JoVE Science Education
Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Restriction Enzyme Digests
  • 00:00Overview
  • 00:38Background and Nomenclature
  • 01:53Basic Principles
  • 03:03Setting up a Restriction Enzyme Digest
  • 05:55Hints
  • 07:35Applications
  • 09:17Summary

Digestiones enzimáticas restricción

English

Share

Overview

Enzimas de restricción o endonucleasas reconocen y cortan el ADN en una secuencia específica. Estas enzimas se producen naturalmente en bacterias como una defensa contra bacteriófagos – virus que infectan bacterias. Bacteriano enzimas de restricción cortan el DNA de bacteriófagos invasores dejando el ADN genómico bacteriano ileso debido a la adición de grupos metilo.

Este video explica los principios básicos de las enzimas de restricción incluyendo: cómo se nombran las enzimas de restricción y los tipos de sitios de reconocimiento y proyecciones que existen. También es un procedimiento generalizado paso a paso de cómo configurar un repertorio de restricción incluyendo los componentes necesarios, el orden en el que la mezcla debe ser montada, y la temperatura de incubación típico y tiempo. Se menciona la importancia de enzimas inactivadoras de restricción para evitar que la actividad estrella. También se ofrecen consejos para realizar resúmenes de enzimas múltiples y uso de controles en las reacciones de la digestión.

Procedure

Enzimas de restricción o endonucleasas de restricción se utilizan en una variedad de diferentes aplicaciones en biología molecular. Estas enzimas reconocen y unirse a una secuencia específica de ADN, llamada un sitio de restricción. El video que está a punto de ver proporciona alguna información sobre estas moléculas milagrosas y muestra cómo configurar una síntesis de la enzima de la restricción. ¿Dónde las enzimas de restricción viene de todos modos? Estas enz…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Transcript

Tags

Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Restriction Enzyme Digests. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

Related Videos