Saggio di aggressione: un metodo per studiare il comportamento aggressivo di Zebrafish in risposta a uno specchio

- Inizia con due serbatoi rettangolari, un serbatoio di acclimatazione e un serbatoio di aggressione. Ora copri i tre lati esterni del serbatoio di aggressione con un foglio bianco per ridurre gli stimoli esterni. Contrassegnare il serbatoio esternamente per dividerlo in quattro quadranti rettangolari uguali per il tracciamento della posizione. Fissare uno specchio nel quadrante inferiore sinistro angolato a 22,5 gradi dalla verticale. Il riflesso del pesce funge da stimolo per l'aggressività.

Versare acqua in entrambe le vasche. L'acqua deve essere prerimpita a 27,5 gradi. Posizionare il pesce focale nel serbatoio di acclimatazione. Questo pesce è il soggetto di prova per il saggio comportamentale. Dopo 10 minuti, trasferire il pesce focale dal serbatoio di acclimatazione al serbatoio di aggressione tramite coppettazione. Ora lasciate che il pesce si acclimati per altri 30 secondi.

Registrare il numero di morsi, gli affondo veloci verso lo specchio con una bocca aperta, il numero di display laterale, il flaring di pinne dorsali, pettorali, anali e caudali nella direzione dello specchio e la quantità di tempo trascorso nel quadrante vicino allo specchio. I pesci aggressivi tendono a trascorrere più tempo vicino allo specchio e mordere lo specchio più spesso. Nel protocollo di esempio, osserveremo questi comportamenti aggressivi nei pesci zebra.

- Inizia ottenendo un serbatoio rettangolare da 19 litri che misura 30 per 15 per 10 centimetri. Disporre il serbatoio di partizioni esterne opache che circondano tre lati del serbatoio di aggressione, lasciando la parte anteriore esposta per la visualizzazione, per ridurre gli stimoli esterni indesiderati. Dividere il serbatoio con segni esterni in quattro quadranti rettangolari uguali. Utilizzare il caulk in silicone per fissare uno specchio all'interno del quadrante inferiore sinistro, inclinato a 22,5 gradi, formando un triangolo destro contro il lato sinistro del serbatoio.

Avere acqua fresca invecchiata pre-riscaldata a 27,5-28,5 gradi Celsius pronta da aggiungere al serbatoio di aggressione per garantire che la temperatura dell'acqua nel serbatoio di acclimatazione e nel serbatoio di aggressione sia entro 2 gradi Celsius dal rack dell'alloggiamento. Tazzare un pesce focale dal rack dell'alloggiamento e trasferirlo in un serbatoio di acclimatazione separato, dove si acclimaterà per 10 minuti.

Verificare che la videocamera sia focalizzata sul serbatoio del saggio di aggressione e sulla registrazione della pressa. Quindi trasferire immediatamente il pesce focale tramite coppettazione dal serbatoio di acclimatazione al serbatoio di aggressione. Registrare il serbatoio di aggressione per 10 minuti e 30 secondi. Quindi premere il pesce focale dal serbatoio di aggressione di nuovo nel serbatoio di acclimatazione.

Quando si guarda la registrazione al termine del test, attendere 30 secondi dopo che il pesce è stato introdotto nel serbatoio come periodo di acclimatazione aggiuntivo prima di segnare i comportamenti. Infine, segnare un singolo saggio di aggressione almeno due volte fino a quando il test non viene segnato con un alto accordo tra le iterazioni.