Summary
Immunoblotting (Western blotting) è un test rapido e sensibile per la rilevazione e la caratterizzazione di proteine che funziona sfruttando la specificità inerenti antigene-anticorpo riconoscimento. Questo video fornisce protocolli per la separazione delle proteine, le proteine assorbente su membrane, immunoprobing, e la visualizzazione utilizzando substrati cromogeni o chemiluminescente.
Abstract
Immunoblotting (Western blotting) è un test rapido e sensibile per la rilevazione e la caratterizzazione di proteine che funziona sfruttando la specificità inerenti antigene-anticorpo riconoscimento. Si prevede la solubilizzazione e la separazione elettroforetica di proteine, glicoproteine, o lipopolisaccaridi mediante elettroforesi su gel, seguito dal trasferimento quantitativa e irreversibile legame con nitrocellulosa, PVDF, o nylon. La tecnica di immunoblotting è stata utile per identificare gli antigeni specifici riconosciuti dagli anticorpi policlonali o monoclonali ed è altamente sensibile (1 ng di antigene possono essere rilevati). Questa unità fornisce protocolli per la separazione delle proteine, le proteine assorbente su membrane, immunoprobing, e la visualizzazione utilizzando substrati cromogeni o chemiluminescente.
Protocol
Il protocollo testo completo di questo approccio sperimentale è disponibile in protocolli di corrente in Biologia Molecolare
