Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Science Education
General Laboratory Techniques

A subscription to JoVE is required to view this content.

מבוא לפיפטות סרולוגיות ופיפטורים
 
Click here for the English version

מבוא לפיפטות סרולוגיות ופיפטורים

Overview

הפיפטה הסרולוגית משמשת לעתים קרובות במעבדה להעברת נפחי מיליליטר של נוזל, מפחות מ 1 מיליליטר עד 50 מ"ל. הפיפטות יכולות להיות סטריליות, מפלסטיק, חד פעמיות או לעקרות, זכוכית ולו שימוש חוזר. שני סוגי הפיפטות משתמשים בסיוע לצינורות, לשאיפה ולחלוקת נוזלים. בגדלים שונים של פיפטות ניתן להשתמש עם אותו pipet-aid עבור מגוון של מותנים ניסיוניים. לדוגמה, צינורות סרולוגיים שימושיים לערבוב פתרונות כימיים או מתלים של תאים, העברת נוזלים בין כלי קיבול, או שכבות בקפידה ריאגנטים של צפיפות שונה. עם תשומת לב זהירה לרמת הנוזל השואף ומחולק, צינורות סרולוגיים יכולים להיות כלים שימושיים להעברת נפחי מיליליטר מדויקים של פתרונות במעבדה. סרטון זה דן באופן שבו ניתן לקרוא את הנפח על פיפטה סרולוגית, כיצד עובד סיוע צנרת ויישומים רבים ושונים לשימוש בצינור סרולוגי.

Procedure

הפיפטה הסרולוגית היא מכשיר מעבדה כמעט בכל מקום המשמש להעברת נפחי מיליליטר של נוזלים. פיפטות סרולוגיות בדרך כלל יש דירוגים לאורך הצדדים שלהם למדידת כמות הנוזל להיות שאיפה או מחולק.

מכשירים אלה משמשים בדרך כלל עם מתקן פיפטה, המאפשר את ההעברה הנוזלית באמצעות יצירת ואקום חלקי. אותו מתקן פיפטה יכול לשמש עם מגוון גדלי פיפטה סרולוגיים, בהתאם לכמות הנפח שברצונך להעביר.

פיפטות סרולוגיות הן בדרך כלל פלסטיק, סטריליות וחד פעמיות או זכוכית, ניתנות לעיקור וליש"ט.

כל הפיפטות הסרולוגיות דורשות שימוש במתקן פיפטה להעברת נוזלים.

מתקן הפיפטה שולל את הצורך של חוקר לבצע את הטכניקה העתיקה של צנרת הפה. שיטה פרימיטיבית זו להעברת נוזלים אינה מומלצת, שכן היא יכולה להוביל לכניסה לנוזל בחלל הפה ולגרום לתופעות לוואי חמורות.

סוג אחד של מתקן, נורת פיפטה מציעה את כמות הדיוק הנמוכה ביותר ומשמשת בדרך כלל עם צינורות סרולוגיים מזכוכית להעברת כמויות נוזלים לא ספציפיות.

משאבת הפיפטה משמשת גם עם צינורות זכוכית ומאפשרת ויסות מדויק יותר של נפח הנוזל. משאבות Pipette שימושיות במיוחד לחלוקת נפחי פתרון חוזרים.

צנרת-סיוע הוא הסוג הנפוץ ביותר של מתקן פיפטה. הוא מורכב ממספר מרכיבים מרכזיים: חרוט האף הוא המקום שבו הצינור מתחבר ושם נמצא המסנן - המגן על החלק הפנימי של הצינור-סיוע מנוזל ושומר על סטריליות.

על הידית של pipet-aid שני גורמים ניתן למצוא; ההדק העליון מדוכא בגלל שאיפת נוזלים, התחתית לחלוקה.

