התחילו בחלוקת 18 גורי חולדות זכרים של ספראג-דולי שבעה ימים לאחר ההמלטה לשלוש קבוצות: בושה, דוגמנית ועיסוי. יש למרוח משחת עיניים וטיפות עיניים על הגורים המורדמים כדי למנוע יובש בעיניהם. יש לחטא את עור הצוואר של החולדות ביודופורה ולאחר מכן באתנול 75%, ולאחר מכן לבצע חתך אורכי באורך של כ-0.5 ס”מ במרכז צווארה של החולדה הצעירה.
להפריד בזהירות את הרקמה התת עורית הימנית, לחשוף את עורק התרדמה המשותף. בקבוצות המודל והעיסוי, הפרידו בין עורק התרדמה המשותף לעצב התועה. קריש את עורק התרדמה המשותף, תוך שימוש באקדח קרישה חשמלי.
לאחר אישור היעדר דימום, תפרו את העור שכבה אחר שכבה וחיטאו שוב את החתך הניתוחי. עבור קבוצת הדמה, להפריד את עורק התרדמה המשותף ללא טיפול. תפרו את העור שכבה אחר שכבה, ולאחר מכן חיטאו את החתך הניתוחי.
ברגע שהחולדה הצעירה זוחלת ללא הגבלה, הניחו אותה לצד אמה. לאחר חיטוי הדגם המופעל וחולדות קבוצת העיסוי, אחסנו אותן על כרית בידוד של 37 מעלות צלזיוס ועקבו באופן עקבי אחר כל סימן לדימום מהפצע או דלקת עיניים. הניחו את החולדות הצעירות בתא היפוקסיה פתוח והתבוננו במשך שעה עד שהן חוזרות להכרה.
לאחר ההתאוששות מההרדמה, העבירו את החולדות הצעירות למכשיר אנוקסי סגור למשך תקופת היפוקסיה של שלוש שעות. לאחר הטיפול ההיפוקסי, החזירו את החולדה הצעירה והעירה לאמה, ואז חיטאו את כלי הניתוח ונקו את החדר ההיפוקסי באלכוהול. לאחר הניתוח, לנקות את החולדה הצעירה עם יודופור כדי למנוע זיהום.
יש לעקוב אחר הפצע מדי יום לאיתור סימני זיהום ולהשתמש בריפוד סטרילי לפי הצורך. לאחר שהמודל מבוסס בהצלחה, שמרו על קבוצת המודל בתנאים רגילים והחילו את ההתערבות הידנית על קבוצת העיסוי. לאחר מכן, הניחו כל קבוצת חולדות ליד החולדות האם על מצעים סטריליים ובטמפרטורה גבוהה ועקבו אחריהן במשך שעה עד שעתיים עד שהחולדות האם מאכילות את הצאצאים.
בצע תצפיות יומיות כדי לבדוק דימום באתר הפצע וכל סימן של דלקת עיניים עד הפצע לרפא לחלוטין.
Qiao, R., Kasimu, A., Chen, D., Gao, C., Li, B. Developing Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy Animal Model to Study the Effects of Massage Manipulation on Motor Dysfunction . J. Vis. Exp. (Pending Publication), e200426, doi:10.3791/200426 (2023).