限制性酶或内切酶会识别并切开DNA上的某个特定序列。这些酶在细菌中天然存在，用来抵御感染细菌的病毒-噬菌体的攻击。细菌中的限制性内切酶会切开入侵噬菌体的DNA，而细菌本身的DNA由于有甲基化，将不会受到影响。

本短片讲述了限制性内切酶的基本原理：内切酶是如何命名的，已有的酶切位点和突出端类型。并将讲解常用的限制性内切酶消化的逐步操作过程，包括所需组分，添加各组分到混合物中的顺序，以及常用的消化温度和时间。还将提及灭活限制性内切酶来抑制非特异性活性的重要性。短片还给出了操作多酶消化及酶切中使用对照的小技巧。