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실험실 기본 관리

Overview

출처: 케이 스튜어트, RVT, RLATG, CMAR; 발레리 A. 슈뢰더, RVT, RLATG. 노틀담 대학교, IN

생쥐와 쥐는 생물 의학 연구에 사용되는 동물의 90% 이상을 차지합니다. 이 연구 동물의 적당한 배려는 실험의 결과에 중요합니다. 이러한 마우스와 쥐의 대다수에 적용되는 일반적인 절차가 있습니다, 그러나 면역 손상된 것과 같은 동물의 몇몇은, 실험을 위해 그(것)들을 유지하기 위하여 취해야 할 추가 단계가 필요합니다.

일반적으로 사용되는 면역 타협 마우스는 자연스럽 게 근친 마우스에서 발생 하는 그 및 유전 공학을 통해 생성 된 사람들을 포함. 연구에 사용된 첫번째 면역 타협마우스는 "누드" 마우스이었습니다. BALB/c 누드 (nu) 마우스는 머리와 흉골이 모두 부족한 마우스를 생산했다 BALB / c 식민지 내에서 1966 년에 발견되었다. 이 자토믹 마우스는 T 세포가 없는 억제된 면역 계통이 있습니다. 이 동물의 가치는 곧 미생물 감염, 면역 결핍 및 자기 면역의 연구에서 사용을 위해 발견되었습니다. 일반적으로 누드 마우스로 사용되지는 않지만 누드 쥐도 있습니다. 누드 쥐는 T 세포 결핍 및 말초 림프구 장기의 흉선 의존 영역에서 고갈 된 세포 인구를 보여줍니다. 또 다른 자연 발생 면역 결핍 마우스는 심각한 결합 된 면역 결핍 마우스 (SCID)입니다. 이 마우스는 기능적인 B와 T 세포의 생산을 손상시키는 결함이 있습니다. 적절한 면역 반응을 탑재 할 수없는, 이 마우스는 인간 세포의 이식을위한 호스트 받는 사람 역할을 할 수 있습니다. 면역 결핍을 가진 몇몇 유전자 변형마우스 긴장은 상업적으로 유효합니다. 1 결핍의 엄격은 유전 적 수정에 따라 다릅니다. 그러나, 면역 손상된 마우스와 쥐의 모든 유사하게 취급됩니다.

이 원고는 면역 능력과 면역 손상 된 동물의 치료를 설명합니다. 주거, 식단, 환경 요구 사항 및 취급은 두 동물 그룹에 대해 논의될 것입니다.

Principles

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주택/Caging

쥐와 쥐는 주로 침구 재료를 포함하는 단단한 바닥으로 신발 상자 형 caging에 보관됩니다. 일반적인 신발 상자 마우스 케이지는 75 평방 인치의 바닥 공간을 제공하며 성인 마우스 5 마리에 적합합니다. 그러나, 실험설계는 4개의 마우스의 군을 요구할 수 있다. 이 경우, 마우스는 실험이 시작될 때 사회 집단의 혼란을 피하기 위해 4개의 그룹으로 수신시 보관되어야 합니다. 일반적으로 쥐 를 조장하면 완전히 자란 성인 동물 2 마리의 최대 가 가능합니다. 쥐가 장기 적으로 보관되어야하는 경우, 그들은 쌍 주택에 설립되어야한다.

케이지는 정적이거나 개별적으로 환기(IVC)일 수 있습니다. 정적 케이지는 와이어 바 뚜껑으로 덮여 있거나 선반 아래 선반에 정착되어 케이지 의 상단입니다. 필터 재질은 와이어 바 뚜껑 위에 보닛으로 케이지 상단 또는 랙 선반 위에 필터 용지 시트로 추가됩니다. IVC는 케이지, 와이어 바 뚜껑 및 보닛으로 설정되어 케이지로 공기 흐름을 제공합니다. IVC를 사용하면 정적 케이지가 변경되는 경우가 자주 케이지를 변경할 필요가 없습니다.

표준 케이지 시스템은 물의 원천과 식량 분배 를 위한 영역을 제공합니다. 물은 케이지 의 상단에 배치 물 병을 통해 또는 동물 케이지의 내장 된 sipper 튜브를 통해 제공 할 수 있습니다. 케이지가 랙에 종사하면 동물 시설 전체의 동물의 요구를 충족하도록 설계된 자동 급수 시스템을 위해 물을 시퍼 튜브로 운반합니다. Caging는 동물에 대한 적절한 치료를 제공하기 위해 적절하게 준비해야합니다. 동물 케이지 내에 피더가 배치되거나 와이어 바 뚜껑의 일부가 식품 저장에 사용됩니다. 동물에 의해 더럽히지 않도록 음식을 배치해야합니다.

