화합물 투여 I

생체 의학 연구에 활용 되는 테스트 화합물의 많은 시판 되지 않는 새로운 물질, 적절 한 물질 준비는 중요 한. 시험 화합물의 제형 및 용해/일시 중단되는 중형 또는 차량의 제형의 멸균, 점도 및 생리적 호환성의 근본적인 우려를 해결해야 한다. 투여 용액은, 내적 또는 부모로 주어든, 화합물이 제대로 흡수되고 조직 손상을 방지하기 위해 적절한 pH로 생리적으로 완충되어야 한다. 용액의 점도는 주입 경로의 결정 인자일 수 있다. 마우스에서 일반적으로 사용되는 주사 부위에 필요한 작은 게이지 바늘을 통과하기에는 너무 두꺼운 물질은 구강 투여를 위한 재제형을 요구할 수 있다. 비부모로 주입되어야 하는 모든 해결책은 동물에 병원체를 도입하는 것을 방지하기 위하여 멸균되어야 합니다. ¹

주사를 위한 바늘 선택은 투여 경로, 용액의 점도 및 동물의 크기에 기초한다. 일반적으로 솔루션을 관리할 수 있는 가장 작은 게이지를 선택해야 합니다. 이것은 일반적으로 마우스에 있는 22-30 게이지 및 쥐를 위한 20-25 게이지입니다. 선택되는 주사기는 정확한 투약에 필요한 올바른 졸업을 통해 다시 가능한 가장 작습니다. ^2,3,4

비경사 주사를 위한 몇몇 경로가 있습니다. 이 비디오의 목적을 위해, 가장 일반적으로 사용되는 경로 (피하 [SQ], 복막 내 [IP], 정맥 내 [IV], 및 근육 내 [IM]에 대해 논의된다. 다른 주입 기술, 와 같은 상인 (ID), 두개 내, 심내, 풋 패드 주사, 비강 내, 및 레트로 궤도 신경을 통해 정맥다른 비디오에서 덮여있다.

화합물의 흡수율은 경로에 따라 다릅니다. IV 경로는 혈액 류에 직접 물질을 배치, 흡수에 필요한 모든 시간을 제거. IM을 주입한 물질은 근육 조직 내의 혈관 수가 많기 때문에 빠르게 흡수된다. IP 주사는 비경구 투여로 간주되지만 흡수 메커니즘은 실제로 구강 투여와 더 유사합니다. 피하 투여는 대량의 유체를 투여하는 편리한 방법입니다. 흡수율은 다른 경로보다 느리며 지속적인 효과를 제공합니다. 경로의 선택은 실험 프로토콜의 필수 구성 요소입니다. ⁴

피하 투여는 피부를 들어 올려 생성 된 가상 공간에 피부 층과 근육 사이의 재료를 배치합니다. 이것은 액체가 천천히 흡수되고 과잉 액체가 신장을 통해 빨리 배설되기 때문에 더 큰 양의 안전한 주입을 허용합니다. 이것은 액체 과부하 및 폐 부종을 방지합니다, 이는 정맥으로 주입되는 대량에서 유래할 수 있는. 선택된 바늘은 주입된 물질의 점도, 일반적으로 쥐에 대한 22-30 게이지 바늘 및 쥐용 22-25 게이지 바늘을 허용할 가능한 가장 작은 크기여야 한다. 주사 량은 마우스의 경우 0.1 ml에서 0.5 ml, 쥐의 경우 0.1 ml에서 1.0 ml까지, 주사 부위당 다양합니다.

IP 경로는 IV 또는 IM 경로보다 큰 볼륨의 전달에 사용할 수 있기 때문에 설치류에서 일반적으로 사용됩니다. 그러나, IP를 투여하는 물질의 흡수는 IM 또는 IV 경로가 상당히 느려집니다. 이 방법으로 투여되는 물질은 혈류량에 들어가기 전에 간 대사를 받는 것으로 생각된다. ⁵ 다시, 선택된 바늘은 주입된 물질의 점도, 일반적으로 쥐에 대한 22-30 게이지 바늘 및 쥐를 위한 22-25 게이지 바늘을 허용할 가능한 가장 작은 크기여야 한다. 마우스의 경우, 주사량은 마우스의 크기에 따라 주사당 0.05ml에서 1.0ml까지 다양합니다. 쥐의 경우 사출 부위당 0.1ml ~ 1.5ml입니다.

메신저 주사, 비록 일반적으로 큰 동물에서 사용, 그들의 작은 근육 질량으로 인해 쥐와 쥐에 최소한의 사용. 근육에 부적절 하거나 반복 된 주입 마비 또는 근육 괴사 결과 신경 손상을 일으킬 수 있습니다. 선택된 바늘은 주입된 물질의 점도, 일반적으로 27-30 게이지의 점도를 허용할 가능한 가장 작은 크기여야 한다. 마우스의 경우, 주사 량은 둔부 근육에 대한 주사 부위당 최대 0.05 ml까지 0.01ml까지 다양합니다. 위트로테뉴에 대한 주사부의 경우 최대 0.05ml가 있습니다. 대조적으로, 쥐 사출 량은 둔부 근육에 대한 주사 부위 당 최대 0.3 ml에 0.01 ml에 구역. 위트로테뉴에 대한 주사부의 경우 최대 0.1ml의 주사량이 있습니다.

IV 주사는 순환 계통에 즉시 도입되기 때문에 물질 투여의 가장 효과적인 경로입니다. 그러나, 마우스에서 IV 에 사용할 수있는 소형 선박으로, 그 유용성은 제한됩니다. 반복정맥 투여가 필요한 경우, 동물의 복지를 위해 혈관 접근 포트 또는 기타 특수 투약 장비의 사용을 고려해야합니다. 선택된 바늘은 주입된 물질의 점도, 일반적으로 27-30 게이지의 점도를 허용할 가능한 가장 작은 크기여야 한다. 사출 량은 마우스의 크기에 따라 주입 당 최대 0.5 ml까지 0.05 ml에서 범위.

표 1. 경로에 따라 마우스와 쥐에 적합한 바늘 게이지 및 주사 부피 범위.

1. 피하 주입

1. 한 손으로 구속 홀드를 통해 마우스를 수동으로 억제합니다. 일단 잡히면 마우스가 테이블이나 다른 보안 표면에 놓일 수 있습니다. 마우스 본문에 압력을 가하지 않도록 하십시오.
2. 호흡을 손상시킬 수 있는 마우스의 과도한 무게를 피하기 위해 테이블에 손의 발 뒤꿈치를 놓습니다. 마우스는 또한 상용 장치에서 억제될 수 있다. 쥐의 경우 상용 구속 장치를 사용하는 것이 가장 좋습니다.
3. 피부를 잡고 위로 당겨 피부 텐트를 만듭니다. 구속 장치를 사용하는 경우 상단의 슬롯을 통해 피부를 파악하려면 집게가 필요할 수 있습니다.
4. 바늘을 척추에 평행하게 삽입하고 텐트의 피부 접기 의 바닥에 머리에서 멀리 지시합니다. 마우스의 두개골 뼈가 매우 얇기 때문에 두개골에 구멍이 발생할 가능성을 피하기 위해 머리에서 바늘을 직접 합니다. 쥐는 그들의 머리를 양육 하는 경향이 있다, 목 근육에 배치 될 주사를 일으킬 수 있는.
5. 바늘 벨을 삽입하여 피부에 부드럽게 미끄러지도록 합니다. 바늘은 피부를 잡고 손가락 아래에 삽입됩니다. 생체 유해 물품을 주입할 때 안전성을 향상시키기 위해 피부는 집게로 파악되어 바늘 스틱 부상의 가능성을 제거합니다.
6. 플런저를 뒤로 당겨 적절한 배치를 확인합니다. 주사기에 공기가 유입되면 바늘 끝이 피부 아래에 위치하지 않고 철회하고 재배치해야 한다는 것을 나타냅니다. 플런저를 다시 당길 때 역압력이 있는 경우, 바늘의 적절한 배치를 나타내며 주사가 진행될 수 있다.
7. 꾸준한 움직임으로 물질을 천천히 주입하십시오. 주사 용품의 손실을 방지하기 위해, 주입 후 일시 중지, 피부 아래 바늘을 약간 회전, 바늘을 철회하는 동안 주사 부위에서 피부를 꼬집는다.

그림 1. 마우스에서 피하 주사.

2. 복막 주사

1. 한 손으로 수동 구속 방법은 마우스에서이 주입 기술에 사용됩니다. 마우스가 회전하는 것을 방지하기 위해 목에 충분히 높게 배치되도록 손을 조정합니다.
2. 엄지손가락과 검지 손가락 사이의 목 덜미에서 느슨한 피부를 잡습니다.
3. 두 번째, 세 번째, 네 번째 손가락 사이의 뒷면을 따라 느슨한 피부를 고정하거나 세 번째 손가락과 네 번째 손가락 사이에 꼬리를 배치하여 뒷분기를 안정화시하십시오.
4. 쥐의 IP 주사는 두 사람이 필요하며, 하나는 쥐를 억제하고 다른 하나는 주사를 수행해야합니다.
   1. 목의 양쪽에 있는 검지와 가운데 손가락을 사용하여 어깨 위에 쥐를 잡고 뒤쪽의 손바닥을 잡습니다. 엄지와 세 번째와 네 번째 손가락은 앞뒤로 이동을 방지하기 위해 가슴을 둘러싸고 있어야합니다. 목 의 양쪽에 손가락의 위치는 쥐가 머리를 회전에서 방지 할 수 있습니다.
   2. 쥐를 들어 올려 복부를 노출하도록 설정합니다.
   3. 발과 꼬리를 단단히 잡고 몸에서 멀리 확장하여 뒷분기를 안정화시하십시오.
5. 마우스 나 쥐를 배치하여 복부를 노출시켜 위쪽으로 향하도록 합니다.
6. 머리가 약 30° 각도로 아래쪽으로 가리키며 동물을 기울여 창자가 앞으로 떨어질 수 있도록 합니다.
7. 사출 랜드마크는 다음과 같습니다.
   1. 주입할 영역은 엉덩이 의 상단에 있는 신체를 가로질러 수평으로 확장되는 가상의 선에 의해 원더로 경계됩니다(측면에서 측면까지).
   2. 중간선은 반대 방향으로 자라는 머리카락이 만나는 곳으로 인식되는 내측 테두리입니다. 털이 없는 동물에서, 중간선은 항문에 xiphoid에서 직선으로 확장됩니다.
   3. 측면 테두리는 엉덩이 의 상단에서 남성의 프레추에 라인이며, 엉덩이의 상단에서 여성의 젖꼭지를 따르는 라인입니다.
   4. 이것은 안전한 주입을 위한 삼각형 영역을 제공합니다.
8. 랜드마크 내 기사 삽입
   1. 위에서 설명한 대로 삼각형에 척추에 수직으로 바늘을 삽입합니다. 바늘을 신체의 평면에 90° 각도로 배치하면 복부의 양쪽을 모두 사용하여 안전한 주사를 할 수 있습니다. 이것은 여러 주사와 특히 중요 하다, 그것은 주사 사이트의 교대를 허용 하 여 조직 외상을 최소화.
   2. 바늘이 90° 각도로 놓으면 복부에 "튀어"들어 깊이를 쉽게 측정할 수 있습니다. 이것은 또한 바늘이 제대로 배치되는 시각적이고 촉각적인 단서입니다.
   3. 주사기를 흡인하여 복막 내의 배치를 보장하고 오줌 방광, 내장 또는 혈관 구조 내에 있지 않습니다.
   4. 음낭에 기사를 투여하지 않도록 남성 마우스에 caudally 주입하지 마십시오. 외상을 방지하기 위해 여성의 젖꼭지에 주입하지 마십시오.

그림 2. 마우스에서 복막 주사에 대 한 랜드 마크.

3. 근육 내 주입

1. 쥐와 쥐에 대 한이 기술에 대 한 구속 두 사람 또는 구속 튜브의 사용을 필요. 여기에 설명된 것은 제지 장치를 이용한 1인칭 방법이다.
   1. 동물을 구속 장치에 배치합니다.
   2. 동물이 튜브에 들어가면 꼬리를 잡고 동물을 뒷다리로 튜브 밖으로 놓습니다.
   3. 대퇴골의 두개골 부분에서 측면의 피부를 잡고 다리를 확장하고 비틀림을 방지합니다.
   4. 동물의 머리를 가리키고 테이블에 서 거나 주사가 수행되는 동안 장치의 안정화를 허용하기 위해 기술자의 몸을 가리키는 테이블에 누워 있도록 구속 장치를 배치합니다.
   5. 주사 랜드 마크는 다음과 같습니다 : 마우스와 쥐 다리는 뒷사지에서 가장 큰 근육 질량을 포함하는 둔부 근육 (caudal 허벅지 근육)으로 작습니다. 뒷사지에서 두 번째로 큰 근육 질량은 위장혈증 (종아리 근육)입니다. 주사는 다리의 소달 양상에서 만들어집니다.
      1. 대퇴골에 둔부 근육 질량 후방을 찾습니다. 뼈는 만져질 수 있고 큰 근육은 쉽게 느낄 수 있습니다.
      2. 후방 측면에서 다리의 중간선은 호크의 지점에서 꼬리까지 실행됩니다. 머리카락은 종종 측면 및 내부 표면에서 반대 방향으로 성장하기 때문에 함께 오는 능선이 있습니다.
      3. 주사는 중간선 에서 허벅지의 측면 측면을 향해 이루어집니다. 이것은 다리의 내측 표면에 있는 신경 그리고 혈관을 손상의 가능성을 감소시킵니다.
      4. 위장혈증으로 주사는 후방 양상에서 수행되며 측면 사페누스 정맥의 위치를 신중하게 고려합니다.
   6. 랜드마크 내 기사 삽입
      1. 위에서 설명한 바와 같이 중공판에서 대퇴골에 바늘을 수직으로 삽입하고, 둔부 근육의 경우 최대 깊이 5mm, 위트렌혈증의 경우 최대 3mm까지 삽입한다.
      2. 근육에 대한 외상을 피하기 위해 조직의 바늘의 불필요한 움직임을 방지해야합니다. 주사기는 주사를 수행하기 위해 손의 재배치를 필요로하지 않는 방식으로 개최되어야한다.
      3. 주사기를 흡인하여 혈관이 아닌 근육 내의 배치를 보장합니다.
      4. 안정적이고 유동적인 움직임에 재료를 주입합니다. 근육의 느린 확장을 허용 하기 위해 신속 하 게 주입 하지 마십시오. 신속한 주사는 조직 외상을 일으킬 것입니다.

그림 3. 쥐의 둔부 근육에 근육 주사.

