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Bioengineering

प्रायोगिक महाधमनी वाल्व प्रक्रियाओं और उपन्यास चिकित्सा उपकरणों के हाइड्रोडायनामिक परीक्षण के लिए एक पूर्व विवो पोर्सिन मॉडल

Published: August 25, 2023 doi: 10.3791/65885
Automatic Translation
1, 2, 1, 3, 1, 2, 2, 2, 1,4
1Department of Surgery, Columbia University Medical Center, 2College of Physicians and Surgeons, Columbia University, 3School of Medicine and Surgery, University of Bologna, 4Division of Cardiac, Thoracic, and Vascular Surgery, Section of Pediatric and Congenital Cardiac Surgery, New York-Presbyterian Morgan Stanley Children’s Hospital, Columbia University Medical Center

Summary

हम अपने हाइड्रोडायनामिक गुणों का परीक्षण करने के लिए एक पल्स डुप्लीकेटर पर एक पोर्सिन महाधमनी वाल्व को माउंट करने के लिए एक विधि प्रस्तुत करते हैं। इस विधि का उपयोग एक बड़े पशु मॉडल में उपयोग करने से पहले एक प्रयोगात्मक प्रक्रिया या उपन्यास चिकित्सा उपकरण के आवेदन के बाद हाइड्रोडायनामिक्स में परिवर्तन को निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है।

Abstract

पशु मॉडल में उपयोग करने से पहले नई हृदय प्रक्रियाओं और खोजी चिकित्सा उपकरणों के परीक्षण के विकल्प सीमित हैं। इस अध्ययन में, हम अपने हाइड्रोडायनामिक गुणों का मूल्यांकन करने के लिए एक पल्स डुप्लीकेटर में एक पोर्सिन महाधमनी वाल्व को माउंट करने के लिए एक विधि प्रस्तुत करते हैं। इन गुणों का मूल्यांकन जांच के तहत प्रक्रिया से पहले और बाद में किया जा सकता है और/या खोजी चिकित्सा उपकरण लागू किया जाता है। इनफ्लो सेगमेंट को सुरक्षित करना बाएं वेंट्रिकुलर बहिर्वाह पथ में परिधीय मायोकार्डियम की कमी के कारण कुछ कठिनाई प्रस्तुत करता है। यह विधि माइट्रल वाल्व के पूर्वकाल पत्रक का उपयोग करके प्रवाह खंड को सुरक्षित करके और फिर प्रवाह स्थिरता के चारों ओर बाएं वेंट्रिकुलर मुक्त दीवार को सीवन करके उस मुद्दे को संबोधित करती है। बहिर्वाह खंड को महाधमनी चाप के बेहतर पहलू में एक चीरा में स्थिरता डालने से सुरक्षित किया जाता है। हमने पाया कि ऊतक निर्धारण से पहले और बाद में नमूनों में काफी भिन्न हाइड्रोडायनामिक गुण थे। इस खोज ने हमें अपने परीक्षण में ताजा नमूनों का उपयोग करने के लिए प्रेरित किया और इस पद्धति का उपयोग करते समय इस पर विचार किया जाना चाहिए। हमारे काम में, हमने घुड़सवार पोर्सिन महाधमनी वाल्वों पर महाधमनी वाल्व नियोक्यूस्पिडाइजेशन प्रक्रिया (ओजाकी प्रक्रिया) का प्रदर्शन करके वाल्वुलर स्थिति में उपयोग के लिए उपन्यास इंट्राकार्डियक पैच सामग्री का परीक्षण करने के लिए इस पद्धति का उपयोग किया। देशी वाल्व की तुलना में हाइड्रोडायनामिक गुणों में परिवर्तन का आकलन करने के लिए प्रक्रिया से पहले और बाद में इन वाल्वों का परीक्षण किया गया था। इसमें, हम प्रयोगात्मक महाधमनी वाल्व प्रक्रियाओं के हाइड्रोडायनामिक परीक्षण के लिए एक मंच की रिपोर्ट करते हैं जो देशी वाल्व के साथ और जांच के तहत प्रक्रिया के लिए उपयोग किए जाने वाले विभिन्न उपकरणों और तकनीकों के बीच तुलना करने में सक्षम बनाता है।

Introduction

महाधमनी वाल्व रोग एक महत्वपूर्ण सार्वजनिक स्वास्थ्य बोझ का प्रतिनिधित्व करता है, विशेष रूप से महाधमनी स्टेनोसिस,जो दुनिया भर में 9 मिलियन लोगों को प्रभावित करता है। इस बीमारी को संबोधित करने के लिए रणनीतियाँ वर्तमान में विकसित हो रही हैं और इसमें महाधमनी वाल्व की मरम्मत और महाधमनी वाल्व प्रतिस्थापन शामिल हैं। विशेष रूप से बाल चिकित्सा आबादी में, वाल्व को बदलने के बजाय मरम्मत के लिए एक महत्वपूर्ण प्रोत्साहन है क्योंकि वर्तमान में उपलब्ध कृत्रिम अंग संरचनात्मक वाल्व अध: पतन (एसवीडी) के लिए प्रवण हैं और विकास सहिष्णु नहीं हैं, रोगी के बढ़ने पर पुन: प्रतिस्थापन के लिए पुन: संचालन की आवश्यकता होती है। यहां तक कि रॉस प्रक्रिया, जो रोगग्रस्त महाधमनी वाल्व (एवी) को देशी फुफ्फुसीय वाल्व (पीवी) के साथ बदल देती है, को फुफ्फुसीय स्थिति में एक कृत्रिम अंग या ग्राफ्ट की आवश्यकता होती है जो एसवीडी और अक्सर सीमित विकास सहिष्णुता2 के अधीन होती है। महाधमनी वाल्व रोग के लिए नए दृष्टिकोण विकसित किए जा रहे हैं, और एक बड़े पशु मॉडल में आवेदन से पहले जैविक रूप से प्रासंगिक संदर्भ में परीक्षण की आवश्यकता है।

