Boya Etiketli Manyetik Mikroküreler Kullanılarak Çoklanmış Kantitatif Bakteri Tespiti

Dahili olarak spektral olarak farklı floroforlarla boyanmış manyetik polistiren mikrokürelerin bir karışımını içeren bir tahlil plakası alın.

Her mikroküre seti, farklı patojenik bakterilere özgü yakalama antikorlarına kovalent olarak bağlanır.

Isıyla öldürülmüş bir patojenik bakteri karışımı ekleyin. Kuluçkaya yatmak.

Yakalama antikorları, hedef bakteriyel antijenleri bağlayarak mikroküre-bakteri kompleksleri oluşturur.

Kompleksleri çökeltmek için manyetik bir ayırıcı kullanın. Bağlanmamış bakterileri atın ve tampon ile yıkayın.

Özellikle mikroküre bağlı bakterilere bağlanan tampon ve biyotinile tespit antikorları ekleyin.

Kompleksleri manyetik olarak ayırın ve tampon ile yıkayın.

Tampondaki kompleksleri yeniden askıya alın. Biyotinile edilmiş tespit antikorlarına bağlanan floroforla bağlanmış streptavidin içeren pipet raportör molekülleri.

Kompleksleri manyetik olarak ayırın ve yıkayın. Arabellekte yeniden askıya alın.

Akış tabanlı analiz sırasında, ilk lazer mikrokürenin iç floroforlarını uyarır, benzersiz spektral imzalar üretir ve benzersiz mikro küre kümelerini tanımlar.

İkinci lazer, mikroküreler üzerindeki bakterilere bağlı florofor raportörlerini uyarır, çeşitli mikroküre