En kronisk immobilisering stress protokol for inducerende depression-lignende adfærd i mus

Begynd med at indstille rummet til lys på 200 lux ved hjælp af en digital lux meter. Sæt musen i et separat bur mindst en uge før test, og læg musen i testrummet i mindst 30 minutter før forsøget. Hold forsigtigt musehalen for at undgå at spændte musen, og placer den forsigtigt på en ru overflade.

Dæk fastholdelsesholderen med et lille hvidt håndklæde og sæt derefter forsigtigt musen ved fastholdelsesholderens åbning, så musen kommer ind i fastholdelsesholderen frivilligt. Dernæst placere lukningen for at fastholde musen så stram som muligt, være omhyggelig med at undgå skader på kroppen, såsom hale, fødder, og testikler. Endelig, under eksponering for fastholdende, måle kropsvægt og fødeindtagelse hver 48 timer.

Før test, habituate musene til tilstedeværelsen af to drikkeflasker, den ene indeholder 0,1 molar saccharose og den anden indeholder almindeligt vand i 48 timer. Skift positionerne for de to flasker efter 24 timer for at reducere eventuelle konfunderende produceret af en side bias. På den tredje dag fratage musene vand i 24 timer.

På eksperimentets dag udsættes musene for to drikkeflasker i seks timer. Efter tre timer skiftes vandflaskernes position. Optag volumen i milliliter saccharoseopløsning og vand, der forbruges, og beregnes derefter dyrets affinitet til saccharose.

Endelig beregnes saccharosepræferencen som en procentdel af mængden af saccharoseforbrug i forhold til det samlede væskeforbrug under testen. Begynd med at bringe den kroniske fastholdelsesstress induceret mus ind i testrummet mindst 30 minutter før du begynder hale suspension test. Indstil rummet lys til dæmpede forhold på 50 lux.

Dernæst placere kameraet omkring 40 centimeter fra musen. Ophæng musen fast fra den vandrette bjælke med tape. Når musen er placeret i midten af suspensionen boksen begynde at optage, og observere de adfærdsmæssige ændringer kontinuerligt i seks minutter.

Hvis musen forsøger at klatre sin hale bruge en pind eller klatre prop for at forhindre det i at gøre det. I slutningen af forsøget flytte musen til sit hjem bur og forsigtigt fjerne båndet fra halen. Endelig skal du bruge video tracking software til at analysere den akkumulerede tid af immobile perioder.

Resultaterne viser fald i kropsvægt for CIS-gruppen og betydeligt mindre fødeindtagelse på dag fire. Sammenlignet med kontroller blev der vist et fald for saccharosepræference i CIS-gruppen, mens der var en betydelig stigning i ubevægelighedstiden og kortikosteron. Yderligere, en glutamin suppleret kost forbedrer depressive lignende adfærd, som vist for kropsvægt, fødeindtagelse, saccharose præference, immobilitet, og corticosterone.