Intervenção Tuina em Modelo de Osteoartrite de Joelho em Coelhos

Summary

O protocolo descreve um método para intervenção de Tuina em um modelo de coelho de osteoartrite de joelho.

Abstract

A osteoartrite do joelho (KOA) é caracterizada principalmente por alterações degenerativas na cartilagem da articulação do joelho e nos tecidos moles circundantes. A eficácia de Tuina no tratamento de OA foi confirmada, mas o mecanismo subjacente precisa ser investigado. Este estudo visa estabelecer um modelo cientificamente viável de coelhos KOA tratados com Tuina para revelar os mecanismos subjacentes. Para isso, coelhos da raça Nova Zelândia, machos de grau normal, com 18 meses de idade, com 6 meses de idade, foram divididos aleatoriamente em grupos sham, modelo e Tuina, com 6 coelhos em cada grupo. O modelo de OA foi estabelecido injetando-se solução de papaína a 4% na cavidade articular do joelho. O grupo Tuina foi intervencionado com Tuina combinado com o método de correção rotatória da articulação do joelho por 4 semanas. Apenas a preensão e fixação padrão foram realizadas nos grupos sham e modelo. Ao final de 1 semana de intervenção, observou-se a amplitude de movimento (ADM) articular do joelho e a coloração pela hematoxilina-eosina da cartilagem (HE). O estudo mostra que Tuina pode inibir a apoptose dos condrócitos, reparar o tecido cartilaginoso e restaurar a ADM articular do joelho. Em conclusão, este estudo demonstra a viabilidade científica do tratamento com Tuina para coelhos modelo de OA, destacando sua potencial aplicação no estudo de OA e condições semelhantes relacionadas à articulação do joelho.

Introduction

A osteoartrite do joelho (OA) é uma doença degenerativa da articulação do joelho, manifestada principalmente por dor, inchaço, deformação e restrição de movimento no joelho, com alta taxa de incapacidade e maior prevalência em mulheres, com 527,81 milhões de pacientes com osteoartrite em todo o mundo em 2019 e sua prevalência global representando 60,6% da prevalência global total de OA¹. Clinicamente, o tratamento da OA é usualmente dividido em terapias não cirúrgicas e cirúrgicas. As terapias não cirúrgicas incluem fisioterapia, farmacoterapia e injeção de plasma rico em plaquetas ^2,3. Tuina é um método de tratamento comum, seguro, confiável e eficaz na medicina chinesa. Este estudo utiliza Tuina combinado com o método de correção rotatória da articulação do joelho para o tratamento de OA de joelho. Técnicas de Tuina, como o amassamento rotatório e o método de prensagem, podem equilibrar o tecido muscular, reduzir a dor, ajustar os níveis de fatores inflamatórios, melhorar o metabolismo tecidual e inibir a degeneração da cartilagem articular ^4,5. O método de correção rotatória da articulação do joelho pode ajustar o alinhamento dos ossos e articulações dos membros inferiores, melhorar o gap articular do joelho, restaurar a linha de força normal e equilibrar a biomecânica do membro inferior 6,7,8,9. O exercício resistido pode aumentar a massa e a força muscular e promover a renovação do tecido cartilaginoso10,11. Um estudo preliminar constatou que este protocolo de Tuina é significativamente mais eficaz do que as cápsulas orais de sulfato de glucosamina no tratamento da OA, com início de ação mais rápido e inibição significativa da degeneração dos condrócitos e reparo do tecido cartilaginoso lesado¹². No tratamento da OA de joelho, comparado à terapia de Tuina, os anti-inflamatórios não hormonais apresentam efeitos adversos e eficácia insatisfatória a longo prazo, riscos e custos cirúrgicos relativamente altos e requerem certas indicações para o tratamento cirúrgico, com problemas pós-operatórios e complicações periprotéticas^13,14,15. Quando comparado à terapia medicamentosa e à cirurgia, o tratamento com Tuina para OA de OA oferece várias vantagens, incluindo efeitos colaterais reduzidos, menor risco, maior segurança, custo-efetividade e eficácia mais duradoura. Além disso, pode efetivamente aliviar a dor articular do joelho, o inchaço, o estalo e a restrição de movimento 6,13,16,17.

