JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:07 dk. • July 8th, 2025
ECM kaplı bir plaka ve Rho-kinaz inhibitörleri içeren bir büyüme ortamında insan pluripotent kök hücrelerinin tohum kümeleri ile başlayın.
ECM hücre bağlanmasını artırırken, inhibitörler Rho-kinazları bloke ederek apoptotik hücre ölümünü önler ve hücre sağkalımını ve çoğalmasını destekler.
Nöral progenitör hücrelere kök hücre farklılaşmasını indüklemek için bir nöral farklılaşma ortamı tanıtın.
Bir ayırma çözeltisi ile muamele edin; bu çözeltideki enzimler ECM'yi ve hücre temasını bozarak hücreleri serbest bırakır.
Bunları Rho-kinaz inhibitörleri içeren kaplanmamış bir şişeye aktarın.
İnhibitörler, hücre sağkalımını ve üç boyutlu yapılara veya sferoidlere spontan agregasyonu kolaylaştırır.
Sferoidleri, büyüme faktörü açısından zengin bir nöral farklılaşma ortamı ile destekleyin, bu da nöral progenitör hücrelerin astrosit progenitörlerine farklılaşmasına ve astrosferler oluşturmasına izin verir.
Düzenli olarak, astrosferleri daha küçük kümelere ayırmak için bir ayırma çözümü ekleyin. Bu, besinlerin sferoidin iç hücrelerine ulaşmasını ve canlılıklarını korumasını sağlar.
Ataların astrositlere dönüşmesi için astrosferleri taze bir ortamda tutun.
Rho-kinaz inhibitörü Y-27632 içeren 2 m
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin