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Séparation d’un mélange par précipitation
 

Séparation d’un mélange par précipitation

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Précipitation est une technique utilisée pour séparer un mélange issu de la solubilité de ses composants. La solubilité d’un composé dépend de la force ionique de la solution, son pH et de température. Manipulation de ces facteurs peut causer un composé devenir un solide insoluble et tomber de la solution. C’est ce qu’on appelle des précipitations.

L’insoluble solid, appelé le précipité,, au départ constitue une suspension, ce qui signifie qu’il est bien dispersé en solution. Le précipité en général s’agglomère et puis on sépare le liquide par décantation, la centrifugation et la filtration. Cette vidéo présentera plusieurs méthodes de séparation de composés à l’aide de précipitations et démontrer une procédure dans le laboratoire.

Un composé dissous peut être précipité hors de la solution en introduisant une contre-ion. Par exemple, l’argent peut être précipité hors de la solution dans la réaction entre le chlorure de sodium et de nitrate d’argent. L’ion nitrate est remplacée par une contre-ion, chlorure, entraînant la formation de chlorure d’argent massif.

Augmentant la concentration d’une solution de sel peut également induire des précipitations. Cette technique, appelée relargage, est commune pour l’isolement des protéines. À forte concentration saline, les molécules d’eau sont plus attirés par le sel dissous, laissant moins pour stabiliser la protéine. En conséquence, les molécules de protéine agrègent et forment un solide.

Précipitations peuvent aussi être causée par un changement de pH. À pH élevé et faible, la protéine est chargée et attirés par la solution polaire. À un certain moment, la charge nette d’un composé devient nulle. C’est le point isoélectrique, ou pI. Le composé ne peut pas interagir avec la solution polaire, amenant à agréger et précipiter.

La température affecte aussi solubilité, tel qu’une température plus élevée augmente la solubilité des solides. En diminuant la température, les composés dissous peuvent re-solidifier. Le taux de formation solide détermine la pureté relative.

Les expériences suivantes démontreront la précipitation de la caséine, protéine du lait à l’aide de pH et plus loin la séparation grâce à des méthodes de filtration et de la centrifugation.

Pour commencer cette procédure, ajoutez 250 mL de lait dans un bécher avec une barre de remuer. Doucement chauffer le lait à 40 ° C sur une plaque de cuisson en remuant. Plonger un pH-mètre dans le lait tiède et surveiller le pH. Ajouter goutte-à-goutte d’acide acétique dans le lait jusqu'à ce que le pH atteigne le point isoélectrique des caséines, 4.6. Les protéines insolubles de lait ou lait caillé, précipite hors de la solution au point isoélectrique. Retirer le caillé de solution par filtration. Si le papier filtre du colmatage, mélanger avec une spatule pour aider à la solution traversent. Si cela n’améliore pas la filtration, changer le filtre en papier. Transférez le solide mouillé le papier filtre colmaté à nouveau filtre en papier. Cela devrait absorber plus de liquide, ou lactosérum, du solide. Continuer de changer le filtre en papier jusqu'à ce qu’il y a une humidité minimale. En appuyant légèrement sur les solides peut aider le filtre en papier pour absorber plus de petit-lait.

Remettre en suspension les matières solides de lait en poudre dans l’éthanol à 70 % pour laver les phospholipides hors le caillé puis répétez le procédé de filtration. Comme alternative à la filtration, solides de protéines peuvent également être séparées par centrifugation. Centrifuger les portions de 50 mL du mélange lait et éliminer le surnageant. Resuspendre le culot dans 50 mL d’éthanol à 70 % pour enlever les phospholipides du caillé et répétez le processus de centrifugation.

Les solides de protéine de lait peuvent ensuite être stockés ou remis en suspension dans une autre solution pour une analyse ultérieure, comme le SDS-PAGE. Pour plus d’informations, voir notre vidéo sur cette technique. SDS-PAGE analyse montre que précipitation a permis l’élimination des impuretés de la plupart de la whey. Tout la caséine a été trouvé dans le culot, même si aucun ne figurait pas dans le surnageant.

Précipitation est une technique couramment utilisée, qui peut être appliquée pour séparer une variété de mélanges ou solutions.

Composés peuvent être précipités à partir d’une solution à l’aide d’une contre-ion, comme dans cet exemple de la précipitation du carbonate de calcium.

Chlorure de calcium et de carbonate de sodium sont à la fois solubles dans la phase aqueuse.

Quand ils sont mélangés, le calcium et le carbonate forment un solide insoluble, qui peut être séparé par centrifugation. Pour plus d’informations sur ce sujet, visionnage de nos vidéos de formation sur les règles de solubilité.

Précipitations peuvent être utilisées dans la préparation des solides l’échelle du nanomètre qui se trouvent dans un large éventail d’applications en nanotechnologie. Dans cet exemple, les graines de nano-échelle ont été utilisées pour contrôler la croissance de nano-cristaux.

Les précurseurs ont été chauffés, réagit avec séléniure de TRIOCTYLPHOSPHINIQUE et puis rapidement refroidis. Méthanol a été ajouté à la solution refroidie, pour précipiter les solides. Les cristaux ont été ensuite récupérés par centrifugation, et a analysé la structure cristalline par Diffraction des rayons x.

Précipitations permet également à la préparation des ligands polymères pour les applications de livraison de drogue. Dans cet exemple, un ligand est synthétisé et conjugué à la platine comme un traitement anticancéreux. Tout d’abord, le ligand a été synthétisé à l’aide d’un amide, réaction de couplage. Il a précipité au fur de la réaction. Il a été ensuite récupéré à l’aide de filtration.

Le solide a été puis purifiée à l’aide de recristallisation et filtré à nouveau. Le ligand est ensuite complexé avec les composés de platine, séchée et ensuite purifié à l’aide de précipitation fractionnée de l’eau avec de l’acétone. Couplage de platine a été confirmée en utilisant la spectroscopie de résonance magnétique nucléaire. Les composés pourraient alors être étudiées pour leur efficacité et les effets secondaires comme agents anticancéreux.

Vous avez juste regardé introduction de Jupiter à la séparation d’un mélange à l’aide de précipitations. Vous devez maintenant comprendre les diverses méthodes de précipitation et comment effectuer ces expériences en laboratoire.

Merci de regarder !

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