실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 가이드2 ("가이드") 모든 caging 구현은 적어도 2 주마다 소독되어야한다고 명시하고 있습니다. 일부 케이지 및 액세서리는 인클로저의 냄새와 암모니아 수준에 따라 더 자주 변경해야 할 수 있습니다. 일반적으로, IVC는 4 개 이상의 남성 또는 쓰레기와 여성이없는 한 2 주마다 변경 될 예정이다; 이러한 인클로저는 매주 변경해야 할 수 있습니다. 케이지 가 변경은 마우스가 병원체에 노출될 수 있는 기회이기 때문에 면역 결핍 마우스를 위한 caging의 변화는 가능한 한 드물게 수행되어야 합니다.

다이어트

단백질, 탄수화물 및 지방 수준의 변화와 함께 사용할 수있는 다이어트의 많은 구성이 있습니다. 전형적으로, 사료는 15-19% 단백질, 44% 탄수화물 및 4-9%의 지방으로 구성되어야 합니다. 지방 함량이 증가한 음식은 종종 번식을 향상시키기 위해 식민지를 사육하는 데 사용됩니다. 식품은 면역 손상 된 쥐에 대 한 오염의 소스 수 있습니다., 그것은 증기 살균 또는 조사 해야 합니다. 오토클레이브 공정을 받는 식품은 공정을 견딜 수 있도록 특별히 제조되어야 합니다. 그러나 조사 과정은 식품 내용을 변경하지 않습니다.

물은 면역 결핍 동물에 대한 오염의 또 다른 잠재적 인 소스입니다. 물은 UV 필터를 통과하는 물을 포함하는 오토클레이브 또는 여과를 통해 처리되어야 합니다. 오토클레이브에서 물을 살균하기 위해 개별 물 병은 알루미늄 호일로 덮여 있습니다. 시퍼 튜브가 있는 병 뚜껑은 오토클레이브 백에 별도로 멸균됩니다. 2.5-3의 pH에 물의 산성화는 물병에 있는 성장 세균성 유기체를 통제하는 것을 돕습니다. 물은 12개의 두더지(M) 염산(HCl)을 8리터의 역전된 osmolality(RO) 물에 첨가하여 산성화된다. 자동 급수 시스템은 미립자 필터와 자외선 필터를 포함하는 시스템 전반에 걸쳐 일련의 여과와 함께 사용할 수 있습니다.

환경

동물 보호 시설 내의 환경 조건은 엄격하게 통제되어야 합니다. 연방 규정 및 지침은 일반적으로 사용되는 동물의 치료 및 취급에 대한 표준을 수립했습니다. 조명, 주변 온도, 습도 및 공기 흐름이 제공되어 동물의 생리적 요구를 충족시킵니다. 약간 증가한 실온에 대한 필요성을 제외하고, 면역 손상된 동물의 매개 변수는 종래의 동물과 동일합니다. 아티믹 누드 동물은 또한 열 조절을 돕기 위해 케이지에 추가 침구와 파쇄 된 종이 형 중첩 재료가 필요합니다.

동물실은 습도가 40~60%인 68-72°F 사이의 온도에서 유지관리해야 합니다. 2 40% 미만의 습도 수준은 꼬리의 피부가 꼬리 주위로 수축되는 지점까지 건조하게 만드는 쥐와 쥐의 링테일을 초래할 수 있으며, 이는 꼬리 슬라우핑으로 이어질 수 있습니다. 조명 주기는 부적절한 광기간 이나 광강도로 인한 동물에 대한 스트레스를 피하기 위해 설정해야합니다. 일반적으로, 광기간은 12 시간 및 12 시간 꺼져 있습니다. 조명 강도는 실내의 활동에 따라 달라져야 합니다. 기술자가 동물실에서 작업할 때 더 높은 조명 레벨을 사용할 수 있습니다. 그러나 모든 활동이 끝나면 조명을 약 325 럭스로 낮춥아야 합니다. 2 조명은 타이머에 있어야 하며 모니터링 시스템을 통해 확인된 사이클입니다. 가이드의 지시에 따라 동물실은 시간당 100% 신선한 공기를 최소 10~15개까지 변경해야 합니다. 2 공기 변화는 동물방에서 미생물과 냄새를 감소시다. 인구밀도가 높은 동물실에서는 시간당 공기 변화의 수를 늘려야 할 수도 있습니다.

케이지 레벨의 환경적 요인으로는 코이징 타입, 케이지 내에서 사용되는 기판, 물 전달 시스템 및 식이요법이 포함됩니다. 사회 주택은 과학적으로 정당화되지 않는 한 필수, 또는 동물은 다른 모든 사람과 호환되지 않습니다. 종이 오두막과 중첩 재료와 같은 환경 농축 의 조항은 동물이 종별 행동을 나타낼 수 있게하여 스트레스 수준을 감소시키고 동물의 전반적인 웰빙을 증가시킵니다. 중첩 물질은 또한 같은 케이지에 있는 다중 남성 마우스의 하우징을 돕는 진정 페로몬에 포화된 수면 공간을 제공합니다. 중첩 영역은 새로운 환경에 도입될 때 남성의 침략을 방지하기 위해 케이지가 바뀌면 깨끗한 케이지로 이동합니다. 3

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Procedure

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1. 면역 능력 (종래) 마우스 처리

그것은 쥐의 면역 장애는 인간에 있는 것과 매우 유사하다는 것을 입증되었습니다. 2 이러한 동물들은 면역학적 능력이 제한되어 있기 때문에 이러한 동물의 취급 및 관리 절차는 엔지니어링 제어, 동물 관리 직원을 위한 개인 보호 장비 및 표준 운영 절차를 통해 전염병의 위험을 최소화하도록 설계되었습니다. 이러한 오염은 동물이 접촉하는 caging 및 기타 장비의 오염을 완화합니다.

  1. 선적 컨테이너에서 포장 풀기: 다른 기관이나 동물 공급 업체에서 동물을 받는 것은 이미 동물 시설 내에 보관 된 동물에게 위험을 초래합니다. 운송 중에 동물 운송 상자가 병원성 제제와 접촉할 수 있습니다. 따라서 선적 컨테이너를 풀 때 적절한 절차를 수행해야 합니다.
    1. 최소한의 개인 보호 장비(PPE) 요구 사항은 동물을 취급할 때 장갑, 깨끗한 실험실 코트 또는 스크럽, 미립자 마스크 및 안전 안경입니다.
    2. 와이어 바 뚜껑과 배리어 탑을 포함하여 적절한 케이지를 선택합니다. 케이지에는 적절한 침구와 중첩 재료가 구비되어 있어야 합니다. 모든 caging는 동물이 도착하기 전에 수령 구역에 준비되고 배치되어야합니다.
    3. 도착 시 교통 상자는 안전하고 온도 조절된 방에 배치됩니다. 그런 다음 컨테이너를 검사하여 손상을 검사합니다.
    4. 선적 용기의 외부 표면을 콜린 이산화물질로 소독하여 유해한 병원균을 파괴합니다. 소독제가 제조업체 권장 사항에 따라 일반적으로 15-30분 동안 상자와 접촉하고 있는지 확인하십시오.
    5. 동물 이송 스테이션(ATS)에 컨테이너를 배치합니다. ATS는 사용자와 작업 영역 사이의 진공 공기 장벽을 만들어 알레르겐 보호를 제공하는 후드 내에서 HEPA 필터링 된 공기 흐름을 제공합니다. 이를 통해 동물 털/dander 및 케이지 침구 소재에 최소한의 노출이 가능합니다. 단방향 공기는 또한 주변 실내 공기로부터 동물을 보호하여 오염 가능성을 최소화합니다.
    6. 선적 컨테이너가 열리면 동물의 전반적인 상태를 평가합니다. 부상또는 아픈 동물을 기록하십시오.
    7. 동물을 조립된 케이지에 적절한 그룹 크기로 배치합니다. 그룹화는 공간 규정및 할당될 실험 프로토콜에 따라야 합니다.
    8. 와이어 바 뚜껑으로 케이지를 덮습니다. 와이어 바 뚜껑의 디바이더를 고정하여 뚜껑에 두 개의 영역을 만듭니다.
    9. 적절한 음식을 선택하고 음식을 와이어 바 뚜껑의 한쪽에 놓습니다. 공기의 더 나은 순환을 허용하기 위해 두 번째 면을 열어 둡니다.
    10. 물은 물병 이나 자동 급수 시스템을 통해 제공 될 것입니다. 물병은 새로 젖을 짜는 마우스가 수분 수준을 유지할 수 있도록 하는 데 사용됩니다. 자동 급수로 Caging IVC의 경우 랙에 넣기 전에 급수 튜브를 충전하십시오.
    11. 케이지를 랙에 놓습니다. IvC를 사용하는 경우 케이지가 랙에 완전히 관여하고 시퍼 튜브가 급수 시스템에 고정되어 있는지 확인합니다.
  2. 종래의 마우스를 바꾸는 케이지
    1. 동물 케이지는 ATS에서 변경됩니다. ATS는 각 세션의 끝에 disind입니다.
    2. 한 번에 하나의 케이지만 열 수 있습니다.
    3. 적절한 침구와 중첩 재료로 준비된 코징은 동물실로 가져온다. 소수의 케이지가 ATS에 배치됩니다.
    4. 내부 시퍼 튜브가있는 IVC 케이지는 시퍼 튜브의 죽은 공기를 제거하기 위해 물을 시퍼로 강제로 충전해야합니다. 제대로 충전되지 않은 경우, 마우스는 그것에서 공기를 제거하기 위해 시퍼 튜브에 충분한 압력을 제공하지 못할 수 있습니다.
    5. 최소한의 개인 보호 장비(PPE) 요구 사항은 동물을 취급할 때 장갑, 깨끗한 실험실 코트 또는 스크럽, 미립자 마스크 및 안전 안경입니다.
    6. 변경될 동물 케이지가 새 케이지에 넣은 다음 ATS에 배치됩니다.
    7. 동물은 손으로 또는 패딩 된 집게를 사용하여 전송됩니다. 장갑은 케이지 사이 또는 마우스의 단 사이에서 변경됩니다. 장갑은 또한 케이지 사이의 무독성 화학 물질로 소독 될 수 있습니다.
    8. 그것은 깨끗한 케이지로 마우스의 둥지 영역을 전송하는 것은 깨끗한 케이지로의 전환을 지원, 특히 그룹 보관 남성에 대한 입증되었습니다. 다른 농축 아이템도 새 케이지로 전송됩니다.
    9. 케이지 상단이나 피더가 새 케이지에 배치되면 음식이 추가됩니다.
    10. 장벽 상단은 새 케이지에 배치되고 케이지가 랙으로 반환됩니다.
    11. IVC 케이지는 공기 와 물 밸브가 관여되도록 랙에 적절하게 도킹되어야 합니다.

2. 면역 손상 된 마우스 처리

  1. 선적 컨테이너에서 포장 풀기
    1. 면역 손상 된 동물은 멸균 조건에서 포장을 풀어야합니다. 면역 결핍 마우스를 취급하는 모든 개별은 증기 살균 가운, 마스크, 머리 보닛 및 멸균 장갑을 착용해야합니다. 무균 기술은 이 동물을 건네줄 때 항상 사용되어야 합니다.
    2. 모든 장비와 파징은 증기, UV 방사선, 또는 적어도 30 분 동안 70 % 에탄올에 담그고 화학적으로 살균되어야합니다 멸균 세이징에 대한 두 가지 옵션이 있습니다 : 포장 및 증기 살균 된 표준 caging, 또는 일반적으로 조사를 통해 살균되는 caging. 이 케이지는 일회용 장치 중 하나입니다.
    3. 라미나르 플로우 후드 하에서 마우스를 조작하기 전에, 후드는 블로어 작동과 함께 70 % 에탄올로 분무된다. 후드 송풍기는 멸균 환경을 유지하기 위해 항상 켜야합니다. 사용 후, 후드는 소독제로 분무되고 모든 파편을 닦아 내고 다시 70 %의 에탄올로 분사됩니다.
    4. 최적으로, 면역 손상 된 마우스의 적절 한 수신에 대 한 두 사람이 필요: 무균 기술을 사용 하 여 동물을 처리 하는 하나 (멸 균 기술자), 오염 된 항목을 처리 하는 하나 (비 살균 기술자). 무균 인은 여전히 깨끗하고 긴 소매 가운을 착용해야합니다. 실험실 코트 또는 스모크; 마스크; 보닛; 그리고 멸균 장갑은 후드에 도달해야하는 경우 멸균 내부의 오염을 방지하기 위해.
    5. 미리 나 흐름 후드는 이전에 설명 한 대로 준비합니다. 면역 손상된 동물을 위한 후드를 갖는 것이 바람직하다. 후드에는 후드의 내부를 사용 하 여 살균하는 데 사용할 수 있는 자외선(UV) 살균 조명이 장착되어 있는 것이 좋습니다. 타이머는 후드의 표면이 UV 광선에 적절한 노출을 가지고 있는지 확인하기 위해 활용된다.
    6. 후드에 넣은 모든 소모품의 외관은 음식, 물 및 파징의 외부 포장을 포함하여 70 % 알코올로 분무됩니다.
    7. 선적 컨테이너는 후드에 놓이기 전에 이산화염소 용액으로 분사됩니다. 후드에 놓으면 15-30 분 동안 열리지 않은 상태로 유지됩니다.
    8. 지정된 동물 취급자는 후드 아래에 멸균 식품과 물을 엽니다.
    9. 비멸 기술자는 후드 아래에 배송 상자를 엽니 다. 후드의 내부 표면과 배송 상자의 내부 표면과의 접촉을 피하기 위해 비살균 기술자가 주의해야 합니다.
    10. 동물 처리기는 멸균 케이지를 열고 음식과 물을 케이지 상단에 배치하여 케이지를 준비합니다. 마우스는 그 때 발송 상자에서 제거하고 멸균 케이지에 놓습니다.
    11. 동물 상태는 멸균 동물 처리기에 의해 지적된다. 아프거나 명백한 부상을 입은 동물은 분리됩니다. 수의학적 주의가 필요한 동물로 표시된 모든 케이지는 다른 동물의 잠재적 오염을 줄이기 위해 마지막으로 취급, 케이지 변경 또는 실험 조작을 위해 배치됩니다.
    12. 비살균자는 후드에서 채워진 케이지를 제거합니다. 케이지는 표준 랙에 정적 케이지또는 IC로 통풍이 잘 되는 랙에 배치할 수 있습니다. IvC에서 마우스는 열 조절을 지원하기 위해 추가 중첩 재료를 제공해야 합니다.
    13. 동물 처리기는 동물의 그룹의 가능한 교차 오염을 방지하기 위해 각 선적 컨테이너 후 장갑을 변경해야합니다. 선적 컨테이너 번호는 질병발생 시 동물의 기원을 추적하기 위해 케이지 카드에 기록됩니다.
    14. 원래 컨테이너를 다시 밀봉할 수 있는 경우 사용하지 않은 소모품을 나중에 사용할 수 있습니다. 사용하지 않은 음식은 방에서 제거됩니다.
    15. 마우스는 실험용으로 사용하기 전에 최소 1주일의 적응 기간을 거쳐야 합니다.
  2. 면역 손상 된 쥐에 대 한 케이지 변경
    1. 마우스 케이지는 적어도 매주 한 번 또는 필요하다고 판단되는 경우 더 자주 변경됩니다.
    2. 후드 준비, 케이지 준비 및 인력 PPE를 위한 단계는 동물의 포장을 풀기위한 것과 동일합니다.
    3. 동물은 손으로 또는 패딩 집게를 사용하여 전송됩니다. 지정된 동물 처리기는 장갑이 찢어지거나 오염된 경우 또는 동물이 아픈 것처럼 보이는 경우 5-10 케이지마다 다시 장갑을 끼워야 합니다.
    4. 아픈 것처럼 보이는 동물을 가진 모든 케이지는 병원체 또는 오염 물질에 건강한 동물의 노출을 피하기 위해 케이지 변경 순서의 끝에 배치됩니다.
    5. 다음 예정된 케이지가 변경되기 전에 음식 및/또는 물을 케이지에 추가해야 하는 경우 준비된 후드 아래에서 무균적으로 수행해야 합니다.

생의학 연구에 사용되는 동물의 90% 이상을 쥐와 쥐를 차지하기 때문에 이러한 유기체를 적절히 돌보는 것은 실험의 결과에 매우 중요합니다. 이러한 치료 절차는 선적 컨테이너에서 케이지 변경, 적절한 주거 조건 유지, 적절한 식단 제공 및 적절한 환경을 보장하는 것까지 동물을 포장하는 것으로 시작됩니다. 비록, 실험실에서 쥐와 쥐의 대부분에 적용 하는 일반적인 절차가 있다, 일부 동물, 면역 타협 하는 것과 같은, 실험 목적을 위해 그들을 유지 하기 위해 추가 주의 해야.

이 비디오는 면역 능력과 면역 손상 된 동물 모두에 대한 표준 및 필수 치료 절차를 설명합니다. 그리고 마지막으로, 우리는 과학자들이 다른 연구 목적을 위해이 지식을 사용하는 방법을 보여주는 몇 가지 예 실험을 설명 합니다.

다른 기관에서 동물을 받는 것은 이미 시설 내에 보관된 동물에게 위험을 초래하며, 운송 상자는 병원성 제제와 접촉할 수 있습니다. 따라서 선적 컨테이너를 풀 때 적절한 절차를 수행해야 합니다.

동물을 취급하기 전에 적절한 개인 보호 장비 또는 PPE를 착용하는 것이 중요합니다. 착용할 최소 PPE는 실험실 코트, 장갑, 안전 안경 및 먼지와 알레르겐에 대한 노출을 줄이는 수술형 마스크입니다. 다음 단계는 들어오는 동물에 적합한 케이지를 선택하는 것입니다. 그런 다음 케이지에 적절한 침구 및 중첩 재료로 가구를 제공하십시오. 그리고 준비된 케이지를 온도 조절식 수령실로 가져가서 동물이 도착하기 전에 옮길 준비가 되어 있습니다.

선적 도착 시 운송 상자를 수령실의 안전한 장소에 놓습니다. 손상에 대한 용기를 검사하고 유해한 병원균을 파괴하기 위해 외부 표면을 소독. 소독제가 제조업체의 권장 사항에 따라 최소 15-30분 동안 상자와 접촉하고 있는지 확인하십시오. 그런 다음 컨테이너를 동물 이송 스테이션 또는 ATS에 배치합니다. 이 스테이션은 후드 내의 단방향 공기 흐름을 여과한 고효율 미립자 공기 또는 HEPA를 제공합니다. HEPA는 알레르겐으로부터 사용자를 보호하고 주변 실내 공기로부터 동물을 보호하여 오염 가능성을 최소화합니다. 다음으로, 선적 컨테이너를 열고 설치류의 전반적인 상태를 평가합니다. 다치거나 아픈 것으로 보이는 동물을 기록하십시오. 그 후, 적절한 그룹 크기의 이미 조립 된 케이지에 배치 와이어 바 뚜껑케이지를 덮고 두 영역을 만들 수있는 칸막이를 고정합니다. 적절한 음식을 선택하고 한쪽에 놓고 두 번째 면을 열어 두어 더 나은 공기 순환을 허용합니다. 마지막으로, 동물이 자동 급수로 랙에 놓이지 않는 경우 적절한 물 공급을 보장하기 위해 물병을 추가하십시오. 각 세션이 끝날 때 ATS를 소독해야 하며 소독 시 송풍기는 꺼져야 합니다.

케이지 를 변경하기 위해 적절한 침구 재료와 ATS에 사용되는 케이지와 함께 두 케이지 - 신선한 케이지를 놓습니다. 하나는 손으로 또는 패딩 집게의 사용으로 새로운 케이지에 이전 케이지에서 동물을 전송할 수 있습니다. 이 두 가지 방법은 이 컬렉션의 다른 비디오에서 논의되었습니다. 한 번에 하나의 동물 케이지만 열 수 있습니다 기억하십시오. 수컷 마우스 또는 암컷의 경우, 마우스의 중첩 부위를 깨끗한 케이지로 옮기는 것이 동물을 돕는다는 것이 입증되었다. 케이지 상단이 새 케이지에 놓이면 오래된 케이지 상단에서 새 탑으로 음식을 옮기고 필요한 경우 더 많은 음식을 추가하십시오. 다음으로 장벽 상단을 놓고 케이지를 랙으로 되돌려 놓습니다. 케이지 사이 또는 그룹 간에 장갑을 교체하는 것이 좋습니다.

면역 절제된 동물을 위한 포장 해제 절차는 살균될 필요가 있기 때문에 약간 다릅니다. 후드 내부의 송풍기는 사용하기 최소 24시간 전에 켜지는 것이 좋습니다. 면역 보상 동물과 마찬가지로, 선적 도착 시 수신실에 소독제 용액으로 용기를 분사하고 15-30 분 동안 열리지 않은 상태로 둡니다. 면역 손상 된 마우스에 대 한 지정 된 ATS에서, 동물을 조작 하기 전에 70% 에탄올30 분 라미나르 흐름 후드를 스프레이. 이 포장 방지 활동에 참여하는 것이 이상적입니다 - 한 사람은 무균 기술을 사용하여 동물을 처리하기 위해 증기 살균 가운과 이중 멸균 장갑을 착용한 멸균 기술자가 될 것이고, 다른 한 명은 깨끗한 격리 가운과 오염된 물품을 처리하기 위해 장갑을 착용한 비멸 기술자가 될 것입니다. 둘 다 마스크, 헤어 보닛 및 안전 안경을 착용해야합니다.

후드 내부에 선적 컨테이너를 열기 전에 모든 소모품을 놓고 이에 넣고 알코올로 외관을 뿌릴 수 있습니다. 그리고 선적 도착 시 받은 동물 상자를 후드에 놓고 70 % 에탄올로 스프레이하십시오. 멸균 세이징에 대한 두 가지 옵션이 있습니다, 포장 및 증기 살균 된 표준 caging, 또는 공급 업체에 의해 조사를 사용하여 살균 된 일회용 단위.

멸균 식품을 열고 운송 상자를 열어 포장 해제 절차를 시작합니다. 이 시점에서 처리기는 첫 번째 멸균 장갑을 폐기해야 합니다. 다음으로, 멸균되지 않은 사람은 멸균 케이지를 풀고 무균처리기로 전달한 다음 보닛과 와이어 바 뚜껑을 제거하고 후드에 거꾸로 놓습니다. 그 후, 케이지의 시퍼 튜브는 후드에있는 역에서 물로 채워져 있습니다. 마지막으로, 동물 취급자는 동물을 케이지에 넣고 와이어 바 뚜껑으로 고정하고 음식을 추가하고 보닛을 제자리에 놓습니다. 후드 송풍기는 멸균 환경을 유지하기 위해 항상 켜야 합니다. 결국, 비멸균 사람은 후드에서 채워진 케이지를 제거하고 적절한 랙에 배치합니다. 그룹 간의 교차 오염을 방지하기 위해 동물 처리기는 각 선적 컨테이너 후에 장갑을 변경해야 합니다.

