Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Science Education
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick

A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.

 
Click here for the English version

병아리의 관리 및 유지

Overview

병아리(갈루스 갈루스 국내)는척추 동물 발달, 신경 과학 및 종양 생물학에서 중요한 개념을 연구할뿐만 아니라 바이러스를 전파하는 효율적인 시스템으로 서 귀중한 연구 도구입니다. 계란은 외부 공급 업체에서 구입하고 병아리와 함께 작업할 수 있지만, 정상적인 배아 발달에 적절한 취급 절차에 대한 이해가 필요합니다.

이 비디오는 온도, 습도 및 계란 회전과 같은 발달에 심오하게 영향을 미칠 수있는 인큐베이션 매개 변수에 대한 설명을 포함하여 계란 처리 원칙에 대한 개요를 제공합니다. 닭 계란을 사용하는 대부분의 실험은 작은, 재밀봉 구멍, 또는 "창"을 절단하여 달성되는 껍질 내의 태아에 대한 액세스를 필요로한다. 이 과정은 캔들링 및 인도 잉크 주입과 같은 병아리와 함께 작업하는 데 필수적인 몇 가지 다른 기술과 함께 단계별 세부 사항으로 설명됩니다. 마지막으로, 비디오는 고급 과학 연구에서 이러한 기본 기술의 몇 가지 실용적인 응용 프로그램을 검토할 것입니다.

Procedure

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

닭 배아는 조기 척추 동물 개발을 연구하기위한 훌륭한 모델입니다, 부분적으로 그들은 유지 보수쉽고 저렴하기 때문에. 실험실에서 사육되는 대부분의 모델 유기체와 달리, 수정된 닭 계란은 외부 공급 업체에서 구입합니다. 또한 계란을 유지하고 작업하려면 특수 장비가 거의 필요하지 않습니다. 이 비디오는 병아리 계란의 취득 및 유지 보수에 대한 일반적인 배경, 배아 개발 작업에 필수적인 기술 및 이러한 방법의 몇 가지 실용적인 응용 프로그램에 대한 일반적인 배경을 제공합니다.

실험실에서 병아리와 함께 일하는 것에 대해 논의하기 전에 암탉이 집에서 알을 어떻게 돌보는지 검토 할 수 있습니다. 알이 놓일 때 이미 수정되었지만, 계란이 추운 외부 온도에 노출되면 병아리 발달이 중단됩니다. 약 12 개의 알을 낳은 후 암탉은 배아 발달을 재개하기 위해 둥지에 앉아 있습니다. 잠복하는 동안 암탉은 알을 회전하여 고르게 데우고 배아가 껍질에 달라붙는 것을 방지합니다. 모든 것이 잘 된다면, 21일 후, 엄마는 병아리무리를 가지고 있습니다.

그렇다면 과학자들은 실험을 위해 충분한 계란을 어떻게 수집합니까? 마이크로미터... 시간이 좀 걸릴 수 있습니다. 닭은 널리 길들여져 있기 때문에, 수정된 계란은 부화장 또는 사육 농장에서 쉽게 얻을 수 있습니다. 계란은 특정 발달 단계에서 주문할 수도 있습니다.

계란이 실험실에 도착하면 최대 5 일 동안 13 - 16 °C로 보관 할 수 있습니다. 개발 준비가 되면 계란이 실온으로 따뜻해지도록 한 다음 원하는 단계에 도달할 때까지 습도가 60%인 37°C의 흔들리는 인큐베이터로 옮깁니다.

병아리에 수행 된 대부분의 실험은 당신이 받은 계란이 처음에 수정되었는지 확인하는 것과 같은 몇 가지 준비 단계가 필요합니다. 쉬운 방법은 밝은 광원 이나 촛불 상자를 사용 하 여 계란을 조명 하는 것입니다. 이 기술을 사용하여, 캔슬링으로 알려져, 혈관과 같은 내부 구조는 태아가 존재하는지 확인하기 위하여 시각화될 수 있습니다.

계란을 그대로 두면 병아리 생존이 향상되지만 껍질은 배아에 대한 접근을 방지합니다. 이 문제를 해독하기 위해 연구자들은 창이라는 기술을 사용합니다.

먼저 알을 옆으로 눕고 상단을 표시하여 배아가 상승할 측면을 식별합니다. 창을 자르는 동안 노른자의 손상을 방지하기 위해 소량의 알부민 또는 달걀 흰자를 제거하여 배아를 껍질에서 멀리 낮춥니다. 이렇게하려면 먼저 70 %의 에탄올로 닦아 껍질을 살균하십시오. 껍질이 말린 후 달걀의 무딘 끝에 테이프 조각을 부드럽게합니다. 그런 다음 멸균 바늘을 사용하여 테이프와 껍질을 관통하십시오. 노른자를 손상시키지 않도록 바늘을 아래쪽으로 삽입하고 5 ml의 알부민을 제거하십시오. 마지막으로, 알부민의 누설을 방지하기 위해 다른 테이프조각으로 구멍을 밀봉하십시오.

셸을 잘라내려면 창을 계획하는 영역에 테이프 조각을 놓습니다. 한 쌍의 가위를 사용하여 쉘에 작은 구멍을 만들고 원형 개구부를 자르기 시작합니다. 이 과정에서 테이프는 껍질 파편이 배아에 떨어지는 것을 방지합니다.

창 이후에도 초기 단계 배아는 작은 크기와 투명성으로 인해 시각화하기가 어려울 수 있습니다. 배아와 노른자 사이의 대비를 개선하기 위해 희석, 비독성 인도 잉크를 사용할 수 있습니다. 잉크는 배아 아래 노른자에 주입되고 확산될 수 있습니다. 배아는 이제 어두운 배경에 대하여 더 높은 대조에서 보일 수 있습니다. 실험적인 조작 후, 창은 테이프로 다시 밀봉되어야 하고 계란은 인큐베이터에 다시 배치되어야 합니다.

이제 계란을 다루는 기본 기술에 익숙해지면 이러한 방법이 닭 배아에 대한 실험을 수행하는 데 어떻게 사용되는지 확인할 수 있습니다.

시작하려면, 캔슬링은 그대로 계란에 있는 배아 구조물의 위치를 확인하기 위하여 이용될 수 있습니다. 예를 들면, 닭 태아의 외화 막은 일반적으로 바이러스의 전파를 위해 이용됩니다. 멤브레인을 감염시키기 위해, 담낭은 배아를 손상시키지 않고 알란토닉 캐비티에 직접 바이러스를 주입하기 위해, 알란토닉 캐빈과 공기 낭 사이의 인터페이스를 찾기 위해 수행된다. 잠복의 며칠 후에, 바이러스성 입자의 다수는 탄토성 액체에서 수확될 수 있습니다.

계란 창은 실험을 위한 태아에 접근을 허용하기 때문에 매우 유용한 사례입니다. 많은 실험은 미세 주입을 통해 특정 조직에 DNA의 전달로 시작합니다. 전극은 관심 있는 조직 주위에 배치되고 전기장은 일시적으로 세포막을 투과화하고 세포로 핵산을 구동하기 위하여 적용됩니다.

초기 배아에 대한 실험을 수행할 때 인도 잉크 주입은 투명한 조직을 시각화하는 데 특히 유용합니다. 여기에서, 향상된 대비는 연구원이 정제한 조직 도메인으로 DNA 해결책을 마이크로주사하는 것을 허용합니다. 궁극적으로,이 기술은 세포 분열을 추적하기 위해 시간이 지남에 따라 모니터링 할 수있는 개별적으로 표지 된 세포를 생성 할 수 있습니다.

당신은 병아리 유지 보수에 JoVE의 비디오를 보았다. 이 프리젠 테이션은 닭 계란의 기본적인 취급 및 유지 보수, 병아리와 함께 일하기위한 일반적인 기술 및 이러한 방법이 생물학적 연구에서 어떻게 적용되는지에 대한 몇 가지 예를 다루었습니다. 시청해 주셔서 감사합니다!

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

이해 상충이 선언되지 않았습니다.

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter