制备及使用幻影病变实践细针穿刺活检

Published 9/29/2009
5 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Biology
 

Summary

细针穿刺活检(FNAB)执业学员是比较具有挑战性的,由于缺乏一个容易获得的,适当的病变。准备的AV幻象执业FNAB程序和掌握的熟练程度的病变是比较容易的。

Cite this Article

Copy Citation

Shidham, V. B., Varsegi, G. M., D'Amore, K., Shidham, A. Preparation and Using Phantom Lesions to Practice Fine Needle Aspiration Biopsies. J. Vis. Exp. (31), e1404, doi:10.3791/1404 (2009).

Please note that all translations are automatically generated through Google Translate.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

目前,卫生工作者,包括居民和研究员没有一个合适的幻象模型,以实践的细针穿刺活检(FNAB)程序。在过去,我们的标准化模型乳胶手套含有新鲜牛肝脏执业FNAB组成。然而,这种模式是很难在短时间内与采购新鲜的牛肝脏中最具挑战性的的一个环节,组织和准备​​。肝脏处理与污染有关的问题,也是一个重要的拉回。此外,手套材料的泄漏通过几针后,造成的烂摊子。

我们已经建立了一个简单的方法,在市售的硅橡胶填缝嵌入一小块香肠或香蕉的小说。这种模式允许保留材料的真空密封和愿望嵌入式标本相似,临床上的肿块实际FNAB程序,。

针枢纽的吸气材料可以处理类似采购的标本,在实际FNAB过程中,促进涂片制备和染色额外的能力。

Protocol

  1. 幻象病变的制备(约38至48小时,准备幻象FNA的能力(图1)实际执业会议之前或利用FNA的来源,美国准备使用“AV幻影”幻象病变(没有冷冻冷藏条件下储存)保持甚至3至4天前的准备练习。
  2. 实践FNA的能力:虽然我们已经证明使用过程Shidham的THFV(收割机的组织与功能阀)(FNA的来源,美国),其他任何活检系统可用于练习(图2)。
  3. 传播和处理的玻片上的吸(图3)。

所需材料

  1. 清除硅橡胶填缝,可在很多施工/家装店。许多品牌都包括GETM,磷酸二铵,红魔鬼,白色的闪电,和当地的连锁品牌。我们用硅橡胶,白防雷产品,克利夫兰,美国俄亥俄州http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.html
  2. 压胶枪
  3. 一个一块保鲜膜板(我们使用萨兰保鲜加WRAP,美国庄臣父子公司,拉辛,威斯康星,美国http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.asp
  4. 乳胶手套
  5. 宽直径的香蕉或香肠。
  6. 事务所平底板(约6英寸x 6英寸)厚的卡板,亚克力板,或其他。
  7. FNA的表演设备
    • 25计的注射针头
    • Shidham THFV(或执行FNA的其他组件)
    • 载玻片
    • 染色试剂盒

一步的步骤细节

A.准备(准备幻象1至2天前FNA的能力(图2)执业或利用FNA的来源,美国准备使用“AV幻影”幻影病变。

  1. 切6 × 6英寸大小支持板。
  2. 剪下的“幻象病灶核心 ”(香蕉或香肠)的2.5英寸长的段。
  3. 排出0.5英寸底板上的一层厚厚的填缝。
  4. 轻轻按下“幻影病变核心”这层填缝。
  5. 添加更多填缝“幻影病变核心”,因此,它是完全嵌入填缝土堆,没有捕获气泡。
  6. 调整和形状的“幻象病灶核心 ”与戴手套的手的填缝。
  7. 以保鲜膜一个6 × 6英寸大小的一块和覆盖填缝土堆,土堆表面用干净的,戴手套的手成光滑的凸配置调整。
  8. 让填缝土堆治愈长于根据产品说明书中提到的固化时间为6-8小时,(通常为24小时),在温暖的地方。
  9. 固化后,填缝应牢固,保鲜膜可以很容易揭下。
  10. FNA的幻象病变准备执业FNA程序后,约8小时时填缝整个土堆已经完全治愈的中心,包含“虚拟病变的核心 ”(香蕉或香肠) 。