면역 손상된 동물의 케이지 변경을 위해 후드와 케이지 및 PPE의 준비는 이러한 동물의 포장을 풀기위한 것과 동일합니다. 그리고 이송 기술은 면역 능력 동물과 동일하지만 멸균 조건하에서.

이제 필수 치료를 제공하는 또 다른 중요한 측면인 동물을 위한 적절한 주거 조건에 대해 논의해 보겠습니다. 마우스와 쥐는 주로 침구 물질을 포함하는 단단한 바닥으로 구둣주걱으로 구사상자 타입으로 보관됩니다. 일반적인 마우스 케이지는 75 평방 인치의 바닥 공간을 제공하며 성인 마우스 5 개에 적합합니다. 다른 한편으로는, 쥐 케이지의 면적142 평방 인치이며 2 성인 쥐에 적합합니다. 정적 케이지는 일반적으로 와이어 바 뚜껑으로 덮여 있으며 필터 재료는 보닛으로 케이지 상단에 추가됩니다. 개별적으로 통풍이 잘 되는 케이지 또는 IVC에는 와이어 바 뚜껑과 보닛이 있지만 케이지로 공기 흐름을 제공하는 랙에 배치됩니다. 이것은 면역 손상된 동물에게 유익할 지도 모르다 정적 케이지로 수시로 케이지를 변경할 필요가 없습니다.

모든 caging 시스템에는 식량 및 급수에 대한 규정이 있습니다. 동물 케이지 내에 피더가 배치되거나 식품 보관에 사용되는 와이어 바 뚜껑의 섹션이 있습니다. 동물에 의해 더럽히지 않도록 음식을 배치해야합니다. 물은 일반적으로 케이지 의 상단에 배치 물 병을 통해 공급, 또는 동물 케이지의 구성 요소에 내장 된 자동 급수 음밸브를 통해. 마킹 밸브 옵션을 위해 케이지가 랙에 장착되면 물이 튜브로 운반되어 동물 시설 전체의 동물의 요구를 충족하도록 설계된 자동 급수 시스템을 위해 튜브로 운반됩니다.

실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 가이드는 모든 caging 구현이 적어도 2 주마다 소독되어야한다고 명시하고 있습니다. 일부 케이지 및 액세서리는 인클로저의 냄새와 암모니아 수준에 따라 더 자주 변경해야 할 수 있습니다.

이제 면역 능력과 면역 타협 동물을위한 적절한 음식과 물 공급에 대해 이야기 해 봅시다. 가변 단백질, 탄수화물 및 지방 조성물을 가진 많은 상업적으로 이용 가능한 공급이 있습니다. 이상적으로, 사료는 15-19% 단백질, 44% 탄수화물 및 4-9%의 지방으로 이루어져야 합니다. 면역 손상된 동물의 경우 사료가 살균되었는지 확인하십시오.

수돗물 또는 RO 물인 역삼투는 면역능력의 동물에게 사용될 수 있지만 면역결핍동물의 경우 물은 오염의 원천이 될 수 있으므로 살균이 필요합니다. 물 내의 멸균은 RO 물 8리터에 12개의 어금다 염산 2방울을 첨가하여 유지되며, 이는 물을 2.5-3의 pH로 산화시키고 세균 성장을 제한합니다. 그런 다음 개별 병에 물을 붓고 알루미늄 호일로 덮습니다. 병 뚜껑을 스테퍼 튜브에 별도로 스테인하여 오토클레이브 백에 넣고 모든 것을 스팀 살균을 위한 오토클레이브에 넣습니다.

이제 동물 관리에 필수적인 표준 환경 조건에 대해 논의해 보겠습니다.

케이지 수준에서 사회 주택은 과학적으로 정당화되지 않는 한 또는 동물이 다른 모든 사람과 호환되지 않는 한 필수입니다. 종이 오두막과 중첩 재료로 환경을 풍요롭게하면 동물은 둥지 건물과 잠복과 같은 종별 행동을 나타낼 수 있으며, 이는 스트레스 수준을 감소시키고 동물의 전반적인 복지를 증가시킵니다. 중첩 물질은 또한 같은 케이지에 있는 다중 남성 마우스의 하우징을 돕는 진정 페로몬에 포화된 수면 공간을 제공합니다. 앞서 언급했듯이, 케이지 가 변할 때 둥지 영역을 깨끗한 케이지로 옮기면 동물이 새로운 환경으로 유입되기 때문에 특히 남성의 침략을 예방할 수 있습니다. 아티믹 누드 동물의 경우, 열 조절을 돕기 위해 케이지에 추가 침구와 파쇄 된 종이 유형 중첩 재료를 제공하는 것이 좋습니다.

