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Neuroscience
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Patch Clamp Electrophysiology
  • 00:00Overview
  • 01:04Principles Behind Patch Clamping
  • 03:20Patch Clamp Configurations
  • 04:43Preparing Micropipettes and Forming a Seal
  • 06:05Whole-cell Patch Clamp Procedure
  • 07:15Applications
  • 09:11Summary

Electrofisiología de patch clamp

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Overview

Las membranas celulares de la neurona se rellenan con canales iónicos que controlan el movimiento de carga dentro y fuera de la célula, de tal modo regulación de disparo de la neurona. Una técnica muy útil para la investigación de las propiedades biofísicas de estos canales se llama grabación de patch clamp. En este método, los neurólogos colocan una micropipeta de vidrio pulido contra una célula y succione para formar un sello de alta resistencia. Este proceso aísla un pequeño “parche” de la membrana que contiene uno o más canales de iones. Utilizando un electrodo dentro de la micropipeta, investigadores pueden “sujetar” o controlar las propiedades eléctricas de la membrana, que es importante para el análisis de la actividad del canal. El electrodo también permite cambios en el voltaje a través de la membrana, o el flujo de iones a través de la membrana, a grabar.

Este video comienza con un resumen de los principios de electrofisiología de patch clamp, una introducción a los equipos necesarios, y las descripciones de las distintas configuraciones de parche, como toda célula, célula Unido, perforado, dentro-fuera, y parches de salida exterior. A continuación, la tecla se describen los pasos de un experimento de abrazadera parche típico de células completas, en el cual se genera una curva de corriente / tensión (IV). Finalmente, aplicaciones de grabación de abrazadera del remiendo se proporcionan para demostrar cómo se evalúan las propiedades biofísicas de los canales iónicos y excitabilidad de la célula compuestos neuroactivos en los laboratorios de Neurofisiología hoy.

Procedure

Grabación de abrazadera del remiendo es una técnica muy útil para la investigación de las propiedades biofísicas de los canales iónicos que controlan la activación neuronal. El procedimiento consiste en presionar una micropipeta de vidrio contra una célula con el fin de aislar a un pequeño “parche” de la membrana que contiene uno o más canales de iones. La disposición experimental adicional permite a los científicos para “fijar” el ambiente eléctrico de la zona parcheada contr…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Patch Clamp Electrophysiology. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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