B.实践AV幻影病变活检能力。

任何获得高品质的的方法,以优良的品质直接细胞学涂片足够的活检抽吸应解决以下关键点

  1. 针规,在程序的标题所暗示,更细的针头(高计数量)产生更好地吸出,以最小的血液稀释。关键平衡的优点和局限性,22日至25表针针最佳的机械稳定性,在不影响活检吸质量的首选。
  2. 控制在适当的活检在真空中的应用和释放序列的过程,这是至关重要的,以便对针枢纽,推进每一针中风的采样细胞。然而,不应该被允许的吸气材料用注射器的针吸大会面积达到。如果这是无法阻止的,材料可能很难检索涂片(然而,这种材料可被用于细胞块制备或浓度的方法,如Cytospin,过滤器的方法,或最近的液基细胞学检查的准备工作)。
  3. 发展适当的技能, 在吸气标本处理,包括直接涂片制备及现场充足评估与辅助检查,如细 ​​胞块免疫细胞化学选修,选修淋巴组织增生性病变的免疫表型流式细胞仪准备适当分流,提交微生物的无菌通行证研究中,和队友(细胞遗传学等)的分子检测里亚尔。

表演FNA程序(Shidham的THFV所示[1](FNA的来源,美国);然而,任何其他的FNA系统可用于练习)(图3,4,5) 。

  1. 阀门关闭,准备活检大会。
  2. 找到病变部位,然后插入针尖在病灶。
  3. 打开阀门,通过其尖端的针,连接真空吸代表病变的细胞成分 ,与每个病变部位来回中风。
  4. 针插入病变在不同的方向,保持对病灶的真空和样品的不同领域。
  5. 关闭阀门,拔下针管腔内的真空。
  6. 均衡的压力与环境条件(例如,从针头注射器阀一瞬间断开和重新连接,如果使用特殊装置内置的步骤,如“THFV',是,这和从BA1通过BA6其他步骤是一致的自动阀系统按照不同的步骤)[1]。
  7. 从病灶取出针与阀关闭,以防止通过毛细作用进入病灶标本的损失,除非有轻微的负压力枢纽年底。
  8. 打跑的载玻片上,吸气内容,准备直接涂片(见下文)(图6)。

BB。吸气标本适当分流处理
传播玻片吸和编制质量良好(图6)直接涂片,其次是适当的染色和分流(图7,8)。

  1. 一滴于载玻片上抛下吸传播的各种方法,如(图6)[2]。通常的做法是“A”。然而,如果试样是与一些microfragments稀释血液,多余的血是退掉倾斜幻灯片,然后microfragments类似'A'这个幻灯片和第二载玻片之间传播。如果吸主要是没有暂停,从淋巴组织增生性病变如microfragments,它是传播类似'B'或'c'。
  2. 涂片可在各种不同的染色方法方法处理,并固定在现场充足评估。然而,最好的办法是风干所有的污迹。 Romanowski污渍(如Difff快客染色,瑞氏染色)后,甲醇固定,或与子宫颈抹片,风干涂片可染色,染色后生理盐水补液,后固定(在95%的乙醇或95%的乙醇最好用5 %乙酸)[3]。由于模糊血消除干扰是一个明显的好处[3]。
  3. 根据现场充足评估期间的初步cytomorphologic调查结果,建议额外的分流(如选修单元块,电子显微镜,微生物学文化,流式细胞仪,分子检测,细胞遗传学等)表示。

代表性的成果:

图1
看到图1的放大版本,请点击这里。
图1。准备影音幻影练FNA的能力所需的材料(*我们使用萨兰保鲜膜,没有坚持在年底填缝,而删除的嵌缝膏完全固化后。)


图2
请点击这里看大图图2。
图2准备影音幻影病变


图3
图3看到一个更大的版本,请点击这里
图3。活检过程中的关键步骤。


图4
图4看到一个更大的版本,请点击这里
图4。EUS - FNA的关键步骤摘要*(见图3)


图5
请点击这里看大图图5。
图5。陷阱活检进程的关键步骤edure。


图6
请点击这里看大图图6。
图6两个幻灯片之间的活检标本直接涂片的制备。


图7
图7看到一个更大的版本,请点击这里
图7。湿固定与风干涂片。


图8
请点击这里看大图图8。
图8。湿固定与风干涂片。

Discussion

细针穿刺活检(FNAB)被广泛作为一种经济,安全,快速的微创组织各种肿瘤和病变的诊断技术。在此过程中,一个18至27号针头插入到病变部位,来回移动多次在病变部位的不同地区根据不同的强度,范围从最小的只有毛细作用形成约10毫升控制的真空(吸)真空注射器检索诊断组织材料。一个人数较多的细针头是首选检索良好的细胞学材料,准备直接涂片检查。更多针头18G检索更多的样本适合细胞块,流式细胞仪,电子显微镜,细胞遗传学,微生物学文化等,虽然过程很简单,控制各种适当的应用程序和真空释放在适当的步骤,协调一致地步骤是非常关键的为达到最佳效果。

由于专门设计的高收益针,传统的皮下注射器针头或修改的非可用性,是用来执行此过程。然而,注射针头有诸多限制,导致产量低的样品,如果用传统方式。特殊的注射器夹具的要求通常会增加程序的复杂性。因此,由于缺乏适合市售FNAB针设备,患有这种高度灵活的程序不足标本检索的一个经常出现的问题。近日,设备,提高产量与可重复性已经报道[1]。

此外,目前还缺乏一个合适的模型练习熟练卫生人员进行培训,包括居民和研究员FNAB。我们一块新鲜的牛肝脏乳胶手套塞进执业FNAB能力模型进行了标准化。然而,这种模式是很难在短时间内组织。采购新鲜的牛肝脏通常是限制的困境。此外,肝脏处理可能引进作为一项重大的借鉴污染的相关因素。乳胶手套的倾向,泄漏后几个针头刺破导致潜在的烂摊子,在练习。

我们的报告,并描述了一个新颖而简单的方法,市售的硅橡胶嵌缝膏和其他容易获得的材料中嵌入一个小块的香蕉(或香肠)。 FNAB幻象保留真空密封,从而使材料从嵌入式的标本,相当于病变在临床上的实际FNAB程序的愿望。在这段视频中,我们展示了FNAB幻象病变和实践FNAB程序的过程。这也表明在简短的检索标本的处理,包括涂片制备和染色[2,3]。

由于填缝需要时间来治愈,幻象病变应准备提前约24至48小时,执业会议之前。可比准备使用幻像病变可从商业来源(FNA的来源,美国)。

幻象病变执业FNAB能力,可用于培训的居民和研究员的患者在临床上表现FNAB开始前。

References

  1. Shidham, V. B., Pandit, A. W., Rao, R. N., Basir, Z., Shidham, A. Tissue Harvester with Functional Valve (THFV): Shidham's device for reproducibly higher specimen yield by fine needle aspiration biopsy with easy to perform steps. BMC Clinical Pathology. 7, (2), (2007).
  2. Shidham, V. B., Epple, J. AppendiX I: Collection and processing of effusion fluids for cytopathologic evaluation. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. 'Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids' First edition, Elsevier; W.B. Saunders Company. Chapter 15 207-235 (2007).
  3. Shidham, V., Kampalath, B., England, J. Routine air drying of all the smears prepared during fine needle aspiration and intraoperative cytology studies: An opportunity to practice a unified protocol, offering the flexibility of choosing variety of staining methods. Acta Cytologica. (45), 60-68 (2001).

Comments

5 Comments

  1. thank you for this outstanding presentation, it is very simple and comprehensive,

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 26, 2009 - 2:13 PM
  2. Thank you the comments.
    We are glad you liked the presentation and found it useful. (Rply by the Authors Shidham & Varsegi).

    Reply
    Posted by: Vinod S.
    October 27, 2009 - 1:49 PM
  3. This is great! I look forward to trying it with my students!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 6, 2011 - 8:41 PM
  4. For more information visit this website http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19893483

    Reply
    Posted by: seth g.
    January 14, 2015 - 5:04 AM


  5. Prototyping and mounting medical devices is very critical and competitive too. Most innovation recently occurs from smaller niche companies. Prototyping has come a long way since traditionally they were just for observation and then function, but now with the innovation of 3D printing process there is no requirement of further assembly. As you can read at http://www.gurufocus.com/news/295253/hologic-produces-the-first-fdaapproved-3d-mammography-platform Hologic was the first company which introduced 3D mammography system to overcome the flaws of traditional mammogram and increase the detection rate of breast cancer. 3D printing technique has brought great capabilities to customize wide variety of applications in the medical field.

    Reply
    Posted by: Brock E.
    May 4, 2015 - 7:34 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Video Stats