Name: Yalıtım endotelyal Progenitor Hücre insan göbek kordon kanı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-09-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 26 s
Description: Keşfedin insan göbek kordon kanından endotelyal progenitor hücre izolasyonunu. Bu yöntem, damar greftleri için doku mühendisliği ve kardiyovasküler risk değerlendirmesi uygulamalarında otolog hücre kaynağı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu malzeme Grant No altında Ulusal Bilim Vakfı tarafından desteklenen çalışma üzerine kuruludur CMMI-1452943 ve Arkansas Üniversitesi onur üniversite tarafından. Biz de Arkansas Kordon Kanı Bankası kordon kanı birimleri ile bize sağlamak için kabul etmek istiyorum.

Bu araştırma Üniversitesi Arkansas kurumsal inceleme Kurulu (onay numarası 16-04-722) onayı ile gerçekleştirilmiştir. Göbek Kordon kanı birimleri sitrat fosfat dekstroz (GBM) çözümünde, Arkansas Kordon Kanı Bankası toplanmıştır ve depolama gereksinimini karşılamayan birimleri için araştırma kuruluşuna verildi. Kordon kan birimleri ortam sıcaklıklarda koleksiyonunun 24 saat içinde laboratuvara couriered.
 1. yalıtım endotelyal Progenitor Hücre kordon kanı üzerinden <ol><li>reaktifler hazırlanması.
	<ol><li>Hazırlamak endotel Bazal orta (EBM) % 10 fetal sığır serum için (FBS) ekleyerek EGM takıma 20 ng/mL İnsülin benzeri büyüme faktörü (IGF), 1 µg/mL askorbik asit, 5 ng/mL rekombinant insan epidermal büyüme faktörü (rhEGF), 22.5 µg/mL heparin ve 0,5 ng/mL vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF), 10 ng/mL rekombinant insan Fibroblast büyüme faktörü B (rhFGF-B), 0.2 µg/mL hidrokortizon ve % 2 penisilin-streptomisin-glutamin ile birlikte. Kültür 0.2 µm polyethersulfone (PES) membran vakum filtre kullanarak ortamın sterilize.</li>
		<li>Hazırlama fare ben kollajen çözüm 50 µg/mL 0,02 N Asetik asit kullanarak bir konsantrasyon, kuyruk. Bu çözüm 0.2 µm şırınga filtre sterilize.</li>
		<li>Öncesi kat 6-şey tabak 2 mL hazırlanmış iri fare ile ben her şey için kollajen çözüm kuyruk. Tohum önce % 5 CO 2 ve 37 ° C en az 1 h için tutulan bir kuluçka yerleştirebilirsiniz.</li>
		<li>1:1 konsantrasyon, kordon kanı ile Hanks dengeli tuz çözüm (HBSS) yaklaşık olarak 25 mL seyreltik.</li>
		<li>Hazırlama radyo-IMMUNO yağış tahlil 150 mM Sodyum Klorür, %1 Triton X-100, % 0.5 sodyum deoxycholate, 1 mM β-gliserofosfat, % 0,1 SDS ve 50 mM Tris (pH 8.0) kullanarak (RIPA) arabellek.</li>
	</ol></li> <li>Yalıtım endotelyal progenitor hücre.
	<ol><li>Sıcak tüm hazır reaktifler yalıtım önce 37 ° C'de tutulan bir su banyosunda.</li>
		<li>Yoğunluğu degrade orta reaktif 20 mL 50 mL santrifüj tüpü ekleyin.</li>
		<li>Dikkatle katman seyreltilmiş kordon kanı pipet tüp yan duvarlarının doğru amaçlayan tarafından bu katman bozmadan yoğunluk gradient orta içeren santrifüj tüpü içinde 20 mL.</li>
		<li>Onların yoğunlukları ( şekil 1) göre kan bileşenlerinin santrifüj rotor frenler ile 800 x g oda sıcaklığında 30 dk için de centrifuging tarafından ayırın. Farklı Katmanlar rahatsız etmeyin.</li>
		<li>Plazma katmanın dikkatle bu tüp dışında diğer hücre katman pipet ucu MNC ulaşmak mümkün olana katmanları (bkz. şekil 1) rahatsız etmeden pipetting tarafından kaldırın. Kaldırılan plazma atın. 
		Not: pipet ipuçları plazma kaldırmak için kullanırken, plazma MNC katmanının (bozuklukları azaltmak için, şekil 1) küçük bir tabaka bırakın.</li>
		<li>Bir 18'lik iğne donatılmış kullanarak çok uluslu şirketler içerir buffy kat toplamak ve bir taze santrifüj tüpü transfer.</li>
		<li>Ekleyin EBM eşit bir hacmi toplanan çok uluslu şirketler. santrifüj için bu tüpler 500 x g 10 min için de 4'te ° C. atma süpernatant. 
		Not: Kırmızı hücre Pelet kırmızı kan hücreleri/eritrositler varlığı nedeniyle görünür.</li>
		<li>5 mL kırmızı kan hücreleri parçalayıcı amonyum klorür çözeltisi ekleyin. Bu tüp için 5-10 dk ara sıra sallayarak ile buz üzerinde kuluçkaya. 
		Not: çok uluslu şirketler için zararlı olabileceği kadar dikkatli olun bu adımı sırasında zaman süresini aşmayacak şekilde alınmalıdır.</li>
		<li>500 x g 4 ° C'de 10 dakika için de tüpler santrifüj kapasitesi ve süpernatant atın. Eritrositler devam ederse, kırmızı renk Pelet içinde gözlenen 1.2.8 ve 1.2.9 yükleme tamamlayana dek.</li>
		<li>Pelet hazırlanan EGM içinde resuspend ve hemasitometre çok uluslu şirketler kullanın.</li>
		<li>Aspiratı sıçan kuyruk ben (adımından 1.1.3) kolajen kaplı 6-şey plaka ve wells 1 fosfat tamponlu tuz çözeltisi (PBS) x ile üç kez yıkayın.</li>
		<li>1 x 10 7 çok uluslu şirketler her iyi bir konsantrasyon, kollajen plakasına EGM içinde resuspended MNC Pelet tohum. 37 ° C'de % 5 CO 2 kuluçka yerleştirin.</li>
		<li>Sonra 24 h, orta Aspire edin ve wells bir kez EGM ile yıkayın. Her şey için EGM orta 3 mL ekleyin ve geri 37 ° C, % 5 CO 2 kuluçka yerleştirin.</li>
		<li>7 gün boyunca her gün taze EGM orta ile plaka doldurmak. 7 gün sonra EGM orta her gün değiştirin.</li>
		<li>Bir alan parlak mikroskop kullanarak almak 6-şey plaka görüntülerini her gün endotel hücre kolonileri ilerlemesini izlemek için. Nerede koloniler ortaya onların büyüme izlemek için plaka işareti. 
		Not: Genellikle kültür görünmesini colonies için 5 ile 9 gün arasında sürer.</li>
	</ol></li> <li>Genişleme endotelyal progenitor hücre.
	<ol><li>Kat T-25 kültür şişeye fare ile kuyruk kollajen (50 µg/mL) ve yer o 37 ° C'de % 5 CO 2 kuluçka için en az 60 dk. aspiratı ve hücreleri tohum önce üç kez 1 x PBS ile T-25 hücre kültür şişeye yıka.</li>
		3 mm boyutunda 150 µL % 0.05 tripsin-EDTA çözüm her kuyuya kullanarak ulaştığınızda <li>endotel hücre koloniler trypsinize. 6-şey plaka 37 ° C, % 5 CO 2 kuluçka 2-3 dakika süreyle geri yerleştirin</li>
		<li>Ekli hücreleri çıkarmak için 6-şey plaka hafifçe dokunun. 2 mL EGM eklenir ve yaklaşık 15 mL santrifüj tüpü hücrelerde kurtarmak.</li>
		<li>Bir hemasitometre kullanarak hücreleri saymak ve ilk tohumlama yoğunluğu hesaplamak.</li>
		<li>Spin 15 mL santrifüj tüpleri 400 x g 5 dakika süreyle, hücre Pelet EGM içinde Resuspend ve T-25 şişeye ~ 500.000 hücreleri ile tohum. Bu şişeyi geçiş 1 olarak işaretlemek ve T-25 şişeye geri 37 ° C, % 5 CO 2 kuluçka yerleştirin. 
		Not: Hücreleri EBM ve DMEM büyüme EGM ile karşılaştırmak için kaplama.</li>
		<li>İçin daha fazla geçişleri, şişeye % 90 izdiham ulaştığında, adımları 1.3.1 - 1.3.5 ve hücre 10 4 hücreleri/cm 2 T-75 veya T-175 hücre kültür şişeler reseed. İzole hücreler (Adım 2 ve 3) karakterizasyonu için devam.</li>
	</ol></li></ol> 2. İzole hücreler kullanarak Western Blot karakterizasyonu <ol><li>Ekle 50-100 µL lizis, arabellek izole hücreleri ayırdetmek için genişleme adımları her geçiş. Proteinler yaklaşık 500.000 veya daha çok satır toplamak.</li>
	<li>Yukarı ve aşağı şiddetle hücreleri rüptürü ve proteinleri serbest bırakmak için pipet. Toplamak ve arabellek microcentrifuge tüp transfer.</li>
	<li>Microcentrifuge tüp 500 x g de spin ve dikkatle süpernatant yeni bir microcentrifuge tüp aktarın. Etiket ve tüpler uzun süreli depolama için-80 ° C'de depolayın.</li>
	<li>Ya Bradford kullanarak her tüpün içinde protein miktarını ölçmek &#39; s veya BCA tahlil 27 , 28 , 29.</li>
	<li>Standart prosedürler 27 , 28 , 29 kullanarak kurutma Western taşımak. İfadeye CD31, CD34, VEGFR2 ve α-SMA ait toplam protein 5 µg analiz. Veri normalleştirme için α-tübülin kullanın.</li>
</ol> 3. Dolaylı ayirt <ol><li>18-mm cam coverslips % 50 etanol içinde solüsyon içeren temizleyicide ve onları kurutun. Temiz coverslips bir 12-şey plaka gecede Biyogüvenlik mahalledeki bir UV ile onları sterilize etmek ışık bırakın.</li>
	<li>Kat coverslips ile 50 ve #181; g/kuyruk kollajen ve plaka bir 37 ° C, % 5 CO 2 kuluçka en az 60 dakika süreyle transfer mL sıçan</li>
	<li>Kollajen Aspire edin ve 1 mL 1 x PBS coverslips yıkamak için 12-şey plaka ekleyin. 1 x PBS Aspire edin ve iki kez tekrarlayın.</li>
	<li>Tohum 250.000 kültürlü EPCs her şey ve onları geri 37 ° C'de % 5 CO 2 kuluçka immunostaining taşıma önce en az 3 gün boyunca yerde.</li>
	<li>3 kez 1 x PBS ile plaka yıkayın. Her şey buz gibi metanol 1 mL ekleyin ve hücreleri düzeltmek 15 dakika oda sıcaklığında kuluçkaya.</li>
	<li>Kullanarak bir standart iletişim kuralı 27 , 28 , 29 immunostaining taşımak. Antikorlar onların uygun dilutions kullanın (Örneğin, CD31 (1:20), CD34 (1:50), α-SMA (1: 100) ve VEGFR2 (1:50)).</li>
	<li>Al epifluorescence mikroskop kullanarak immunostained coverslips görüntülerini.</li>
</ol>