4. 꼬리 정맥을 이용한 정맥 주사

1. 동물의 구속은 동물이 마취또는 깨어 있는지 여부에 따라 달라집니다.
   1. 무모 또는 누드 동물을 제외하고 의식이 있는 쥐 또는 쥐에 원통형 구속 튜브를 사용하십시오. 털이 없는 동물의 지성 특성으로 인해 피부가 단단한 플라스틱을 고수하는 경향이 있기 때문에 아크릴 제지기에서 재배치하고 제거하기가 어렵습니다. 따라서 유연한 플라스틱 원뿔이 사용됩니다.
   2. 다른 사출 장치에는 라이트 플랫폼, 가열 플랫폼 및 마우스가 꼬리의 장력으로 엄격하게 원뿔에 보관되는 단단한 플라스틱 콘이 있습니다.
   3. 마취 된 마우스는 구속이 필요하지 않을 수 있습니다.
   4. 몸 전체 또는 꼬리를 따뜻하게하여 꼬리 혈관의 혈관 확장을 보장합니다.
      1. 중간 또는 순환 물 담요에 설정 전기 난방 패드로 몸 전체를 따뜻하게.
      2. 동물을 열원에 싸서 구속 장치에 놓습니다.
      3. 동물을 면밀히 관찰하고 혈관이 팽창하는 즉시 열원에서 제거하십시오. 케이지로 향하는 열램프를 사용하여 전신 온난화를 달성할 수도 있습니다. 열 램프를 사용할 때 동물을 과열하기 쉽기 때문에 동물을 면밀히 관찰해야합니다.
      4. 전신 온난화가 가능하지 않을 때, 가열 된 수건, 온수 병의 따뜻한 압축을 사용하여 꼬리를 가열하거나 꼬리를 따뜻한 물에 잠급니다. 뜨거운 물 병, 따뜻한 수건 및 따뜻한 물에 온도 조절이 없기 때문에 꼬리를 태우지 않도록주의해야합니다. 열원은 처음에 과열되는 것이 일반적입니다. 이 열원은 또한 빨리 냉각합니다.
   5. 조직 오일의 사용은 혈관의 시각화를 향상시키는 또 다른 방법입니다.
      1. 면에 기울어진 어플리케이터를 티슈 오일에 담그고, 안정화를 위해 잡혀 있는 꼬리 부분으로부터 오일을 잘 발라주세요. 조직 오일은 혈관이 더 명확하게 정의된 것처럼 보이게 합니다.
      2. 증발로 피부의 온난화와 혈관 확장을 생성하는 제형에 화학 물질을 포함하는 비독성 오일이 시판되고 있다. 이 오일은 적용되고, 몇 분 후, 혈관이 볼 때, 여분의 오일은 면공으로 닦아.
      3. 모든 오일은 꼬리를 잡기 가 더 어렵게 만들 수 있습니다.
      4. 오일을 사용하는 경우 혈관의 시각화 시 즉시 주입해야 합니다.
   6. 사출 랜드마크는 다음과 같습니다.
      1. 측면 꼬리 정맥은 꼬리 의 측면에 있습니다. 또한 주사 목적에 적합하지 않은 꼬리의 등및 복부 중간선을 따라 달리는 혈관이 있습니다.
      2. 억제제의 동물은 측면 용기가 주입의 용이성을 위해 직면할 수 있도록 회전할 수 있습니다. 또는 꼬리를 돌리면 혈관을 주입에 더 적합한 위치로 가져올 수 있습니다.
      3. 선박은 매우 피상적입니다. 꼬리 의 바닥에 도달할 때 그들은 더 피상적이됩니다.
   7. 꼬리 정맥에 기사를 주입하려면 기술이 필요합니다. 혈관에 대한 외상을 피하기 위해 바늘의 불필요한 움직임을 방지해야합니다. 주사기는 주사를 수행하기 위해 손의 재배치를 필요로하지 않는 방식으로 개최됩니다.
      1. 용기가 보이고 장력 하에서 유지되도록 꼬리를 배치합니다. 꼬리에 과도한 장력을 적용하지 마십시오, 또는 혈관을 스트레칭 하고 혈류가 감소 할 수 있습니다.
      2. 가능한 한 멀리 멀리 혈관 위에 직접 바늘을 배치합니다.
      3. 약간의 압력을 가하고 바늘을 척추와 평행하게 꼬리에 밀어 넣습니다. 바늘이 혈관을 변속하기 때문에 바늘을 아래로 얽매이지 마십시오. 바늘은 루멘으로 적어도 2mm 진행되기 때문에 용기에서 볼 수 있어야합니다.
      4. 선박의 파열을 피하기 위해 천천히 유체 운동에 재료를 주입하십시오.
      5. 주사 중 꼬리에 특별한주의를 기울이는. 용기에 제대로 삽입하면 용기로 흐르는 주입 물질이 저항없이 느껴질 수 있습니다. 혈액이 주입 물질에 의해 밀려나기 때문에 혈관은 희미해져야 합니다.
      6. 바늘이 용기에 없는 경우 주입 시 강한 저항이 있을 것입니다. 힘으로 주입하는 경우, 재료는 피하 공간을 채우고 꼬리는 풍선 것입니다. 정맥 주사하도록 설계된 물질이 주변 조직에 인과성일 수 있기 때문에 즉시 중지하십시오. 바늘을 철회하고 꼬리에 더 까다롭게 다른 주사를 시도하십시오.
      7. 성공적인 주사 후, 바늘을 철회하고 케이지에 동물을 반환하기 전에 좋은 hemostasis을 보장하기 위해 주사 부위에 압력을 적용합니다.

그림 4. 마우스에서 꼬리 정맥 주입.

물질 투여는 동물을 활용하는 실험 프로토콜의 일반적인 구성 요소입니다. 전달 경로를 선택할 때, 동물을 투여하는 책임이있는 개인의 기술적 숙련도, 동물의 크기, 유체의 점도 및 투여 량을 포함하여 많은 요인을 심의해야합니다. 이러한 요인을 주의 깊게 고려하면 동물의 웰빙과 실험의 전반적인 결과를 향상시킬 수 있습니다.