ، وأكثر خطورة الحد من حركة مفصل الركبة. على العكس من ذلك ، كلما كان ROM لمفصل الركبة أكبر ، زادت درجة حركة الركبة بشكل طبيعي. يعكس تلطيخ HE لمراقبة مورفولوجيا وهيكل أنسجة …

Discussion

تصميم البروتوكول التجريبي مهم بشكل خاص للتحقيق في آلية Tuina في علاج KOA. تم إجراء نمذجة KOA على الأرانب عن طريق حقن غراء في Waixiyan. يقع Waixiyan في القبو الجانبي للرباط الرضفي ، والذي يسهل تحديد موقعه ، ومساحة المفصل بين عظم الفخذ والساق كبيرة هنا أثناء ثني الركبة ، مما يجعل من السهل الحقن في تجويف مفص…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

تم دعم هذا العمل من قبل مشروع علوم وتكنولوجيا الطب الصيني التقليدي بمقاطعة شاندونغ (2021Q080) ومشروع وراثة المدرسة الأكاديمية لمدرسة تشيلو للطب الصيني التقليدي [Lu-Wei-Letter (2022) 93].

Materials

0.9 % sodium chloride injection Sichuan Keren Pharmaceutical Co. Z22121903
-20°C refrigerator Haier BD-328WL
4 % fixative solution Solarbio P1110
4°C refrigerator Haier SC-315DS
Anhydrous ethanol Sinopharm
Automatic tissue dewatering machine Dakowei (Shenzhen) Medical Equipment Co. HP30
Blast drying oven Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co. DHG-9070A
Coverslip Biyuntian FCGF50
Electric thermostat water bath Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co. HWS-26
Embedding freezing table Changzhou Paishijie Medical Equipment Co. BM450
Embedding machine Changzhou Paishijie Medical Equipment Co. BM450A
Ethylenediaminetetraacetic acid decalcification solution Servicebio G1105-500ML
Fluorescent inverted microscope Leica Leica DM IL LED
Hematoxylin-eosin staining kit Cisco Jet EE0012
Hydrochloric acid Laiyang Economic and Technological Development Zone Fine Chemical Plant
Medical joint goniometer KOSLO
Neutral gum Cisco Jet EE0013
Normal-grade male New Zealand rabbit Jinan Xilingjiao Breeding and Breeding Center SCXK (Lu) 2020 0004
Papain(3000 U/mg) Bioss D10366
Pathological tissue bleaching and drying instrument Changzhou Paishijie Medical Equipment Co. PH60
Pet electric clippers Codos CP-3180
Rabbit fixing box any brand
Rotating Slicer Leica 531CM-Y43
Tuina technique parameter determination instrument Shanghai DuKang Instrument Equipment Co. Ltd. ZTC-Equation 1
Ventilator TALY ELECTRIC C32
Xylene Fuyu Reagent

