नेत्र लेंस विच्छेदन: ज़ेब्राफिश लेंस आकृति विज्ञान का निरीक्षण करने के लिए एक तकनीक

- जेब्राफिश की आंख में कॉर्निया, स्क्लेरा, लेंस और रेटिना होता है। कॉर्निया एक पारदर्शी ऊतक होता है जो आंखों में प्रवेश करने की अनुमति देता है। स्क्लेरा एक अपारदर्शी ऊतक है जो कॉर्निया के साथ निरंतर होता है, बाहरी सुरक्षात्मक परत बनाता है। लेंस एक गोलाकार संरचना है जो रेटिना पर प्रकाश केंद्रित करती है, जो ऊतकों की एक हल्की संवेदनशील परत है जो प्रकाश को तंत्रिका संकेत में परिवर्तित करती है।

आंखों को विच्छेदन करने के लिए, सिलिकॉन के साथ एक पेट्री डिश भरें और इसे सेट करने दें । अब, पकवान में एक एनेस्थेटाइज्ड मछली रखें और माइक्रो-कैंची का उपयोग करके आंखों को उत्पादित करें । आंखों को पीबीएस से भरी प्लेट में स्थानांतरित करें ताकि ऊतक में एक निरंतर पीएच बनाए रखा जा सके और आंख को पीछे की ओर उन्मुख किया जा सके । आंख को बल के साथ पकड़ें और ध्यान से स्कलेरा और रेटिना के माध्यम से तीन रेडियल कट बनाएं ।

इसके बाद, लेंस को प्रकट करने के लिए ऊतक को बाहर निकालें। अब, आंख को पूर्वकाल की ओर से देखें और स्क्लेरा और रेटिना को हटा दें। विच्छेदन वाली आंख से लेंस को बाहर निकालें और उसके चारों ओर किसी भी शेष ऊतक को हटा दें। निम्नलिखित प्रोटोकॉल में, हम लेंस आकृति विज्ञान का विश्लेषण करने के लिए लार्वा और वयस्क जेब्राफिश लेंस विच्छेदन करेंगे।

बाद पुष्टिकरण के पर्याप्त बेहोशी साथ ट्राइकेन, उपयोग माइक्रोडिसेक्शन क़ैंची करने के लिए ज्‍यों ही उत्पाद दोनों आँखों से कोई एक एक पूर्णतया विकसित या लार्वा जेब्राफिश, और जगह दोनों आँखों में एक 35 मिलीमीटर निर्देशानुसार तैयार पेट्री पकवान साथ एक सिलिकॉन विच्छेदन मोल्ड भरा साथ पीबीएस। करने के लिए फसल के लेंस से एक पूर्णतया विकसित जेब्राफिश, जगह के आँख नितंब पक्ष ऊपर और अंतःस्‍थापित करना सँड़सी पर एक कम से 45 डिग्री कोण के माध्यम से के ऑप्टिक डिस्‍क। उपयोग विच्छेदन क़ैंची करने के लिए बनाना दो या तीन रेडिअल चीरों के माध्यम से के रेटिना और स्क्लेरा से के ऑप्टिक डिस्‍क करने के लिए के सिलियरी क्षेत्र-विशेष में के स्थिर आँख और छील शर्त लगाना के रेटिना और स्क्लेरा पसंद फूल पंखुड़ियों। पलट देना के आँख कार्निया पक्ष ऊपर और उपयोग के समतल पक्ष के के क़ैंची करने के लिए स्थिर के लेंस परोक्ष द्वारा हेरफेर के के स्क्लेरा और कार्निया जबकि का उपयोग करके सँड़सी करने के लिए खींचना दूर के रेटिना और लगाव-युक्त ऊतकों। फिर ध्यान साफ़-सुथरा दूर कोई अतिरिक्त देखिए। टिशू पेपर से के लेंस।

लार्वा ज़ेब्राफ़िश लेंस फसल के लिए, पीबीएस के सिलिकॉन डिश के सपाट हिस्से पर एक लार्वा आंख पीछे की ओर खेलता है। और रेटिना और स्क््लीरा के माध्यम से रेडियो कटौती करने के लिए एक तेज टंगस्टन सुई का उपयोग करें, जबकि आंख को एक और सुई या संदंश के साथ स्थिर करता है। फिर धीरे-धीरे एक कस्टम-निर्मित तुंगस्टन तार सुई के कुंद पक्ष के साथ अलग आंख से लेंस स्कूप और सावधानी से संलग्न ऊतकों को खींचें।