Calibrated pins Modell av ryggmargskompresjon Injury

* These authors contributed equally
Medicine
JoVE Journal
Medicine
AccessviaTrial
 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

McDonough, A., Monterrubio, A., Ariza, J., Martínez-Cerdeño, V. Calibrated Forceps Model of Spinal Cord Compression Injury. J. Vis. Exp. (98), e52318, doi:10.3791/52318 (2015).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Kompresjons skader av det murine ryggmargen er verdifulle dyremodeller for studiet av ryggmargsskade (SCI) og rygg regenererende behandling. Den kalibrerte tang modell av kompresjonsskade er en praktisk, lav pris, og veldig reproduserbar dyremodell for SCI. Vi brukte et par modifiserte tang i henhold til fremgangsmåten publisert av Plemel et al. (2008) for sideveis å komprimere ryggmargen til en avstand på 0,35 mm. I denne videoen vil vi demonstrere en rygg laminektomi å utsette ryggmargen, etterfulgt av kompresjon av ryggmargen med de endrede tang. I videoen, vil vi også ta opp spørsmål knyttet til omsorg for paraplegiske forsøksdyr. Denne skaden modellen produserer mus som viser svekkelse i sensasjon, samt svekket bakben bevegelsesfunksjon. Videre er denne metode for skade produserer konsistente avvik i patologien av SCI, som bestemt ved immunhistokjemiske metoder. Etter å ha sett denne video, seere bør være i stand til å bestemme de nødvendige forsyninger og metoder for å produsere SCI av ulike alvorlighetsgrader i musen for studier på SCI og / eller behandlinger utviklet for å redusere verdifall etter skade.

Introduction

Dyremodeller av SCI er verdifulle verktøy for å vurdere effekten av terapeutiske paradigmer utformet for å redusere skader som følge av skade på ryggmargen. Ut av eksperimentell nødvendighet, må disse modellene gir reproduserbare underskudd i lokomotoriske og sensoriske atferd, være justerbar for å produsere skader av ulik alvorlighetsgrad, og vise at skadegrads korrelerer med graden av nevrologisk utfall observert. Det er tre hovedtyper av SCI med forskjellige funksjoner i skade: tran, kontusjon, og kompresjon en. I korthet er en tran skade en rift på ryggmargen, oppstår et -kontusjon skade fra et kort, brenn kraft som påføres den dorsale ryggmargen, og en kompresjons skade oppstår når et skadelig kraft påføres til ryggmargen, og kan også bli referert til som en klemskade 2.

Komplett tran skader er klinisk sjelden hos mennesker 3, mens kontusjon end kompresjonsskader er mer vanlig. Kompresjons skade frembringer et resultat som ligner på det som er funnet i human SCI er forårsaket av, for eksempel, tumor sammenpressing eller andre skadelige trykkrefter, og kan utføres ved hjelp av en enkel rekke av verktøy. Kontusjon og kompresjonsskader er like i at begge er en trykkraft og begge har lignende patologiske funksjoner, for eksempel cytoarchitectonic uorden, og fremkalle lignende endogene svar til skade 1,4. Den -kontusjon skade Modellen gjelder vanligvis denne kraften til den dorsale ryggmargen ved hjelp av en spesiell anordning på en måte som ligner på menneske tilfeller av SCI som følge av en forstoppelse av ryggsøylen 2,5,6. I motsetning til dette, kan kompresjonsskader frembringes ved en rekke metoder, som søker kraften dorsalt eller sideveis. Metoder for en kompresjonsskade inkluderer kalibrert tang 7, aneurisme klipp 2, eller plassere en vekt direkte på ryggmargen 8. En fordel med denaneurisme klipp er at de er i stand til å gi ulike mengder kraft 9. Fremgangsmåten for å tilføre vekt til den dorsale overflate av ryggmargen direkte 8 krever at vekten til å være på plass i 10 minutter, drastisk å øke lengden av kirurgi og som fører til uregelmessigheter på grunn av plassering av vekt og bevegelser på grunn av respirasjon av dyr. På grunn av den lille størrelsen på mus, plassere dyr i spesialiserte apparater beregnet for bruk i rotter, som impactors for kontusjon skader, kan være vanskelig eller føre til inkonsistente skader 7. Imidlertid mus er tilgjengelige i et bredt spekter av transgene stammer, i motsetning til større dyr slik som rotter eller kaniner som er svært nyttig for SCI forskning.

