نعرض هنا لدينا وسيلة لعزل الماوس البشرة الجذعية العصبية قمة الخلايا (EPI – NCSC). الأسلوب الذي ينطوي على تشريح المسام الدقيقة ضئيلة للغاية ، وعزل انتفاخ placeing عليه في زراعة الأنسجة. EPI – NCSC بدء الهجرة من explants انتفاخ على الطبقة التحتية في غضون 3 — 4 أيام.
Abstract
EPI – NCSC هي من مخلفات العصبية الجنينية للقمة في مكان غير أخلاقي ، وانتفاخ في بصيلات الشعر. هم الخلايا الجذعية multipotent التي لديها خاصية فسيولوجية لتوليد مجموعة واسعة من أنواع الخلايا المختلفة ، بما في ذلك الخلايا العصبية ، الخلايا العصبية الداعمة ، وخلايا العضلات الملساء والعظام / خلايا الغضاريف والخلايا الصباغية. EPI – NCSC يمكن الحصول عليها بسهولة في الجلد وشعر كما يمكن عزل السكان نقية للغاية من الخلايا الجذعية. هذا الفيديو يوفر بروتوكول مفصلة لإعداد الماوس EPI – NCSC الثقافات من بصيلات ضئيلة للغاية. إزالة لوحة من الخط الطولي ماوس الكبار ، وتشريح بصيلات الطولي. المسام تقطع طوليا ثم في وقت لاحق وبشكل مستعرض فوق وتحت منطقة انتفاخ. إزالة انتفاخ من كبسولة الكولاجين وضعت في لوحة الثقافة. EPI – NCSC بدء الهجرة من انتفاخ explants 3 إلى 4 أيام في وقت لاحق.
Protocol
تشريح من الانتفاخ من الكبار المسام الشارب ماوس نحن نستخدم 10 أسابيع إلى 6 أشهر من العمر الفئران. الفئران الأصغر الغلة غالبا ما تكون أكثر الخلايا. الموت ببطء والفأر حيوان تغرق بالكامل في خليط من betadine 01:01 (محلول اليود) وبي?…
Discussion
بحكم قدرتها على الهجرة ، ويمكن أن تكون معزولة EPI – NCSC كما يبلغ عدد سكانها نقية للغاية من الخلايا الجذعية ، التي يمكن توسيعها في المختبر. كبقايا الجنينية في موقع الكبار ، EPI – NCSC المرشحين يحتمل أن تكون جذابة بالنسبة لمستقبل العلاجات البديلة للخلية ، الهندسة الطبية و / أو الطب التجدي?…
Acknowledgements
بدعم من : USPHS منح NS38500 ، المعهد الوطني للاضطرابات العصبية والسكتة الدماغية ، المعاهد القومية للصحة بالولايات المتحدة الأمريكية ، التكنولوجيا الطبية الحيوية التحالف جنوب شرق ويسكونسن ، Milwauke ، ويسكونسن ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ بريون Riesch مؤسسة الشلل ، وميلووكي ، ويسكونسن ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ ترتيب الشقيق النسور ، والغرب الأوسط الفصل ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ الوطنية لاصابة النخاع الشوكي الرابطة ، الفصل ميلووكي ، الولايات المتحدة الأمريكية ، شمال شرق انكلترا معهد الجذعية الخليوي ، جامعة نيوكاسل في المملكة المتحدة.