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Encyclopedia of Experiments: Biology

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Drosophila Ensaio de agressão

 
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Drosophila Ensaio de agressão: um método para testar a plasticidade comportamental em moscas

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- Para avaliar a agressão em moscas, use uma câmara de combate fechada equipada com dois pontos de entrada, e um divisor para manter os sujeitos separados antes do julgamento. Coloque uma fonte de alimento no centro da câmara para criar conflito para as moscas. Em seguida, carregue machos previamente isolados e marcados através dos pontos de entrada em ambos os lados da arena.

Para estabelecer o domínio, um macho exibe comportamentos ofensivos estereotipados que aumentam de intensidade, desde a aproximação e perseguição do oponente até o arremesso, um comportamento que indica agressão, onde a mosca atacante levanta alto em suas patas traseiras e desce para o oponente na tentativa de agarrá-lo. Em contraste, o oponente exibe comportamentos defensivos, como fugir em retirada do atacante.

No protocolo de exemplo, veremos como uma configuração que elimina o manuseio de animais durante o ensaio de agressão é usada para estudar a formação da memória em moscas que perderam sua primeira luta, denominada efeito "perdedor".

- Inicie experimentos comportamentais inserindo divisores plásticos em cada câmara de combate. Remova o plugue de algodão do tubo de isolamento e posicione o tubo abaixo de um orifício aberto na lateral do aparelho. Permitir que a mosca entre na câmara de combate por geotaxis negativos. Em seguida, feche a parede deslizante depois que a mosca entrou na câmara.

Em seguida, coloque o aparelho de volta na posição iluminada de videotaping. Inicie a gravação de vídeo e remova o divisor de plástico para permitir que as moscas interajam. Para experimentos de efeito "perdedor", grave as primeiras lutas por 20 minutos para garantir a formação de fortes relações de dominância. Após 20 minutos, substitua suavemente o divisor de plástico nas câmaras de combate para separar as moscas e parar o vídeo.

- Para induzir uma mentalidade forte de "perdedor", certifique-se de que as moscas estabeleçam e mantenham a relação de dominação durante as primeiras lutas, e depois minimizem a perturbação dos animais ao inserir os divisores para separar as moscas.

- Após um período de descanso de 10 minutos, comece a gravar e remova suavemente o divisor de plástico. Deixe as moscas interagirem por mais 20 minutos. Pare de gravar após 20 minutos. Para concluir o experimento, remova as moscas das câmaras comportamentais por geotaxis negativos, invertendo o procedimento descrito anteriormente.

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