JoVE Science Education
Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Restriction Enzyme Digests
  • 00:00Overview
  • 00:38Background and Nomenclature
  • 01:53Basic Principles
  • 03:03Setting up a Restriction Enzyme Digest
  • 05:55Hints
  • 07:35Applications
  • 09:17Summary

תקציר אנזימי הגבלה

English

Share

Overview

הגבלת אנזימים או אנדונוקלאזים מזהים וחותכים דנ”א ברצף מסוים. אנזימים אלה מתרחשים באופן טבעי בחיידקים כהגנה מפני בקטריופאג’ים – וירוסים שמדביקים חיידקים. אנזימי הגבלת חיידקים חותכים את הדנ”א הבקטריופאז’ הפולש תוך השארת הדנ”א הגנומי החיידקי ללא פגע עקב תוספת של קבוצות מתיל.

וידאו זה מסביר את העקרונות הבסיסיים של אנזימי הגבלה כולל: כיצד אנזימי הגבלה נקראים וסוגי אתרי זיהוי ו overhangs הקיימים. כמו כן מסופק הליך כללי צעד אחר צעד כיצד להגדיר תקציר הגבלה כולל הרכיבים הדרושים, את הסדר שבו יש להרכיב את התערובת, ואת טמפרטורת הדגירה הטיפוסית וזמן. החשיבות של אימת אנזימי הגבלה למניעת פעילות כוכב מוזכרת. טיפים לביצוע אנזימים מרובים מעכלים ושימוש בבקרות בתגובות עיכול מסופקים גם.

Procedure

אנזימי הגבלה, או אנדונוקלאזים מגבילים, משמשים במגוון יישומים שונים בביולוגיה מולקולרית. אנזימים אלה מזהים ומבקעים רצף דנ”א מסוים, הנקרא אתר הגבלה. הסרטון שאתם עומדים לצפות בו מספק מידע רקע על המולקולות המופלאות האלה ומראה כיצד להגדיר תקציר אנזים מוגבל. מאיפה בכלל מגיעים…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Transcript

Tags

Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Restriction Enzyme Digests. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

Related Videos