Summary
यह प्रोटोकॉल घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस (केओए) के सोडियम मोनोआयोडोसेटेट इंजेक्शन-प्रेरित चूहे मॉडल में ट्यूना हस्तक्षेप के तरीकों का वर्णन करता है, जो केओए पशु मॉडल में ट्यूना के आवेदन के लिए एक संदर्भ प्रदान करता है। यह प्रोटोकॉल केओए के लिए ट्यूना के प्रभावी तंत्र का भी अध्ययन करता है, और परिणाम इसके आवेदन को बढ़ावा देने में मदद करेंगे।
Abstract
घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस (केओए), एक आम अपक्षयी संयुक्त विकार, पुराने दर्द और विकलांगता की विशेषता है, जो संयुक्त के अपूरणीय संरचनात्मक क्षति के लिए प्रगति कर सकता है। केओए में आर्टिकुलर उपास्थि, मांसपेशियों, सिनोवियम और घुटने के जोड़ के आसपास के अन्य ऊतकों के बीच की कड़ी की जांच का बहुत महत्व है। वर्तमान में, केओए के प्रबंधन में जीवनशैली संशोधन, व्यायाम, दवा और सर्जिकल हस्तक्षेप शामिल हैं; हालांकि, केओए से संबंधित दर्द के अंतर्निहित जटिल तंत्र की व्याख्या अभी भी कमी है। नतीजतन, केओए दर्द एक प्रमुख नैदानिक चुनौती और चिकित्सीय प्राथमिकता बनी हुई है। टुइना को मोटर, प्रतिरक्षा और अंतःस्रावी तंत्र पर एक नियामक प्रभाव पाया गया है, जिससे यह पता चलता है कि क्या ट्यूना भड़काऊ कारकों के उत्थान के कारण केओए के लक्षणों को कम कर सकता है, और आगे, अगर कंकाल की मांसपेशियों में भड़काऊ कारक केओए की प्रगति को बढ़ा सकते हैं।
हमने 32 नर स्प्रैग डॉली (एसडी) चूहों (180-220 ग्राम) को आठ जानवरों के चार समूहों में यादृच्छिक किया: एंटीपीडी-एल 1 + टुइना (समूह ए), मॉडल (समूह बी), तुइना (समूह सी), और शम सर्जरी (समूह डी)। समूह ए, बी, और सी के लिए, हमने दाहिने घुटने के संयुक्त गुहा में सोडियम मोनोआयोडोसेटेट (एमआईए) समाधान (बाँझ खारा समाधान के 25 माइक्रोन में पतला 4 मिलीग्राम एमआईए) के 25 माइक्रोन इंजेक्ट किया, और समूह डी के लिए, बाँझ शारीरिक खारा की समान मात्रा इंजेक्ट की गई थी। सभी समूहों का मूल्यांकन इंजेक्शन से पहले और इंजेक्शन के बाद 2, 9, और 16 दिनों के लिए सबसे तनावपूर्ण परीक्षणों (पंजा यांत्रिक निकासी दहलीज, पंजा वापसी थर्मल विलंबता, दाहिने घुटने के जोड़ की सूजन, लेक्सेन एमजी स्कोर, त्वचा का तापमान) का उपयोग करके किया गया था।
Introduction
घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस (केओए) एक आम अपक्षयी ऑस्टियोआर्थराइटिस है, जो पुराने दर्द और विकलांगता की विशेषता है, और अपेक्षाकृत गंभीर केओए संयुक्त1 को अपरिवर्तनीय संरचनात्मक क्षति का कारण बनेगा। केओए का उच्च वैश्विक प्रसार एक प्रमुख वैश्विक सार्वजनिक स्वास्थ्य चुनौती 2,3 बन गया है, जो रोगियों के जीवन की गुणवत्ताको गंभीरता से प्रभावित करता है 4,5. अध्ययनों से पता चला है कि केओएदुनिया भर में 260 मिलियन से अधिक लोगों को प्रभावित करता है। जनसंख्या की उम्र बढ़ने के साथ, चीन में केओए की कुल व्यापकता दर 17.0 वर्ष की आयु में 40% जितनी अधिक है, जो प्रभावित लोगों के परिवारों पर भारी बोझ डालती है 7,8.
चीनी चिकित्सा के अनुसार, केओए "पक्षाघात" 9 की श्रेणी से संबंधित है, और आंतरिक चिकित्सा के पीले सम्राट के क्लासिक पक्षाघात के साथ टेंडन, हड्डियों और मांस को जोड़ते हैं। इसलिए, हमें केओए में उपास्थि, मांसपेशियों, सिनोवियम, साथ ही घुटने के जोड़ के आसपास के अन्य ऊतकों के बीच संबंध पर ध्यान देने की आवश्यकता है। आधुनिक चिकित्सा में, मांसपेशियों और हड्डी की सूजन दोनों, जो गठिया के प्रतिरक्षा होमियोस्टेसिस के प्रमुख घटक हैं, केओए दर्द की प्रगति को चलाते हैं। हालांकि, अधिकांश अध्ययन हड्डी के जोड़ों में उपास्थि की सूजन और श्लेष सूजन पर ध्यान केंद्रित करते हैं, और कंकाल की मांसपेशियों में भड़काऊ घटनाओं की जांच करने वाले लेखों की कमी है। इसलिए, केओए की अधिक व्यापक समझ हासिल करने और अधिक प्रभावी उपचार के तौर-तरीकों के लिए विचार प्रदान करने के लिए सूजन में कंकाल की मांसपेशियों की भूमिका पर अधिक शोध की आवश्यकता है। साहित्य की समीक्षा में, हमने पाया कि प्रतिरक्षा-संबंधी कारक क्रमादेशित मृत्यु लिगैंड 1 (PD-L1) के निषेध ने KOA10,11 की प्रगति को बढ़ा दिया और KOA 15 के साथ रोगियों की कंकाल की मांसपेशी में IL-12 और FOXO12 की अंतर अभिव्यक्ति थी, साथ ही अंत-चरण KOA वाले रोगियों में महत्वपूर्ण कंकाल की मांसपेशियों की सूजन, जो चाल में बदलाव से भी जुड़ा था। यह दिखाया गया है कि कंकाल की मांसपेशी आईएल -6 जैसे भड़काऊ प्रतिरक्षा से निकटता से संबंधित कारकों का स्राव भी कर सकती है, और यह कि टीएनएफ-α पीडी-एल 1 मार्ग और केओए13,14,15 से भी निकटता से संबंधित है।