Den Plemel metode for å bruke kalibrerte pinsett til å komprimere ryggmargen genererer en reproduserbar SCI med en høy grad av korrelasjon mellom skadegrads og nevrologiske underskudd 7. Det kirurgiske SCI modellen ergenereres ved hjelp av et par No. 5 Dumont tang modifisert til å bli holdt fra hverandre i en definert avstand ved enten metall epoksy eller en annen hindring for å forhindre fullstendig lukning. Dette utviklet avstand sikrer at pinsett vil alltid nær en viss bredde i flere operasjoner og etter ulike brukere. Fordelen med Plemel metoden er at materialene for å fremstille de kalibrerte tangen lett kan kjøpes og monteres i laboratoriet uten behov for spesialutstyr. Disse tang tåler flere runder med autoklave og sterilisering, og mangelen på en egen, klumpete apparat effektiviserer operasjoner.

I denne videoen viser vi kirurgisk bruk av et par kalibrerte tang på musen ryggmarg å generere en trykkskader. Vi henvender oss også unike bekymringer knyttet til omsorgen for ryggmargs skadet forsøksdyr til å forbedre sin livskvalitet postoperativt og redusere dødelighet.

Protocol

Alle dyr prosedyrer og dyr omsorg metoder skal være godkjent av institusjonens Institutional Animal Care og bruk Committee (IACUC).

1. Kirurgisk Forberedelse

  1. Montere alle nødvendige kirurgiske verktøy og reagenser: tang, Vana saks, roungeurs, retractor, skalpeller, sakser, sting, hud stifter, Q-tips, sterilt saltvann, kirurgiske svamper, og isofluran. Forberede og autoklav en komplett pakke med kirurgiske verktøy før operasjonen. Hvis du utfører operasjoner på mer enn én mus, forberede og autoklav en pakke med verktøy per dyr, eller autoklav en pakke av kirurgiske instrumenter og sterilisere med et verktøy sterilisator i mellom operasjoner. Vanligvis kan en pakke med steriliserte verktøy brukes på opp til 5 mus hvis en glassperle terilizer verktøyet brukes til å rense verktøy i mellom operasjoner (etter 5 dyr verktøyene må re-renset og sterilisert før bruk). Vennligst sjekk med din lokale IACUC administrator for institutipå spesifikke retningslinjer.
  2. Sterilisere kirurgiske feltet med 70% isopropyl alkohol våtservietter. Sett opp operasjonsduker for å sikre et sterilt felt opprettholdes under operasjonen.
  3. Veie hver mus før operasjonen. Administrere en dose på 0,05 mg / kg kroppsvekt av buprenorfin, subkutant.
  4. Bedøve dyr ved administrering av isofluran i en dose på 4% i induksjonskammeret av isofluran maskin.
  5. Når dyret er bedøvet, gjelder salve til øynene for å unngå dehydrering, sette dyret på en varmepute ved 37 ° C, og sikre at musen hode er riktig plassert i anestesi kjegle. (Merk: Bruk en varmekilde som ikke vil forårsake brannskader, dvs. en sirkulerende vann teppe, varmeflaske, eller tilsvarende..) På dette punktet administrere en dose på 2% isofluran til dyret.
  6. Barbere dorsalflaten av musen, ca 1 cm rundt den tiltenkte innsnitt plassering.
  7. Desinfisere snittet site ved vasking med 70% isopropylalkohol våtservietter, så med en jod-løsning (10% Povidon-jod, 1% tilgjengelig jod). Dette gjentas 3 ganger.

