Transmisyon Elektron Mikroskobu Kullanılarak Bir Fare Beyin Bölümünün Ultrastrüktürel Analizi

Bir reçine bloğuna gömülü osmiyum tetroksit ile sabitlenmiş bir fare beyni bölümü alın.

Bir kesit görüntüsü elde edin ve ilgilenilen bölgeyi belirlemek için önceden hazırlanmış bir atlas görüntüsüyle hizalayın.

Bu bölgenin sınırlarını blok üzerinde işaretleyin.

Reçineyi yumuşatmak için ısıtın ve işaretli bölgeyi çıkarın.

Numuneyi bir cam tutma çubuğuna yapıştırın ve kesin.

Bir ultramikrotom kullanarak yarı ince ve ultra ince bölümler hazırlayın.

Yarı ince ve ultra ince bölümleri sırasıyla cam taşıyıcılara ve nikel ızgaralara aktarın.

Yarı ince bölümleri nükleik asitlere, ribozom açısından zengin sitoplazmaya ve hücre dışı matrise bağlanan bir boya ile boyayın.

Bölümleri yıkayın ve hedef alanın varlığını doğrulamak için ışık mikroskobu altında inceleyin.

Transmisyon elektron mikroskobu altında ultra ince kesitleri gözlemleyin.

Osmiyum tetroksit, hücresel ve organel zarlarının elektron yoğunluğunu arttırır, daha az elektron yoğun sitoplazmaya karşı yüksek kontrast sağlar ve hücresel üst yapının görselleştirilmesini sağlar.

Bir ilgi alanını eşlemek için, daha önce hazırlanmış görüntü atlasından ilgi alanını içeren bir görüntü seçin. İlgilenilen alanın kenarlıklarını bölümlere ayrılmış görüntünü