Aggression Assay: En metode til at studere aggressiv adfærd zebrafisk som reaktion på et spejl

- Start med to rektangulære tanke, en akklimatisering tank og en aggression tank. Nu dækker de ydre tre sider af aggression tank med et hvidt papir til at reducere eksterne stimuli. Mark tanken eksternt at opdele det i fire lige rektangulære kvadranter for position tracking. Fix et spejl i venstre nederste kvadrant vinklet på 22,5 grader fra lodret. Fiskens refleksion fungerer som en stimulus for aggression.

Hæld vand i begge tanke. Vandet skal forvarmes til 27,5 grader. Placer fokalfisken i akklimatiseringstanken. Denne fisk er forsøgspersonen for den adfærdsmæssige analyse. Efter 10 minutter skal du overføre fokalfisken fra akklimatiseringstanken til aggressionstanken via cupping. Lad nu fisken akklimatisere sig i yderligere 30 sekunder.

Registrer antallet af bid, hurtige lunges mod spejlet med en åben mund, antallet af laterale skærme, flaring af dorsal, pectoral, anal og kaudale finner i retning af spejlet og mængden af tid brugt i kvadranten nær spejlet. Aggressiv fisk har tendens til at tilbringe mere tid i nærheden af spejlet og bide spejlet oftere. I eksempelprotokollen vil vi observere disse aggressive adfærd hos zebrafisk.

- Begynd med at få en 19 liter rektangulær tank, der måler 30 med 15 med 10 centimeter. Udstyr tanken med eksterne uigennemsigtige skillevægge omkring tre sider af aggressionstanken, hvilket efterlader fronten udsat for visning for at reducere uønskede udvendige stimuli. Del tanken med eksterne markeringer i fire lige store rektangulære kvadranter. Brug silikone caulk til at fastgøre et spejl i venstre nederste kvadrant, skrå ved 22,5 grader, der danner en højre trekant mod den yderste venstre side af tanken.

Har frisk alderen vand forvarmet til 27,5 til 28,5 grader Celsius klar til at tilføje til aggression tank for at sikre, at temperaturen på vandet i akklimatisering tank og aggression tank er inden for 2 grader Celsius af huset rack. Cup en fokal fisk fra huset rack, og overføre det til en separat akklimatisering tank, hvor det vil akklimatisere i 10 minutter.

Bekræft derefter, at videokameraet er fokuseret på aggressionsanalysetanken og presserekorden. Overfør straks fokalfisken via cupping fra akklimatiseringstanken til aggressionstanken.

Når du ser optagelsen efter analysen er færdig, vente 30 sekunder efter fisken er blevet introduceret til tanken som en ekstra akklimatisering periode, før scoring adfærd. Endelig score en enkelt aggression assay mindst to gange, indtil analysen er scoret med høj aftale mellem iterationer.