वर्तमान में, केओए के लिए उपलब्ध उपचारों में वजन नियंत्रण, व्यायाम, दवा और सर्जरी शामिल हैं, जिसमें आमतौर पर इंट्रा-आर्टिकुलर इंजेक्शन, एनाल्जेसिक दवा, आर्थोस्कोपिक सर्जरी और घुटने16 के पेरिप्रोस्थेटिक ऑस्टियोटॉमी शामिल हैं। वर्तमान में, केओए रोग की प्रगति को पूरी तरह से रोका या उलटा नहीं किया जा सकता है, और केओए दर्द के अंतर्निहित जटिल तंत्र की स्पष्ट समझ के बिना, केओए रोगियों को एनाल्जेसिक दवाओं के अति प्रयोग और साइड इफेक्ट्स की एक उच्च घटना के लिए जोखिम होता है8. अधिकांश उपचार रणनीतियाँ केवल छोटी अवधि के लिए प्रभावी होती हैं और रोग के रोगजनन के बजाय केवल लक्षणों की अस्थायी राहत पर ध्यान केंद्रित करती हैं। इसलिए, केओए दर्द एक प्राथमिकता और उपचार के लिए एक चुनौती बनी हुई है, जो एक गंभीर नैदानिक चुनौती है। हालांकि, ट्यूना केओए उपचार में प्रभावित संयुक्त के आसपास कंकाल की मांसपेशियों को सीधे उत्तेजित कर सकता है और कुछ लाभ प्रदान कर सकता है। पिछले विवरण के साथ संयुक्त, यह केओए में कंकाल की मांसपेशी ऊतक की भूमिका का अध्ययन करने के लिए आदर्श चिकित्सा है, और सूजन में कंकाल की मांसपेशी ऊतक की भूमिका को स्पष्ट करना केओए के तुइना के लिए बेहतर सैद्धांतिक समर्थन भी प्रदान कर सकता है।
अध्ययनों से पता चला है कि मालिश चिकित्सा, ऑस्टियोपैथिक जोड़ तोड़ चिकित्सा, और रीढ़ की हड्डी में हेरफेर दर्द को दूर करने और शरीर समारोह17,18 बहाल करने में मदद कर सकते हैं. ये जोड़तोड़ स्थानीय सूजन पर कार्य कर सकते हैं और बाहरी यांत्रिक कार्रवाई के माध्यम से ऐंठन और एनाल्जेसिया से राहत दे सकते हैं। वे कुल घुटने आर्थ्रोप्लास्टी के बाद दर्द से राहत दे सकते हैं, एनाल्जेसिक दवाओं के उपयोग को कम कर सकते हैं, पश्चात वसूली को बढ़ावा देने और बायोमेकेनिकल संतुलन19 में सुधार कर सकते हैं। स्वीडिश मालिश पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस के उपचार में संभव है और तनाव को कम कर सकते हैं और जीवन की गुणवत्ता में सुधार कर सकतेहैं 20. केओए पर तुइना का चिकित्सीय प्रभाव कुछ अध्ययनों से पहले हुआ है।
इस प्रयोग में, हमारी टीम यह पता लगाएगी कि क्या पीडी-एल 1 की अभिव्यक्ति और कंकाल की मांसपेशियों में संबंधित भड़काऊ कारक केओए को प्रेरित कर सकते हैं और चूहों में एमआईए-प्रेरित केओए मॉडल के आधार पर इसके विकास को बढ़ावा दे सकते हैं। ट्यूना को यह देखने के लिए भी लागू किया जाएगा कि क्या यह सूजन कारक अभिव्यक्ति में वृद्धि के कारण केओए के लक्षणों को कम कर सकता है। Tuina को PD-L1 अवरोध के साथ जोड़ा जाएगा ताकि KOA विकास और दर्द को प्रभावित करने वाले कंकाल की मांसपेशियों की सूजन में Tuina-मध्यस्थता PD-1 मार्ग के बीच संबंध प्रदर्शित किया जा सके, जो KOA में Tuina हस्तक्षेप के चिकित्सीय तंत्र पर आगे के बहु-स्तरीय अध्ययन की नींव रखेगा।
सारांश में, यह पत्र केओए और इसके दर्द के विकास में कंकाल की मांसपेशियों की सूजन के तंत्र की जांच और विस्तार का वर्णन करता है, साथ ही साथ प्रतिरक्षा-भड़काऊ कारक अभिव्यक्ति के दृष्टिकोण से केओए पर तुइना के चिकित्सीय प्रभाव, व्यवहार संबंधी संकेतकों के साथ संयुक्त, पारंपरिक चीनी चिकित्सा में "कण्डरा और हड्डी के असंतुलन" सिद्धांत के लिए आधुनिक शोध साक्ष्य प्रदान करने के लिए।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
सभी प्रयोगों को शंघाई यूनिवर्सिटी ऑफ ट्रेडिशनल चाइनीज मेडिसिन (अनुमोदन संख्या: SYXK2018-0040) की पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित और पर्यवेक्षण किया गया था, जो वर्ल्ड मेडिकल एसोसिएशन हेलसिंकी घोषणा में शर्तों के अनुरूप है।
1. पशु तैयारी
- हाउस 32 स्प्रैग डॉली (एसडी) नर चूहों की आयु 8 सप्ताह और वजन 180-220 ग्राम एक विशिष्ट रोगजनक मुक्त आवास उपकरण में 12 घंटे प्रकाश / 12 घंटे अंधेरे चक्र के तहत 24 ± 2 डिग्री सेल्सियस और 60% आर्द्रता एक मानक कृंतक गोली आहार के साथ। जानवरों पर सभी प्रयोगात्मक संचालन प्रयोगात्मक जानवरों और पशु प्रयोगात्मक सुरक्षा नियमों के कल्याण नैतिकता का अनुपालन करते हैं।
- अनुकूली खिला के 1 सप्ताह के बाद प्रत्येक आठ जानवरों के चार समूहों में यादृच्छिक और पिंजरे चूहों: एंटीपीडी-एल 1 + टुइना (समूह ए), मॉडल (समूह बी), ट्यूना (समूह सी), और शम सर्जरी (समूह डी)।
2. घुटने में मोनोसोडियम आयोडोसेटेट (एमआईए) का इंट्रा-आर्टिकुलर इंजेक्शन
नोट: समूह डी को छोड़कर, केओए चूहा मॉडल सभी समूहों में एमआईए के घुटने के संयुक्त गुहा इंजेक्शन द्वारा तैयार किया जाएगा। समूह डी के लिए, दाहिने घुटने के संयुक्त गुहा में बाँझ शारीरिक खारा के 25 माइक्रोन इंजेक्ट करें।
- चूहे को एक संवेदनाहारी पिंजरे में रखकर और फिर 2.5% आइसोफ्लुरेन पेश करके एनेस्थेटाइज करें जब तक कि यह पूरी तरह से संवेदनाहारी न हो जाए। पुष्टि करें कि जानवर पूरी तरह से उस बिंदु की प्रतीक्षा करके संवेदनाहारी है जब युवा चूहा अपनी पीठ पर झूठ बोल रहा है, उसके अंग हिलना बंद कर देते हैं, और पैर की अंगुली चुटकी (पेडल रिफ्लेक्स), पैल्पेब्रल रिफ्लेक्स और मांसपेशियों में छूट में कोई प्रतिक्रिया नहीं होती है।
- आंखों की सूखापन को रोकने के लिए एनेस्थेटाइज्ड युवा चूहों को पालतू आंख मरहम और आंखों की बूंदें जोड़ें।
- चूहों के दाहिने हिंद अंग दाढ़ी और आयोडोफोर और 75% इथेनॉल के तीन वैकल्पिक दौर के साथ घुटने के जोड़ कीटाणुरहित.
- एक मानकीकृत प्रयोगात्मक स्थिति को बनाए रखने के लिए, ध्यान से 90 डिग्री के एक सटीक कोण पर घुटने के लचीलेपन को ठीक करें, यह सुनिश्चित करना कि पटेलर लिगामेंट ऊपर की ओर उन्मुख है। इसके बाद, एमआईए समाधान के 25 माइक्रोन इंजेक्ट करें, जिसमें चूहों के दाहिने घुटने के संयुक्त गुहा में बाँझ खारा समाधान के 25 माइक्रोन में पतला एमआईए के 4 मिलीग्राम शामिल हैं।
नोट: यह इंजेक्शन एक विशेष माइक्रोइंजेक्टर के साथ किया गया था, प्रक्रिया21,22,23 में सटीकता और स्थिरता सुनिश्चित करना। चूहों को वापस पिंजरों में रखें जब तक कि वे जाग न जाएं। जिस जानवर की सर्जरी हुई है, वह पूरी तरह से ठीक होने तक अन्य जानवरों की कंपनी में वापस नहीं आता है। - अध्ययन के अंत में, 100 मिलीग्राम / किग्रा खुराक के रूप में 1% पेंटोबार्बिटल सोडियम इंजेक्शन द्वारा चूहों को इच्छामृत्यु दें।
3. तुइना का कार्यान्वयन
नोट: का कार्यान्वयनटुइना सिद्धांत द्वारा निर्देशित किया जाएगा कि "कण्डरा और हड्डी के असंतुलन वाले रोगियों के लिए, टेंडन को पहले इलाज करने की आवश्यकता है"। दोनों समूह ए और बी ने मॉडल के सफल मूल्यांकन के बाद पहले दिन हस्तक्षेप शुरू किया, और दोनों समूहों को 14 दिनों के लिए दिन में एक बार संचालित किया गया। शेष दो समूहों को बिना किसी हस्तक्षेप के केवल 14 दिनों के लिए देखा गया था। बल, आवृत्ति और लय की स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए प्रयोग से पहले हेरफेर के ऑपरेटरों को सख्ती से प्रशिक्षित किया जाना चाहिए।
- सटीक रूप से EX-LE4, ST35, SP10, ST34, SP9, और GB34 (चित्रा 1 और तालिका 1) सहित चूहे एक्यूपंक्चर बिंदु का पता लगाएं, जहां प्रायोगिक एक्यूपंक्चर24 का उपयोग करके उंगली सानना विधियों को किया जाएगा।
- चूहे निर्धारण उपकरण पर प्रवण स्थिति में चूहे को ठीक करें।
- शांत होने और निचले अंगों के शिथिल होने के बाद, प्रभावित अंग के EX-LE4 और ST35 को अंगूठे और तर्जनी से एक साथ 4 मिनट के लिए 120-140 बार/मिनट पर गूंध लें।
- अंगूठे और तर्जनी के साथ प्रभावित अंग के पूर्वकाल और औसत दर्जे का पार्श्व मांसपेशियों को 120-140 बार/मिनट पर 3 मिनट के लिए गूंधें, SP10, ST34 और घुटने के जोड़ के पास की मांसपेशियों पर ध्यान केंद्रित करें। एक तीव्रता के साथ उन कठोर मांसपेशियों के हेरफेर पर जोर दें ताकि चूहा संघर्ष न करे।
- प्रभावित अंग के पीछे के बछड़े की मांसपेशियों को ऊपर से नीचे तक 3 मिनट के लिए 120-140 बार/मिनट पर अंगूठे, तर्जनी और मध्यमा उंगली का उपयोग करके गूंध लें। उपचार क्षेत्र को पूरी तरह से उजागर करने के लिए, प्रभावित अंग के टखने के जोड़ को पकड़ने के लिए अनामिका और छोटी उंगली का उपयोग करें और धीरे से प्रभावित अंग पर टग करें। SP9, GB34, और कठोर मांसपेशियों और तीव्रता पर जोर देने के साथ घुटने के जोड़ के पास की मांसपेशियों पर ध्यान केंद्रित करें ताकि चूहा संघर्ष न करे।
4. व्यवहार सूचकांक का मापन
- तल यांत्रिक दर्द सीमा का मापन
नोट: एमआईए इंजेक्शन से 1 दिन पहले और इंजेक्शन के 2, 9 और 16 दिनों के बाद प्लांटार मैकेनिकल दर्द थ्रेसहोल्ड को मापें।- अनुकूलन के 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान (22 ± 2) डिग्री सेल्सियस पर एक शांत वातावरण में एक स्टेनलेस स्टील ग्रिड नीचे और एक प्लास्टिक पिंजरे शरीर के साथ एक तल परीक्षण कक्ष में चूहों को लाओ.
- चूहों के दाहिने हिंद पैर के केंद्रीय क्षेत्र को लंबवत रूप से उत्तेजित करने के लिए व्यास में 0.8 मिमी की प्लास्टिक परीक्षण सुई के साथ एक इलेक्ट्रॉनिक यांत्रिक दर्द परीक्षक का उपयोग करें। समान रूप से और धीरे-धीरे उत्तेजना की तीव्रता में वृद्धि जब तक चूहों पंजा पीछे हटना और परिहार प्रतिक्रियाओं दिखा.
- चूहे के दाहिने तल पैर के यांत्रिक दर्द दहलीज के रूप में इलेक्ट्रॉनिक स्क्रीन के पढ़ने रिकॉर्ड.
- 5 मिनट के अंतराल पर प्रत्येक चूहे 5x उपाय.
- पाँच मानों में से अधिकतम और न्यूनतम मानों को निकालें. परिणाम (तालिका 2) के रूप में छंटनी माध्य विधि के माध्यम से मध्य तीन मूल्यों का औसत मूल्य लें।
- पंजा यांत्रिक निकासी सीमा का मापन
नोट: एमआईए इंजेक्शन से 1 दिन पहले, इंजेक्शन के 2, 9 और 16 दिनों के बाद पंजा यांत्रिक निकासी सीमा को मापें।- अनुकूलन के 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान (22 ± 2) डिग्री सेल्सियस पर एक शांत वातावरण में एक 30 डिग्री सेल्सियस कांच के नीचे और एक प्लास्टिक पिंजरे शरीर के साथ एक गर्म तल परीक्षण कक्ष में चूहों को लाओ।
- चूहे एक पंजा पीछे हटने और परिहार प्रतिक्रिया से पता चलता है जब तक 65 डिग्री सेल्सियस की एक उत्तेजना तापमान पर एक प्रकाश स्रोत हीटिंग डिवाइस के साथ सही हिंद तल केंद्र क्षेत्र को उत्तेजित करें.
- चूहे के सही तल थर्मल दर्द सीमा के रूप में इलेक्ट्रॉनिक स्क्रीन के समय पढ़ने रिकॉर्ड.
- प्रत्येक चूहे 5x लगातार 5 मिनट के अंतराल पर उपाय.
- पाँच मानों में से अधिकतम और न्यूनतम मानों को निकालें. परिणाम (तालिका 3) के रूप में छंटनी माध्य विधि के माध्यम से मध्य तीन मूल्यों का औसत मूल्य लें।
5. दाहिने घुटने के जोड़ की सूजन का मापन
नोट: एमआईए इंजेक्शन से 1 दिन पहले चूहों के दाहिने घुटने के जोड़ की सूजन को मापें, इंजेक्शन के 2, 9 और 16 दिन बाद।
- चूहे को एक संवेदनाहारी पिंजरे में रखकर और इसे 2.5% आइसोफ्लुरेन तक उजागर करके एनेस्थेटाइज करें जब तक कि यह पूरी तरह से संवेदनाहारी न हो जाए।
- ऑपरेटिंग टेबल पर एक फ्लैट स्थिति में चूहे रखें.
- वर्नियर कैलिपर्स (चित्रा 2 और तालिका 4) के साथ दाहिने घुटने के जोड़ की चौड़ाई को मापें।
6. Lequesne MG स्कोर का मापन
नोट: एमआईए इंजेक्शन के बाद 2, 9 और 16 दिनों में चूहों में लेक्सन एमजी स्कोर को मापें। Lequesne et al ने कूल्हे (ISH) के लिए पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस के लिए गंभीरता का एक सूचकांक विकसित किया, जिसका उपयोग चिकित्सीय हस्तक्षेप की प्रभावशीलता का आकलन करने के लिए किया जा सकता है। हम चार मापदंडों पर विचार करते हैं: दर्द उत्तेजना, चाल परिवर्तन, संयुक्त गतिशीलता और संयुक्त सूजन।
- कमरे के तापमान (22 ± 2) डिग्री सेल्सियस पर एक शांत वातावरण में एक हेरफेर मंच के लिए चूहों लाओ.
- दो ऑपरेटर हैं, एक दूसरे से अंधे हैं, स्थानीय दर्द उत्तेजना प्रतिक्रिया, चाल परिवर्तन, संयुक्त आंदोलन और संयुक्त सूजन को मापते हैं।
- एक प्लास्टिक परीक्षण सुई के साथ दाहिने घुटने के जोड़ के पार्श्व पक्ष को उत्तेजित करें और प्रतिक्रिया के अनुसार 0-3 के पैमाने पर स्कोर करें। 0 कोई जवाब नहीं; 3 एक अच्छी प्रतिक्रिया; प्रभावित अंग का 1 संकुचन; प्रभावित अंग के 2 संकुचन और ऐंठन, हल्के सामान्यीकृत प्रतिक्रियाओं के साथ, जैसे कांपना, चाटना और चूसना।
- ऑपरेटिंग टेबल पर चूहे प्लेस और अपने दाहिने हिंद अंगों की चाल का निरीक्षण. प्रतिक्रिया के अनुसार 0-3 के पैमाने पर स्कोर करें। 0 प्रभावित अंग की गति में कोई गड़बड़ी नहीं, सामान्य दौड़ना और मजबूत फुटवर्क; 3 प्रभावित अंग चलने में भाग नहीं ले सकता है, जमीन को छू सकता है, या जमीन पर स्टंप नहीं कर सकता है; मजबूत स्टंप के साथ दौड़ने के दौरान 1 हल्के ट्रेकिंग; 2 प्रभावित अंग चलने में भाग लेता है, लेकिन चूहों (ट्रेकिंग) के आंदोलन में गड़बड़ी स्पष्ट है।
- फ्लेक्स और हाथ से चूहे के दाहिने घुटने के जोड़ का विस्तार और संयुक्त गतिशीलता का निरीक्षण. प्रतिक्रिया के अनुसार 0-3 के पैमाने पर स्कोर करें। 90 ° से अधिक का 0 संयुक्त गतिशीलता कोण; 15 डिग्री से कम का 3 संयुक्त गतिशीलता कोण; 1 संयुक्त गतिशीलता कोण या 45 ° -90 °; 2 ° -15 ° का संयुक्त गतिशीलता कोण।
- चूहे के दाहिने घुटने के जोड़ को स्पर्श करें और एक सामान्य चूहे के साथ प्रतिक्रिया की तुलना करें। प्रतिक्रिया के अनुसार 0-2 के पैमाने पर स्कोर करें। 0 कोई स्पष्ट सूजन और दृश्यमान बोनी चिह्न; 2 चिह्नित सूजन और कोई बोनी निशान नहीं; 1 हल्की सूजन और सतही बोनी के निशान।
- प्रत्येक चूहे के लिए Lequesne एमजी स्कोर का उत्पादन करने के लिए इन स्कोर जोड़ें और छंटनी विधि (तालिका 5) के माध्यम से औसत मूल्य की गणना.
7. त्वचा के तापमान का मापन
नोट: एमआईए इंजेक्शन से 1 दिन पहले और इंजेक्शन के 9 और 16 दिन बाद त्वचा का तापमान मापें।
- चूहे को एक संवेदनाहारी पिंजरे में रखकर और फिर आइसोफ्लुरेन को तब तक पेश करें जब तक कि यह पूरी तरह से संवेदनाहारी न हो जाए।
- ऑपरेटिंग टेबल पर एक पार्श्व स्थिति में चूहे रखें, कमरे के तापमान (22 ± 2) डिग्री सेल्सियस पर.
