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Biology

Analisi immunoblot

doi: 10.3791/759 Published: June 20, 2008

Summary

Immunoblotting (Western blotting) è un test rapido e sensibile per la rilevazione e la caratterizzazione di proteine ​​che funziona sfruttando la specificità inerenti antigene-anticorpo riconoscimento. Questo video fornisce protocolli per la separazione delle proteine, le proteine ​​assorbente su membrane, immunoprobing, e la visualizzazione utilizzando substrati cromogeni o chemiluminescente.

Abstract

Immunoblotting (Western blotting) è un test rapido e sensibile per la rilevazione e la caratterizzazione di proteine ​​che funziona sfruttando la specificità inerenti antigene-anticorpo riconoscimento. Si prevede la solubilizzazione e la separazione elettroforetica di proteine, glicoproteine, o lipopolisaccaridi mediante elettroforesi su gel, seguito dal trasferimento quantitativa e irreversibile legame con nitrocellulosa, PVDF, o nylon. La tecnica di immunoblotting è stata utile per identificare gli antigeni specifici riconosciuti dagli anticorpi policlonali o monoclonali ed è altamente sensibile (1 ng di antigene possono essere rilevati). Questa unità fornisce protocolli per la separazione delle proteine, le proteine ​​assorbente su membrane, immunoprobing, e la visualizzazione utilizzando substrati cromogeni o chemiluminescente.

Protocol

Il protocollo testo completo di questo approccio sperimentale è disponibile in protocolli di corrente in Biologia Molecolare

Analisi immunoblot
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Gallagher, S., Chakavarti, D. Immunoblot Analysis. J. Vis. Exp. (16), e759, doi:10.3791/759 (2008).More

Gallagher, S., Chakavarti, D. Immunoblot Analysis. J. Vis. Exp. (16), e759, doi:10.3791/759 (2008).

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