Comece dividindo 18 filhotes machos de ratos Sprague-Dawley sete dias após o nascimento em três grupos: sham, modelo e massagem. Aplique pomada e colírio nos filhotes anestesiados para evitar o ressecamento dos olhos. Desinfetar a pele do pescoço dos ratos com iodóforo, seguido de etanol a 75%, e então fazer uma incisão longitudinal de aproximadamente 0,5 centímetros de comprimento no centro do pescoço do rato juvenil.
Separe cuidadosamente o tecido subcutâneo direito, expondo a artéria carótida comum. Nos grupos modelo e massagem, separar a artéria carótida comum e o nervo vago. Coagular a artéria carótida comum, empregando uma pistola de coagulação elétrica.
Após a confirmação da ausência de sangramento, sutura da pele camada por camada e desinfecção da incisão cirúrgica novamente. Para o grupo sham, separar a artéria carótida comum sem tratamento. Sutura a pele camada por camada e, em seguida, desinfeta a incisão cirúrgica.
Uma vez que o rato jovem rasteja sem restrições, coloque-o ao lado de sua mãe. Depois de desinfetar o modelo operado e os ratos do grupo de massagem, abrigue-os em uma almofada de isolamento de 37 graus Celsius e monitore consistentemente quaisquer sinais de sangramento da ferida ou inflamação ocular. Coloque os ratos jovens em uma câmara de hipóxia aberta e observe por uma hora até que recuperem a consciência.
Após a recuperação da anestesia, mova os ratos jovens para um dispositivo anóxico fechado por um período de hipóxia de três horas. Após o tratamento hipóxico, devolva o rato jovem acordado à sua mãe, desinfete os instrumentos cirúrgicos e limpe a câmara hipóxica com álcool. Após a cirurgia, limpe o rato jovem com iodóforo para prevenir a infecção.
Monitore a ferida diariamente em busca de sinais de infecção e empregue estofamento estéril conforme necessário. Uma vez estabelecido com sucesso o modelo, manter o grupo modelo em condições normais e aplicar a intervenção manual no grupo de massagem. Depois, coloque cada grupo de ratos ao lado dos ratos-mãe em camas estéreis e de alta temperatura e monitore-os por uma a duas horas até que os ratos-mãe alimentem a prole.
Realize observações diárias para verificar se há sangramento no local da ferida e quaisquer sinais de inflamação ocular até que a ferida cicatrize completamente.