실내 수준에서, 마우스와 쥐의 온도 사이 해야 68 그리고 79° F. 낮은 레벨은 링테일(ringtail)으로 알려진 상태를 초래할 수 있기 때문에 실내 습도 수준은 30-70%여야 합니다. 세 번째 방 매개 변수는 조명입니다. 여기에는 빛의 강도와 사이클이 포함됩니다. 일반적으로 동물실은 12시간 광/12시간 암흑 주기로 설정됩니다. 조명 강도는 실내의 활동에 따라 달라져야 합니다. 기술자가 작업할 때 더 높은 조명 레벨을 사용할 수 있습니다. 그러나 모든 활동이 끝나면 약 325 럭스로 낮아져야합니다. 마지막으로, 방 내의 공기 흐름도 주의 깊게 제어해야 합니다. 시간당 100% 신선한 공기의 최소 10-15 공기 변화가 발생합니다. 이것은 동물방에 있는 세균 과 냄새를 감소시다.

마지막으로, 연구원들이 실험에서 실험실 동물 하우징, 식이 요법 및 환경 선호도에 대한 이 지식을 어떻게 사용하는지 살펴보겠습니다.

앞에서 설명한 바와 같이, 실험실 동물은 일반적으로 스트레스를 감소시키는 둥지 건물 행동을 나타내며, 연구자들은 이를 동물 복지지표로 사용했습니다. 이 특별한 실험에서 과학자들은 구축된 둥지점수를 매기기 위해 편견없는 시스템을 개발한 다음 주변 온도가 둥지 구축 동작에 미치는 영향을 연구했습니다. 보시다시피 온도가 상승하면서 점수가 크게 떨어지면서 동물 복지에서 주변 온도의 역할을 강조했습니다.

쥐와 쥐가 탄수화물을 좋아한다는 점을 감안할 때, 연구원은 동물의 운동 기능을 테스트하기 위하여 다른 모양의 사료를 이용했습니다. 여기에는 다양한 유형의 식품 취급 작업 중 손재주를 분석하고 외과 또는 약리학적 개입 에 따른 도달 행동을 검사하는 것이 포함됩니다.

마지막으로, 쥐와 쥐는 야행성이며 조명 영역을 선호하지 않는 것으로 알려져 있습니다. 과학자들은 이 지식을 사용하여 이 종에 있는 불안을 공부하기 위하여 환경을 건설합니다. 예를 들어, 여기서 연구는 간단한 개방 필드에 동물을 소개하고 불안과 같은 행동에 대한 유전자 녹다운 효과를 분석하기 위해 내외부 제기 영역에서 야생 유형 및 녹아웃 마우스에 의해 소요된 시간을 연구하였다.

당신은 쥐와 쥐에 대한 필수 치료 절차에 JoVE의 소개를 보았다. 이제 이러한 동물의 환경과 취급이 동물의 건강에 해를 끼치지 않도록 하기 위해 취해야 할 조치에 대해 더 잘 이해해야 하며, 연구자들이 이러한 매개 변수를 수정하여 다른 과학적 목표를 달성할 수 있는 방법을 알아야 합니다. 언제나처럼, 시청주셔서 감사합니다!

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생물 의학 연구에 사용되는 동물의 적절한 관리 및 취급은 실험의 결과에 매우 중요합니다. 규정 및 확립된 지침은 사용되는 많은 관행을 규정합니다. 그러나, 기회 병원체에 우발적인 노출을 완화하기 위하여 면역 결핍이 있는 마우스와 쥐를 위한 추가 측정이 요구됩니다. 관행이 확립 된 절차를 준수 할 때, 실험 동물의 건강과 웰빙이 향상되고, 더 나은 실험 결과 달성된다.

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References

  1. Belizário J.E. 2009. Immunodeficient Mouse Models: An Overview. The Open Immunology Journal. 2. 79-85.
  2. Institute for the Laboratory Animal Research. 2011. Guide for the care and use of laboratory animals, 8th ed. Washington (DC): National Academies Press.
  3. Van Loo, P. 2001. Modulation of aggression in male mice: influence of cage cleaning regime and scent marks. In Male Management: Coping with Aggression Problems in Male Laboratory Mice. Surrey: UK.

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