Name: Hipokampal Piramidal Nöronlardaki Rolleri İçin Pozisyona Özgü GABAA Reseptör Alt Birimi Yanlış Algılama Varyantlarının Tanımlanması ve Sınıflandırılması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T13:15:00.000+00:00
Duration: 8 min 4 s
Description: Keşfedin GABA A reseptör alt birimi mutasyonlarının CA1 piramidal nöron modelindeki etkilerini. Bu çok ölçekli çerçeve, epilepsi nöral mekanizmalarını anlamak ve terapötik stratejiler geliştirmek için kritik içgörüler sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>Brian2&nbsp;</td><td>Sorbonne Üniversitesi, INSERM, CNRS, Institut de la Vision, Fransa; Imperial College London, Birleşik Krallık</td><td>2.8.0.4</td><td>Stimberg ve diğerleri, 2019 (https://pypi.org/project/Brian2/ )</td></tr><tr><td>dbNSFP sunucusu&nbsp; &nbsp;</td><td>Genos Biyoinformatik LLC, ABD</td><td>sürüm 3.0</td><td>Liu ve diğerleri, 2020 (http://database.liulab.science/dbNSFP) (https://sites.google.com/site/jpopgen/dbNSFP)</td></tr><tr><td>UMUT&nbsp; &nbsp;</td><td>Moleküler ve Biyomoleküler Bilişim Merkezi CMBI, Radboud Üniversitesi, Hollanda&nbsp;</td><td>1.1.1</td><td>Venselaar ve diğerleri, 2010 (https://www3.cmbi.umcn.nl/hope/)</td></tr><tr><td>Jalview&nbsp; &nbsp;</td><td>Dundee Üniversitesi, Birleşik Krallık</td><td>JV2</td><td>Waterhouse ve diğerleri, 2009 (https://www.jalview.org/)</td></tr><tr><td>Jupyter Notebook</td><td>Jupyter Projesi, ABD</td><td></td><td>https://jupyter.org/install&nbsp;</td></tr><tr><td>Fiton</td><td>Python Yazılım Vakfı, ABD</td><td>3.13</td><td>https://www.python.org/downloads/</td></tr><tr><td>Protter&nbsp; &nbsp;</td><td>ETH Zürih, İsviçre</td><td>Sürüm 1.0</td><td>Omasitler ve diğerleri, 2014 (https://wlab.ethz.ch/protter/start/)</td></tr><tr><td>R&nbsp;</td><td>R İstatistiksel Hesaplama Vakfı, ABD</td><td>R sürüm 4.3.2&nbsp;</td><td>&nbsp; https://www.r-project.org/&nbsp;</td></tr><tr><td>RStudio</td><td>Pozit yazılımı, PBC, ABD</td><td>RStudio 2023.12.1+402 "Okyanus Fırtınası" Sürümü</td><td>https://posit.co/downloads/</td></tr></tbody></table>

hipokampal piramidal nöronlardaki rolleri İçin pozisyona Özgü gabaa reseptör alt birimi yanlış algılama varyantlarının tanımlanması ve sınıflandırılması

Identification and Classification of Position-specific GABAA Receptor Subunit Missense Variants for Their Role In Hippocampal Pyramidal Neurons

Bu çalışma, epilepsinin patofizyolojisinde önemli bir bileşen olan GABAA reseptörünün γ2 alt birimindeki patojenik varyantları tahmin etmek ve karakterize etmek için çok ölçekli bir yaklaşım kullanmaktadır. Öngörücü modeller, moleküler modelleme, evrimsel koruma, yapısal inceleme, korelasyon analizi ve nöral simülasyonların kullanılması yoluyla bu yaklaşım, epilepsi araştırmaları ve muhtemelen klinik kullanım için önemli bir önemi olan varyantların sınıflandırılmasını geliştiri...

Hipokampal Piramidal Nöronlardaki Rolleri İçin Pozisyona Özgü GABAA Reseptör Alt Birimi Yanlış Algılama Varyantlarının Tanımlanması ve Sınıflandırılması

Understanding the effects of functionally unknown variants in epilepsy associated genes is crucial for elucidating disease pathophysiology and developing ...

Çalışmamız, GABA-A reseptör alt birimlerindeki epileptojenik ve proksimal olarak öngörülen mutasyonların CA1 piramidal nöron modelini benzer şekilde etkileyebileceği fikrine dayanmaktadır. Bunu çok ölçekli bir çerçeve aracılığıyla araştırıyoruz. Laboratuvar deneyleri gerçeği keşfetmek için gereklidir, ancak moleküllerden organizmalara kadar tüm ölçeklerde yaşamın çeşitliliğini ve karmaşıklığını tam olarak yakalayamazlar. Çok fazla olasılık var, sorun bu.Protokolümüz ve bulgularımız, GABA-A reseptör alt birim polimorfizmleri gibi polimorfizmlerin nöral fonksiyon üzerindeki etkisini araştırmak için kullanılabilecek bir hesaplama ortamının yolunu açtı.Çalışmamız, tahmin edilen patojenik varyantların ve epileptojenik mutasyonların ne ölçüde benzer özellikler gösterdiği ve bu ilişkilerin nasıl etkili bir şekilde yakalanıp simüle edilebileceği konusunda yeni sorular ortaya çıkarmaktadır.Şu anki odak noktamız entorinal korteks-hipokampus mikro devre fonksiyonudur. Özellikle nöropsikiyatrik bozukluklarda bu devre üzerinde septal kontrolü araştırmak için in vivo hayvan modellerini ve hesaplamalı mikro devre modellerini takip edeceğiz.[Anlatıcı] Başlamak için, genetik verileri içeren orijina

identification-classification-position-specific-gabaa-receptor

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Nöronlar ilk elektrofizyolojik karakterizedir. Ardından kaydedilen nöron sitoplazma aspire ve nörotransmitter sentezi enzimler, iyon kanalları ve reseptörler mRNA'ların ifade algılamak için ters transkripsiyon-PCR analizi tabi.

Voltaj-kapılı potasyum Kanal mRNA gösterilmeden Tek hücreli RT-PCR teknikleri kullanarak Nigral Nöronlar

Burada GABA hipokampal nöronlar bir reseptör yüzey lokalizasyonu ve, endositoz ölçmek için α-bungarotoksin bağlanmış flüoresan Alexa boya kullanımını göstermektedir. Α-bungarotoksin, plazma zar proteini endositik ticaretinin analiz elde edilebilir bağlanan kısa bir hücre dışı bir etiket taşıyan konstruktların kullanımı yoluyla.

GABA A reseptör Membran Yerelleşme ve Ticareti Eğitim için bir α-bungarotoksin Bağlama Sitesi Tag Kullanımı

Kortikal ağları inhibitör küçük, ama farklı kümesi tarafından kontrol edilir. Internöronlar Fonksiyonel soruşturma dolayısıyla hedeflenen kayıt ve titiz belirlenmesini gerektirir. Hücre içi etiketleme, post-hoc morfolojik ve imünositokimyasal analizler nöronu tek ya da çiftli sinaptik çiftlerinden bütün hücre kayıtları içeren bir birleşik yaklaşım aşağıda tarif edilmiştir.

Morphologically- ve nörokimyasal tanımlanan hipokampal internöronlardan gelen tüm hücre Patch-kelepçe Kayıtlar

Ontojenliği sırasında inhibitör GABA'erjik sinaps oluşumunu koordine moleküler mekanizmalar tam olarak bilinmemektedir. Bu işlemleri incelemek için, fonksiyonel GABA A reseptörleri eksprese eden stabil olarak transfekte edilmiş insan embriyonik böbrek 293 (HEK293) hücreleri ile birlikte kültürlendi embriyonik orta spinal GABAerjik nöronlar içeren bir ko-kültürü modeli sistemini geliştirdik.