No entanto, o mecanismo de Tuina para o tratamento de OA precisa ser esclarecido, o que limita a melhora e a perfeição do protocolo de tratamento para OA. Portanto, estudar o mecanismo de intervenção de Tuina em OA através de experimentos com animais é um método eficaz. Os coelhos, em comparação com os ratos, têm um temperamento dócil e articulações do joelho maiores. A estrutura anatômica e os índices bioquímicos da cartilagem são semelhantes aos dos seres humanos, sendo um tema adequado para o estudo do mecanismo de doença articular do joelho por Tuina¹⁸. O modelo de OA estabelecido pela injeção de papaína na cavidade articular do joelho de coelhos tem as vantagens de curto tempo de modelagem, trauma reduzido, alta taxa de sucesso, alta taxa de sobrevida e mecanismo patológico semelhante ao OA¹⁹. Este estudo tem como objetivo estabelecer um protocolo experimental animal cientificamente viável para a intervenção de Tuina em OA e investigar o mecanismo de Tuina.

Protocol

O estudo foi aprovado pelo comitê de ética do Hospital Afiliado da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Shandong (número de aprovação: 2020-29). 1. Animais de experimentação Criar coelhos da Nova Zelândia machos de grau normal de 18 e 6 meses de idade (2,75 ± 0,25 kg) em gaiolas simples padrão (ciclo claro/escuro de 12 h, temperatura 20-24 °C, umidade do ar 40%-60%). 2. Método de agrupamento …

Representative Results

O grau de restrição de movimento do joelho e o dano ao tecido cartilaginoso refletem a gravidade da OA. A ADM da articulação do joelho reflete o grau de restrição do movimento articular do joelho. Quanto menor a ADM articular do joelho, mais grave é a limitação do movimento articular do joelho. Ao contrário, quanto maior a ADM articular do joelho, mais normal é o grau de movimento do joelho. A coloração HE para observar a morfologia e estrutura do tecido cartilaginoso reflete o grau de dano do tecido cartila…

Discussion

O desenho do protocolo experimental é particularmente importante para investigar o mecanismo de Tuina no tratamento de OA hospitalar. A modelagem com OA foi realizada em coelhos por injeção de papaína em Waixiyan. Waixiyan está localizado na cripta lateral do ligamento patelar, que é fácil de localizar, e o espaço articular entre o fêmur e a tíbia é grande aqui durante a flexão do joelho, o que facilita a injeção na cavidade articular do joelho e evita danos aos tecidos circundantes, por isso é fácil esta…

Materials

0.9 % sodium chloride injection	Sichuan Keren Pharmaceutical Co.	Z22121903
-20°C refrigerator	Haier	BD-328WL
4 % fixative solution	Solarbio	P1110
4°C refrigerator	Haier	SC-315DS
Anhydrous ethanol	Sinopharm
Automatic tissue dewatering machine	Dakowei (Shenzhen) Medical Equipment Co.	HP30
Blast drying oven	Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co.	DHG-9070A
Coverslip	Biyuntian	FCGF50
Electric thermostat water bath	Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co.	HWS-26
Embedding freezing table	Changzhou Paishijie Medical Equipment Co.	BM450
Embedding machine	Changzhou Paishijie Medical Equipment Co.	BM450A
Ethylenediaminetetraacetic acid decalcification solution	Servicebio	G1105-500ML
Fluorescent inverted microscope	Leica	Leica DM IL LED
Hematoxylin-eosin staining kit	Cisco Jet	EE0012
Hydrochloric acid	Laiyang Economic and Technological Development Zone Fine Chemical Plant
Medical joint goniometer	KOSLO
Neutral gum	Cisco Jet	EE0013
Normal-grade male New Zealand rabbit	Jinan Xilingjiao Breeding and Breeding Center	SCXK (Lu) 2020 0004
Papain(3000 U/mg)	Bioss	D10366
Pathological tissue bleaching and drying instrument	Changzhou Paishijie Medical Equipment Co.	PH60
Pet electric clippers	Codos	CP-3180
Rabbit fixing box	any brand
Rotating Slicer	Leica	531CM-Y43
Tuina technique parameter determination instrument	Shanghai DuKang Instrument Equipment Co. Ltd.	ZTC-
Ventilator	TALY ELECTRIC	C32
Xylene	Fuyu Reagent