Name: Hücre hücre Etkileşim kurgulama için Silikon mikroçipler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-08-30T00:00:00.000+00:00
Duration: 23 min 21 s
Description: Öğrenin silikon mikroçipler kullanarak hücre-hücre etkileşimlerini dinamik olarak düzenleme yöntemini. Karaciğer hepatositleri ve stromal hücreler arasındaki iletişimi mikrometre ölçeğinde araştırın.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazarlar Salman Khetani Jared Allen, Chris Flaim ve Austin Derfus bu cihaz tasarımı sürecinde yararlı tartışmalar için teşekkür ederiz. Bu çalışma, Ulusal Bilim Vakfı Fakültesi Erken Kariyer Geliştirme Programı Sağlık / Ulusal Diyabet ve Sindirim ve Böbrek Hastalıkları Enstitüsü, Ulusal Sağlık Enstitüleri ve David ve Lucile Packard Vakfı tarafından desteklenmiştir. Eeh bir Ruth L. Kirschstein Ulusal Araştırma Hizmet Ödülü tarafından desteklenmiştir.

Hücre kültürlerinin hazırlanması: <ol><li> Plazma ile tedavi edilen polistiren kaplamalı silikon parçaları ile başlayın. </li><li> Uygun ekstraselüler matriks proteinleri ile Coat parçaları istenilen hücre tipi eklenti desteği. Hepatositler için, 37 ° 50 g / ml Kollajen-1 çözümü ° C de 45 dakika inkübe edin. 3T3 fibroblastlar için, herhangi bir matris ihtiyaç vardır. </li><li> Tamamlayıcı parçaları ile temas yapılandırma parça kilitleyin. </li><li> Sterilize etmek için 10 dakika en az% 70 etanol içinde bekletin. Hücre kültür ortamı GKD 2 O, 1x 2x durulayın. </li><li> Tohum hücrelerinin uygun kültür ortamı 500.000 hücre / ml &#39;lik bir konsantrasyon. 12-iyi bir kültür plaka her kuyuda 1 ml kullanın. </li><li> Eşit olarak yeniden askıya hücreler her 15 dakikada bir sallayarak, 1 saat süreyle inkübe edin. </li><li> Konfluent tek tabaka 1 saat sonra elde edilmemiş ise, hücre süspansiyonu ve taze bir süspansiyon ile tekrar tohumlama aspirat. Istenilen hücre yoğunluğu elde edene kadar tekrarlayın. </li><li> Tamamlayıcı parçaları sökün. Taze kuyu parça transfer ve hücrelerin tam olarak uymak ve yaymak için izin gece boyunca inkübe edin. </li><li> Boşluk veya kontakt konfigürasyonu birine uygun parçaları kilitleme Formu ortak kültürler. Yapılandırma sırasında herhangi bir kültür istenilen noktada değiştirilebilir. </li><li> Medya değiştirirken, mümkün olan en kısa sürede hücreleri kuru bırakmak tercihen sadece bir ya da iki saniye ilgilenir. Tek elle sıvı çizin ve diğer yandan kullanarak medya hemen değiştirin. </li></ol> İşleme yeniden kullanım için silikon parçaları: <ol><li> , Çamaşır suyu iliklerine ve su ile durulama hücreleri soyun. </li><li> Parçalar tamamen kurumasını bekleyin. Toluende polistiren şerit 2 saat bekletin. </li><li> 120 ° C ısıtılmış: piranha çözümü (H 2 SO 4 01:02 H 2 O 2) Temiz </li><li> GKD 2 O sürekli bir akış altında 15 dakika süreyle yıkayın Polistiren hemen yatırmak değilseniz parçaları, su saklayın. </li><li> 100 mg / ml toluen polistiren çözülür. Polipropilen konik, yaklaşık 1 saat ya da tamamen eriyene kadar karıştırın. Çözüm biraz fazla 1 ml, her 10 parça için gereklidir. </li><li> 30 sn için 2400 rpm&#39;de bireysel silikon parçaları Spin kat polistiren çözüm. </li><li> 120 ° C&#39;de en az 5 saat süreyle pişirin </li><li> 1 dakika boyunca oksijen plazma (200 mTorr, 200 W) ile tedavi. </li></ol>

<ol><li>Hui, E. E., Bhatia, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micromechanical+control+of+cell-cell+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Micromechanical control of cell-cell interactions.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 104, 
	
 <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=ShowDetailView&TermToSearch=17389399&ordinalpos=2&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_RVDocSum">http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=ShowDetailView&TermToSearch=17389399&ordinalpos=2&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_RVDocSum</a> 5722-5726 (2007).</li>
<li>Bhatia, S. N., Balis, U. J., Yarmush, M. L., Toner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+cell-cell+interactions+in+preservation+of+cellular+phenotype%3A+cocultivation+of+hepatocytes+and+nonparenchymal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Effect of cell-cell interactions in preservation of cellular phenotype: cocultivation of hepatocytes and nonparenchymal cells.</a> The FASEB Journal. 13, 
	
 <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=ShowDetailView&TermToSearch=10544172&ordinalpos=2&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_RVDocSum">http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=ShowDetailView&TermToSearch=10544172&ordinalpos=2&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_RVDocSum</a> 1883-1900 (1999).</li>
<li>El-Ali, J., Sorger, P. K., Jensen, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cells+on+Chips%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Cells on Chips.</a> Nature. 442, 
	
 <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=ShowDetailView&TermToSearch=16871208&ordinalpos=2&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_RVDocSum">http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=ShowDetailView&TermToSearch=16871208&ordinalpos=2&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_RVDocSum</a> 403-411 (2006).</li>
</ol>

Yazarların beyan edilecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Bu sistem, dinamik hücresel seviyede manipüle doku mekansal organizasyon sağlayan benzersiz. Sonuç olarak, bu cihaz, hücrelerarası sinyalizasyon dinamikleri, iletişim aracılı karşı çözünür sinyal, hücre kaderinin kararları, toksikoloji ve hücresel crosstalk gibi konuları kapsayan bir dizi yeni biyolojik deneyler sağladı. Bu cihaz yaygın kültür substratı standart doku kültürü plastik olduğundan genellenememektedir olmalıdır ve sistemi standart kültür yöntemleri ve testleri ile uyumlu. Bu nedenle, biz bu platformda birçok farklı hücrelerin ve...

<table><tbody><tr><td>Silikon Tarak Altlıklar</td><td>Araç</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Parçalar iş birlikli araştırma projeleri için mevcuttur. Lütfen Elliot Hui (eehui @ alum . mit . edu) veya Sangeeta Bhatia (sbhatia @ mit . edu) ile iletişime geçiniz.</td></tr></tbody></table>

hücre hücre etkileşim kurgulama için silikon mikroçipler

Silicon Microchips for Manipulating Cell-cell Interaction

Hücresel mikroçevresinin geliştirme malign transformasyon hemen hemen tüm memeli dokularında hücre kaderi ve fonksiyon belirlenmesinde önemli bir rol olarak kabul edilmektedir. Özellikle, çevre stroma ile etkileşim biyolojik olayların bir bolluk suçlanmıştır, ancak geleneksel teknikler bu etkileşimlerin mekansal ve dinamik elemanlar sorgulamak için sınırlayabilir. Mikromekanik Reconfigurable Kültür (RC), hareketli parçaları ile mekanik yeniden konumlandırma sayesinde hücre-hücre etkileşimleri kontrol etmek için dinamik bir Mikroişlenmiş silikon taban istihdam. Daha önce, bu yöntem, zamana bağımlı olarak çözünür sinyalizasyon 1 etkileşimleri ve sınırlı gösteren, hepatosit ve olmayan parankimal hücrelerin ortak kültürler hücrelerarası iletişimi araştırmak için uygulanmıştır. Burada, RC sistemi ayrıntılı olarak hazırlanması ve kullanımı açıklanır. Biz boşluğu ve kontakt yapılandırmaları arasında tahrik de dahil olmak üzere, cımbız kullanarak aygıt parça işleme göstererek başlar (hücre popülasyonlarının 80 mikron dar bir boşlukla ayrılmış, ya da doğrudan yakın temas halinde). Sonra, kültür substratları hazırlama sürecinin ayrıntılı ve çok adım hücre Tohumlama işlemi konfluent hücre mono tabakaları elde etmek için gerekli. Canlı mikroskobu kullanarak, biz o zaman farklı olası deneysel yapılandırmaları arasında hücreler gerçek zamanlı manipülasyon göstermektedir. Toluen ve piranha temizlik, polistiren kaplama ve oksijen plazma tedavisi: Son olarak, biz, yeniden kullanım için cihaz yüzeyi yeniden için gerekli adımları göstermektedir.

Bu makale, mikrometre ölçeğinde yapışık hücreleri arasındaki hücre-hücre etkileşimleri dinamik düzenlenmesi için deneysel bir yaklaşımı açıklar. Manipülasyon, hepatosit ve stromal hücre arasındaki hücrelerarası iletişimi gösterilmiştir. Geliştirilen platform geliştirme ve patogenezinde de dahil olmak üzere çeşitli biyolojik süreçlerin, hücre-hücre etkileşimleri soruşturma sağlar.

Hücre hücre Etkileşim kurgulama için Silikon mikroçipler

Hücresel mikroortamın rolünün, ...'dan başlayarak hemen hemen tüm memeli dokularında hücre kaderini ve fonksiyonunu belirlemede kritik olduğu kabul edilmektedir.

Merhaba, ben Elliot Hu. Massachusetts Teknoloji Enstitüsü'ndeki Tia'nın laboratuvarında doktora sonrası araştırmacıyım. Bugün silikon mikromekanik çipler üzerinde hücre kültürleri hazırlayacağız. Cihazlar birbirine kilitlenen küçük taraklara benziyor ve iki farklı hücre popülasyonu arasındaki etkileşimleri hassas bir şekilde manipüle etmemize olanak tanıyorlar.Bugün karaciğer hepatositleri ile destekleyici stromal hücreler arasındaki etkileşimi inceleyeceğiz. Özellikle, 3T3 fibroblast hücreleri tarakların üst yüzeyine kültüre edilmiştir; böylece tarak dişlerini kaydırarak hücreleri hareket ettirebilir ve mekansal düzenlerini değiştirebilirsiniz. Her bir cihaz, iki olası konfigürasyonda birbirine kenetlenen iki parçaya ayrılmıştır.İlki, iki hücre popülasyonunu birbiriyle temas ettirir. İkincisi ise, hücrelerin birbirine dokunamaması için iki popülasyonu hafifçe ayırır. Burada, temas etkileşimleri engellenirken, salgılanan faktörler aracılığıyla gerçekleşen etkileşimler korunur.Parçaların cımbızla nasıl tutulacağıyla konuşmaya başlayalım. Hem daha büyük Teflon cımbızları hem de daha küçük yuvarlak uçlu metal cımbızları kullanmayı tercih ediyorum. Büyük cımbızlarla, parçaları kenarlar

silicon-microchips-for-manipulating-cell-cell-interaction

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Biz elastomerik polidimetilsiloksan (PDMS)-tabanlı photolithographically tanımlanan hassas birimleri kapatın ve özellik için ekstra enerji ihtiyacını Mikrovalf dizileri imalat ve otomatikleştirmek için protokolleri göstermektedir. Bir paralel subnanoliter ses mikseri ve entegre bir mikroakışkan perfüzyon sistemi sunulmaktadır.

Elastomerik Mikrovalf Diziler Kontrollü mikroakışkan Chips

Biz, bir substrat üzerindeki istenilen noktada hücre yerleştirmek için basit bir yöntem ortaya koymaktadır. Bu yöntem desen hücreleri yüzeye hücreleri ile dolu mikro oyukların içeren bir silikon çip saygısız. Bu yöntem yayılabilir ve juxtacrine hücreleri arasındaki sinyal modüle etmek için yeni bir yol sağlar.

Bio Flip-Chip kullanarak Embriyonik Kök Hücreler, Desenlendirme

Biz, üç-boyutlu hücre kültürü için gözenekli polimer cips mikroimalat için iki süreç sunuyoruz. Bunlardan birincisi, solvent buhar kaynak işlemi ile birlikte sıcak kabartma. Ikincisi ise, kısa bir süre önce geliştirilen iyon izleme teknolojisi ile üretim önemli bir basitleştirme giden kombine microthermoforming süreci kullanır.

Üç boyutlu Hücre ekimi için Chip-ölçekli Yapı iskeleleri mikroimalat

Bu yazıda tek bir hücre analizi için bir mikroakışkan çip sunuyoruz. Bu sağlar: hücre içi proteinler, enzimler, kofaktörler, ve floresan deneyleri veya bağışıklık aracılığıyla ikinci haberciler miktar.

Tek Hücrelerinin yönlü Kimyasal Analiz için mikroakışkan Chip

Bu protokol, SiO 2 hücre modelleme için bir mikroimalat uyumlu bir yöntemi tarif etmektedir. Önceden tanımlanmış bir parylene C dizayn photolithographically SiO 2 gofret yazdırılır. Serum (veya başka bir etkinleştirme solüsyonu) ile inkübasyondan sonra hücreler için özel olarak uygun (ve uygun göre gelişir) SiO 2 bölgeleri ile püskürtüldü olmak iken esas parylene,-C,.

Photolithographically Tanımlı Parylene-C hücre Desenlendirme: SiO<sub&gt; 2</sub&gt; Yüzeyleri

Bu protokol, in vitro kas hücrelerinin kasılma ölçmek için esnek kültür yüzeyleri olarak mikro silikon konsolun kullanımını tarif etmektedir. Hücresel kasılması, ölçülen kaydedilen ve in vitro kontraktil fonksiyon ölçmek için non-invazif ve ölçeklenebilir sisteminin temin edilmesiyle, kuvvet çıktılan dönüştürülebilir dirsekli bükme neden olur.

Mikro Silikon konsolun Kullanımı Hücresel kasılma fonksiyonunu değerlendirmek için İn Vitro

Akışkan bileşenlerle entegre edilmiş mikro fabrikasyon cihazlar, in vivo mikro ortamı taklit eden hücre çalışmaları için in vitro bir platform sağlar. Tek veya bir arada bulunan kimyasal/elektriksel/kesme gerilimi uyaranları altında hücresel tepkileri incelemek için polimetilmetakrilat bazlı mikroakışkan çipler geliştirdik.

Tek ya da Eşlik Kimya / Elektrik / Kesme Stres Uyaranların altında Hücresel Yanıtları incelenmesi için mikroakışkan Cihazlar Tasarımı

Bu rapor, birden fazla hücrenin yüksek verimli eşleştirme ve mikroskobik analizinin sağlanabileceği tek bir hücre kültürü deneyi kurmak için mikroakışkan çip tabanlı bir yöntem tanımlanmaktadır.

Mikroakışkan Çiple Deterministik Bir Şekilde Tek Hücreli Ortak Kültürlerin Oluşturulması

Bu protokol, hücre içi optik biyo-modülasyonu için basit ve kolay bir yöntemde silikon nanotellerin kullanımını açıklamaktadır. Bu teknik, çeşitli hücre tiplerine son derece uyarlanabilir ve in vitro ve in vivo uygulamaları için de kullanılabilir.

Silikon Nanowires ve Optik Stimülasyon İç-ve Hücrelerarası Elektrik Kaplin İncelemeler için

Mikroakışkan bir çip üzerinde fare embriyonik dokusunun kültürü ve manipülasyonu için bir protokol sağlanır. Yol modülatörlerinin darbelerini uygulayarak, bu sistem fare somitogenezinin fonksiyonel araştırması için sinyal salınımlarını harici olarak kontrol etmek için kullanılabilir.

Somitogenezi Yöneten Sinyal Salınımlarının Fonksiyonel Olarak İncelenmesi İçin Bir Mikroakışkan Yaklaşımı

Polidimetilsiloksan (PDMS) çip cihazlarının zarları için su geçirmez silikon bazlı contalar üretmek için yenilikçi bir sızdırmazlık protokolü. Laboratuvarlarda çip modelleri kurmak ve küçük ölçekli çip platformu geliştirme için tasarlanmıştır. Protokolü plastik ve doğal doku zarları kullanarak gösteriyoruz. Bu işlem yalnızca PDMS, toluen, küf, membran ve vakum odası gerektirir.

Esnek ve Güvenilir Yapıştırma için Erişilebilir Silikon Çip-Membran Sızdırmazlık Prosedürü

Öğrenin silikon mikroçipler kullanarak hücre-hücre etkileşimlerini dinamik olarak düzenleme yöntemini. Karaciğer hepatositleri ve stromal hücreler arasındaki iletişimi mikrometre ölçeğinde araştırın.

Hücre hücre Etkileşim kurgulama için Silikon mikroçipler

Daha fazla video keşfet