Co-kültür Model Birleşmeyle GABA'erjik Orta Spiny Nöronlar ve HEK293 Hücreler inhibitör Synapse Oluşumu istikrarlı bir şekilde GABA ifade A Reseptörler

Elektrokonvulsif nöbet (ECS) Elektrokonvulsif terapi şiddetli depresyon için bir deneysel hayvan modeldir. ECS synaptogenesis ve sinaptik plastisite yol hipokampüs, faaliyet genel olarak uyarır. Burada, ECS indüksiyon Sıçanlarda nöbet kaynaklı sinaptik protein değişimler incelemek için kendi hippocampi hücre altı ayırma yöntemleri açıklanmaktadır.

Elektrokonvulsif nöbetler fareler ve onların Hippocampi ayırma nöbet kaynaklı değişiklikleri postsinaptik yoğunluğu proteinlerde incelemek için

Biz hangi tarafından farmakolojik reaktifler bütün hücreli yama-kelepçe kayıt sırasında yönetilemez duruma gelir ve başarısı için çok önemli özellikleri çeşitli yönlerini vurgulamak puf tekniğini tanımlamak.

GABA beyin dilimleri içinde uygulanması Puff tarafından indüklenen bütün hücreli akımları

Hedeflenen yeni nesil sıralama Hastalıkları Araştırma ve Klinik teşhis giderek daha popüler hale geliyor zaman ve maliyet-etkin bir yaklaşımdır. Burada açıklanan protokol sıralaması için gerekli karmaşık iş akışı ve hastalık katkıda genetik varyantların tanımlamak için kullanılan Biyoinformatik işlem sunar.

Hedef yeni nesil sıralama ve Biyoinformatik boru hattı anayasal hastalığı genetik belirleyicileri değerlendirmek için

Bu iletişim kuralı kritik adımlar ve yama-kelepçe sonra tek hücre multiplex Ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu gerçekleştirmek için gereken önlemleri açıklar. Bu teknik ifade profil genler tarafından yama-kelepçe kayıtları ile karakterize bir tek hücreden önceden belirlenmiş bir dizi analiz etmek için basit ve etkili bir yöntemdir.

Tek hücre Multiplex Ters transkripsiyon polimeraz zincir tepkimesi sonra yama-kelepçe

Burada, GABAA reseptörleri, fizyoloji ve farmakoloji bağlama, aktif bileşikler keşfetmek için protokolleri mevcut.

Bir Neurotransmission roman bileşikleri bir gama - aminobütirikasit reseptör oransal keşfi için yöntemleri yazın

Nöronal uyarılabilirlik endo-dinamik bir süreçtir ve ekzositozu eksitatör ionotropic glutamat reseptörlerinin modülasyonlu. Burada açıklanan yüzey ve iç reseptör nüfus havuzları miktarının için erişilebilir, yüksek içerikli bir tahlil olduğunu.

AMPA izlemek için bir yüksek-içerik tahlil reseptör ticareti

Keşfedin GABA A reseptör alt birimi mutasyonlarının CA1 piramidal nöron modelindeki etkilerini. Bu çok ölçekli çerçeve, epilepsi nöral mekanizmalarını anlamak ve terapötik stratejiler geliştirmek için kritik içgörüler sunar.

Hipokampal Piramidal Nöronlardaki Rolleri İçin Pozisyona Özgü GABAA Reseptör Alt Birimi Yanlış Algılama Varyantlarının Tanımlanması ve Sınıflandırılması (Video) | JoVE Journal

Hipokampal Piramidal Nöronlardaki Rolleri İçin Pozisyona Özgü GABA_A Reseptör Alt Birimi Yanlış Algılama Varyantlarının Tanımlanması ve Sınıflandırılması

Daha fazla video keşfet