<ol><li>Asahara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+putative+progenitor+endothelial+cells+for+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis.</a> Science. 275 (5302), 964-967 (1997).</li>
<li>Lin, Y., Weisdorf, D. J., Solovey, A., Hebbel, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origins+of+circulating+endothelial+cells+and+endothelial+outgrowth+from+blood%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Origins of circulating endothelial cells and endothelial outgrowth from blood.</a> J Clin Invest. 105 (1), 71-77 (2000).</li>
<li>Shi, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+circulating+bone+marrow-derived+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Evidence for circulating bone marrow-derived endothelial cells.</a> Blood. 92 (2), 362-367 (1998).</li>
<li>Hirschi, K. K., Ingram, D. A., Yoder, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+identity%2C+phenotype%2C+and+fate+of+endothelial+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Assessing identity, phenotype, and fate of endothelial progenitor cells.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28 (9), 1584-1595 (2008).</li>
<li>Ingram, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+novel+hierarchy+of+endothelial+progenitor+cells+using+human+peripheral+and+umbilical+cord+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Identification of a novel hierarchy of endothelial progenitor cells using human peripheral and umbilical cord blood.</a> Blood. 104 (9), 2752-2760 (2004).</li>
<li>Yoder, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Redefining+endothelial+progenitor+cells+via+clonal+analysis+and+hematopoietic+stem%2Fprogenitor+cell+principals%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Redefining endothelial progenitor cells via clonal analysis and hematopoietic stem/progenitor cell principals.</a> Blood. 109 (5), 1801-1809 (2007).</li>
<li>Sales, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transforming+growth+factor-beta1+modulates+extracellular+matrix+production%2C+proliferation%2C+and+apoptosis+of+endothelial+progenitor+cells+in+tissue-engineering+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Transforming growth factor-beta1 modulates extracellular matrix production, proliferation, and apoptosis of endothelial progenitor cells in tissue-engineering scaffolds.</a> Circulation. 114, 1 Suppl 193-199 (2006).</li>
<li>Sales, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Progenitor+Cells+as+a+Sole+Source+for+Ex+Vivo+Seeding+of+Tissue-Engineered+Heart+Valves%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Pt+A%22%5BJournal%5D)">Endothelial Progenitor Cells as a Sole Source for Ex Vivo Seeding of Tissue-Engineered Heart Valves.</a> Tissue Eng Pt A. 16 (1), 257-267 (2010).</li>
<li>Liew, A., Barry, F., O'Brien, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+progenitor+cells%3A+diagnostic+and+therapeutic+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Bioessays%22%5BJournal%5D)">Endothelial progenitor cells: diagnostic and therapeutic considerations.</a> Bioessays. 28 (3), 261-270 (2006).</li>
<li>Hur, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+two+types+of+endothelial+progenitor+cells+and+their+different+contributions+to+neovasculogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Characterization of two types of endothelial progenitor cells and their different contributions to neovasculogenesis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 24 (2), 288-293 (2004).</li>
<li>Ingram, D. A., Caplice, N. M., Yoder, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unresolved+questions%2C+changing+definitions%2C+and+novel+paradigms+for+defining+endothelial+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Unresolved questions, changing definitions, and novel paradigms for defining endothelial progenitor cells.</a> Blood. 106 (5), 1525-1531 (2005).</li>
<li>Melero-Martin, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+vasculogenic+potential+of+human+blood-derived+endothelial+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">In vivo vasculogenic potential of human blood-derived endothelial progenitor cells.</a> Blood. 109 (11), 4761-4768 (2007).</li>
<li>Melero-Martin, J. M., Bischoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+13.+An+in+vivo+experimental+model+for+postnatal+vasculogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Chapter 13. An in vivo experimental model for postnatal vasculogenesis.</a> Methods Enzymol. 445, 303-329 (2008).</li>
<li>Yoder, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+endothelial+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Perspect+Med%22%5BJournal%5D)">Human endothelial progenitor cells.</a> Cold Spring Harb Perspect Med. 2 (7), 006692(2012).</li>
<li>Siddique, A., Shantsila, E., Lip, G. Y. H., Varma, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+progenitor+cells%3A+what+use+for+the+cardiologist%5BTitle%5D)+AND+%22J+Angiogenes+Res%22%5BJournal%5D)">Endothelial progenitor cells: what use for the cardiologist.</a> J Angiogenes Res. 2 (6), (2010).</li>
<li>Camci-Unal, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface-modified+hyaluronic+acid+hydrogels+to+capture+endothelial+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Soft+Matter%22%5BJournal%5D)">Surface-modified hyaluronic acid hydrogels to capture endothelial progenitor cells.</a> Soft Matter. 6 (20), 5120-5126 (2010).</li>
<li>Hill, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circulating+endothelial+progenitor+cells%2C+vascular+function%2C+and+cardiovascular+risk%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Circulating endothelial progenitor cells, vascular function, and cardiovascular risk.</a> N Engl J Med. 348 (7), 593-600 (2003).</li>
<li>Young, P. P., Vaughan, D. E., Hatzopoulos, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biologic+properties+of+endothelial+progenitor+cells+and+their+potential+for+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Cardiovasc+Dis%22%5BJournal%5D)">Biologic properties of endothelial progenitor cells and their potential for cell therapy.</a> Prog Cardiovasc Dis. 49 (6), 421-429 (2007).</li>
<li>Mehta, J. L., Szwedo, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circulating+endothelial+progenitor+cells%2C+microparticles+and+vascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hypertens%22%5BJournal%5D)">Circulating endothelial progenitor cells, microparticles and vascular disease.</a> J Hypertens. 28 (8), 1611-1613 (2010).</li>
<li>Nevskaya, T., et al. Circulating endothelial progenitor cells in systemic sclerosis are related to impaired angiogenesis and vascular disease manifestations. Ann Rheum Dis. 66, 67-67 (2007).</li>
<li>Cebotari, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+application+of+tissue+engineered+human+heart+valves+using+autologous+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Clinical application of tissue engineered human heart valves using autologous progenitor cells.</a> Circulation. 114, 1 Suppl 132-137 (2006).</li>
<li>Ito, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+progenitor+cells+as+putative+targets+for+angiostatin%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Endothelial progenitor cells as putative targets for angiostatin.</a> Cancer Res. 59 (23), 5875-5877 (1999).</li>
<li>Vasa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increase+in+circulating+endothelial+progenitor+cells+by+statin+therapy+in+patients+with+stable+coronary+artery+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Increase in circulating endothelial progenitor cells by statin therapy in patients with stable coronary artery disease.</a> Circulation. 103 (24), 2885-2890 (2001).</li>
<li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-engineered+microvessels+on+three-dimensional+biodegradable+scaffolds+using+human+endothelial+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Tissue-engineered microvessels on three-dimensional biodegradable scaffolds using human endothelial progenitor cells.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 287 (2), 480-487 (2004).</li>
<li>Boyer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+endothelial+cells+and+their+progenitor+cells+from+human+peripheral+blood%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Isolation of endothelial cells and their progenitor cells from human peripheral blood.</a> J Vasc Surg. 31 (1), Pt 1 181-189 (2000).</li>
<li>Huber, B., Czaja, A. M., Kluger, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+epidermal+growth+factor+%28EGF%29+and+hydrocortisone+on+the+co-culture+of+mature+adipocytes+and+endothelial+cells+for+vascularized+adipose+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biol+Int%22%5BJournal%5D)">Influence of epidermal growth factor (EGF) and hydrocortisone on the co-culture of mature adipocytes and endothelial cells for vascularized adipose tissue engineering.</a> Cell Biol Int. 40 (5), 569-578 (2016).</li>
<li>Sturdivant, N. M., Smith, S. G., Ali, S. F., Wolchok, J. C., Balachandran, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acetazolamide+Mitigates+Astrocyte+Cellular+Edema+Following+Mild+Traumatic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Acetazolamide Mitigates Astrocyte Cellular Edema Following Mild Traumatic Brain Injury.</a> Sci Rep. 6, 33330(2016).</li>
<li>Lam, N. T., Muldoon, T. J., Quinn, K. P., Rajaram, N., Balachandran, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Valve+interstitial+cell+contractile+strength+and+metabolic+state+are+dependent+on+its+shape%5BTitle%5D)+AND+%22Integr+Biol+%28Camb%29%22%5BJournal%5D)">Valve interstitial cell contractile strength and metabolic state are dependent on its shape.</a> Integr Biol (Camb). 8 (10), 1079-1089 (2016).</li>
<li>Tandon, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Valve+interstitial+cell+shape+modulates+cell+contractility+independent+of+cell+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">Valve interstitial cell shape modulates cell contractility independent of cell phenotype.</a> J Biomech. 49 (14), 3289-3297 (2016).</li>
<li>Cockshell, M. P., Bonder, C. S. <a target="_blank" href="http://www.bio-protocol.org/e1772">Isolation and Culture of Human CD133+ Non-adherent Endothelial Forming Cells.</a> Bio-Protocol. 6 (7), (2016).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Daha önce belirtildiği gibi bir kaldırım taşı döşeli Morfoloji sahip yapışık EPCs. Bizim izole çok uluslu şirketler bir seklinde hücre koloni (Şekil 2A-2D) bir süre kültür on gün içinde bir Arnavut kaldırımlı koloni (Şekil 2E-2F) erken aşamalarında ilerledi. EPCs farklı farklı araştırma gruplarınca, endotel koloni oluşturan hücreleri5veya endotelyal progenitor hücreler12Yani geç en...