हमने एक पोर्सिन एवी के परीक्षण के लिए एक विधि विकसित की है जो एक जांच प्रक्रिया या एक उपन्यास चिकित्सा उपकरण के आवेदन से पहले और बाद में वाल्व के कार्य में अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकती है। व्यावसायिक रूप से उपलब्ध पल्स डुप्लीकेटर मशीन पर पोर्सिन एवी को माउंट करके, हम हाइड्रोडायनामिक विशेषताओं की तुलना करने में सक्षम हैं जो आमतौर पर वाल्व कृत्रिम अंग की जांच और अंततः अनुमोदन में उपयोग की जाती हैं, जिसमें रिगर्जिटेशन अंश (आरएफ), प्रभावी छिद्र क्षेत्र (ईओए), और मतलब सकारात्मक दबाव अंतर (पीपीडी)3,4 शामिल हैं. हस्तक्षेप को तब एक बड़े पशु मॉडल में उपयोग करने से पहले जैविक रूप से प्रासंगिक संदर्भ में ठीक किया जा सकता है, इस प्रकार मनुष्यों में उपयोग की जा सकने वाली प्रक्रिया या कृत्रिम अंग का उत्पादन करने के लिए आवश्यक जानवरों की संख्या को सीमित किया जा सकता है। इस प्रयोग के लिए इस्तेमाल दिल स्थानीय बूचड़खाने या अन्य प्रयोगों से अपशिष्ट ऊतक से प्राप्त किया जा सकता है, तो यह केवल इस प्रयोग के प्रयोजनों के लिए एक जानवर की बलि के लिए आवश्यक नहीं है.

हमारे काम में, हमने वाल्व की मरम्मत और प्रतिस्थापन के लिए एक उपन्यास पैच सामग्री विकसित करने के लिए इस पद्धति का उपयोग किया। हमने पोर्सिन एवी पर महाधमनी वाल्व नियोक्यूस्पिडाइजेशन प्रक्रिया (ओजाकी प्रक्रिया 5,6,7) का प्रदर्शन करके और प्रक्रिया से पहले और बाद में पल्स डुप्लीकेटर में उनका परीक्षण करके विभिन्न प्रकार के पैच सामग्री के हाइड्रोडायनामिक फ़ंक्शन का परीक्षण किया। इसने हमें इसके हाइड्रोडायनामिक प्रदर्शन के आधार पर सामग्री को ठीक करने में सक्षम बनाया। इस प्रकार, यह विधि एक बड़े पशु मॉडल में आवेदन से पहले एवी पर उपयोग के लिए प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं और उपन्यास चिकित्सा उपकरणों के हाइड्रोडायनामिक परीक्षण के लिए एक मंच प्रदान करती है।

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Protocol

सभी शोध जानवरों की देखभाल के लिए संस्थागत दिशानिर्देशों के अनुपालन में किए गए थे।

1. विचार और प्रयोग के लिए तैयारी

  1. एवी के माध्यम से कार्डियक आउटपुट के सिमुलेशन के लिए एक उपयुक्त पल्स डुप्लीकेटर (पीडी) का उपयोग करें। पीडी को जैविक सामग्रियों को समायोजित करने और साफ करने में सक्षम होने की आवश्यकता होगी।
    1. एवी के परीक्षण के लिए उपयुक्त पीडी सेटिंग्स का उपयोग करें: 70 एमएल विस्थापन मात्रा और 70 बीट प्रति मिनट (5 एल / मिनट कार्डियक आउटपुट), सिस्टोल में हृदय चक्र का 35%, 100 मिमीएचजी मतलब ट्रांसवाल्वुलर दबाव ढाल, 120 अधिकतम दबाव ढाल, और 80 न्यूनतम दबाव ढाल।
    2. द्रव माध्यम के रूप में कमरे के तापमान (आरटी) सामान्य खारा (0.9% NaCl) का प्रयोग करें।
  2. पीडी पर परीक्षण के लिए पोर्सिन एवी को माउंट करने के लिए उपयुक्त जुड़नार का पता लगाएँ या बनाएं (3 डी प्रिंटिंग या इसी तरह की विधि का उपयोग करके)।
    1. निम्नलिखित विनिर्देशों के साथ पल्स डुप्लीकेटर के साथ प्रदान किए गए जुड़नार पर मॉडलिंग किए गए जुड़नार का उपयोग करें: सुनिश्चित करें कि स्थिरता का आंतरिक व्यास एवी के व्यास के समान है जिसका अध्ययन किया जा रहा है, लगाव की लंबाई कम से कम 2 सेमी है, और प्रयोग करने योग्य लगाव चौड़ाई कम से कम 4 सेमी है (चित्र 1)।
    2. जुड़नार के सिरों पर गास्केट के रूप में रबर ओ-रिंग का उपयोग करें।
  3. हृदय-उच्छेदन (चित्रा 2 ए) के बाद एक दिल नमूना प्राप्त करें।
    1. बूचड़खाने से पोर्सिन कार्डियक नमूनों का उपयोग करें या जानवरों से अपशिष्ट ऊतक जो अन्यथा स्वस्थ हैं और किसी भी प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल का हिस्सा नहीं हैं जो उनके दिल को प्रभावित करेंगे।
    2. कार्डिएक्टोमी के बाद नमूना प्राप्त करें या पोस्ट-मॉर्टम कार्डिएक्टोमी करें, जिसमें बेहतर वेना कावा, अवर वेना कावा, मुख्य फुफ्फुसीय धमनी (पीए), सभी फुफ्फुसीय नसें, और महाधमनी चाप के बाहर के पहलू पर महाधमनी शामिल हैं।
      नोट: ताजा नमूने, 6 घंटे से कम पोस्टमार्टम या 7 दिनों तक 4 ओसी रेफ्रिजरेटर में 1% एंटीबायोटिक समाधान (पेनिसिलिन और स्ट्रेप्टोमाइसिन) के साथ बाँझ खारा में संग्रहीत, इस प्रयोग के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए। फॉर्मेलिन या ग्लूटार्डाल्डिहाइड में तय किए गए ऊतक बढ़ी हुई कठोरता के कारण परिवर्तित हाइड्रोडायनामिक परिणाम उत्पन्न करेंगे।

Figure 1
चित्रा 1: पल्स डुप्लीकेटर पर पोर्सिन महाधमनी वाल्व बढ़ते के लिए कस्टम 3 डी मुद्रित जुड़नार। जैसा कि प्रोटोकॉल में उल्लेख किया गया है, लगाव की लंबाई कम से कम 2 सेमी होनी चाहिए, और प्रयोग करने योग्य लगाव चौड़ाई कम से कम 4 सेमी होनी चाहिए। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

2. दाएं तरफा संरचनाओं की लकीर

  1. वेंट्रिकुलर ऊतक दिखाई देने तक मेटज़ेनबाम कैंची के साथ महाधमनी से पीए को विच्छेदन करें (चित्रा 2बी)।
  2. महाधमनी साइनस से उनके मूल में दोनों कोरोनरी धमनियों को रेशम संबंधों के साथ विच्छेदन और लिगेट करें, ध्यान रखें कि साइनस को संकीर्ण न करें।
  3. रेशम संबंधों के लिए कोरोनरी धमनियों को स्थानांतरित करें।
  4. मेटज़ेनबाम कैंची(चित्रा 2सी)का उपयोग करके फुफ्फुसीय वाल्व के आधार पर महाधमनी और पीए के बीच सही वेंट्रिकल (आरवी) को उकसाएं।
  5. पूर्वकाल की शुरुआत में, आरवी मुक्त दीवार(चित्रा 2डी,ई)को हटाने के लिए इंटरवेंट्रिकुलर सेप्टम के साथ परिधि में चीरा जारी रखें।
  6. सभी सही अलिंद ऊतक(चित्रा 2एफ)को हटाने के लिए इंटरएट्रियल सेप्टम के साथ ट्राइकसपिड वाल्व एनुलस के माध्यम से पीछे की ओर चीरा जारी रखें।

Figure 2
चित्रा 2: कार्डिएक्टोमी नमूना और दाएं तरफा संरचनाओं की लकीर। (ए) कार्डिएक्टोमी नमूना। (बी)मुख्य फुफ्फुसीय धमनी महाधमनी बंद विच्छेदित जब तक वेंट्रिकुलर ऊतक दिखाई देता है. (सी) फुफ्फुसीय वाल्व के आधार पर सही वेंट्रिकल (आरवी) को चीरना। (डी) पूर्वकाल में इंटरवेंट्रिकुलर सेप्टम के साथ चीरा जारी रखना। (ई) इंटरवेंट्रिकुलर सेप्टम के साथ परिधि में चीरा जारी रखकर आरवी-मुक्त दीवार को हटाना। (एफ) दाएं तरफा संरचनाओं के साथ नमूना हटा दिया गया। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

3. पीडी स्थिरता के साथ कैनुलेशन के लिए बाएं वेंट्रिकुलर बहिर्वाह पथ (एलवीओटी) की तैयारी

  1. मेटज़ेनबाम कैंची(चित्रा 3ए)का उपयोग करके महाधमनी के समानांतर दाएं फुफ्फुसीय शिरा ओस्टियम के माध्यम से बाएं आलिंद (एलए) को उकसाएं।
    नोट: हालांकि सीमित परिवर्तनशीलता मौजूद है, पोर्सिन फुफ्फुसीय शिरा शरीर रचना विज्ञान आम तौर पर ला8 में प्रवेश करने वाले दो फुफ्फुसीय शिरा ओस्टिया में समाप्त हो जाती है।
  2. माइट्रल वाल्व (एमवी) के अग्रपार्श्व कमिश्नर की ओर चीरा जारी रखें, महाधमनी की तरफ अलिंद ऊतक के कम से कम 3 मिमी कफ छोड़कर।
  3. अतिरिक्त ला ऊतक ट्रिम करें, महाधमनी पर आलिंद ऊतक के 3 मिमी कफ को बनाए रखना और एमवी एनुलस परिधीय रूप से(चित्रा 3बी)।
  4. एमवी के अग्रपार्श्व कमिश्नर के माध्यम से बाएं वेंट्रिकल (एलवी) पर चीरा बढ़ाएं, अग्रपार्श्व पैपिलरी मांसपेशी(चित्रा 3सी)को संरक्षित करने का ख्याल रखें।
  5. कॉर्डे टेंडिनी को अग्रपार्श्व पैपिलरी मांसपेशी से पीछे के एमवी पत्रक में विभाजित करें, पूर्वकाल एमवी पत्रक के अनुलग्नकों को संरक्षित करें।
  6. दिल के शीर्ष करने के लिए चीरा जारी रखें.
  7. पैपिलरी मांसपेशियों के नीचे अतिरिक्त एलवी ऊतक ट्रिम करें, दोनों पैपिलरी मांसपेशियों (चित्रा 3 डी) को संरक्षित करें।

Figure 3
चित्रा 3: पल्स डुप्लीकेटर स्थिरता के साथ कैनुलेशन के लिए बाएं वेंट्रिकुलर बहिर्वाह पथ की तैयारी। (ए) दाएं फुफ्फुसीय शिरा के ओस्टियम के माध्यम से बाएं आलिंद (एलए) को उकसाना। (बी) अतिरिक्त ला ऊतक छंटनी, महाधमनी पर आलिंद ऊतक के कम से कम एक 3 मिमी कफ बनाए रखने और माइट्रल वाल्व annulus circumferentially बनाए रखने. (सी) माइट्रल वाल्व के अग्रपार्श्व कमिश्नर के माध्यम से बाएं वेंट्रिकल (एलवी) पर चीरा का विस्तार। (डी) पैपिलरी मांसपेशियों के नीचे अतिरिक्त एलवी ऊतक को हटाना। छवि के ऊपरी दाएं कोने में कैंची दिखाई दे रही है। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

4. पीडी स्थिरता के साथ कैनुलेशन के लिए महाधमनी की तैयारी

  1. महाधमनी (चित्रा 4 ए) से किसी भी अतिरिक्त लसीका, संयोजी, या फुफ्फुसीय धमनी ऊतक ट्रिम करें।
  2. मेटज़ेनबाम कैंची (चित्रा 4 बी) का उपयोग करके बाएं सबक्लेवियन धमनी में अवरोही महाधमनी से महाधमनी चाप के बेहतर पहलू को उकसाएं।
  3. बाएं सबक्लेवियन धमनी से महाधमनी चाप के बेहतर पहलू पर ब्रैकियोसेफेलिक ट्रंक(चित्रा 4सी, डी)तक चीरा जारी रखें।
    नोट: डिस्टल से समीपस्थ तक पोर्सिन महाधमनी चाप की शाखाओं में बाएं सबक्लेवियन धमनी और ब्रैकियोसेफेलिक ट्रंक शामिल हैं, जो दाएं सबक्लेवियन धमनी, दाएं कैरोटिड धमनी और बाएं कैरोटिड धमनी9 को जन्म देता है।

Figure 4
चित्रा 4: पल्स डुप्लीकेटर स्थिरता के साथ कैनुलेशन के लिए महाधमनी की तैयारी। (ए) अतिरिक्त ऊतक के साथ महाधमनी चाप हटा दिया। पोर्सिन महाधमनी चाप, ब्राचियोसेफेलिक ट्रंक और बाएं सबक्लेवियन धमनी में दो आर्क वाहिकाओं पर ध्यान दें। (बी) बाएं सबक्लेवियन धमनी के लिए अवरोही महाधमनी महाधमनी से महाधमनी के बेहतर पहलू के साथ चीरा शुरू. (सी) बाएं सबक्लेवियन धमनी से ब्रैकियोसेफेलिक ट्रंक तक महाधमनी चाप के बेहतर पहलू के साथ चीरा जारी रखना। (डी) पूर्ण महाधमनी चाप चीरा। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

5. पीडी स्थिरता के साथ एलवीओटी का कैनुलेशन

  1. LVOT में स्थिरता की स्थिति का परीक्षण करें और अतिरिक्त LV ऊतक ट्रिम करें।
    1. एमवी के पूर्वकाल पत्रक के नीचे एलवीओटी में स्थिरता डालें।
    2. स्थिरता के चारों ओर एलवी-मुक्त दीवार लपेटें।
    3. स्थिरता के चारों ओर एक तंग लपेट बनाए रखने के लिए अतिरिक्त एलवी ऊतक ट्रिम करें।
    4. इंटरवेंट्रिकुलर सेप्टम से शुरू होने वाली एलवी मुक्त दीवार की आधी मोटाई निकालें, सिवनी लाइन(चित्रा 5ए)की अखंडता को बनाए रखने के लिए मुक्त किनारे पर कम से कम 1 सेमी एपिकार्डियम बनाए रखें।
    5. एलवी मुक्त दीवार लपेटें (चित्रा 5 ए) के बेहतर कोने से ऊतक के 1 सेमी ट्रिम करें।
  2. LVOT में स्थिरता को सहायक रॉड अटैचमेंट होल के साथ LV चीरा (चित्र 5B) के पीछे 1 सेमी रखें।
    1. ध्यान रखें कि स्थिरता को एलवीओटी में बहुत दूर तक न डालें जैसे कि यह एवी एनुलस को पतला कर दे।
  3. एमवी के पूर्वकाल पत्रक को एक या दो 6-इंच ज़िप संबंधों का उपयोग करके स्थिरता में जकड़ें, जो पत्रक के कॉर्डे टेंडिनी (चित्रा 5सी) के बीच स्थित हैं।
  4. स्थिरता के चारों ओर एलवी मुक्त दीवार को सीवन करें (चित्र 5डी)।
    1. एक शंकु बिंदु सुई के साथ एक साधारण चल सिवनी का उपयोग कर महाधमनी पर ला ऊतक के कफ को एमवी annulus suturing द्वारा शुरू करें.
    2. एलवी पर चल रही सिलाई जारी रखें, एलवी ऊतक को फाड़ें नहीं।

Figure 5
चित्रा 5: पल्स डुप्लीकेटर स्थिरता के साथ बाएं वेंट्रिकुलर बहिर्वाह पथ का कैनुलेशन। (ए) एलवी मुक्त दीवार की एक-आधी मोटाई मुक्त किनारे पर बनाए गए 1 सेमी एपिकार्डियम के साथ हटा दी गई। बिंदीदार रेखा 1 सेमी क्षेत्र को एलवी मुक्त दीवार लपेटने के बेहतर कोने से हटाने का संकेत देती है। (बी) सहायक रॉड लगाव छेद एलवी मुक्त दीवार चीरा के पीछे 1 सेमी स्थित है। (सी) समीपस्थ स्थिरता के लिए एमवी के पूर्वकाल पत्रक को बन्धन करने वाली ज़िप टाई। (डी) एलवी मुक्त दीवार स्थिरता के चारों ओर sutured। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

6. पीडी स्थिरता और पीडी परीक्षण के लिए अंतिम तैयारी के साथ महाधमनी के कैनुलेशन

  1. पीडी परीक्षण के परिणामों की व्याख्या में सहायता के लिए हेगर डाइलेटर का उपयोग करके एवी के व्यास को मापें।
  2. महाधमनी (चित्रा 6 ए) लोभी द्वारा मेज से नमूना उठाने से महाधमनी की तटस्थ स्थिति की पहचान करें.
  3. महाधमनी में पीडी स्थिरता डालें, महाधमनी की तटस्थ स्थिति में रॉड लगाव छेद को लाइन करने का ख्याल रखें।
  4. समर्थन छड़ डालकर नमूने की लंबाई की जांच करें।
  5. एक या दो 6 इंच ज़िप संबंधों (चित्रा 6 बी) का उपयोग महाधमनी के लिए पीडी स्थिरता सुरक्षित.
  6. एक या दो 8-इंच ज़िप संबंधों का उपयोग करके पीडी स्थिरता के चारों ओर एलवीओटी को सुरक्षित करें।
  7. पीडी सेट के साथ प्रदान किए गए शिकंजा का उपयोग करके समर्थन छड़ को सुरक्षित करें।
  8. पीडी में नमूना प्लेस और परीक्षण (चित्रा 6C, वीडियो 1, और वीडियो 2) शुरू करते हैं.
  9. आवश्यकतानुसार किसी भी लीक को सीवन करें।

Figure 6
चित्रा 6: महाधमनी के कैनुलेशन और पल्स डुप्लीकेटर में परीक्षण। (ए) महाधमनी की तटस्थ स्थिति की पहचान करने के लिए महाधमनी द्वारा तालिका से नमूना उठाना। (बी) ज़िप संबंधों के साथ महाधमनी में सुरक्षित डिस्टल स्थिरता। (सी) हाइड्रोडायनामिक परीक्षण के लिए पल्स डुप्लीकेटर में घुड़सवार नमूना। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

7. प्रयोगात्मक प्रक्रिया करें

नोट: प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं की तरह, ओजाकी प्रक्रिया के रूप में पहले वर्णित 5,6,7, और पीडी परीक्षण दोहराएँ।

  1. यदि प्रक्रिया के दौरान ऊतक सूख गया है, तो ज़िप संबंधों को कस लें और आवश्यकतानुसार सिवनी लाइन को मजबूत करें।

8. नमूने का दीर्घकालिक भंडारण (यदि वांछित हो)

  1. नमूना को फॉर्मेलिन में 10% 168 घंटे (1 सप्ताह)10,11 के लिए रखें।
  2. ऊतक निर्धारण के बाद, विआयनीकृत पानी के साथ नमूना धो लें और इसे दीर्घकालिक भंडारण के लिए इथेनॉल 70% में रखें।

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Representative Results

पल्स डुप्लीकेटर से एकत्र किए गए प्रतिनिधि डेटा में रिगर्जिटेशन अंश (आरएफ), प्रभावी छिद्र क्षेत्र (ईओए), और मतलब सकारात्मक दबाव अंतर (पीपीडी) शामिल हैं। आरएफ और ईओए, विशेष रूप से, प्रोस्थेटिक वाल्व (आईएसओ 5840) के लिए आईएसओ मानकों में उपयोग किए जाते हैं और यदि प्रोस्थेटिक वाल्व उत्पादों की जांच चल रही है तो इसे इकट्ठा करना महत्वपूर्ण होगा। पीपीडी वाल्व खोलने के लिए कितना दबाव आवश्यक है के बारे में जानकारी प्रदान करता है और आमतौर पर कृत्रिम वाल्व प्रतिस्थापन 3,4 पर चर्चा करते समय संदर्भित किया जाता है। HDTi-6000 पल्स डुप्लीकेटर (बीडीसी प्रयोगशालाओं, गेहूं रिज, सीओ) इस प्रयोग में इस्तेमाल अन्य मूल्यों को इकट्ठा कर सकते हैं अगर वांछित है, बंद मात्रा, रिसाव मात्रा, कुल regurgitant मात्रा, कुल आगे प्रवाह मात्रा, सिस्टोलिक अवधि, अधिकतम सकारात्मक दबाव अंतर, और मतलब आगे प्रवाह.

सही ढंग से किए गए प्रयोग में देशी महाधमनी वाल्व (एन = 20) के हाइड्रोडायनामिक परीक्षण (आरएफ, ईओए और पीपीडी) के मूल्यों को तालिका 1में दिखाया गया है। प्राप्त मान महाधमनी वाल्व माप के लिए सामान्य सीमा के भीतर हैं, जिसमें 5.74%12 का औसत आरएफ और 1.08 सेमी2/एम2 का औसत अनुमानित महाधमनी वाल्व सूचकांक शामिल है (औसत महाधमनी व्यास के आधार पर शरीर की सतह क्षेत्र की भविष्यवाणी करके गणना की जाती है और उस मूल्य से मतलब ईओए को विभाजित करके)13,14.

जब नमूना फॉर्मेलिन 10% या ग्लूटार्डाल्डिहाइड 0.6% में तय किया जाता है, तो वाल्व के आसपास के ऊतक कठोर हो जाते हैं, और परीक्षण के लिए नमूने को पर्याप्त रूप से सीधा करना मुश्किल होता है। किसी भी वक्र या मोड़ का उच्चारण किया जाता है, और वाल्व एनुलस को विकृत किया जा सकता है ताकि पत्रक के खराबी के कारण आरएफ को गलत तरीके से ऊंचा किया जा सके। उदाहरण के लिए, दो निश्चित नमूनों के लिए आरएफ मान जिनमें एनुलस को विकृत करने वाले अपरिवर्तनीय मोड़ थे, 27.73% और 67.30% थे। यहां तक कि जब नमूना परीक्षण करने के लिए पर्याप्त सीधा होता है, तो वाल्व के आसपास के ऊतक की कठोरता एक झूठा ऊंचा पीपीडी पैदा करती है, आरएफ में कमी आती है, और ईओए में कमी आती है। फॉर्मेलिन या ग्लूटार्डाल्डिहाइड में निर्धारण के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं है। इन मुद्दों को ध्यान में रखा जाना चाहिए अगर इस प्रयोगात्मक मॉडल के साथ निश्चित ऊतक का उपयोग, और सुझाव है कि ताजा नमूने विवो वाल्व समारोह में के अधिक प्रतिनिधि हैं. निश्चित नमूनों में ऊतक निर्धारण से पहले और बाद में प्रतिनिधि मूल्यों को एक असंतुलित तरीके से रखा जा सकता है तालिका 2में प्रस्तुत किया जाता है।

आरएफ को नमूने से लीक करके झूठा ऊंचा किया जा सकता है, विशेष रूप से वाल्व के समीपस्थ लीक करना। कुछ लीक की उम्मीद की जानी चाहिए, और एक सामान्य नियम के रूप में, कोई भी लीक जो एक निरंतर धारा (टपकने के विपरीत) के साथ प्रस्तुत करता है, हाइड्रोडायनामिक रूप से महत्वपूर्ण है। सिवनी लाइन से लीक एक मजबूत सिवनी (एक और चल सिवनी या आठ सिलाई का एक आंकड़ा) का उपयोग कर संबोधित किया जा सकता है. सामान्य तौर पर, इस मॉडल का उपयोग करते समय, काटने की सुइयों का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए क्योंकि सिवनी छेद से रिसाव होगा। स्थिरता सम्मिलन साइटों से लीक को मौजूदा ज़िप संबंधों को कसने या अधिक जोड़कर संबोधित किया जा सकता है। एक प्रतिनिधि मामले में, लीक को संबोधित करने के लिए एक ज़िप टाई को कसने के परिणामस्वरूप आरएफ में 13.7% से 9.5% की कमी आई। इनफ्लो साइड पर ज़िप संबंधों को अधिक कसने के लिए देखभाल नहीं की जानी चाहिए, क्योंकि इससे ईओए में गलत तरीके से कमी हो सकती है और गलत तरीके से ऊंचा पीपीडी हो सकता है। एक प्रतिनिधि मामले में, एक अति-कड़े ज़िप टाई को ढीला करने के परिणामस्वरूप ईओए में 0.98 सेमी2 से 1.08 सेमी2 तक की वृद्धि हुई और पीपीडी में 20.2 मिमीएचजी से 18.0 मिमीएचजी तक की कमी आई। ज़िप संबंधों को इतना ढीला होना चाहिए कि वाल्व के लिए निलय ऊतक समीपस्थ व्यवहार्य रहता है, और लीक को पूरी तरह से समाप्त करने की आवश्यकता नहीं है, बस एक टपकने की स्थिति में धीमा हो जाता है जिस पर यह हाइड्रोडायनामिक माप को प्रभावित नहीं करेगा।

एक बार देशी वाल्व का परीक्षण हो जाने के बाद, हाइड्रोडायनामिक फ़ंक्शन में परिवर्तन को निर्धारित करने के लिए जांच के तहत प्रक्रिया की जा सकती है। हमारे काम में, हमने ओजाकी प्रक्रिया 5,6,7 के माध्यम से पत्रक को बदलकर वाल्वुलर स्थिति में विभिन्न पैच सामग्री का उपयोग करने के प्रभाव की जांच की। विभिन्न जांच सामग्रियों के साथ पत्रक को बदलकर, हम महाधमनी वाल्व की मरम्मत और प्रतिस्थापन में उपयोग के लिए विभिन्न सामग्रियों के कार्य का मूल्यांकन करने में सक्षम थे। नियंत्रण पैच सामग्री (ग्लूटार्डाल्डिहाइड 0.6% में तय ऑटोलॉगस पेरीकार्डियम ) का उपयोग करके ओजाकी प्रक्रिया के बाद प्राप्त मूल्यों ने बेसलाइन वाल्व से एक परिवर्तन का उत्पादन किया जो उचित आकार के वाल्व प्रोस्थेसिस (आरएफ < 10%, पीपीडी < 20 मिमीएचजी, ईओए परिवर्तन < 0.3 सेमी 2 बेसलाइन सेकमी)4. नियंत्रण पैच सामग्री के साथ ओजाकी प्रक्रिया करने के बाद प्राप्त प्रतिनिधि मूल्य तालिका 3में दिए गए हैं।

वीडियो 1: पल्स डुप्लीकेटर पर आंतरिक कैमरे का उपयोग करके रिकॉर्ड किया गया महाधमनी वाल्व का कार्य। कृपया इस वीडियो को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

वीडियो 2: पल्स डुप्लीकेटर पर परीक्षण किए जा रहे महाधमनी वाल्व का पार्श्व दृश्य। कृपया इस वीडियो को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

नमूना व्यास (मिमी) आरएफ (%) ईओए (सेमी2) पीपीडी (mmHg)
पी1 20 4.90 1.20 7.50
पी2 18 6.50 1.08 8.00
पी3 17 3.40 1.25 13.80
पी4 21 8.87 1.55 13.60
पी5 19 5.93 1.46 14.73
पी6 19 4.30 1.47 14.53
पी7 17 3.33 1.30 16.53
पी8 18 5.47 1.23 15.50
पी10 18 3.17 1.28 13.43
पी11 16 4.03 1.04 16.70
पी12 17 4.17 1.33 11.33
पी13 17 6.90 1.37 9.97
पी14 15 5.67 1.22 11.57
पी15 14 8.33 1.23 11.80
पी16 16 6.10 1.29 10.33
पी17 17 5.80 1.40 8.03
पी18 16 3.77 1.29 9.73
पी19 15 4.53 1.17 11.40
पी21 22 11.73 1.26 8.30
पी22 17 7.83 1.17 9.27
औसत 17.45 5.74 1.28 11.80
मानक विचलन 2.01 2.18 0.13 2.92

तालिका 1: एक सही ढंग से प्रदर्शन प्रयोग में हाइड्रोडायनामिक परीक्षण द्वारा प्राप्त प्रतिनिधि मूल्य। नमूने P9 और P20 को शामिल नहीं किया गया क्योंकि देशी वाल्व असामान्य थे। पल्स डुप्लीकेटर सॉफ्टवेयर से प्राप्त मूल्य। आरएफ, regurgitation अंश; ईओए, प्रभावी छिद्र क्षेत्र; पीपीडी, सकारात्मक दबाव अंतर।

मूल निवासी (n = 6) फिक्स्ड (एन = 6) पी मान
आरएफ (%) 5.81 ± 3.10 2.36 ± 1.20 0.01
ईओए (सेमी2) 1.21 ± 0.08 0.77 ± 0.35 0.04
पीपीडी (mmHg) 9.17 ± 2.42 23.50 ± 10.69 0.02
ग्लूटार्डाल्डिहाइड फिक्स्ड (एन = 2) फॉर्मेलिन स्थिर (n = 4) पी मान
आरएफ (%) 2.52 ± 1.86 2.28 ± 1.11 0.89
ईओए (सेमी2) 0.81 ± 0.34 0.76 ± 0.40 0.89
पीपीडी (mmHg) 19.33 ± 2.31 25.58 ± 13.09 0.42

तालिका 2: फॉर्मेलिन 10% या ग्लूटार्डाल्डिहाइड 0.6% के साथ ऊतक निर्धारण से पहले और बाद में हाइड्रोडायनामिक परीक्षण द्वारा प्राप्त प्रतिनिधि मूल्य। मानक विचलन ± माध्य के रूप में प्रस्तुत डेटा। पी मूल्यों की गणना युग्मित टी-टेस्ट (देशी बनाम फिक्स्ड) या अनपेयर्ड टी-टेस्ट (ग्लूटार्डाल्डिहाइड बनाम फॉर्मेलिन) का उपयोग करके की गई थी। पल्स डुप्लीकेटर सॉफ्टवेयर से प्राप्त मूल्य। आरएफ, regurgitation अंश; ईओए, प्रभावी छिद्र क्षेत्र; पीपीडी, सकारात्मक दबाव अंतर।

मूल निवासी (n = 6) पोस्ट-ओजाकी (एन = 6) पी मान
आरएफ (%) 4.51 ± 1.43 8.57 ± 3.25 <0.01
ईओए (सेमी2) 1.26 ± 0.12 1.07 ± 0.05 <0.01
पीपीडी (mmHg) 13.91 ± 2.81 16.77 ± 2.31 <0.01

तालिका 3: ग्लूटार्डाल्डिहाइड फिक्स्ड ऑटोलॉगस पेरिकार्डियम के साथ ओजाकी प्रक्रिया करने से पहले और बाद में हाइड्रोडायनामिक परीक्षण द्वारा प्राप्त प्रतिनिधि मूल्य। मानक विचलन ± माध्य के रूप में प्रस्तुत डेटा। पी मूल्यों की गणना युग्मित टी-परीक्षण का उपयोग करके की गई थी। पल्स डुप्लीकेटर सॉफ्टवेयर से प्राप्त मूल्य। आरएफ, regurgitation अंश; ईओए, प्रभावी छिद्र क्षेत्र; पीपीडी, सकारात्मक दबाव अंतर।

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Discussion

यहां प्रस्तुत विधि एक प्रयोगात्मक प्रक्रिया या एक उपन्यास चिकित्सा उपकरण के प्रभाव की जांच करने के लिए एवी के हाइड्रोडायनामिक परीक्षण के लिए एक मंच प्रदान करती है। पल्स डुप्लीकेटर मशीन पर देशी महाधमनी वाल्व को माउंट करके, हम उपन्यास वाल्व कृत्रिम अंग (आईएसओ 5840) की जांच और अनुमोदन में उपयोग किए जाने वाले सभी हाइड्रोडायनामिक मापदंडों पर प्रयोगात्मक प्रक्रिया के प्रभाव को निर्धारित करने में सक्षम हैं। यह एक बड़े पशु मॉडल में उपयोग करने से पहले प्रक्रियाओं और कृत्रिम अंगों को ठीक करने का अवसर प्रदान करता है।

इनफ्लो सेगमेंट को सुरक्षित करना बाएं वेंट्रिकुलर बहिर्वाह पथ में परिधीय मायोकार्डियम की कमी के कारण कुछ कठिनाई प्रस्तुत करता है। यह विधि माइट्रल वाल्व के पूर्वकाल पत्रक का उपयोग करके प्रवाह खंड को सुरक्षित करके उस मुद्दे को संबोधित करती है, फिर प्रवाह स्थिरता के चारों ओर बाएं वेंट्रिकुलर मुक्त दीवार को सीवन करती है, और वेंट्रिकुलर कफ में अतिरिक्त ज़िप संबंधों को लागू करती है। इसी तरह के अन्य तरीकों ने एलवीओटी15,16 के लिए एक पॉलीथीन टेरेफ्थेलेट (डैक्रॉन) ट्यूब को सीवन करने या एवी एनुलस17,18 के करीब प्रवाह स्थिरता को सुरक्षित करने का सहारा लिया है। ये विधियां आरएफ की कीमत पर ईओए को कृत्रिम रूप से ऊपर उठाने का जोखिम उठाती हैं, जो कि अपेक्षाकृत कठोर प्रवाह स्थिरता के लिए एनुलस को ठीक करती है जो इसके मूल व्यास से बड़ा है। इसी तरह, व्यास को एक कठोर माउंट पर निर्धारण द्वारा संकीर्ण करना संभव है जो अपने मूल व्यास से छोटा है और इस तरह ईओए की कीमत पर आरएफ को कृत्रिम रूप से कम करता है। नतीजतन, कई समान विधियां आरएफ और ईओए 15,16,18 दोनों की रिपोर्ट नहीं करती हैं। इस पद्धति के फायदों में से एक यह है कि हम एक साथ वाल्वों के उद्घाटन और समापन दोनों मापदंडों का मूल्यांकन करने में सक्षम हैं।

हालांकि यह प्रयोग के अधिक लचीले समय के लिए निश्चित नमूनों का उपयोग करके इस प्रयोग को करने के लिए आकर्षक है, वाल्व के हाइड्रोडायनामिक गुण निर्धारण के बाद काफी बदल जाते हैं, और बढ़ते प्रक्रिया बहुत अधिक कठिन हो जाती है। वाल्व के आसपास का ऊतक बहुत कठोर हो जाता है जब इसे फॉर्मेलिन 10% या ग्लूटार्डाल्डिहाइड 0.6% में तय किया जाता है, और आरएफ कृत्रिम रूप से कम हो जाता है जबकि पीपीडी कृत्रिम रूप से बढ़ जाता है और ईओए कृत्रिम रूप से कम हो जाता है। महाधमनी के प्राकृतिक वक्र को भी परीक्षण के लिए सीधा करना बहुत मुश्किल हो जाता है, और इसके परिणामस्वरूप, एनुलस को विकृत किया जा सकता है ताकि, कुछ मामलों में, वाल्व का परीक्षण नहीं किया जा सके। इस कारण के लिए, हम अपने प्रयोगों में ताजा ऊतक का इस्तेमाल किया है, या तो 6 घंटे के भीतर परीक्षण या बाँझ खारा में 4 डिग्री सेल्सियस पर प्रशीतित और 7 दिनों के लिए 1% एंटीबायोटिक समाधान (पेनिसिलिन और स्ट्रेप्टोमाइसिन).

एक बार देशी वाल्व का परीक्षण हो जाने के बाद, जांच के तहत प्रक्रिया की जा सकती है। हमारे काम में, हमने महाधमनी वाल्व की मरम्मत या प्रतिस्थापन में उपयोग किए जाने पर इन सामग्रियों में से प्रत्येक के हाइड्रोडायनामिक गुणों का मूल्यांकन करने के लिए विभिन्न प्रकार की पैच सामग्री का उपयोग करके एक ओजाकी प्रक्रिया का प्रदर्शन किया। मौजूदा पैच सामग्री समय के साथ अध: पतन के लिए प्रवण हैं, और इन अनुप्रयोगों19 के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि एक टिकाऊ पैच सामग्री के लिए एक महत्वपूर्ण आवश्यकता है. इस पद्धति का उपयोग करके जांच की जा सकने वाली प्रक्रिया के प्रकार के एक उदाहरण के रूप में, हमने नियंत्रण सामग्री, ग्लूटार्डाल्डिहाइड-फिक्स्ड ऑटोलॉगस पेरिकार्डियम का उपयोग करके ओजाकी प्रक्रिया करने के हाइड्रोडायनामिक प्रभाव का मूल्यांकन किया, और पाया कि हाइड्रोडायनामिक गुणों में परिणामी परिवर्तन एक अच्छी तरह से आकार के एवी प्रोस्थेसिस4 को प्रत्यारोपित करने से जुड़े परिवर्तन के अनुरूप था।

इस पद्धति की मुख्य सीमाएं, जैसा कि ऊपर विस्तृत है, परिधीय मायोकार्डियम के बिना प्रवाह खंड को सुरक्षित करने में निहित कठिनाइयों से संबंधित हैं। प्रक्रिया के इस भाग को ऊपर दिए गए प्रतिनिधि परिणाम अनुभाग में विनिर्देशों के अनुसार सावधानीपूर्वक किया जाना चाहिए। पूर्व विवो महाधमनी वाल्व हाइड्रोडायनामिक परीक्षण के लिए किसी भी तकनीक के साथ, मूल्यों को बढ़ते प्रक्रिया द्वारा बदला जा सकता है, और सबसे शिक्षाप्रद परिणाम एक प्रयोगात्मक प्रक्रिया से पहले और बाद में एक वाल्व की हाइड्रोडायनामिक विशेषताओं की तुलना है। इसके अतिरिक्त, ऊतक निर्धारण से गुजरने वाले नमूनों का मज़बूती से परीक्षण करने में असमर्थता उस समय सीमा को सीमित करती है जिसमें प्रयोग किया जाना चाहिए और आवेदन की चौड़ाई संभव है। पोर्सिन एवी और मानव एवी के बीच शरीर रचना विज्ञान में अंतर सीमित हैं, जिसमें पोर्सिन एवी में सही कोरोनरी पुच्छल के तहत एक मांसपेशी शेल्फ का सबसे महत्वपूर्ण हिस्सा शामिल है, लेकिन मानव शरीर रचना20,21 के लिए इन परिणामों के सामान्यीकरण में ध्यान में रखा जाना चाहिए।

पीडी मशीन पर पोर्सिन एवी के परीक्षण की इस पद्धति को एवी पर उपयोग के लिए अन्य जांच प्रक्रियाओं और कृत्रिम अंगों के परीक्षण में लागू किया जा सकता है। नए महाधमनी वाल्व कृत्रिम अंग और महाधमनी जड़ प्रतिस्थापन की तकनीक, विशेष रूप से, स्वीकार्य हैं। यह विधि एक मंच प्रदान करती है जिस पर इन प्रक्रियाओं और कृत्रिम अंगों द्वारा प्रेरित हाइड्रोडायनामिक परिवर्तनों का परीक्षण और मात्रा निर्धारित की जाती है। इस प्रकार, यह एक बड़े पशु मॉडल में उपयोग करने से पहले जैविक रूप से प्रासंगिक सेटिंग में सामग्री और प्रक्रियाओं की तुलना और ठीक करने का अवसर प्रदान करता है।

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Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए ब्याज का कोई प्रासंगिक वित्तीय संघर्ष नहीं है।

Acknowledgments

हम जूली वान हैसल, मोहम्मद डायने और पैनपैन चेन सहित डॉ गोरदाना वुंजक-नोवाकोविक की प्रयोगशाला को धन्यवाद देना चाहते हैं, ताकि हमें उनके प्रयोगों से हृदय अपशिष्ट ऊतक का उपयोग करने की अनुमति मिल सके। इस काम को बटलर, एनजे में जन्मजात हृदय दोष गठबंधन और बेथेस्डा, एमडी (5T32HL007854-27) में राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान द्वारा समर्थित किया गया था।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
3D Printer Ultimaker Ultimaker S5 Used for printing custom fixtures for hydrodynamic testing
Crile-Wood Needle Driver Emerald Instruments 2.0638.15 Used for suturing ventricle
Debakey Forceps Jarit 320-110 Used for dissection and sample preparation (can use multiple if working with an assistant)
Ethanol 200 proof Decon Labs Inc. DSP-MD.43 Used for fixed tissue storage
Formalin 10% Epredia 5701 Used for tissue fixation
Gerald Forceps Jarit 285-126 Used for dissection and sample preparation
Glass jars QAPPDA B07QCP54Z3 Used for tissue storage
Glutaraldehyde 25% Electron Microscopy Sciences 16400 Used for tissue fixation
HEPES 1 M buffer solution Fisher BP299-100 Used to make glutaraldehyde 0.6%
Mayo Scissors Jarit 099-200 Used for cutting suture
Metzenbaum Scissors Jarit 099-262 Used for dissection and sample preparation
O-ring Sterling Seal & Supply Inc. AS568-117 Used as a gasket on the end of the 3D printed fixtures
Polylactic acid resin Ultimaker 1609 Used for 3D printing fixtures
Polyproplene suture Covidien VP-762-X Used for suturing ventricle, tapered needle
Pulse Duplicator BDC Laboratories HDTi-6000 Used for hydrodynamic testing
Silk ties Covidien S-193 Used for ligating coronary arteries
Tonsil Clamp Aesculap BH957R Used for coronary artery dissection
Zip ties (6 inch) Advanced Cable Ties, Inc. AL-06-18-9-C Used for securing sample to fixtures, 157.14 mm long (6 inches), 2.5 mm wide
Zip ties (8 inch) GTSE GTSE-20025B.1000 Used for securing sample to fixtures, 203 mm long (8 inches), 2.5 mm wide

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References

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प्रायोगिक महाधमनी वाल्व प्रक्रियाओं और उपन्यास चिकित्सा उपकरणों के हाइड्रोडायनामिक परीक्षण के लिए एक <em>पूर्व विवो</em> पोर्सिन मॉडल
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LaSala, V. R., Beqaj, H., Sun, M.,… More

LaSala, V. R., Beqaj, H., Sun, M., Castagnini, S., Ustunel, S., Cordoves, E., Rajesh, K., Jackman, S., Kalfa, D. An Ex Vivo Porcine Model for Hydrodynamic Testing of Experimental Aortic Valve Procedures and Novel Medical Devices. J. Vis. Exp. (198), e65885, doi:10.3791/65885 (2023).

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