לעתים קרובות צינורות-עזרים יבואו מצוידים בהגדרות השולטות על המהירות שבה נוזל מחולק. לדוגמה, המכשיר יכול להיות מוגדר לחלק נוזל באמצעות אוויר כפוף, בסביבה לפוצץ, וללא כוח, בסביבת כבידה.

למרות שלחלק מהעזרים יש כבלים, רובם מופעלים באמצעות סוללה.

כמה צינורות-עזרים מצוידים במעמד המתחבר לידית, המאפשר pipet-aid לנוח על הצד שלה מבלי להסיר את pipette.

כאמור, בגדלים שונים של פיפטות סרולוגיות ניתן להשתמש עם אותו מתקן פיפטה בהתאם לנפח הנוזל המועבר, מעשירית מיליליטר עד עשרות מיליליטר.

תחילה, בחר את הפיפטה בגודל המתאים עבור אמצעי האחסון שברצונך להעביר. לאחר מכן פתחו את העטיפה בחלק העליון, וטיפול בצינורה רק מעל סימני הדירוג, חברו אותו למתקן לפני הסרת שאר העטיפה.

לאחר מכן, מחזיק את מתקן פיפטה ביד אחת, להסיר את המכסה של הנוזל שאתה רוצה לשאוף. לאחר מכן, שמירה על פיפטה אנכית, בעדינות לדכא את ההדק העליון לשאוף לאט המדגם שלך.

השתמש בסימני הדירוג לאורך הצד של הפיפטה למדידת הנפח שתעביר. שים לב כי הכרך נקרא בדירוג לאורך החלק התחתון של המניסקוס, לא בחלק העליון של הנוזל.

עכשיו בלי לגעת בקצה הפיפטה כנגד משטחים לא סטריליים, יש לחלק בזהירות את הנוזל לתוך כלי הקיבול שבחרת.

היזהר להשתמש בלחץ עדין בעת שאיפת נוזלים, במיוחד בעת שימוש בצינורות סרולוגיים בנפח קטן יותר כדי למנוע זיהום המסנן ודגם או פגיעה בצינור-סיוע. אי שימוש בטיפול בעת הפעלת pipet-aid יכעיס מאוד חברים מנוסים יותר במעבדה שאולי יצטרכו לפרק ולתקן מכשיר זה. כאשר שואפים כרכים גדולים יותר וכאשר מחלקים, לחץ מוצק יותר יכול לשמש על ההדק להעברה מהירה יותר של הפתרון.

לבסוף, הקפד להיפטר פיפטה כראוי לאחר שתסיים להעביר את הנוזל.

עכשיו שאתם יודעים איך להפעיל פיפטה סרולוגית, בואו נסתכל מקרוב על כמה יישומי מעבדה נפוצים.

הפצה שווה של תאים לאורך פתרון היא צעד חשוב בעת ציפוי או פולחן תאים. השתמש פיפטות סרולוגיות לערבוב עדין ויעיל של השעיות תאים, כמו גם לערבוב פתרונות כימיים ריאגנטים.

לאחר בידוד או טיפול בתרביות תאים ניסיוניות, צינורות סרולוגיים יכולים להיות שימושיים להעברת מושבות שלמות של תאים להרחבה או לניתוח ניסיוני נוסף.

שימוש נפוץ נוסף עבור פיפטות סרולוגיות הוא שכבות זהירה של ריאגנטים ליצירת שיפועי צפיפות כמו שיפוע פיקול, המשמש לטיהור תאים מפלזמת דם.

הרגע צפיתם בהקדמה של ג'וב לפיפטות סרולוגיות.

בסרטון זה סקרנו: מהו פיפטה סרולוגית ומתי משתמשים בה, כיצד מסייעת לצינורות מסייעת לשאוף ולחלק כמויות מיליליטר של נוזלים, וכמה יישומים שונים של הפיפטה הסרולוגית שלך. תודה שצפיתם ובבקשה תזכרו את הסכנות, של צנרת הפה!

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

לא הוכרזו ניגודי אינטרסים.

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter