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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Restriction Enzyme Digests
  • 00:00Overview
  • 00:38Background and Nomenclature
  • 01:53Basic Principles
  • 03:03Setting up a Restriction Enzyme Digest
  • 05:55Hints
  • 07:35Applications
  • 09:17Summary

制限酵素処理

English

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Overview

制限酵素、又はエンドヌクレアーゼは特定配列を認識しDNAを切断します。本来この酵素はバクテリオファージ(バクテリアに感染するウイルス)に対する防御機構としてバクテリアが作り出すものです。バクテリアの制限酵素は侵入したバクテリオファージのDNAを切断します。しかしバクテリア自身のゲノムDNAはメチル基が付加されているため制限酵素により認識されません。

このビデオでは、まず制限酵素の基本原理: 制限酵素の名前の由来、認識部位のタイプ、について説明しています。また、制限酵素処理のセットアップ方法、反応混合液の調製方法、一般的なインキュベーション温度や時間などの一般的手法を段階的に紹介しています。その中で、スター活性を防止するための制限酵素不活性化の必要性に触れ、さらに複数の制限酵素を用いた処理法やコントロール使用などのヒントも紹介しています。

Procedure

制限酵素、別名制限エンドヌクレアーゼは、様々な分子生物学の実験に利用されています。この種の酵素は、制限酵素部位と呼ばれるDNA配列を特異的に認識し切断します。 このビデオでは、この素晴らしいテクニックについての基本的な知識と制限酵素処理のセットアップ方法を紹介していきます。 一体制限酵素はどこからやってきたのでしょうか?この酵素は、?…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Transcript

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Restriction Enzyme Digests. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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