Birkaç müfettişler özellikleri ve insan EPCs5,10,11,12,13potansiyelini inceledik. EPCs endotel dokusunda siteleri hipoksi, iskemi, yaralanma veya tümör oluşumu için uygun ve yeni vasküler yapılar4,14oluşumuna katkıda yeteneği olan hücreleri dolaşan olarak tanımlanabilir. Neovaskülarizasyon, doğum sonrası vasculogenesis, şeklinde gözlenen onların katılımı bir anlayış bu hücreler ve tedavi uygulamaları4,15, kullanımları Patofizyoloji yol açmış 16. bireyin EPCs sayısında kardiyovasküler patoloji9,15,16,17,18ile,19 ilişkili olduğu gösterilmiştir ,20. Diğer çalışmalar da EPCs bir vana fibroblast benzeri fenotip ayrıştırılan ve bu hücrelerin doku Mühendisliği kalp vanalar7,21için kullanılan olabilir önerdi.
EPCs yalıtmak için gerekli belirli hücre yüzey molekülleri açıkça nedeniyle İncelemeler4arasındaki tutarsızlıkları tespit edilmiştir değil. Çok uluslu şirketler yapışma maruz kalma kültür koşulları, çeşitli ile belirli bir matris için sözde EPCs olabileceğini düşündüren çeşitli gruplar1,17,22,23, sahne aldı farklı fenotipik özellikleri görüntülenemiyor. Bu özellikler phagocytotic yeteneği, Matrigel tüp oluşumu ve Dil acetylated düşük yoğunluklu lipoproteinler alımını eksikliği içerir. Yüksek klonojenik progenitör mobilizasyonu yapar ve proliferatif potansiyeli ile hangi EPCs hierarchized5olabilir iki özelliklerdir. EPCs da insan fetal akciğer fibroblastlar4ile cocultured zaman vitro tübüllerin oluşabilir. Bu hücreler endotel hücre yüzey işaretleyicileri ifade etmek ve hematopoetik işaretleri13,24,25bazılarını paylaşmak için bilinir. Fenotipleme EPCs için yaygın olarak kabul edilen olumlu ifade işaretleri vardır CD31, CD34, vasküler endotelyal büyüme faktörü reseptör 2 (VEGFR2), von Willebrand faktör (vWF), CD133, c-Kit ve vasküler endotel cadherin (VE-cadherin)4 , 18. CD90, CD45, CD14, CD115 veya alfa-düz kas aktin (α-SMA) Co hızlı hücreleri bakteri ve yetersizlik de novo insan formu için phagocytose sınırlı proliferatif potansiyel, yeteneklerini nedeniyle EPCs olmak dikkate alınmaz damarları vivo içinde4,7. Bu makalede insan göbek kordon kanı ezelî belgili tanımlık lüzum için herhangi bir hücreyi iletişim kuralları sıralama endotelyal progenitor hücre izolasyon için değiştirilmiş bir protokol özetlenmektedir. Bu yazı için biz CD31, CD34 ve VEGFR2 olumlu işaretleyicilerle α-SMA negatif göstergesi olarak olarak kullanılır.
Bu makalede, yalıtma ve göbek kordon kanı hücrelerden endotelyal progenitor hücre kullanarak sıralama kültür yöntemi büyüme faktörleri (EGM) ile desteklenmiş endotelyal büyüme orta İhtisas öneriyorum. Bu EGM vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF) ve fibroblast büyüme faktörü (FGF), hayatta kalma, yayılması ve endotel hücreleri26geçiş güvenliğini artırmak içerir. Ayrıca askorbik asit, hücre Arnavut kaldırımlı Morfoloji bakımından sorumlu olan içerir; İnsülin benzeri büyüme faktörü-anjiogenik ve göçmen işlevi sağlayan 1 (IGF-1); ve heparin, büyüme faktörleri geliştirilmiş uzun vadeli istikrar içinde orta26neden olur. Endotel hücre kültür ortamına eklenen diğer büyüme faktörleri içerir takviyesi ile epidermal büyüme uyarıcı hücre çoğalması ve farklılaşma ve EGF26 hücrelere sensitizes hidrokortizon yardımcı olan faktörü (EGF), . Bu belirli büyüme orta kullanımı EPCs endotel Bazal orta (EBM) ya da Dulbecco'nın modifiye kartal orta (DMEM) göre daha yüksek sayıda verimleri göster.

<table><tbody><tr><td><güçlü >A) İzolasyon ve kültürleme için< / güçlü ></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>EGM-2 BulletKit</td><td>Lonza</td><td>CC-3162</td> Bu ürün, Endotel Büyüme Ortamı Fetal Sığır Serumu Thermofisher Scientific 26140079 Pencillin-Streptomisin-Glutamin (100x) Thermofisher Scientific 10378016 <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr> yapmak için gereken tüm büyüme faktörleriyle birlikte gelir<tr><td></td><td></td><td>.</td><td></td></tr><tr><td>Ficoll-Paque</td><td>GE Heatlhcare</td><td>17-1440-02</td><td></td></tr><tr><td>Hank'in Dengeli Tuz Çözeltisi</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>14170-112</td><td></td></tr><tr><td>Amonyum Klorür</td><td>Kök Hücre Teknolojileri</td><td>7850</td><td></td></tr><tr><td>1x Fosfat Tampon Tuzlu</td><td>Su Thermofisher Bilimsel</td><td>14190250</td><td></td></tr><tr><td>Sıçan Kuyruğu I Kollajen</td><td>Corning</td><td>354236</td><td></td></tr><tr><td>Buzul Asetik Asit</td><td>Amresco</td><td>0714-500ML</td><td></td></tr><tr><td>%0.05 Tripsin-EDTA</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>HEPES tamponu</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>15630080</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco'nun Modifiye Eagle's Medium</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10566-016</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>B) Antikorlar ve hücre lizatları</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CD31&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>ab28364</td><td>1:250 seyreltme&nbsp; Western blotting</td></tr><tr><td>CD34</td><td>için Santa Cruz Biotechnology</td><td>sc-7045</td><td>1:100 Western blotting</td></tr><tr><td>&alpha;-SMA</td> için seyreltme <td>abcam</td><td>ab5694</td><td>Western blotting için 1:100 seyreltme</td></tr><tr><td>&-tubulin</td><td>abcam</td><td>ab7291</td><td>Western blotting için 1:2.500 seyreltme</td></tr><tr><td>VEGFR2</td><td>abcam</td><td>sc504</td><td>Western blotting için 1:100 seyreltme</td></tr><tr><td>İnsan umbilikal ven endotel hücre lizatı</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>sc24709&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Valf interstisyel hücre lizatı</td><td></td><td></td><td>Kendi laboratuvarından kültürlenmiş ve RIPA tamponu ile parçalanmış birincil hücre hattı</td></tr> <tr><td><güçlü >C) Western blotting ve immün boyama< / güçlü ></td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>10x Tris / Glisin / SDS tamponu</td><td>Biorad</td><td>161-0772</td><td>Çalışma tamponu olarak kullanılır</td></tr><tr><td>10x Tris / Glisin tamponu</td><td>Biorad</td><td>161-0771</td><td>Transfer tamponu olarak kullanılır</td></tr><tr><td>Immobilon-FL transfer membranı</td><td>Merck Millipore</td><td>IPFL0010</td><td>Bu, 45 & m gözenek boyutu ve protokolde western blot membran</td></tr><tr><td>4x Laemmli numune tamponu</td><td>olarak belirtilmiştir Biorad</td><td>161-0747</td><td></td></tr><tr><td>2-merkaptoetanol</td><td>Biorad</td><td>161-0710</td><td></td></tr><tr><td>%10 Kriter TGX prekast jel</td><td>Biorad</td><td>5671033</td><td></td></tr><tr><td>Prolong Gold antifade</td><td>Thermofisher</td><td>Scientific P36930</td><td>Uzun süreli depolama için immün boyalı lamellerin montajında kullanılır</td></tr><tr><td>Metanol</td><td>VWR Analitik</td><td>BDH1135-4LP</td><td></td></tr></tbody></table>

yalıtım endotelyal progenitor hücre insan göbek kordon kanı

Isolation of Endothelial Progenitor Cells from Human Umbilical Cord Blood

Endotelyal progenitor hücreler (EPCs) periferik kan varlığı ve onun katılımı vasculogenesis ilk Ashara ve arkadaşları1tarafından rapor. Daha sonra diğerleri benzer türdeki diğer kemik iliği2,3' ten kaynaklanan EPCs varlığını belgelemiştir. Daha yakın zamanlarda, Yoder ve EPCs göbek kordon kanı türetilmiş gösterdi Ingram4,5,6kan olanlar yetişkin periferik izole göre bir daha yüksek proliferatif potansiyeli vardı. Doğum sonrası vasculogenesis dahil olmak dışında EPCs da söz doku Mühendisliği vasküler kalp kapak yapıları7,ve8oluşturmak için hücre kaynağı olarak göstermiştir. Çeşitli yalıtım protokoller bulunmaktadır, bazıları ücretli mononükleer hücreler (ÇUŞ 'un) endotel ve hematopoetik işaretleri yardımıyla yukarıda belirtildiği kaynaklardan elde edilen hücre sıralanması veya özel endotelyal büyüme ile bu ÇUŞ 'un kültür Orta veya bu teknikleri9bileşimi. Burada, biz yalıtım için bir iletişim kuralı mevcut ve kullanarak EPCs kültürünün İhtisas endotel orta immunosorting, Western Blot kullanarak izole hücrelerin karakterizasyonu tarafından takip kullanımı olmadan büyüme faktörleri ile desteklenmiş ve immunostaining.

Yalıtım ve genişleme endotelyal Progenitor Hücre: Bir şematik (şekil 1) genel Protokolü tasvir sağlanır. Farklı kan bileşeni katmanları insan göbek kordon kanı ile yoğunluk gradient Orta yoğunluk gradient Santrifüjü takip tespit edildi. Çok uluslu şirketler kollajen tedavi plakalar üzerine tohum, gün 5 ve 7 (Şekil 2A) arasında ilk koloniler akıbet gözlendi. Bu koloniler büyümeye devam etti ve ...

Bu iletişim kuralının amacı göbek kordon kanı endotelyal progenitor hücrelerini izole etmektir. Bazı uygulamalar bu hücreler bir biyomarker hastaların kardiyovasküler riski ile iskemik hastalıklar, tedavi tanımlamak için kullanmayı içerir ve oluşturma doku Mühendisliği vasküler ve kalp kapak oluşturur.

Yalıtım endotelyal Progenitor Hücre insan göbek kordon kanı

The existence of endothelial progenitor cells (EPCs) in peripheral blood and its involvement in vasculogenesis was first reported by Ashara and ...

