Hücresel Davranış incelenmesi için Groove Desenler mikroakışkan Aygıt

Biz hücre yakalama ve kültür etkinleştirebilirsiniz mikroakışkan cihazların imalatı için bir protokol tanımlamaktadır. Bu yaklaşımda, mikroakışkan kanallar içinde oluk gibi desenli mikro, içinde hücre sabitleyebilirsiniz Shear stresin düşük olduğu bölgelerde oluşturmak için kullanılır.

Benim adım Jiang, Harvard ve MIT, sağlık, bilim ve Teknoloji poster üyesiyim. Bu laboratuvardaki uzmanlığım, hücresel davranışı incelemek için yeni bir tahmin cihazı oluşturabilirim. Çok yeni gradyan cihazı üretebilirim ve aynı zamanda tahmin cihazıma entegre de oluşturabilirim.

TC cihazı, hücre hücre etkileşimini ve hücre etkileşimini ve ayrıca hücre güneş faktörü temasını hassas bir şekilde manipüle edebilir. Bu yüzden TC sistemini kullanarak, temel hücre biyolojisini anlamak için çalışabilir ve aynı zamanda bazı gelişim biyolojilerinin yanı sıra bazı biyobiyo kök hücre biyomühendisliğini uygulayabilirim. Benim adım Amir Manchi ve Harvard, MIT Sağlık Bilimleri ve Teknolojisi Bölümü'nde lisans öğrencisi profesör Haan laboratuvarıyım.

Ve ben mikro fillik cihazlar üzerinde çalışıyorum ve bir prensip kanıtı olarak, mikroakışkan cihazların hücreleri kültürlemek için büyük potansiyel cihazlar olduğunu göstermeye çalışıyoruz ve toksisite çalışmaları gibi farklı çalışmalar yapıyoruz ve ayrıca bu cihazların içindeki sıvı karakterizasyonunu akış hızlarının bir fonksiyonu olarak incelemeye ve optimize etmeye çalıştık. geometri ve diğer farklı parametreler. Şu anda mikrofabrikasyon odasından başlıyoruz ve yapacağımız şey bazı mikroakışkan cihazlar yapmaya çalışmak, mikro folik cihazların oluşması için bazı silikon gofret kalıplarına ihtiyacımız var ve bunların üzerinde bazı PDMS kalıplarına ihtiyacımız var. Bu PDMS polimeri aslında iki farklı şeyin bir karışımıdır.

Silikon elastomer baz ve ayrıca silikon elastomer akım ajanının bir karışımıdır. Bu ikisini karıştırma şeklimiz, onları 10'a bir oranında, yani 10 baz ve bir kürleme maddesinde karıştırmamızdır. Şimdi burada tabanımın yaklaşık 20 gramını istiyorum.

Ayrıca iki gram kürleme maddesine ihtiyacım var ve kürleme maddesi çok daha az yoğun. Çok daha hızlı gelecek ve biraz dikkatli olmam gerekiyor. Yani şimdi yaklaşık 22 ve baz ile kürleme maddesini birlikte karıştırmak istiyorum.

Bu yüzden bunu yapmak için boru kullanacağım. Elimden geldiğince çok iyi bir şekilde karıştırmaya çalışacağım. Bu PDMS polimerini, üzerlerinde aslında desen bulunan silikon gofretlerin üzerine dökmek istiyorum ve silikon gofret, PDMS kalıplarına desen vermeye yardımcı oluyor.

Aslında burada iki silikon gofretim olduğunu fark edebilirsiniz ve bunun nedeni birinin mikro fillic cihazımızın üst katmanı, diğerinin ise alt katmanı için olmasıdır. Mikro fillik cihazlarda iki katmana ihtiyacımız var çünkü içeride bir kanala sahip olmaya çalışıyoruz ve mikro akışkan cihazların arkasındaki tüm hikaye, bu kanalların içinde akışa sahip olmak istememizdir. Bu yüzden bu karışımı her iki silikon gofretin üzerine dökmem gerekiyor çünkü bu karışımın içinde çok fazla baloncuk var.

