Neuroscience
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Создание острого инфаркта понтий в Крысах электрической стимуляцией
Chapters
Summary August 27th, 2020
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Здесь представлен протокол для установления острого инфаркта понтий в крысиной модели с помощью электрической стимуляции с одним импульсом.
Transcript
Мы предоставляем протокол для установления инфаркта в пончики крысы. Эта модель pontine infarction крысы легко была выполнена, легко воспроизведена, и высоки успешно модель. Электрическая стимуляция может быть использована для инфаркта в любой другой области мозга, как таламус.
Люди, которые хотят выполнить эту модель должны узнать понтийскую автономию перед экспериментом. Перед операцией взвесить крыс и оценить их неврологические показатели в соответствии с поведенческими тестами, как описано в сопроводительном тексте. Разогреть грелку до 37 градусов по Цельсию непосредственно перед анестезией и прикрепить сверло черепа к держателю на стереотаксисной раме.
Подтвердите отсутствие реакции на педаль рефлекса у первой обезболивающей крысы и смонтируете крысу на стереотаксисную раму в положении, подверженном на грелке. Распоить ухо баров над ушным каналом, чтобы обеспечить голову, заботясь о том, что череп хранится горизонтально, чтобы избежать перекоса инъекции. Нанесите мазь на глаза животного и используйте микро бритву, чтобы удалить волосы из черепа.
Используйте маркер, чтобы нарисовать трехсантиметровую линию вдоль средней линии черепа от линии двустороннего бокового кантуса до 0,5 сантиметра за задней фонтанелью и использовать скальпель, чтобы сделать разрез средней линии вдоль отмеченной линии. Используйте ватный тампон, чтобы удалить кровь и поместить кусок хирургической ленты на каждой стороне лоскута кожи, чтобы разоблачить череп. Используйте новый тампон, пропитанный хлоридом натрия 0,9%, чтобы аккуратно удалить любую соединительной ткани из черепа и найти брегму.
Используйте тонкую ручку маркера наконечника, чтобы указать центральную точку брегмы в качестве точки происхождения, поместите сверло на шесть миллиметров передней задней, два миллиметра медиальной боковой. Используйте дрель, чтобы тщательно выполнить краниотомию диаметром один миллиметр. Далее, заменить дрель с 22 калибровочный зонд с изолированной оболочки с кончиком размещены два миллиметра над проксимальным концом оболочки.
Вставьте листы семь миллиметров в мозг и заранее зонд вдоль оболочки до верхней части зонда девять миллиметров ниже поверхности мозга. Подключите электроды к электрическому стимулятору и соедините анод с зондом. Затем подключись к катоду к уху крысы.
Затем включите электрический стимулятор и установите ширину одного импульса до 4 050 миллисекунд, напряжение до 50 вольт и ток до четырех миллиампер. Оставьте зонд в положении в течение пяти минут после стимуляции, прежде чем удалить устройство из мозга. Обложка краниотомии с костным цементом и дайте цементу высохнуть перед использованием 4,0 полиамидных шов нитей, чтобы закрыть рану.
После трех или четырех швов, галстук 2-1-1 стандартных хирургических узлов. Затем интраперитонически вводят крысе 250 микролитров пенициллина и следят за крысой каждые 15 минут до полного бодрствования, прежде чем вернуть животное в клетку. В этом анализе, шесть животных были подвергнуты операции, как попродемонстрировано, и шесть животных были обработаны в качестве контроля.
Кусочки мозга на этих изображениях были получены из одной крысы на группу. МРТ-сканирование показало, что инфаркт находился в основе пон, имитирующих антеролатеральные инфаркты у пациентов. Поскольку использовалась изолированная оболочка, инфаркт не наблюдался в коре головного мозга, мозжечка или среднего мозга.
Диффузионные взвешенные изображения также выявили острый инфаркт понтий. ТТК окрашивание было использовано для подтверждения инфаркта 24 часов после операции. Как и ожидалось, объем инфаркта был значительно выше в хирургической группе по сравнению с контрольной группой.
Поведенческие оценки измерялись до и после операции. По сравнению с контрольной группой, крысы с инфарктом понтии кружили влево. Значительные различия наблюдались в Лонга, Бердерсон, расположение конечностей, баланс пучка, и клей удаления соматосензорных тестов между тирады с понтийского инфаркта и контрольной группы крыс.
Любая конкретная область мозга будет уничтожена электрической стимуляцией.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