- हाथ से पैर को धीरे से पकड़कर दाएं घुटने के जोड़ को सीधा करें। Filr इन्फ्रारेड कैमरे का उपयोग करके त्वचा का तापमान निर्धारित करने के लिए फोटोग्राफ।
- सहायक संपादन सॉफ्टवेयर का उपयोग करके घुटने के जोड़ की त्वचा का तापमान और चूहे के घुटने के जोड़ के आसपास पढ़ें। टखने के जोड़ और घुटने के जोड़ पर नियंत्रण बिंदु सेट करें जहां तापमान धीरे-धीरे कम हो जाता है।
8. सांख्यिकीय विश्लेषण
- चतुर्थक में प्रयोगात्मक डेटा व्यक्त करने के लिए सांख्यिकीय सॉफ्टवेयर का उपयोग करें.
- आउटलेर्स से निपटने के लिए ट्रिम मीन विधि का उपयोग करें। व्यवहार परीक्षणों के परिणामों को माध्य ± मानक त्रुटि के रूप में नोट किया जाता है।
- समूहों के बीच तुलना के लिए स्वतंत्र नमूने टी-परीक्षण करें। विचरण (एनोवा) के दो-तरफा दोहराया माप विश्लेषण का उपयोग करके व्यवहार डेटा का विश्लेषण करें, इसके बाद बोनफेरोनी के कई तुलना परीक्षण किए जाते हैं। जहां डेटा सामान्यता या होमोसेडेस्टिसिटी प्रदर्शित नहीं करता है, एक गैर-पैरामीट्रिक परीक्षण (क्रुस्कल-वालिस के नमूने) करें।
नोट: पी < 0.05 इंगित करता है कि अंतर सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण हैं। सभी डेटा लागू होने वाले सांख्यिकीय परीक्षणों की मान्यताओं को पूरा करते हैं।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
वर्णित प्रोटोकॉल एकीकृत पारंपरिक चीनी और पश्चिमी चिकित्सा के Yueyang अस्पताल में एक नैदानिक सेटिंग में लागू किया गया था. चित्रा 1 चूहों में धकेल दिया एक्यूपॉइंट्स का सटीक स्थान दिखाता है, और तालिका 1 इन बिंदुओं को उत्तेजित करने के सामान्य लाभों को दिखाता है। तालिका 2 और तालिका 3 पीडी -1 मार्ग निषेध की अनुपस्थिति में भी ट्यूना थेरेपी के माध्यम से प्राप्त उल्लेखनीय दर्द राहत के सम्मोहक सबूत प्रदान करते हैं। तालिका 4, तालिका 5, और चित्र 2 में प्रस्तुत निष्कर्ष अतिरिक्त रूप से ट्यूना आवेदन और घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस (केओए) की प्रगति के बीच संबंध को दर्शाते हैं, जिसका अर्थ है कि मैनुअल थेरेपी चूहों में केओए लक्षण प्रबंधन को बढ़ाने के लिए एक सहायक दृष्टिकोण के रूप में काम कर सकती है। हमने मैनुअल थेरेपी एंटी-पीडी-एल 1 (एमटीए) समूह में प्रत्येक चूहे को एंटी-पीडी-एल 1 की 200 माइक्रोग्राम की खुराक के साथ इंजेक्ट किया ताकि एमआईए के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस प्रेरण के 3 दिनों के बाद मार्ग को अवरुद्ध किया जा सके। फिर, चूहों चूहे एक्यूपंक्चर अंक में मैनुअल थेरेपी के अधीन थे, EX-LE4, ST35, SP10, ST34, SP9, और GB34 सहित, 2 सप्ताह के लिए हर 2 दिन, 3 दिनों के बाद उंगली सानना तरीकों का उपयोग के बाद पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस प्रेरण.
चित्रा 1: चूहों में अंक का आरेख. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्रा 2: चूहों में घुटनों की सूजन के विभिन्न डिग्री। ट्यूना के कार्यान्वयन के माध्यम से सूजन को नियंत्रित किया जा सकता है। पीडी-एल 1 मार्ग अवरुद्ध होने से पहले, दाहिने घुटने के संयुक्त व्यास (घुटने जिसे एमआईए के साथ इंजेक्ट किया गया था) को मापा गया था (19 जनवरीको) और 1 सप्ताह के बाद फिर से मापा गया। घुटने की सूजन को नियंत्रित करने पर तुइना का प्रभाव पीडी-एल 1 नाकाबंदी के बाद महत्वहीन हो जाता है। P < 0.0001 का प्रतिनिधित्व करते हैं, ** P < 0.01 का प्रतिनिधित्व करते हैं, * P < 0.05 का प्रतिनिधित्व करते हैं)। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
| एक्यूपंक्चर अंक | कार्यों |
| पूर्व-LE4 | घुटने की सूजन और दर्द से राहत |
| एसटी35 | संयुक्त डिस्फ्लेक्सिया को कम करें |
| एसपी10 | औसत दर्जे का ऊरु दर्द कम करें |
| एसटी34 | संयुक्त पक्षाघात हस्तक्षेप |
| एसपी9 | घुटने के दर्द से राहत |
| जीबी34 | निचले अंग के पक्षाघात से छुटकारा पाएं |
तालिका 1: इन बिंदुओं को उत्तेजित करने का प्रभाव।
| बेसलाइन | 1 सप्ताह | 2 सप्ताह | |
| ग्रुप A | 58.01 | 29.61 | 27.9 |
| (एंटीपीडी-एल 1 + टुइना) | |||
| ग्रुप बी | 31.76 | 25 | 23.52 |
| (नमूना) | |||
| ग्रुप सी | 34.15 | 32.45 | 37.53 |
| (तुइना) | |||
| ग्रुप डी | 40.26 | 43.93 | 51.3 |
| (शाम की सर्जरी) |
तालिका 2: बेसलाइन (पीडी-एल 1 नाकाबंदी का दिन), 1 सप्ताह और सफल प्रेरण के 2 सप्ताह बाद समूहों के बीच यांत्रिक दर्द थ्रेसहोल्ड की तुलना। तालिका में डेटा उस दिन मापा गया प्रत्येक समूह का औसत मान है। किसी भी दो समूहों के बीच पी मान <0.05 है, समूह ए और बी के बीच पी मान को छोड़कर।
| बेसलाइन | 1 सप्ताह | 2 सप्ताह | |
| ग्रुप A | 9.67 | 6.72 | 7.82 |
| (एंटीपीडी-एल 1 + टुइना) | |||
| ग्रुप बी | 7.5 | 7.25 | 6.39 |
| (नमूना) | |||
| ग्रुप सी | 11.67 | 8.63 | 9.26 |
| (तुइना) | |||
| ग्रुप डी | 12.8 | 10.8 | 10.14 |
| (शाम की सर्जरी) |
तालिका 3: बेसलाइन पर समूहों के बीच थर्मल दर्द थ्रेसहोल्ड की तुलना, 1 सप्ताह और सफल प्रेरण के 2 सप्ताह बाद। तालिका में डेटा उस दिन मापा गया प्रत्येक समूह का औसत मान है। किसी भी दो समूहों के बीच पी मान <0.05 है, समूह ए और बी के बीच पी मान को छोड़कर।
| बेसलाइन | 1 सप्ताह | 2 सप्ताह | |
| ग्रुप A | 10.96 | 11.68 | 10.56 |
| (एंटीपीडी-एल 1 + टुइना) | |||
| ग्रुप बी | 11.3 | 12.18 | 11.79 |
| (नमूना) | |||
| ग्रुप सी | 11.75 | 10.88 | 10.35 |
| (तुइना) | |||
| ग्रुप डी | 10.8 | 11.23 | 10.49 |
| (शाम की सर्जरी) |
तालिका 4: बेसलाइन पर समूहों के बीच घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस सूजन की तुलना, 1 सप्ताह, और सफल प्रेरण के 2 सप्ताह बाद। तालिका में डेटा उस दिन मापा गया प्रत्येक समूह का औसत मान है। किसी भी दो समूहों के बीच P मान <0.05 है, समूह A और B के बीच P मान को छोड़कर)
| बेसलाइन | 1 सप्ताह | 2 सप्ताह | |
| ग्रुप A | 3.13 | 4.25 | 3.88 |
| (एंटीपीडी-एल 1 + टुइना) | |||
| ग्रुप बी | 2.63 | 4.5 | 4.75 |
| (नमूना) | |||
| ग्रुप सी | 2.75 | 1.88 | 2.25 |
| (तुइना) | |||
| ग्रुप डी | 0 | 0 | 0 |
| (शाम की सर्जरी) |
तालिका 5: बेसलाइन पर समूहों के बीच Lequesne एमजी सूचकांक की तुलना, 1 सप्ताह, और सफल प्रेरण के बाद 2 सप्ताह. तालिका में डेटा उस दिन मापा गया प्रत्येक समूह का औसत मान है। किसी भी दो समूहों के बीच पी मान <0.05 है, समूह ए और बी के बीच पी मान को छोड़कर।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
इस अध्ययन का उद्देश्य मानकीकृत व्यवहार संकेतकों का उपयोग करके तुइना हस्तक्षेप के बाद केओए के सुधार का आकलन करना और केओए के लिए ट्यूना के तंत्र और कंकाल की मांसपेशियों और केओए के बीच संबंध की जांच करना है। औषधीय और शल्य चिकित्सा उपचारों के विपरीत, टुइना का मोटर, प्रतिरक्षा और अंतःस्रावी तंत्र पर सकारात्मक नियामक प्रभाव पड़ता है। टुइना विभिन्न लक्ष्यों पर कार्य करके बीमारी से उत्पन्न सूजन और दर्द को दूर कर सकता है। उदाहरण के लिए, टीएलआर 4 मार्ग और एमआईआरएनए को विनियमित करके, यह ग्लियल कोशिकाओं की सक्रियता को रोक सकता है, परिवर्तित मस्तिष्क समारोह को संशोधित कर सकता है, डाउनस्ट्रीम भड़काऊ साइटोकिन्स को विनियमित कर सकता है, और परिधीय सूजन25,26,27को दबा सकता है। इसी समय, Tuina भी स्वायत्त तंत्रिका तंत्र और hypothalamic-पिट्यूटरी-अधिवृक्क अक्ष है कि पुराने दर्द विकारों में बेकार हैं में हस्तक्षेप कर सकते हैं, इस प्रकार स्वायत्त तंत्रिका तंत्र homeostasis बहाल करने और एक immunoendocrine प्रतिक्रिया को ट्रिगर करने में मदद, जो अंतःस्रावी और शारीरिक प्रक्रियाओं28,29,30 को विनियमित करके दर्द से छुटकारा मिल सकता है . इसके अतिरिक्त, जब Tuina बाहरी रूप से मांसपेशियों, parasympathetic उत्तेजना 31, और इन विट्रो में extravascular दबाव कंकाल की मांसपेशी संकुचन और वासोडिलेशन का कारण बनता है, जो कंजेस्टिव प्रतिक्रिया में योगदान देता है और चयापचय32,33 को बढ़ावा देता है. इसलिए, एक गैर-औषधीय और गैर-सर्जिकल उपचार के रूप में, तुइना केओए की राहत के लिए एक आशाजनक चिकित्सा है।
हमने मोनोसोडियम आयोडोसेटेट (एमआईए) द्वारा प्रेरित केओए मॉडल पर एरोबिक व्यायाम, पारंपरिक चीनी चिकित्सा (टीसीएम), और इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर के चिकित्सीय प्रभावों पर साहित्य की भी समीक्षा की। एरोबिक व्यायाम TRPV5 की अभिव्यक्ति को विनियमित करके चोंड्रोसाइट एपोप्टोसिस को रोक सकता है, और एरोबिक व्यायाम और ग्लूकोसामाइन हाइड्रोक्लोराइड कैप्सूल का संयोजन और भी अधिक प्रभावी हो सकता है34,35. चीनी जड़ी बूटियों से शुद्ध यौगिक, जैसे कि कैस्टिसिन और वैनिलिक एसिड, घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस, श्लेष सूजन और विवो में दर्द से संबंधित व्यवहार / मध्यस्थ को कम कर सकते हैं। चीनी जड़ी बूटियों से शुद्ध यौगिक, जैसे कि कैस्टिसिन और वैनिलिक एसिड36, विवो में घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस में केओए श्लेष सूजन और दर्द से संबंधित व्यवहार / मध्यस्थ को कम कर सकते हैं। इसके अलावा, वैनिलिक एसिड एनएलआरपी 3 भड़काऊ सक्रियण37 को बाधित करके घुटने के जोड़ों की रक्षा कर सकता है। इसके अलावा, इलेक्ट्रोएक्यूपंक्चर को एनएलआरपी 3 सूजन को बाधित करने और पाइरोप्टोसिस को कम करने के लिए प्रदर्शित किया गया है, जिससे उपास्थि ऊतक का संरक्षण और केओए38 का उपचार होता है।
टीसीएम के विपरीत, ट्यूना को नैदानिक उपचार के लिए आंदोलन के विभिन्न रूपों की आवश्यकता होती है, कई तकनीकों और रोगी के निष्क्रिय आंदोलन का संयोजन, जो अक्सर उपयुक्त तकनीक, कार्रवाई की साइट और कार्रवाई की ताकत चुनने में नए चिकित्सकों के लिए एक समस्या होती है। इसके अलावा, पोस्टट्रीटमेंट प्रभावकारिता का मूल्यांकन हेरफेर चिकित्सा में एक बड़ी चुनौती है, क्योंकि यह ज्यादातर रोगियों के व्यक्तिपरक विवरणों तक सीमित है, जिसमें विधियों और प्रथाओं का मूल्यांकन करने के लिए कोई उद्देश्य डेटा नहीं है। इसलिए, हमने केओए और दर्द के विकास में कंकाल की मांसपेशियों की सूजन के तंत्र की जांच करने और केओए के चूहे के मॉडल के आधार पर केओए पर ट्यूना के चिकित्सीय प्रभावों की जांच करने का लक्ष्य रखा, जो एमआईए के साथ प्रेरित है, व्यवहार और भड़काऊ कारक से संबंधित संकेतकों के साथ संयुक्त। उसी समय, चूंकि ट्यूना को इस सिद्धांत द्वारा निर्देशित किया जाता है कि "कण्डरा और हड्डी के असंतुलन वाले रोगियों के लिए, टेंडन को पहले इलाज करने की आवश्यकता होती है", प्रायोगिक एक्यूपंक्चर में चूहे एक्यूपंक्चर बिंदु सूची का उपयोग EX-LE4, ST35, SP10, ST34, SP9 और GB34 का सटीक पता लगाने के लिए किया जाएगा। इसलिए, बल, आवृत्ति और लय की स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए हस्तक्षेप लागू करने से पहले हेरफेर करने वाले ऑपरेटरों को सख्ती से प्रशिक्षित किया जाना चाहिए।
तालिका 2 और तालिका 3 सबूत प्रदान करते हैं कि पीडी -1 मार्ग की नाकाबंदी के बिना ट्यूना द्वारा दर्द से काफी राहत मिली है। तालिका 4, तालिका 5, और चित्रा 2 में परिणाम आगे ट्यूना और केओए प्रगति के कार्यान्वयन के बीच संबंध को प्रदर्शित करते हैं, यह सुझाव देते हुए कि चूहों के केओए लक्षणों में सुधार के लिए मैनुअल थेरेपी केओए के लिए एक पूरक उपचार हो सकता है। इसलिए, केओए की प्रगति का मुकाबला करने के लिए ट्यूना के साथ उपचार एक प्रभावी हस्तक्षेप हो सकता है; हालांकि, इसके तंत्र को स्पष्ट करने के लिए अधिक गहन अध्ययन की आवश्यकता है।
इसके अलावा, इस प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल के लिए कुछ सीमाएं हैं. सबसे पहले, चूंकि अति सक्रिय या शांत चूहे हैं और यांत्रिक दर्द के माप में कुछ त्रुटि हो सकती है, प्रत्येक माप को प्रत्येक माप के बीच नियमित अंतराल के साथ समयबद्ध करने की आवश्यकता होती है। दूसरा, यह प्रयोगात्मक डिजाइन एमआईए-प्रेरित केओए चूहा मॉडल का अध्ययन करने के लिए डिज़ाइन किया गया है, और ट्यूना के नैदानिक चिकित्सीय प्रभावों को स्पष्ट करने के लिए और शोध की आवश्यकता है। हालांकि, हमारी टीम ने कंकाल की मांसपेशियों पर केओए के प्रभाव, तुइना द्वारा मांसपेशियों और केओए के सुधार और पीडी -1 मार्ग के साथ संबंध पर ध्यान केंद्रित किया, जिसका उद्देश्य केओए में ट्यूना हस्तक्षेप के तंत्र की जांच करना है। भविष्य में, हम हेरफेर चिकित्सा की व्यवहार्यता, सुरक्षा और प्रभावकारिता को बढ़ावा देने और कंकाल की मांसपेशियों पर ट्यूना की नैदानिक प्रभावकारिता पर और शोध करने का लक्ष्य रखेंगे। टेंडन और हड्डियों के बीच संबंध, केओए के रोगजनन और हेरफेर चिकित्सा हस्तक्षेप के तंत्र का अध्ययन करते हुए, हम अपने शोध निष्कर्षों और विचारों को अन्य बीमारियों पर लागू करने की भी उम्मीद करते हैं।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
लेखक घोषणा करते हैं कि हितों का कोई टकराव नहीं है।
Acknowledgments
यह अध्ययन चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (NO.82105042, 82205302) द्वारा समर्थित है; शंघाई पोस्ट-डॉक्टरल उत्कृष्टता कार्यक्रम (NO.2020371); चीन पोस्टडॉक्टोरल साइंस फाउंडेशन (NO.2021M692156); शंघाई नौकायन कार्यक्रम (NO.20YF1450900); एकीकृत पारंपरिक चीनी और पश्चिमी चिकित्सा के युयांग अस्पताल का विज्ञान फाउंडेशन (NO.2021yygq03)। अध्ययन के डिजाइन, निष्पादन या लेखन में फंडर्स की कोई भूमिका नहीं थी।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Anti-PD-L1 | Abcam, Cambridge, MA, USA | ab80276 | |
| electric von Frey esthesiometer | IITC/Life Science, Woodland Hills, CA, USA | ALMEMO 2450 | |
| GraphPad Prism 9.0 | GraphPad Software | Software for stastistical analysis | |
| monosodium iodoacetate | Sigma-Aldrich Inc | I9148 | Resolved into normal saline for injection |
| pentasorbital sodium | Sigma-Aldrich Inc | P3761 | |
| Sprague Dawley (SD) male rats | Shanghai Jihui Experimental Animal Breeding Co., Ltd | No. SCXK (Hu) 2017-0012 | |
| thermal analgesia tester | IITC/Life Science | Model 390 |
References
- Katz, J. N., et al. Diagnosis and treatment of hip and knee osteoarthritis: A review. JAMA. 325 (6), 568-578 (2021).
- Culvenor, A. G., et al. Prevalence of knee osteoarthritis features on magnetic resonance imaging in asymptomatic uninjured adults: a systematic review and meta-analysis. Br J Sports Med. 53 (20), 1268-1278 (2019).
- Safiri, S., et al. regional and national burden of osteoarthritis 1990-2017: a systematic analysis of the Global Burden of Disease Study 2017. Ann Rheum Dis. 79 (6), 819-828 (2020).
- Kong, L., et al. Traditional Chinese exercises on pain and disability in middle-aged and elderly patients with neck pain: a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Front Aging Neurosci. 14, 912-945 (2022).
- Nevitt, M. C., et al. Symptoms of knee instability as risk factors for recurrent falls. Arthritis Care Res (Hoboken). 68 (8), 1089-1097 (2016).
- Hunter, D. J., March, L., Chew, M. Osteoarthritis in 2020 and beyond: a Lancet Commission). Lancet. 396 (10264), 1711-1712 (2020).
- Fan, Z. J., et al. Interpretation and evaluation of the Chinese Osteoarthritis Treatment Guidelines (2021 Edition). Chinese Journal of Evidence-Based Medicine. 22 (06), 621-627 (2022).
- Chen, W., et al. Design of an epidemiological survey on the prevalence of osteoarthritis of the knee in a middle-aged and elderly population in China. Journal of Hebei Medical University. 36 (04), 487-490 (2015).
- Shao, S. Study on the mechanism of regulating the "balance of tendon and bone force" in the treatment of knee osteoarthritis by Tui Na manipulation. Shanghai University of Traditional Chinese Medicine. , 107-108 (2020).
- Liu, S. Role and mechanism of PD-1/PD-L1 pathway in osteoarthritis in mice. Shandong University. , 130-134 (2020).
- Shoujian, PD-1 promotes the repair and regeneration of contused skeletal muscle by regulating Treg cells and macrophages. Shanghai Institute of Physical Education. , 54-58 (2020).
- Levinger, P., et al. The level of FoxO1 and IL-15 in skeletal muscle, serum and synovial fluid in people with knee osteoarthritis: a case control study. Osteoporos Int. 27 (6), 2137-2143 (2016).
- Niu, Q., Xie, C., Jiang, Z. Advances in Chinese medicine based on PI3K/AKT signaling pathway for the treatment of knee osteoarthritis. Massage and Rehabilitation Medicine. , 1-5 (2022).
- Liu, S., et al. Blocking of checkpoint receptor PD-L1 aggravates osteoarthritis in macrophage-dependent manner in the mice model. Int J Immunopathol Pharmacol. 33, 2058-2073 (2019).
- Molanouri, S. M., et al. Combined effect of aerobic interval training and selenium nanoparticles on expression of IL-15 and IL-10/TNF-alpha ratio in skeletal muscle of 4T1 breast cancer mice with cachexia. Cytokine. 90, 100-108 (2017).
- Mahmoudian, A., et al. Early-stage symptomatic osteoarthritis of the knee - time for action. Nat Rev Rheumatol. 17 (10), 621-632 (2021).
- Nahin, R. L., et al. Evidence-based evaluation of complementary health approaches for pain management in the United States. Mayo Clin Proc. 91 (9), 1292-1306 (2016).
- Bervoets, D. C., et al. Massage therapy has short-term benefits for people with common musculoskeletal disorders compared to no treatment: a systematic review. J Physiother. 61 (3), 106-116 (2015).
- Xu, H., et al. Effectiveness of tui na in treating pain after total knee replacement for knee osteoarthritis. Chinese Tissue Engineering Research. 25 (18), 2840-2845 (2021).
- Ali, A., et al. Massage therapy and quality of life in osteoarthritis of the knee: a qualitative study. Pain Med. 18 (6), 1168-1175 (2017).
- Yoh, S., et al. Intra-articular injection of monoiodoacetate induces diverse hip osteoarthritis in rats, depending on its dose. BMC Musculoskelet Disord. 23 (1), 494-487 (2022).
- Lockwood, S. M., et al. Characterisation of peripheral and central components of the rat monoiodoacetate model of osteoarthritis. Osteoarthritis Cartilage. 27 (4), 712-722 (2019).
- McCoy, A. M. Animal models of osteoarthritis: Comparisons and key considerations. Vet Pathol. 52 (5), 803-818 (2015).
- Guo, X. Exploring the effect of pushing on cartilage in rats with knee osteoarthritis based on ROCK/LIMK1/Cofilin signaling pathway. Chongqing Medical University. , 42-44 (2022).
- Liu, Z. F., et al. Tuina for peripherally-induced neuropathic pain: A review of analgesic mechanism. Front Neurosci. 16, 1096-1104 (2022).
- Gebremariam, L., et al. Subacromial impingement syndrome--effectiveness of physiotherapy and manual therapy. Br J Sports Med. 48 (16), 1202-1208 (2014).
- Yao, C., et al. Transcriptome profiling of microRNAs reveals potential mechanisms of manual therapy alleviating neuropathic pain through microRNA-547-3p-mediated Map4k4/NF-kappab signaling pathway. J Neuroinflammation. 19 (1), 211-221 (2022).
- Valera-Calero, A., et al. Endocrine response after cervical manipulation and mobilization in people with chronic mechanical neck pain: a randomized controlled trial. Eur J Phys Rehabil Med. 55 (6), 792-805 (2019).
- Kovanur, S. K., et al. Measureable changes in the neuro-endocrinal mechanism following spinal manipulation. Med Hypotheses. 85 (6), 819-824 (2015).
- Colombi, A., Testa, M. The effects induced by spinal manipulative therapy on the immune and endocrine systems. Medicina (Kaunas). 55 (8), 312-314 (2019).
- Afify, A., Mark, H. F. Fluorescence in situ hybridization assessment of chromosome 8 copy number in stage I and stage II infiltrating ductal carcinoma of the breast. Cancer Genet Cytogenet. 97 (2), 101-105 (1997).
- Kirby, B. S., et al. Mechanical influences on skeletal muscle vascular tone in humans: insight into contraction-induced rapid vasodilatation. J Physiol. 583, 861-874 (2007).
- Sefton, J. M., et al. Therapeutic massage of the neck and shoulders produces changes in peripheral blood flow when assessed with dynamic infrared thermography. J Altern Complement Med. 16 (7), 723-732 (2010).
- Chen, B., et al. Aerobic exercise combined with glucosamine hydrochloride capsules inhibited the apoptosis of chondrocytes in rabbit knee osteoarthritis by affecting TRPV5 expression. Gene. 830, 146465 (2022).
- Fang, L., et al. The mechanism of aerobic exercise combined with glucosamine therapy and circUNK in improving knee osteoarthritis in rabbits. Life Sci. 275, 119375 (2021).
- Li, X., et al. Casticin suppresses monoiodoacetic acid-induced knee osteoarthritis through inhibiting HIF-1alpha/NLRP3 inflammasome signaling. Int Immunopharmacol. 86, 106745 (2020).
- Ma, Z., et al. Vanillic acid reduces pain-related behavior in knee osteoarthritis rats Through the inhibition of NLRP3 inflammasome-related synovitis. Front Pharmacol. 11, 599022 (2020).
- Zhang, W., et al. Electroacupuncture ameliorates knee osteoarthritis in rats via inhibiting NLRP3 inflammasome and reducing pyroptosis. Mol Pain. 19, 17448069221147792 (2023).