Bu baloncukları çıkarmak istiyorum ve yaptığımız şey, bu baloncukları çıkarmak için vakum kullanmak. Ana laboratuvar alanına geri döndük ve size daha önce de söylediğim gibi, PDMS karışımının içinde çok sayıda kabarcık var ve bunları çıkarmak istiyoruz ve karışımları vakum odasının içindeki silikon gofretlerin üzerine yerleştireceğim. Hazneyi kapatacağım ve vakumu açacağım, bu yapıldıktan sonra PDMS kalıplarını daha sağlam hale getirmek için bir gece fırının içine alacağız.

Tamam, şu anda laboratuvardayız ve bu mikro folik cihazları monte etmek istiyoruz. Yapacağımız şey, gece boyunca inkübatörün içinde olan PDMS kalıplarını alacağız ve onlar, silikon gofretlerin üzerindeki kalıpları oluşturdular ve ben iki farklı desen kullanacağım. Sol tarafta, en üst katman olacak olan mikro kanalı görebilir ve sağ tarafta, alt katman olacak bazı yeşil çizgi desenlerini görebilirsiniz.

Ve bu, bu mikro cihazın içindeki olukları oluşturacak. Silikon gofretten kolayca ayrılabilmesi için üst tabakaya sahip olabilmek için bu jelleri kesmekle başlıyorum. Ve yapacağım şey, onu bu Petra kabına yüzü yukarı bakacak şekilde aktaracağım, böylece desenler yukarı bakacak.

Ve aynı şeyi yeşil çizgi desenleri olan oluklar için de deneyeceğim. Yani bunlar alt katmanı oluşturacak. Bu yüzden jel kesildikten sonra onu Petra kabına aktaracağım ve desenlerin üzerine toz çıkmasını önlemek için onları bantlayacağım.

Bir sonraki adım, hücre ve ortamın içeri ve dışarı akmasına izin vermek için kanalların uçlarını delmektir. Yapacağım şey şu, çünkü burada geniş bir yüzeye sahibim ve desenleri kendim göremem, kanalları görebilmek için bunu kullanacağım ve her iki ucunu da yumruklayacağım. Bu yüzden burada büyük bir yumruk atacağım, böylece bir rezerv emri olması gerekiyor ve diğer tarafta, diğer tarafta poli etanol boruları kullanabilmek için küçük bir delik açacağım.

Şu anda mikrofabrikasyon odasındayız ve bir sonraki adım, sahip olduğumuz iki farklı yüzeyi birbirine bağlamak. Bunu yapmak için plazma temizleyici adı verilen bu makineyi kullanıyorsunuz ve işleme plazma tedavisi deniyor. Bu odanın içinde olan şey, bir plazma ortamına sahip olmamız ve plazma yüzey etkileşiminde olacak olan şey, plazmanın aslında zayıf yüzey dengesini bozması ve onu oldukça reaktif kimyasal gruplarla değiştirmesi olacak.

Şimdi olacak olan şey, tozlanmasını önlemek için buraya koyduğu bantları çıkaracağım ve bu kalıpları haznenin içine koyacağım. Bu kapıyı sonuna kadar kapatacağım, önce güç, sonra pompalama ve sonra gitmeye hazırız. Beş ila 10 dakika içinde alacağız.

Şimdi onu kapatmak istiyorum, bu yüzden pompayı ve gücü kapatıyorum ve hazneyi açacağım. Aslında burada negatif bir basınç var, bu yüzden sesi duyabilirsiniz. İşte bu, negatif baskı nedeniyle, bu yüzden yavaş yavaş kalıplarımı çıkarıyorum.

