Göz Merceğinin Korteks ve Çekirdeğinden Demetlerin ve Tek Fiber Hücrelerin Hazırlanması ve İmmünofloresan Boyanması

Lens, gözün ön kamarasında bulunan şeffaf bir elipsoid organdır ve net bir görüntü oluşturmak için ışığın retinaya ince odaklanmasından sorumludur. Lensin işlevi biyomekanik özelliklerine dayanır, lens fiber hücreleri arasındaki karmaşık interdigitasyonların lens sertliği için önemli olduğu son zamanlarda gösterilmiştir. Mercek lifi hücrelerinin özel morfolojisi daha önce elektron mikroskobu ile tanımlanmış olsa da, bu birbirine kenetlenen zarlar için gerekli olan proteinler hakkında çok az şey bilinmektedir.

Önceki çalışmalar, karmaşık hücre mimarisinin net bir şekilde görselleştirilmesine izin vermeyen lens dokusu kesitlerine dayanıyordu. Spesifik proteinlerin boyanması ve konfokal mikroskopi görüntülemesi için lens lifi hücreleri arasındaki karmaşık membran interdigitasyonlarını aslına uygun olarak korumak için yeni bir teknik oluşturduk ve mükemmelleştirdik. Bu protokolde, lens çekirdeği olarak da bilinen lensin merkezinden fiber hücrelerin boyanması için yeni bir yöntem de vardır.

Bu yöntem, zar sayısallıklarındaki oluşum mekanizmalarını ve değişiklikleri inceleyerek lif hücresi farklılaşmasını ve olgunlaşmasını anlamanın kapısını açar.