Preparación y tinción por inmunofluorescencia de haces y células de fibra única de la corteza y el núcleo del cristalino del ojo

El cristalino es un órgano elipsoide transparente en la cámara anterior del ojo, y es responsable de enfocar la luz en la retina para crear una imagen clara. La función de la lente se basa en sus propiedades biomecánicas, recientemente se ha demostrado que las interdigitaciones complejas entre las células de fibra de la lente son importantes para la rigidez de la lente. Si bien la morfología especializada de las células de fibra del cristalino se ha descrito previamente mediante microscopía electrónica, se sabe poco sobre las proteínas que se requieren para estas membranas entrelazadas.

Estudios anteriores se han basado en secciones de tejido del cristalino, que no permiten una visualización clara de la arquitectura celular compleja. Hemos creado y perfeccionado una técnica novedosa para preservar fielmente las complejas interdigitaciones de membrana entre las células de fibra del cristalino para la tinción y la obtención de imágenes de microscopía confocal de proteínas específicas. En este protocolo, también existe un nuevo método para teñir las células de fibra desde el centro del cristalino, que también se conoce como núcleo del cristalino.

Este método abre la puerta a la comprensión de la diferenciación y maduración de las células de fibra mediante el estudio de los mecanismos de formación y los cambios en las interdigitaciones de la membrana.