Her iki desen yüzeyi de yukarı baktığından, alt katmanı alacağım, sol elime yerleştireceğim ve üst katmanı alacağım, ters çevireceğim ve oluklarımın üzerine yerleştireceğim ve sonra katmanları üst üste iteceğim. Yapışma gücü ve kalıcılığı, bu plazma işleme makinesini kullanmanın avantajıdır. Ve şu anda burada gördüğünüz şey, aslında üst katmandaki kanalı görebildiğiniz ve alt katmandaki yivli desenleri görebildiğiniz ve bir sonraki adıma geçmeye hazır olduğu.

Ve sonra buraya bu kültür odasını, bu kültür yemeğini getirin ve sonra kapıyı açın. Ve sonra sadece fibronektini yükleyebilir, 60 mikrolitre fibroini çıkarabilir ve sonra cihaza yükleyebiliriz. Ve sonra, kanalın içindeki titreşimi küçük bir kaplamaya neden olmak için cihazın içinde bir miktar akış oluşturmak için, çıkışı nazikçe emebiliriz.

Bundan sonra, bu cihazı inkübatöre yerleştirebiliriz ve bir saat sonra, inkübatörün titreşimli iç kısmını soğuturuz. Sadece inkübatörden dis numunesini alıyoruz ve sonra sadece beş pas, üç, üç fiber pas kullanıyoruz. Sadece füzyon ve gölge gönderiyoruz ve sonra medyayı koyuyoruz ve sonra hücre sayacını kullanarak hücre ilçesini de kullanıyoruz.

Biz genellikle şehrin milyon hücresi önde gelen cihazın içinde oturuyor. Bu nedenle, ayrışmadan sonra sadece bir tane, birkaç kez şampuanı itebilir ve ardından satış süspansiyonunu çıkarabilir ve ardından hücreyi kanalın içine daha iyi yüklemek için kanalın içini yükleyebiliriz. Aspiratı kullanarak sadece nazikçe akabilirsiniz.

Çıkış hücresinden geçen toplam ortam ve yüzey süspansiyonu aspirasyonu genellikle otomatik olarak, bilirsiniz, seçici, küresel kanalı tohumlar. Bundan sonra, inkübatörü bir saat boyunca söküp koyabiliriz, hücre tamamen kanalın içine yayılana kadar. Ve sonra sadece ek beşi ve prop iyodürü ve ayrıca hidro peroksiti infüze edebiliriz.

Ve sonra zaman hipotezi tahlilinizi inceleyin. Numuneyi sadece bir doku kültürü yiyeceğinin içine alabiliriz ve daha sonra çözeltiyi iki değirmen DMM ortamının yanı sıra 20 mikrolitre ek beş 40 mikrolitre prop iyot, 100 mili hidrojen peroksit yapabiliriz. Ve sonra ek beş, prop iyodür, hidro perside ile iki metrelik medya ortamını alın ve ardından şırıngayı yerleştirin.

İki değirmen ortamını koyun ve ek beş prop iyodür, hidro persid. Çözeltiyi tavanın içine koyabilir ve ardından balonu çıkarabilir ve ardından C ayısını bağlayabiliriz. Bu, gaz geçirmez Hamilton sıcak değirmen tavanlarıdır.

Bu üç ayı. Bu tek kullanımlık tavan tavanlarıdır. Bu 27 gauge iğne.

Bu PE 20 poli boru. Solüsyonu bir şırınganın içine yükledikten sonra, sadece birkaç kez dolu ve tam itebilir ve tam itebilir ve itebilir ve bazen biraz uç, biraz şırıngaya dokunabilir ve ardından kabarcığı çıkarabilir ve ayrıca çözeltiyi çekebilirsiniz. Bu yüzden bir kez daha tamamen itin, balonu çıkarın ve ardından yavaşça tekrar programlayın.

Bu yüzden çözeltiyi bir öğün için alın ve sonra valfi değiştirebiliriz. İtin, çözeltiyi üç vanadan ve tamamen borunun içine itin. Sonunda çözüm, tüpümüzün ucundan dışarı çıkın ve daha sonra boruyu mikro cihaza bağlayabilir ve dakikada bir mikro demlemeye başlayabiliriz.