References

  1. Long, H. B., et al. Prevalence trends of site-specific osteoarthritis from 1990 to 2019: findings from the global burden of disease study 2019. Arthritis & Rheumatology. 74 (7), 1172-1183 (2022).
  2. Tschopp, M., et al. A randomized trial of intra-articular injection therapy for knee osteoarthritis. Investigative Radiology. 58 (5), 355-362 (2023).
  3. Buchanan, W. W., Kean, C. A., Kean, W. F., Rainsford, K. D. Osteoarthritis. Inflammopharmacology. , (2023).
  4. Wang, W. Y., et al. A randomized, parallel control and multicenter clinical trial of evidence-based traditional Chinese medicine massage treatment VS External Diclofenac Diethylamine Emulgel for the treatment of knee osteoarthritis. Trials. 23 (1), 555 (2022).
  5. Wang, M. N., et al. Mechanism of traditional Chinese medicine in treating knee osteoarthritis. Journal of Pain Research. 13, 1421-1429 (2020).
  6. Katz, J. N., Arant, K. R., Loeser, R. F. Diagnosis and treatment of hip and knee osteoarthritis: A review. The Journal of the American Medical Association. 325 (6), 568-578 (2021).
  7. Chang, A., et al. The relationship between toe-out angle during gait and progression of medial tibiofemoral osteoarthritis. Annals of the Rheumatic Diseases. 66, 1271-1275 (2007).
  8. Jenkyn, T. R., Hunt, M. A., Jones, I. C., Giffin, J. R., Birmingham, T. B. Toe-out gait in patients with knee osteoarthritis partially transforms external knee adduction moment into flexion moment during early stance phase of gait: a tri-planar kinetic mechanism. Journal of Biomechanics. 41 (2), 276-283 (2008).
  9. Brouwer, G. M., et al. Association between valgus and varus alignment and the development and progression of radiographic osteoarthritis of the knee. Arthritis & Rheumatism. 56 (4), 1204-1211 (2007).
  10. Liao, C. D., et al. Effects of protein supplementation combined with resistance exercise training on walking speed recovery in older adults with knee osteoarthritis and sarcopenia. Nutrients. 15 (7), 1552 (2023).
  11. Thudium, C. S., et al. Cartilage tissue turnover increases with high-compared to low-intensity resistance training in patients with knee OA. Arthritis Research & Therapy. 25 (1), 22 (2023).
  12. Zheng, L. J., et al. Shutiao Jingjin massage can stabilize intracellular environment of rabbit chondrocytes following knee osteoarthritis-induced cartilage injury. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 27, (2023).
  13. Liu, K. Q., et al. Efficacy and safety of Tuina (Chinese therapeutic massage) for knee osteoarthritis: A randomized, controlled, and crossover design clinical trial. Frontiers in Medicine. 10, 997116 (2023).
  14. Wang, Z., et al. Systematic Review and Network Meta-analysis of Acupuncture Combined with Massage in Treating Knee Osteoarthritis. BioMed Research International. 2022, 4048550 (2022).
  15. Li, Y. Y., et al. Therapeutic effect of acupotomy at Sanheyang for cartilage collagen damage in moderate knee osteoarthritis: a rabbit model. Journal of Inflammation Research. 16, 2241-2254 (2023).
  16. Guo, G. X., et al. Cerebral mechanism of Tuina analgesia in management of knee osteoarthritis using multimodal MRI: study protocol for a randomised controlled trial. Trials. 23 (1), 694 (2022).
  17. Perlman, A., et al. Efficacy and safety of massage for osteoarthritis of the knee: a randomized clinical trial. Journal of General Internal Medicine. 34 (3), 379-386 (2019).
  18. Chen, B. J., et al. Aerobic exercise combined with glucosamine hydrochloride capsules inhibited the apoptosis of chondrocytes in rabbit knee osteoarthritis by affecting TRPV5 expression. Gene. 830, 146465 (2022).
  19. Rasheed, M. S., Ansari, S. F., Shahzadi, I. Formulation, characterization of glucosamine loaded transfersomes and in vivo evaluation using papain induced arthritis model. Scientific Reports. 12 (1), 19813 (2002).
  20. Li, Z. R. Experimental acupuncturology. Beijing: China Press of Traditional Chinese Medicine. 2003, 314-319 (2003).
  21. Hu, Y. L. Manual of practical animal acupuncture. Beijing: China Press of Agriculture. 2003, 286-298 (2014).
  22. Liu, J., et al. Effects of "knot-loosing" of acupotomy on motor function and morphological changes of knee joint in knee osteoarthritis rabbits. Zhen Ci Yan Jiu. 46 (2), 129-135 (2021).
  23. Li, Q., et al. The protective effects and mechanism of Ruyi Zhenbao Pill, a Tibetan medicinal compound, in a rat model of osteoarthritis. Journal of Ethnopharmacology. 308, 116255 (2023).
  24. Kwon, M., Nam, D., Kim, J. Pathological characteristics of monosodium iodoacetate-induced osteoarthritis in rats. Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 20 (3), 435-446 (2023).
  25. Wang, J. G., Tang, C. L. Experimental Tuina science. Beijing: China Press of Traditional Chinese Medicine. Chinese. , (2017).
  26. Fang, M., Song, B. L. Tuina science. Beijing: China Press of Traditional Chinese Medicine. , (2016).
  27. Jin, X. Y., Yu, Y. Y., Lin, Y. Y., Yang, J. P., Chen, Z. H. Tendon-regulating and bone-setting manipulation promotes the recovery of synovial inflammation in rabbits with knee osteoarthritis via the TLR4-MyD88-NF-κB signaling pathway. Annals of Translational Medicine. 11 (6), 245 (2023).
  28. Wang, M., Liu, C., Xiao, W. Intra-articular injection of hyaluronic acid for the reduction in joint adhesion formation in a rabbit model of knee injury. Knee Surgery, Sports Traumatology, Arthroscopy: Official Journal of the ESSKA. 22 (7), 1536-1540 (2014).
