本视频演示,到线虫的性腺创建转基因动物的显微注射技术。
转基因线虫可以很容易地创建,通过显微注射DNA质粒的解决方案进入性腺1。质粒DNA的重新排列,形成稳定遗传,但不以同样的效率为 2实际的染色体染色体外concatamers。一个共同感兴趣的基因注入一个明显的表型标记,如ROL – 6或GFP,在解剖显微镜下,允许转基因动物的选择。可能是外源基因表达的细胞定位研究的原始推动者。此外,转基因可以由不同的组织特异性的启动子,以评估在特定的细胞或组织的基因产物的作用。这项技术有效地推动所有组织线虫的生殖细胞或早期胚胎基因表达 3 。转基因动物的创建是广泛使用的实验范式。本视频演示了显微注射过程产生转基因的蠕虫。此外,选择和维护稳定的转基因线虫线描述。
执行此过程时,重要的是要记住: – 直接注入到性腺中心 – 没有注入过多的液体 – 迅速开展工作,以防止dessication。
如果进针,如它被打破过大的问题,这是最好的改造,而不是试图以比不太理想的针注入新鲜针,。
代转基因蠕虫有许多应用,如: – 突变基因的鉴定,在方法调用转化救援 – 截短蛋白的表达蛋白结构域的映射,通过 – 一个细胞和疾病的进程的基因的作用表?…
我们要感谢考德威尔实验室所有成员的合作精神。运动障碍在实验室的研究已经得到了巴赫曼 – 斯特劳斯肌张力障碍及帕金森基金会,美国帕金森基金会,美国帕金森病协会,阿拉巴马州帕金森氏病协会,迈克尔J.福克斯帕金森病研究基金会,和本科生科研。