2. Dorsal laminectomy

  1. Før vi gjør en innsnitt, sørge for at dyret er skikkelig bedøvet ved å sjekke for reflekser ved hjelp av tå eller hale klype metode.
  2. Lage et snitt langs ryggbein med skalpell og blad, og deretter se etter reflekser igjen. Bue på baksiden for å bidra til å visualisere landemerker, for eksempel grensene mellom ryggvirvlene.
  3. Skjære gjennom huden. Sett retractor å holde huden og fascia tilbake fra ryggmargen. Fjerne vevet på begge sider av ryggmargen for å eksponere de muskler som dekker ryggraden.
    MERK: Kirurgen bør være kjent med de anatomiske landemerker. For eksempel, den nedre vinkelen på skulderblad tilsvarer T7. Toppen av den naturlige krumning musens rygg er T12 og kan anvendes som et referansepunkt.
  4. Med pRoper belysning, bestemme plass mellom ryggvirvlene. Finn den bakre enden av T10 og kutte muskler og fascia vinkelrett på mellomvirveldiskplass. Skjær akkurat nok til å eksponere spinous prosess og posterior lamina av T10.
  5. Ved hjelp av et par fine tippet Dumont # 5 tang, fjerne noen av vev fra lamina og spinous prosess for å avdekke en liten flis av ryggmargen. Når det er nødvendig, bruke vev tang for å stabilisere ryggsøylen.
  6. Utføre laminektomi ved å sette den ene side av et par små Vana saks langs dorsolateral side av vertebra og like under lamina.
    1. Lag små, forsiktige klipp for å skjære gjennom den laterale side av rygg lamina. Sørg for at ingen trykket er brukt til ryggmargen.
    2. Gjenta på den andre siden.
    3. Bruke milde press for å stoppe blødning som nødvendig med en Q-tip eller kirurgisk svamp, ta vare å ikke legge press på ryggmargen.
      MERK: Forbered gel skumfuktet i sterilt saltvann i tilfelle at blødnings behov for å bli kontrollert.
    4. Når snittene er gjort, løft av rygg aspekt av vertebra og forsiktig fjerne eventuelle vev vedlegg. Bruk egnede midler for å kontrollere blødning hvis det er nødvendig.

3. ryggmargskompresjon

  1. Ved hjelp roungeurs eller laminektomi tang, sørge for at de laterale sider av ryggmargen er fri for ryggvirvel bein slik at de kalibrerte tang for komprimering skade kan plassere på hver side av ryggmargen. Armene av pinsettangens må være i stand til å bli plassert inne i epiduralrommet på tilstøtende sider av ryggmargen og spissene av tang må være i stand til å nå gulvet i ryggmargskanalen.
    1. Sørg for at synligheten av ryggmargen er bra.
  2. Plasser kalibrert Dumont # 5 tang omtrent midt i den synlige delen av ryggmargen. Husk at armene av kraftenps må plasseres innenfor epiduralrommet på tilstøtende sider og spissene må berøre gulvet av ryggmargskanalen for å generere reproduserbare skader.
  3. Komprimere ryggmargen nøye før avstandsstykkene koble til. Hold på plass for 15 sek.
  4. Løsne forsiktig trykkraft og fjerne de kalibrerte tang fra ryggmargen. Sterilt saltvann bør brukes til å gjenvinne homeostase før såret lukkes.

4. Sår Closing

  1. Sy nøye muskelen lag over ryggmargen, og pass på å ikke forstyrre eller legg press på ryggmargen.
  2. Bruk enten sting eller stifter å lukke huden over såret.
  3. Hvis du bruker gass bedøvelse, begynner å avta / slå av bedøvelse.
  4. Forvalte 0,1 ml Ringer-laktat per 10 g kroppsvekt for å hjelpe konto for dehydrering under operasjonen og etter operasjonen når dyret er sløv og utvinne fra skade. Oppløsningen skal være warmed til kroppstemperatur før injeksjon.
  5. Plasser musen i en bedding fritt bur. Buret skal hvile på toppen av en varmepute (som beskrevet i 1.1.5) på en måte som gjør at halvparten av buret området for å være på puten, mens den andre halvparten hviler på et RT-telleren, for å gi museklima alternativer når det er oppegående. Pass på å sikre at "recovery bur" ligger i et rolig miljø. Nøye overvåke dyret før den har kommet til bevissthet, da musen kan overføres til en vanlig bur med sengetøy.

5. Postoperativ Care

  1. Etter operasjonen administrere en dose på 0,05 mg / kg kroppsvekt buprenorfin subkutant hver 12. time i de første 3 dager etter operasjonen, og deretter etter behov for å behandle symptomer på smerte.
  2. Administrere en dose av Ringer-laktat (0,1 ml per 10 g kroppsvekt subkutant) for de første 3 - 5 dager etter operasjonen. Gi denne dosen hvis / når enimal begynner å vise tegn på dehydrering utenfor denne første perioden.
  3. Manuelt uttrykke blæren til dyrene ved hjelp av Crede manøver to ganger daglig. Forsiktig palpate dyrets mage for å finne blæren, og deretter bruke milde press nedover til blæren er tom.
    1. Hvis blæren ikke tømmes eller urinen er blodig eller klart, administrere 50 mg / kg av kroppsvekt av Baytril til dyret via interperitoneal injeksjon i 10 dager.
  4. Overvåke dyr for tegn på autofagi, dehydrering, og overdreven vekttap (større enn 20% av kroppsvekten). Hvis et dyr opplever noen av disse symptomene må du ta kontakt med en veterinær umiddelbart med hensyn til behandlingstilbud, eller avlive dyret på en human måte å følge IACUC retningslinjer.
    1. Gitt at mobilitet kan være begrenset rett etter operasjonen, ta de nødvendige skritt for å sørge for at dyrene har tilgang til mat og vann. Pre-pakket våt mat, samt ens hydrogel, kan bli gjort tilgjengelig for dyrene i disse tilfeller.

6. Vurdere Tissue Skade som resultat av Compression Injury

  1. Bedøve dyr som beskrevet i trinn 1.4 og 1.5. Sjekk dybden av anestesi ved tå klype og overvåkingshornhinneblunkerefleks. Når dyret er ufølsom for stimuli, fortsett til trinn 6.2.
  2. Utfør en intracardial perfusjon 10.
    1. Expose brysthulen og stikker en nål inn i venstre hjertekammer. Spyle ut de eksisterende fluider med 20-30 ml iskald fosfatbufret saltløsning (PBS) fulgt av 15 til 25 ml is-kald 4% paraformaldehyd (PFA).
  3. Fjern ryggmargen.
    1. Kutte huden rygg til ryggmargen og fjerne overflødig vev rundt lengden av ryggsøylen.
    2. Avgiftsdirektoratet ryggsøylen og klippe bort eventuelle gjenværende vev. Den faktiske grad av laminektomi, og jegnjury kan bekreftes ved å telle ribbeina.
    3. Bruk Vanna sakser og pinsetter for å fortrenge små deler av ryggsøylen i en caudal til rostralt retning. Fortsetter å kutte inntil ledningen er utsatt nok til å tillate trygg fjerning. Visualisering av skjære sted og prosessen kan gjøres lettere ved bruk av et stereoskop.
  4. Plassere ryggmarg vev i 4% PFA. Tillate vev til post-fix i denne løsningen i 24 timer ved 4 ° C.
  5. Cryoprotect vev ved inkubering i 30% sukrose i 24 timer ved 4 ° C.
  6. Embed vev i oktober Kort, ta vev fra 30% sukrose inkubasjon og fjerne overflødig løsning. Plasser vevet inn i en cryomold fylt med oktober og inkuberes i 1 time ved 4 ° C.
    1. Fjerne mugg fra 4 ° C, bekrefter retningsorientering av vevet, sette støpeformen i en grunn skål av 2-metylbutan (på forhånd avkjølt i 1 time på tørris) og tillater oktober å stivne helt. Hold på tørris hvis du bruker umiddelbart eller store ved -80 ° C.
  7. Kutt vevet inn 20 mikrometer sagittal delene med en kryostat. Mount vev direkte på lysbilder. Lagre ved -20 ° C inntil bruk.
  8. Utføre Hematoxylin og eosin (H & E) flekken.
    1. I korthet rehydrere vev (5 min, to ganger), flekken med Hematoxylin (2,5 min) og vask med vann (1 min, to ganger).
    2. Inkuber vev i 50% og så 70% etanol (3 minutter hver), flekken med Eosin (45 sek), og dehydrerer ved inkubering i 90% (5 s), 95% (5 sek) 100% etanol (2 min) og isopropanol (2 min).
    3. Klart med xylen (5 min, 3 ganger).
      MERK: H & E flekker vil variere med spesifikke vev tykkelse og betingelser. Derfor er standardisering nødvendig før du fortsetter med eksperimentelle vevsprøver.
  9. Dekke vevet med en tynn strimmel av Permount (~ 100 mikrometer) og dekkglass. Trykke ned på alle sider av dekkglass for å sikre riktig fordeling av fluid. La lysbilder tørke O / N.
  10. Visualize vevssnitt bruker et digitalt mikroskop og ta bilder ved hjelp av den medfølgende programvaren.

Representative Results

Vi utførte en laminektomi på 12 hannmus (25-30 gram) som beskrevet ovenfor, etterfulgt av ryggmarg kompresjoner ved 0,25 mm (n = 4), 0,35 mm (n = 4) og 0,55 mm (n = 4). Vi ofret dyr på tre (n = 6) og sju (n = 6) dager etter skade ved intrakardiell perfusjon. Ryggmargen ble fjernet fra ryggsøylen, og vevet ble fremstilt og behandlet som beskrevet ovenfor. Bilder av hele ryggmargen ble tatt med en Leica EZ4 digitalt mikroskop og tilhørende programvare. Bilder av ryggmargs deler ble tatt med 2X forstørrelse ved hjelp av en digital Olympus mikroskop og tilhørende programvare.

Vi fant ut at ryggmargskompresjon produserer en skade med episenter på stedet av komprimering (figur 1). Virkningene av skaden forlenge flere millimeter i rostral og caudal retninger. Alvorlighetsgraden av skaden økt som avstanden mellom avstandsstykkene redusert (0,25 mm> 0,35 mm>0,55 mm, figur 2). Tre dager etter komprimering det var blod i episenteret av skaden og omliggende regioner som ikke var til stede 7 dager etter skade. De 0,25 mm og 0,35 mm kompresjoner produseres et hulrom, men ikke den 0,55 mm modell. Etter 7 dager, dorsal og ventral hvit substans i stor grad redusert i størrelse ved episenteret, den grå materie organisasjonen ble sterkt forvrengt, og kavitasjon var vedvarende. Disse cytoarchitectonical endringer er oversatt til motor og sensoriske endringer i dyrs atferd evaluert ved hjelp av egnede tester som Basso Mouse Scale for Locomotor Funksjon og von Frey hår og etylklorid tester for sensorisk funksjon som vi viste i tidligere publikasjoner 8.

Figur 1
Figur 1. Representative bilder av den intakte ryggmarg både før og after skade. (A) Intakt ryggmarg. (B) Ryggmargs etter 0.35 mm komprimering. Piler indikerer grensen for skade. Stjerne identifiserer episenter skade. D = Dorsal, L = Lateral. Målestokk:. 0,50 mm Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 2
Figur 2. Representative bilder av mus ryggmargen før og etter komprimering skade på varierende komprimerings bredder. (A) sagittal delen av kontroll ryggmarg. (B) koronal seksjon ved episenteret av en 0,35 mm SCI 7 dager etter kompresjonsskade (dpi). (C, E, G) sagittal deler av ryggmargen tre dpi til en bredde på 0,25 , 0,35 eller 0,55 mm. (D, F, H) sagittal deler av H & E beiset ryggmargs 7. dpi til en bredde på 0,25, 0,35 eller 0,55 mm. Stjerne identifiserer episenter skade. Alle seksjoner farget med H & E. D = Dorsal, L = Lateral. Målestokk:. 1.25 mm Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Discussion

Valget av en SCI-modellen er viktig i utformingen av forsøk for å bestemme effekten av behandlinger for humane tilfeller av SCI. Slike eksperimenter krever en dyremodell som er svært reproduserbare å begrense variasjonen som kan føre til uklare data. De bør også være av klinisk relevans for å vurdere nøyaktig den menneskelige tilstand de er modellering. For dette formål, velger en trykk eller contusive skade over et tran er mer klinisk relevant 3. Men impactors og vekt slipp apparater for kontusjon skader krever bruk av dyre og kompliserte maskiner. I motsetning til dette utnytter den kalibrerte tang modell av SCI modifisert tang som er enkel å montere fra vanlige laboratoriematerialer, og operasjonen krever kun en ytterligere trinn etter en standard dorsal laminektomi å eksponere ryggmargen. Imidlertid er en ulempe ved bruk av denne metoden at trykkraften blir alltid anvendt i stedet for sideveis dorsalt, såer oftest sett i humane kliniske tilfeller av SCI 9, og trykkskader som genereres ved hjelp av metoden påvirker en større rostrokaudale grad av vev enn kontusjon modeller 1,2. Denne modellen er blitt demonstrert av opphavet til teknikken, og vi, for å generere reproduserbar SCI 7,11, og er godt egnet til størrelsen av mus. Videre gir denne skaden modell for dyr som skal evalueres etter kirurgi og terapeutiske behandlinger ved hjelp av en rekke atferdstester, for eksempel Basso Mouse Scale for Locomotion og von Frey hår test, for å bekrefte at en kohort av dyr har samme skadegrads og nevrologiske utfall 7,11-13. De samme teknikkene kan også brukes til å evaluere effekten av behandlinger som dyr under undersøkende studier, oppfyller de generelle kriteriene for dyremodeller brukes til å evaluere behandlingsformer for SCI 2,7.

Fremgangsmåten for fremstilling av den kalibrerte forceps for skade Modellen er enkel og kan utføres med en rekke forskjellige metoder. Vi har benyttet avstandsmetoden 11, som er publisert av Plemel 7, og er også modifisert tang ved hjelp av en liten skrue, som ikke bare gir en enklere metode for å lage kompresjonsenhet, men også gir mulighet for allsidighet i å justere den endelige kompresjon bredde, av nytte for komparative studier. Utvalget av alternativer i å skape pinsett er nesten ubegrenset så lenge spacer (e) gi en stabil måte å alltid lukke tangen til samme avstand og tåler autoklave og sterilisering. De kirurgiske metodene som beskrives i denne videoen er svært reproduserbare over brukerne, men det er nødvendig at det utvises forsiktighet når du utfører laminektomi og sy dyret etter inngrepet er utført slik at ryggmargen ikke lider noen ekstra kompresjonskrefter som kan øke den skadegrads og forvirre fremtidige eksperimenter. Med riktig trening og praksis, er den kalibrerte tang modell av kompresjonsskade godt egnet for å utføre SCI i mus som etterligner kliniske tilfeller observert hos mennesker 2,3,7. På grunn av den enkle å lage tang, produsere mus av ulik grad av skadegrads kan enkelt gjøres. Dette vil være til stor nytte for å observere genetiske effekter på SCI av ulik grad av alvorlighet i transgene mus samt vurdering av effekten av stamcelletransplantasjoner i mus. Flertallet av studier i litteraturen har blitt utført på rotter på grunn av sin størrelse, som generelt gjør operasjoner enklere å utføre. Fremgangsmåten publisert av Plemel et al. 7 og beskrevet av oss i dette video bør imidlertid mulig SCI for å bli utført på mus med stor letthet og reproduserbarhet.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Isoflurane machine Smiths Medical PM, Inc VCT302
Isoflurane Phoenix Pharmaceutical NDC: 66794-013-25
Dissecting Scope Seiler Precision Microscopes SSI 202/402
Germinator-500 (tool sterilizer) Thomas Scientific 3885A20
Puralube (eye ointment) Dechra NDC 17033-211-38
Scalpel handle (#3) Fine Science Tools 10003-12
Scalpel blade (#11) Fisher Scientific  08-914B
Retractor (Colibri) Fine Science Tools 17000-03
Friedman Pearson roungeur Fine Science Tools 16021-14
Vanna (Castroviejo) scissors Roboz RS-5658
Tissue forceps Fine Science Tools 11029-14
Laminectomy forceps (Dumont #2) Fine Science Tools 11223-20
Dumont #5 forceps Fine Science Tools 11252-20
Stapler Fine Science Tools 12031-07
Staples (wound clips) Reflex7 203-1000
Sutures Henry Schein 101-2636
Needles (30 G x ½) BD Biomedical 305106
Syringe (1 ml) BD Biomedical 309659
Baytril (enrofloxacin) Bayer NADA 140-913
Buprenex (buprenorphine) Cardinal Health NDC 12496-0757-1

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. McDonough, A., Martinez-Cerdeno, V. Endogenous proliferation after SCI in animal models. Stem Cells Int. 2012, 387513 (2012).
  2. Onifer, S. M., Rabchevsky, A. G., Scheff, S. W. Rat models of traumatic SCI to assess motor recovery. ILAR J. 48, (4), 385-395 (2007).
  3. Bunge, R. P., Puckett, W. R., Becerra, J. L., Marcillo, A., Quencer, R. M. Observations on the pathology of human SCI. A review and classification of 22 new cases with details from a case of chronic cord compression with extensive focal demyelination. Adv Neurol. 59, 75-89 (1993).
  4. Beattie, M. S., et al. Endogenous repair after spinal cord contusion injuries in the rat. Exp Neurol. 148, (2), 453-463 (1997).
  5. Basso, D. M., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. Graded histological and locomotor outcomes after spinal cord contusion using the NYU weight-drop device versus transection. Experimental Neurology. 139, (2), 244-256 (1996).
  6. Krishna, V., et al. A contusion model of severe SCI in rats. J Vis Exp. 78, (2013).
  7. Plemel, J. R., et al. A graded forceps crush SCI model in mice. J Neurotrauma. 25, (4), 350-370 (2008).
  8. Wu, D., Shibuya, S., Miyamoto, O., Itano, T., Yamamoto, T. Increase of NG2-positive cells associated with radial glia following traumatic SCI in adult rats. J Neurocytol. 34, (6), 459-469 (2005).
  9. Namiki, J., Tator, C. H. Cell proliferation and nestin expression in the ependyma of the adult rat spinal cord after injury. Journal of Neuropathology and Experimental Neurology. 58, (5), 489-498 (1999).
  10. Teletin, M., et al. Histopathology in Mouse Metabolic Investigations. Current Protocols in Molecular Biology. 29, (2007).
  11. McDonough, A., Hoang, A. N., Monterrubio, A. M., Greenhalgh, S., Martinez-Cerdeno, V. Compression injury in the mouse spinal cord elicits a specific proliferative response and distinct cell fate acquisition along rostro-caudal and dorso-ventral axes. Neuroscience. 254, 1-17 (2013).
  12. Basso, D. M., et al. Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after SCI in five common mouse strains. J Neurotrauma. 23, (5), 635-659 (2006).
  13. Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J Neurosci Methods. 53, (1), 55-63 (1994).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics