Preparazione e utilizzo lesioni Phantom alla pratica Belle biopsie agoaspirazione

Published 9/29/2009
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Biology
 

Summary

Praticare delle biopsie fini di aspirazione dell'ago (FNAB) da tirocinanti è relativamente impegnativo, a causa della mancanza di un facilmente disponibile, lesione appropriato. Preparazione di una lesione AV fantasma per praticare la procedura di FNAB e competenza mastering è relativamente facile.

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Shidham, V. B., Varsegi, G. M., D'Amore, K., Shidham, A. Preparation and Using Phantom Lesions to Practice Fine Needle Aspiration Biopsies. J. Vis. Exp. (31), e1404, doi:10.3791/1404 (2009).

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Abstract

Attualmente, gli operatori sanitari compresi i residenti e compagni non hanno un modello adatto fantasma di praticare l'agoaspirato biopsia (FNAB) procedura. In passato, abbiamo standardizzato un modello costituito da guanti in lattice contenenti fresca fegato bovino per la pratica FNAB. Tuttavia, questo modello è difficile da organizzare e preparare in tempi brevi, con l'acquisto di fegato fresco bovino è l'aspetto più impegnativo. Manipolazione di fegato con problemi di contaminazione legati è anche un pareggio importante schiena. Inoltre, le perdite di materiale dei guanti, dopo un ago pochi passi, con conseguente disordine.

Abbiamo stabilito un nuovo metodo semplice di incorporare un piccolo pezzo di salsiccia o di banane in un mastice di silicone disponibili in commercio in gomma. Questo modello consente la conservazione di tenuta vuoto e l'aspirazione di materiale dal campione incorporato, che assomiglia ad un procedimento effettivo FNAB sulle lesioni massa clinica.

Il materiale aspirato nel mozzo dell'ago può essere elaborato simile ai modelli procurato durante una procedura effettiva FNAB, facilitando competenza aggiuntiva in preparazione striscio e colorazione.

Protocol

  1. Preparazione di lesione fantasma (phantom preparare circa 38 a 48 ore prima della effettiva sessione pratica di competenza FNA (Figura 1) o utilizzare pronta per l'uso 'AV Phantom' da sorgenti FNA, USA. La lesione fantasma (conservati in frigorifero senza congelamento) può essere tenuti pronti anche 3 o 4 giorni prima della sessione di pratica.
  2. Praticare FNA competenza: Anche se abbiamo dimostrato la procedura utilizzando Shidham di THFV (Tissue semoventi con valvola funzionale) (Fonte FNA, USA), qualsiasi altro sistema FNA può essere utilizzato per la pratica (Figura 2).
  3. Diffusione e l'elaborazione dei aspirare nelle diapositive di vetro (Figura 3).

Materiale richiesto

  1. Chiaro gomma siliconica caulk-disponibile in molte costruzioni / home negozi di miglioramento. Molte marche sono disponibili includendo GETM, DAP, Red Devil, White Lightning, e dei marchi catena locale. Abbiamo usato in gomma di silicone trasparente, Prodotti White Lightning, Cleveland, Ohio, USA, http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.html )
  2. Pistola per silicone
  3. Un pezzo di foglio di pellicola trasparente (abbiamo usato Saran Wrap Cling Inoltre, SC Johnson & Son Inc, Racine, WI, USA http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.asp
  4. Guanti in lattice
  5. Diametro di banane largo o salsiccia.
  6. Fermo e piatto piastra di base (circa 6 pollici x 6 pollici), fatto di cartone spesso, piatto in acrilico, o altro.
  7. FNA eseguire attrezzature
    • 25 gauge aghi ipodermici
    • Shidham di THFV (o di altri componenti per l'esecuzione di FNA)
    • vetrini
    • colorazione kit

Passo-passo i dettagli

A. Preparazione della lesione fantasma (phantom preparare 1 a 2 giorni prima di praticare FNA competenza (Figura 2) o utilizzare pronta per l'uso 'AV Phantom' da sorgenti FNA, USA.

  1. Tagliare una X 6 6 in pollici di sostenere bordo.
  2. Tagliare un segmento da 2,5 pollici lunga serie di 'core lesione fantasma' (banana o salsiccia).
  3. Espellere 0,5 cm di spessore di strato calafatare sulla piastra di base.
  4. Premere il 'fantasma lesione core' leggermente in questo strato di calafatare.
  5. Aggiungere più calafatare il 'core lesione fantasma' in modo che sia completamente incorporato nel tumulo di caulk, senza intrappolare bolle d'aria.
  6. Regolare e modellare il calafatare sul 'core lesione fantasma' con mano guantata.
  7. Prendete un pezzo X 6 6 pollici formato di pellicola trasparente e coprire il tumulo calafatare e regolare la superficie della collina in una configurazione uniforme convessa con un pulito, mano guantata.
  8. Lasciate la cura tumulo calafatare per 6-8 ore in più rispetto al tempo di maturazione di cui al punto le istruzioni del prodotto, (di solito per 24 ore), in luogo caldo.
  9. Dopo la polimerizzazione, il calafatare dovrebbe essere ferma, e l'involucro di plastica può essere staccata facilmente.
  10. La lesione FNA fantasma è pronto per essere usato per praticare la procedura di FNA dopo circa 8 ore in cui il cumulo intera caulk ha completamente curato con il centro che contiene il 'core lesione fantasma' (banana o salsiccia).

B. Praticare FNA competenza sulla lesione AV Phantom.

Qualsiasi approccio per ottenere alta qualità, adeguata aspirati FNA con una buona qualità prelievi citologici diretto dovrebbe affrontare i seguenti punti critici-

  1. L'indicatore, come l'ago implicita nel titolo della procedura, gli aghi più sottili (numero di diametro superiore) resa migliore aspirati con la diluizione del sangue minimi. Per l'equilibrio critico di vantaggi e limitazioni, dal 22 al 25 aghi calibro sono da preferire per la stabilità meccanica ottimale dell'ago senza compromettere la qualità aspirare FNA.
  2. Controllo sequenze appropriate in applicazione del vuoto e rilasciare nel corso della procedura di FNA-Questo è fondamentale per far progredire le cellule campionate con ogni colpo di spillo, verso il mozzo ago. Tuttavia, il materiale aspirato non dovrebbe essere consentito di giungere nella zona del gruppo ago aspirazione con siringa. Se questo non è impedito, il materiale può essere difficile da recuperare per fare strisci (questo materiale può tuttavia essere utilizzato per la preparazione cell block o per metodi di concentrazione come Cytospin, i metodi di filtro, o di recente preparati liquidi citologia).
  3. Lo sviluppo di competenze appropriate nel trattamento del campione aspirato, compresa la preparazione striscio diretta e on-site valutazione di adeguatezza con triaging appropriato per le prove di accessori quali celle blocco preparazione immunocitochimica elettiva, citometria a flusso elettivo per immunofenotipizzazione delle lesioni linfoproliferative, presentando passa sterile per microbiologia studi, e compagnoriale per i test molecolari (citogenetica, ecc.)

Ba Esecuzione di procedura FNA (indicato con THFV Shidham [1] (Fonte FNA, USA), ma qualsiasi altro sistema FNA può essere utilizzato per la pratica). (Fig. 3,4,5).

  1. Preparare l'assemblea FNA con la valvola chiusa.
  2. Localizzare la lesione e inserire la punta dell'ago nella lesione.
  3. Aprire la valvola per collegare il vuoto, attraverso l'ago alla sua punta, per aspirare rappresentante componenti cellulari della lesione con ogni corsa avanti e indietro nella lesione.
  4. Mantenere le aree vuoto e campione diverse della lesione inserendo l'ago nella lesione in diverse direzioni.
  5. Chiudere la valvola di scollegare il vuoto nel lume ago.
  6. Equilibrare la pressione con condizioni ambientali (per esempio scollegando il siringa valvole da l'ago per un breve istante e ricollegare. Se il dispositivo speciale con passi integrato, come 'THFV' è utilizzato, questo e altri passi da Ba1 attraverso BA6 sono concertati automaticamente seguendo diverse fasi del sistema di valvole) [1].
  7. Rimuovere l'ago dalla lesione con la valvola chiusa, al fine di prevenire la perdita del campione per capillarità nella lesione meno che ci sia pressione leggermente negativa al termine hub.
  8. Rimuovere il contenuto aspirato sul vetrino per preparare striscio diretto (vedi sotto) (figura 6).

Bb. Trattamento del campione aspirato con triage appropriato
Diffondere la aspirare sui vetrini e preparazione di strisci di buona qualità diretto (Figura 6) seguita dalla colorazione corretta e triage (Figura 7,8).

  1. Una goccia di aspirare sloggiato sul vetrino si sviluppa da una varietà di approcci, come illustrato nella (Figura 6) [2]. L'approccio comune è 'a'. Tuttavia, se il campione è sangue diluito con un po microfragments, il sangue in eccesso viene drenata via inclinando il vetrino, e il microfragments poi sono sparsi tra questa diapositiva e far scorrere secondo bicchiere simile a 'a'. Se l'aspirato è prevalentemente una sospensione senza microfragments, ad esempio da lesioni linfoproliferative, si diffonde simile a 'b' o 'c'.
  2. Le sbavature possono essere trattati e fissati in una varietà di modi per metodi di colorazione diversa durante valutazione in loco adeguatezza. Tuttavia, l'approccio migliore è quello di asciugare tutte le sbavature. L'aria secca strisci possono essere colorati con macchie Romanowski (come Difff-Quik macchia, Wright macchia) dopo la fissazione metanolo o con il Pap macchia dopo reidratazione salina-e post-fissazione (nel 95% di etanolo o preferibilmente in etanolo al 95% con 5 % di acido acetico) [3]. L'eliminazione delle interferenze dovute al sangue oscurando è un beneficio significativo [3].
  3. A seconda dei risultati iniziali cytomorphologic durante la valutazione sul campo adeguatezza, triage aggiuntive (come il blocco di celle elettiva, microscopia elettronica, culture microbiologia, citometria a flusso, citogenetica molecolare-test, ecc) è raccomandato come indicato.

Rappresentante dei risultati:

figura 1
Clicca qui per vedere una versione più grande della figura 1 .
Figura 1. Materiali necessarie per la preparazione AV Phantom per la pratica di competenza FNA (* Noi usiamo involucro di plastica Saran che non aderire al calafatare alla fine, durante la rimozione dopo l'indurimento completo della calafatare.)


figura 2
Clicca qui per vedere una versione più grande della figura 2.
Figura 2. Preparazione AV lesione Phantom


figura 3
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Figura 3. Passaggi critici nella procedura FNA.


figura 4
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Figura 4. EUS-FNA-Sintesi dei passaggi critici * (vedi Fig. 3)


figura 5
Clicca qui per vedere una versione più grande della figura 5.
Le insidie ​​Figura 5. Legate ai passaggi critici in FNA procedure.


figura 6
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Figura 6. Preparazione degli strisci diretta del campione FNA tra due diapositive.


figura 7
Clicca qui per vedere una versione più grande della figura 7.
Figura 7. Wet fisso strisci contro essiccati all'aria.


figura 8
Clicca qui per vedere una versione più grande della figura 8.
Figura 8. Wet fisso strisci contro essiccati all'aria.

Discussion

Biopsie con ago sottile aspirazione (FNAB) sono ampiamente eseguita come una economica, tecnica sicura, rapida e mini-invasiva per la diagnosi del tessuto di vari tumori e lesioni. In questa procedura, un 18-27 gauge viene inserito nella lesione, avanti e indietro più volte in diverse aree della lesione sotto vuoto controllato (aspirazione) di intensità variabile da minimo sotto forma di unica azione capillare di circa 10 ml vuoto in siringa per recuperare materiale diagnostico dei tessuti. Un ago con calibro più fine più alto è il numero preferito di recuperare un buon materiale citologico per preparare strisci diretti. Gauge più ampia di 18G recupera più adeguato campione per il blocco delle cellule, citometria a flusso, microscopia elettronica, citogenetica, microbiologia ecc culture Anche se la procedura è semplice, controllare le varie fasi con l'applicazione corretta ed il rilascio di vuoto a misure appropriate in modo concertato è estremamente importante per risultati ottimali.

A causa della non disponibilità di appositamente progettato ad alto rendimento aghi, aghi ipodermici convenzionale o le loro modifiche sono utilizzati per eseguire questa procedura. Tuttavia, gli aghi ipodermici hanno delle limitazioni che portano ad una bassa resa di campione se utilizzato in modo convenzionale. Il requisito di grip siringa speciale aggiunge di solito la complessità della procedura. Pertanto, a causa della mancanza di idonei dispositivi disponibili in commercio aghi FNAB, questa procedura estremamente versatile soffre un problema frequente di recupero campione inadeguata. Recentemente, un dispositivo aumentando il rendimento con la riproducibilità è stata segnalata [1].

Inoltre, attualmente vi è una mancanza di modello adatto per praticare attitudine ai FNAB da personale sanitario in formazione tra residenti e compagni. Abbiamo avuto un modello standardizzato con un pezzo di fegato bovino fresco farcito in guanto di lattice per praticare FNAB competenza. Tuttavia, questo modello è difficile da organizzare a breve termine. Acquisto di fegato bovino fresco di solito è la situazione limitante. Inoltre, la gestione del fegato può introdurre contaminazione fattori legati da richiamo significativo indietro. La tendenza per il guanto in lattice a perdere dopo un paio di punture spillo porta alla confusione potenziale durante la sessione di prove libere.

Riportiamo e descrivere un nuovo metodo semplice ma di incorporare un piccolo pezzo di banana (o salsiccia) in un mastice di silicone disponibili in commercio in gomma e altri materiali facilmente reperibili. Il fantasma FNAB mantiene tenuta di vuoto permettendo così l'aspirazione di materiale dal campione incorporato, equivalente alla procedura FNAB reale su una lesione in ambito clinico. In questo video, dimostriamo la procedura che consente FNAB lesione fantasma e la pratica della procedura FNAB. Dimostra anche in breve il trattamento dei campioni recuperate compresa la preparazione striscio e colorazione [2,3].

Poiché il caulk richiede tempo per curare la lesione fantasma dovrebbe essere preparata in anticipo circa 24 a 48 ore prima della sessione pratica. Paragonabile pronto per l'uso lesione fantasma possono essere ottenuti da una fonte commerciale (Fonte FNA, USA).

La lesione fantasma per la pratica di FNAB competenza possono essere utilizzati per la formazione dei residenti e compagni prima dell'inizio della prestazione FNAB su pazienti in ambiente clinico.

References

  1. Shidham, V. B., Pandit, A. W., Rao, R. N., Basir, Z., Shidham, A. Tissue Harvester with Functional Valve (THFV): Shidham's device for reproducibly higher specimen yield by fine needle aspiration biopsy with easy to perform steps. BMC Clinical Pathology. 7, (2), (2007).
  2. Shidham, V. B., Epple, J. AppendiX I: Collection and processing of effusion fluids for cytopathologic evaluation. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. 'Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids' First edition, Elsevier; W.B. Saunders Company. Chapter 15 207-235 (2007).
  3. Shidham, V., Kampalath, B., England, J. Routine air drying of all the smears prepared during fine needle aspiration and intraoperative cytology studies: An opportunity to practice a unified protocol, offering the flexibility of choosing variety of staining methods. Acta Cytologica. (45), 60-68 (2001).

Comments

5 Comments

  1. thank you for this outstanding presentation, it is very simple and comprehensive,

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 26, 2009 - 2:13 PM
  2. Thank you the comments.
    We are glad you liked the presentation and found it useful. (Rply by the Authors Shidham & Varsegi).

    Reply
    Posted by: Vinod S.
    October 27, 2009 - 1:49 PM
  3. This is great! I look forward to trying it with my students!

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 6, 2011 - 8:41 PM
  4. For more information visit this website http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19893483

    Reply
    Posted by: seth g.
    January 14, 2015 - 5:04 AM


  5. Prototyping and mounting medical devices is very critical and competitive too. Most innovation recently occurs from smaller niche companies. Prototyping has come a long way since traditionally they were just for observation and then function, but now with the innovation of 3D printing process there is no requirement of further assembly. As you can read at http://www.gurufocus.com/news/295253/hologic-produces-the-first-fdaapproved-3d-mammography-platform Hologic was the first company which introduced 3D mammography system to overcome the flaws of traditional mammogram and increase the detection rate of breast cancer. 3D printing technique has brought great capabilities to customize wide variety of applications in the medical field.

    Reply
    Posted by: Brock E.
    May 4, 2015 - 7:34 AM

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