Bu prosedürün genel amacı, insan göbek kordonu kanından endotelyal progenitör hücreleri izole etmektir. Bu yöntem, vasküler greftlerin doku mühendisliğinde otolog hücreler olarak potansiyel kullanımları için kordon kanından endotelyal progenitör hücrelerin izolasyonunu açıklamaktadır. Bu tekniğin temel avantajı, izolasyon prosedürünün herhangi bir immünosıralama gereksinimi olmaksızın özel besiyerlerinde gerçekleştirilebilmesidir.İzole edilen endotelyal progenitör hücreler neovaskülarizasyon çalışmalarında kullanılabilir; ayrıca raporlar, bu hücrelerin kardiyovasküler hastalık riski taşıyan hastaları belirlemek için biyobelirteç olarak kullanılabileceğini öne sürmüştür. İzolasyon prosedürüne başlamadan önce, altılı kuyucuklu plakaların her bir kuyucuğunu iki mililitre taze hazırlanmış sıçan kuyruğu tip 1 kolajen çözeltisi ile ön kaplayın. Plağı 37 °C ve %5 CO2 içeren bir inkübatörde en az bir saat boyunca dengeleyin.Ardından, yaklaşık 25 mililitre kordon kanını HBSS ile bire bir konsantrasyonda seyreltin. Sonrasında, 50 mililitrelik konik bir tüpe 20 mililitre yoğunluk gradyanı ortam reaktifi ekleyin ve kanı ortamın üzerine tabaka şeklinde yaymak için 20 mililitre seyreltilmiş kordon kanını tüpün duvarından aşağıya dikkatlice aktarın. Hücreleri santrifüjleme ile ayırın ve ardından plazma tabakasını dikkatlice uzaklaştırın.18 gauge iğne takılmış bir şırınga kullanarak, mononükleer hücre içeren buffy coat tabakasını yeni bir 50 mililitrelik tüpe toplayın. Ve hücrelere eşit hacimde endotelyal bazal medyum ekleyin. Hücreleri santrifüj ile yıkayın ve oluşan pelletteki eritrositleri, buz üzerinde beş mililitre amonyum klorür çözeltisi ile lizleyin.Ara sıra çalkalayarak beş ila 10 dakika beklettikten sonra, hücreleri santrifüj ederek toplayın ve beyaz peleti taze endotel büyüme ortamında yeniden süspande edin. Sayım yaptıktan sonra, altı kuyucuklu plakanın her bir kuyucuğundaki kolajeni aspire edin ve kuyucukları üç kez PBS ile yıkayın. Mononükleer hücreleri, kuyucuk başına 2 mL ortamda 1 × 10⁷ hücre konsantrasyonunda ekleyin.Ve plakı 24 saat boyunca inkübatöre geri yerleştirin. Ertesi gün, hücreleri bir kez taze endotel büyüme medyumu ile durulayın. Ardından yıkama solüsyonunu üç mililitre taze endotel büyüme medyumu ile değiştirin ve hücreleri hücre kültürü inkübatörüne geri yerleştirin.Endotel hücre kolonilerinin ilerlemesini izlemek için parlak alan mikroskobu kullanarak hücrelerin günlük görüntülerini alın ve büyüme takibini yapmak için kolonilerin oluştuğu plakları işaretleyin. Endotel hücre kolonileri yaklaşık üç milimetre boyuta ulaştığında, T25 kültür flaskını hücre kültürü inkübatöründe en az bir saat boyunca taze rat tail one kolajen ile kaplayın. Ardından, hücre kültürü inkübatöründe kuyuk başına 150 µL %0,05 Trypsin-EDTA ile iki ila üç dakika boyunca hücreleri hasat edin.Yapışmış hücreleri yerinden oynatmak için plak hafifçe tıklatılır. Hücreler ayrılmaya başladığında, derhal iki mililitre taze endotelyal büyüme ortamı ekleyin ve hücreleri tek bir 15 mililitrelik konik tüpe çekin. Hücreleri santrifüj ile toplayın ve pelletini taze endotelyal büyüme ortamında yeniden süspande edin.Sayım işleminden sonra, hücreleri kolajen kaplı flasklara her flask için 3 mL besiyerinde 5 × 10⁵ hücre yoğunluğunda ekleyin ve flaskı pasaj 1 olarak işaretleyin. Ardından flaskı inkübatöre geri yerleştirin ve koloni %90 konfluense ulaştığında hücreleri yeniden ekleyin. Kolajenle işlem görmüş plaklara ekim yapıldıktan sonra, ilk koloni büyümesi tipik olarak beş ila dokuzuncu günler arasında gözlemlenir.Koloniler büyümeye devam eder ve kültürün erken evrelerinde iğ şeklinde bir hücre morfolojisi kazanır, bu durum daha sonra parke taşına benzer bir morfolojiye evrilir. Her pasajda toplanan toplam hücre sayısı, toplam kültür gün sayısıyla doğrudan korelasyon içinde artar. Western blot analizi, kültüre edilen endotel hücreler tarafından CD 31 ve CD 34'ün erken ekspresyonunu ortaya koyar ve bu ekspresyonun sonraki pasajlarla birlikte azaldığı görülür.Vasküler endotelyal büyüme faktörü reseptörü iki ekspresyonu ise, ilk pasajdan sonra gözlemlenene kıyasla biraz daha düşük bir seviyede olsa da zaman içinde korunur. Dikkat çekici bir nokta olarak, endotelyal progenitör hücreler, örneğin pozitif kontrol olarak eklenebilen valvüler interstisyel hücre lizatlarının aksine, mezenkimal hücre markörü alfa düz kas aktini için pozitif değildir. Tüm izolasyon prosedürü, elde edilen kordon kanı ünitesine bağlı olarak beş saatten kısa sürede tamamlanabilir.Mononükleer hücreler izole edilip endotelyal büyüme ortamına ekildikten sonra, EPC kolonilerinin kültürde görünmesi genellikle beş ila dokuz gün sürer. Önerilen izolasyon yöntemi, endotelyal progenitör hücrelerin kültürü için özelleşmiş ortamlar kullanır ve endotelyal markerların belirlenmesi gerekliliği açısından akış sitometresi kullanımından kaçınır. Bu yöntem aynı zamanda, kısa bir süre içinde yüksek miktarda endotelyal progenitör hücre elde etmek için verimli bir protokol sağlar.Bu videoyu izledikten sonra, insan göbek kordon kanı birimlerinden endotelyal progenitör hücrelerin nasıl izole edileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. İnsan göbek kordon kanının tehlikeli olabileceğini ve atık kan ile hücre kültürü ürünlerinin uygun şekilde bertaraf edilmesi gerektiğini unutmayın.

isolation-endothelial-progenitor-cells-from-human-umbilical-cord

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Gelişim Biyolojisi

Bu video protokolü insan göbek kordonu, insan umbilikal ven endotel hücreleri (HUVEC) izolasyonu ve kültürü göstermektedir. Bir kere bu hücreler, in vitro Hughes laboratuvar gösterdiği Optimize Fibrin Jel Boncuk Testi gibi anjiyogenez tayinlerde için kullanılabilir izole edilmiştir.

İnsan umbilikal ven endotel hücreleri İzolasyon (HUVEC)

Bu protokol deneysel nakli amaçlı otolog yaratmanız serum hayvan kullanmadan mezenkimal stromal hücreleri ve endotel koloni oluşturan hücrelerin izolasyonu ve sonraki genişleme açıklamaktadır.

İnsan Göbek kordonu İzolasyon ve Hayvan Serum Genişleme Mezenkimal stromal hücreler (MKH) ve endotel Koloni Oluşturan Progenitör Hücreler (ECFCs) Türetilmiş

Endotel koloni oluşturan hücreleri (ECFCs) intrensek göstermeyen sağlam klonal bir proliferatif potansiyeli olan endotel hücreleri...

Endotel Colony Forming Hücrelerinin Fenotipik ve Fonksiyonel Karakterizasyonu İnsan Göbek Kordonu Kanı türetilen

Bu makale ilk umblikal damarlar, insan endotel hücreleri izole etmek için bir yordam açıklanır ve sonra akış koşullarında nötrofil göçü incelemek için bu hücreleri nasıl kullanılacağını gösterir. Camın optik karakteristikler ile bir polimer elde edilen bir düşük hacimli akış odası kullanılarak, nadir hücre popülasyonlarının canlı-hücre flüoresan görüntüleme da mümkündür.

Akış Koşullarında İnsan umbilikal ven endotel hücreleri ve nötrofil Transmigration Çalışmaları Kullanılması İzolasyonu

Burada göbek kordon kanı habercisi alt B-hücreleri izole etmek için bir protokol açıklar. Nükleik asitlerin yeterli bir miktarı ve kalitesi hücrelerinden çıkarılır ve DNA ya da RNA kullanılarak daha sonraki deneylerde kullanılabilir.

Kordon Kanı gelen Prekürsör B-hücreli altkümeleri İzolasyonu

Bir yöntem de periferik kan hücrelerinden zenginleştirilen hematopoietik projenitör hücrelerinden insan nöral kök hücrelerini elde etmek için geliştirilmiştir.

Periferik kan Hematopoetik Progenitör Hücreleri İnsan Sinir Kök Hücre Doğrudan İndüksiyon

Bu protokol, küçük bir yetişkin periferik kan hacminden kan büyümesi endotel hücrelerinin (BOEC'ler) güvenilir bir şekilde oluşturulmasına ve karakterizasyonuna izin verir. BOEC'ler, vasküler bozuklukları olan hastalardan alınan endotel hücreleri için bir vekil olarak ve indüklenmiş pluripotent kök hücrelerin üretimi için bir substrat olarak kullanılabilir.

İnsan çevresel kanından üretilmesi ve kültür Blood üremesi Endotel Hücreleri

Hematopoetik kök ve progenitör hücreler (HSPC) henüz küçük bazı endotel hücreleri kan yapıcı olmaya belirtmek hangi işlemi hakkında bilinen, gelişim sırasında uzman (hemogenic) endotel hücreleri kaynaklanıyor. Bu fare embriyonik dokulardan hemogenic endotel hücreleri ve HSPC eşzamanlı izolasyonu sağlayan bir akış-sitometri göre bir yöntem ortaya koymaktadır.

Fare Embriyonik Hemogenic endotel hücrelerinin izolasyonu

Endotelyal Ata Hücreler (EPC'ler) önemlisi, iskemik dokuların neovaskülarizasyonu katılmaktadırlar. Bu yöntem, periferal kandan alınan insan EPC izolasyonunu, hem de kalp cerrahi hastalarında serum örneklerinde karşı göç potansiyelinin belirlenmesi açıklanmaktadır.

Kalp Damar Cerrahisi sonra serum Örnekleri etkilenerek Sağlıklı Gönüllüler ve Bunların Göçmen Potansiyelden Endotel Ata Hücreleri İzolasyon

Burada, biz eski tarif CD34 hematopoetik kök hücrelerden genişlemesi vivo+ hücreleri göbek kordon kanı türetilmiş bir sitokin kokteyl ve VPA kombinasyonu ile tedavi. Bu yöntem eski ilkel HSCs vivo genişlemesi için de önemli bir ölçüde yol açar klinik veya laboratuvar uygulamaları.

EX Vivo insan göbek kordon kanı elde edilen CD34 hematopoetik kök hücrelerden genişlemesi+ hücreleri kullanarak Valproik asit

Burada, dört miyeloid soya immünotipik karakterizasyon ve sitokin kaynaklı cd34+ hematopoetik kök ve ataat hücrelerinin farklılaşması için bir protokol sıyoruz. Bu protokolün uygulamaları cd34+ hücrelerin miyeloid farklılaşması üzerinde miyeloid hastalık mutasyonları veya küçük moleküllerin etkisi üzerine araştırmalar içerir.

İnsan Kordon Kanı Kaynaklı CD34 Pan-miyeloid Farklılaşması+ Hematopoetik Kök ve Progenitor Hücreleri

Keşfedin insan göbek kordon kanından endotelyal progenitor hücre izolasyonunu. Bu yöntem, damar greftleri için doku mühendisliği ve kardiyovasküler risk değerlendirmesi uygulamalarında otolog hücre kaynağı sağlar.

Yalıtım endotelyal Progenitor Hücre insan göbek kordon kanı

Daha fazla video keşfet