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JoVE Journal
Bioengineering

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Ein Protokoll für mehrfache Gen-Knockout in Maus-Dünndarm-Organoiden mit einem CRISPR-Concatemer
Hollow Fiber Bioreactors for In Vivo-like Mammalian Tissue Culture
Journal (Bioengineering)
Hollow Fiber Bioreactors for In Vivo-like Mammalian Tissue Culture
Fabrication and Characterization of Layer-By-Layer Janus Base Nano-Matrix to Promote Cartilage Regeneration
Journal (Bioengineering)
Fabrication and Characterization of Layer-By-Layer Janus Base Nano-Matrix to Promote Cartilage Regeneration
 
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Ein Protokoll für mehrfache Gen-Knockout in Maus-Dünndarm-Organoiden mit einem CRISPR-Concatemer

Article DOI: 10.3791/55916-v • 11:53 min • July 12th, 2017
July 12th, 2017 •
1,2, 1,2, 1, 1, 3, 1,2
1Wellcome Trust - Medical Research Council Stem Cell Institute, University of Cambridge, 2Department of Genetics, University of Cambridge, 3Department of Pathology, Yonsei University College of Medicine

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Dieses Protokoll beschreibt die Schritte zum Klonieren von mehreren einzelnen Leitungs-RNAs in einen Leitfaden-RNA-Concatemer-Vektor, der von besonderem Nutzen bei der Herstellung von Multi-Gen-Knockouts unter Verwendung der CRISPR / Cas9-Technologie ist. Die Erzeugung von Doppelknockouts in Darmorganoiden wird als mögliche Anwendung dieser Methode gezeigt.

Tags

Bioengineering Ausgabe 125 CRISPR / Cas9 Knockout Organoid Darm Elektroporation Paralogen Wnt.
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