  29. Xu, C., et al. Bacterial cellulose membranes used as artificial substitutes for dural defection in rabbits. International Journal of Molecular Sciences. 15 (6), 10855-10867 (2014).
  30. Leary, S., et al. AVMA guidelines for the euthanasia of animals: 2020 edition. Schaumburg: American Veterinary Medical Association. 2020, (2020).
  31. Amirtham, S. M., Ozbey, O., Kachroo, U., Ramasamy, B., Vinod, E. Optimization of immunohistochemical detection of collagen type II in osteochondral sections by comparing decalcification and antigen retrieval agent combinations. Clinical Anatomy. 33 (3), 343-349 (2020).
  32. Niazvand, F., et al. Curcumin-loaded poly lactic-co-glycolic acid nanoparticles effects on mono-iodoacetate-induced osteoarthritis in rats. Veterinary Research Forum: An International Quarterly Journal. 8 (2), 155-161 (2017).
  33. Liu, A., et al. Intra-articular injection of umbilical cord mesenchymal stem cells loaded with graphene oxide granular lubrication ameliorates inflammatory responses and osteoporosis of the subchondral bone in rabbits of modified papain-induced osteoarthritis. Frontiers in Endocrinology. 12, 822294 (2022).
  34. Hall, M. M. The accuracy and efficacy of palpation versus image-guided peripheral injections in sports medicine. Current Sports Medicine Reports. 12 (5), 296-303 (2013).
  35. Xing, L., et al. Traditional Chinese medicine ointment combined with Tuina therapy in treatment of pain and swelling after total knee arthroplasty. World Journal of Orthopedics. 13 (10), 932-939 (2022).
  36. Xu, H., et al. The effectiveness of Tuina in relieving pain, negative emotions, and disability in knee osteoarthritis: a randomized controlled trial. Pain Medicine. 24 (3), 244-257 (2023).
  37. Ding, N., et al. Mast cells are important regulator of acupoint sensitization via the secretion of tryptase, 5-hydroxytryptamine, and histamine. The Public Library of Science One. 13 (3), e0194022 (2018).
  38. Cai, F. H., Li, F. L., Zhang, Y. C., Li, P. Q., Xiao, B. Research on electroacupuncture parameters for knee osteoarthritis based on data mining. European Journal of Medical Research. 27 (1), 162 (2022).
  39. Mei, Z. G., Cheng, C. G., Zheng, J. F. Observations on curative effect of high-frequency electric sparkle and point-injection therapy on knee osteoarthritis. Journal of Traditional Chinese Medicine. 31 (4), 311-315 (2011).
  40. Xiao, G., et al. Effect of manipulation on cartilage in rats with knee osteoarthritis based on the Rho-associated protein kinase/LIM kinase 1/Cofilin signaling pathways. Journal of Traditional Chinese Medicine. 42 (2), 194-199 (2022).
  41. Wu, M. X., et al. Clinical study on the treatment of knee osteoarthritis of Shen-Sui insufficiency syndrome type by electroacupuncture. Chinese Journal of Integrative Medicine. 16 (4), 291-297 (2010).
  42. Richards, R. E., Andersen, M. S., Harlaar, J., van den Noort, J. C. Relationship between knee joint contact forces and external knee joint moments in patients with medial knee osteoarthritis: effects of gait modifications. Osteoarthritis Cartilage. 26 (9), 1203-1214 (2018).
  43. Shull, P. B., et al. Toe-in gait reduces the first peak knee adduction moment in patients with medial compartment knee osteoarthritis. Journal of Biomechanics. 46 (1), 122-128 (2013).
  44. Adouni, M., Shirazi-Adl, A. Partitioning of knee joint internal forces in gait is dictated by the knee adduction angle and not by the knee adduction moment. Journal of Biomechanics. 47 (7), 1696-1703 (2014).
  45. Kutzner, I., Trepczynski, A., Heller, M. O., Bergmann, G. Knee adduction moment and medial contact force–facts about their correlation during gait. The Public Library of Science One. 8 (12), e81036 (2013).
  46. Camacho-Cardenosa, A., et al. Resistance circuit training combined with hypoxia stimulates bone system of older adults: a randomized trial. Experimental Gerontology. 169, 111983 (2022).
  47. Babur, M. N., Siddiqi, F. A., Tassadaq, N., Arshad Tareen, M. A., Osama, M. Effects of glucosamine and chondroitin sulfate supplementation in addition to resistance exercise training and manual therapy in patients with knee osteoarthritis: A randomized controlled trial. The Journal of the Pakistan Medical Association. 72 (7), 1272-1277 (2022).
  48. Wang, H. N., et al. Effect of low-load resistance training with different degrees of blood flow restriction in patients with knee osteoarthritis: study protocol for a randomized trial. Trials. 23 (1), 6 (2022).
  49. Cheon, Y. H., et al. Relationship between decreased lower extremity muscle mass and knee pain severity in both the general population and patients with knee osteoarthritis: Findings from the KNHANES V 1-2. The Public Library of Science One. 12 (3), e0173036 (2017).
  50. Murton, A. J., Greenhaff, P. L. Resistance exercise and the mechanisms of muscle mass regulation in humans: acute effects on muscle protein turnover and the gaps in our understanding of chronic resistance exercise training adaptation. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 45 (10), 2209-2214 (2013).
check_url/65763?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Zhang, S., Zhang, X., Sun, G., Wang, K., Qiao, Y., He, Y., Li, M., Li, H., Zheng, L. Tuina Intervention in Rabbit Model of Knee Osteoarthritis. J. Vis. Exp. (198), e65763, doi:10.3791/65763 (2023).

View Video